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槐耳菌质对人胆管癌细胞侵袭与迁移的影响及其作用机制

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中国普通外科杂志 2024年第9期33卷 1499-1506页

作者：谭义炫王艳良张振胜张月馨王超焌海南省儋州市人民医院肝胆外科海南儋州571700 海南省儋州市人民医院肿瘤内科海南儋州571700 中国人民解放军联勤保障部队第九二八医院血液肿瘤科海南海口571100

背景与目的:胆管癌作为罕见的恶性肿瘤,难以诊断,往往在晚期才被发现,只能选择姑息疗法,但是常规的化疗药物对胆管癌治疗效果较差,急需寻找新的治疗药物。本研究探讨槐耳菌质对人胆管癌细胞恶性生物学行为的影响,及其与TGF-β/Smad通路... 详细信息

背景与目的:胆管癌作为罕见的恶性肿瘤,难以诊断,往往在晚期才被发现,只能选择姑息疗法,但是常规的化疗药物对胆管癌治疗效果较差,急需寻找新的治疗药物。本研究探讨槐耳菌质对人胆管癌细胞恶性生物学行为的影响,及其与TGF-β/Smad通路的关系,旨在为槐耳菌质治疗胆管癌提供理论依据。方法:用不同浓度槐耳菌质孵育人正常肝细胞L-02和人胆管癌细胞HuCCT1不同时间后,检测细胞增殖情况,并计算半数抑制浓度(IC_(50));将HuCCT1细胞分为阴性对照组(无干预)、阳性对照组(15 mg/L顺铂)和不同浓度槐耳菌质干预组(根据浓度与时间为预实验结果选择1/5 IC_(50)、2/5 IC_(50)和IC_(50)),用划痕试验与Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力,同时用Western blot检测HuCCT1细胞中TGF-β/Smad通路相关蛋白的表达。结果:只有较高浓度的槐耳菌质(>312.5 mg/L)对L-02细胞的增殖有明显抑制作用;当浓度超过5 mg/L时,槐耳菌质能明显抑制HuCCT1细胞增殖,且呈浓度依赖性(均P<0.05),IC_(50)分别为24 h:138.52 mg/L、48 h:99.41 mg/L、72 h:113.52 mg/L。与阴性对照组比较,阳性对照组与三种浓度(20、40、100 mg/L)的槐耳菌质干预组HuCCT1细胞迁移距离、侵袭细胞数减少,TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、N-cadherin、Snail和Slug表达降低,E-cadherin表达增加(均P<0.05);与阳性对照组比较,三个槐耳菌质干预组的上述变化更弱,但呈明显的浓度依赖性(均P<0.05)。结论:槐耳菌质可以抑制HuCCT1细胞恶性生物学行为,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路活性有关。

关键词：胆管肿瘤细胞增殖肿瘤侵润槐耳菌质

继发于单纯疱疹病毒脑炎的抗NMDAR和抗GABA_(BR)双阳性自身免疫性脑炎1例报告及文献复习

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 236-242页

作者：赵仲艳徐志育吴婵姬赵二义黄丹黄仕雄海南省人民医院海南医学院附属海南医院神经内科海南海口570311 海南省人民医院海南医学院附属海南医院重症医学科海南海口570311

目的:分析1例单纯疱疹病毒性脑炎(HSVE)继发抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)和抗γ-氨基丁酸B型受体(GABA_(BR))双阳性自身免疫性脑炎(AE)患者的临床表现及诊疗经过,以提高临床医生对该类病的认识。方法:收集1例HSVE继发抗NMDAR和抗GABA... 详细信息

目的:分析1例单纯疱疹病毒性脑炎(HSVE)继发抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)和抗γ-氨基丁酸B型受体(GABA_(BR))双阳性自身免疫性脑炎(AE)患者的临床表现及诊疗经过,以提高临床医生对该类病的认识。方法:收集1例HSVE继发抗NMDAR和抗GABA_(BR)双阳性AE患者的临床资料,对其诊断和治疗经过进行总结,并结合相关文献进行复习。结果:患者,男性,36岁,以头痛起病,随后出现肢体抽搐,并进展为意识障碍。入院后脑脊液常规生化检测异常,脑脊液单纯疱疹病毒1型(HSV-1) IgG抗体阳性,脑脊液和血清NMDAR抗体检测阳性,头部磁共振成像(MRI)检查提示右侧枕叶白质异常信号,诊断为HSVE继发抗NMDAR脑炎。数月后患者出现精神行为异常、认知障碍和睡眠障碍等症状,血清NMDAR抗体和GABA_(BR)抗体均阳性,诊断为HSVE继发抗NMDAR脑炎和抗GABA_(BR)脑炎。给予激素冲击和静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗后,患者病情好转出院。随访1年,患者精神症状完全消失,遗留轻度认知功能障碍。结论:HSVE抗病毒治疗有效的恢复期患者临床症状再度恶化时,应高度怀疑继发AE的可能,应尽快完善自身免疫性抗体检测,以期早期诊断,早期治疗,以改善患者预后。

关键词：单纯疱疹病毒性脑炎抗N-甲基-D-门冬氨酸受体抗体抗γ-氨基丁酸B型受体抗体自身免疫性脑炎

miR-138靶向HIF-1α介导NLRP3炎症小体对脑卒中大鼠神经元凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 127-132页

作者：周德聪贝宁李建红王叶青陈声妹海南省老年病医院神经内科海南海口571100 海南医学院第二附属医院神经内科

目的探究微小RNA(miR)-138对缺氧诱导因子(HIF)-1α和Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3通路的调控作用及对脑卒中大鼠神经元凋亡的影响。方法收集60例脑卒中患者及20例健康体检者血清,qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-138表达。中... 详细信息

目的探究微小RNA(miR)-138对缺氧诱导因子(HIF)-1α和Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3通路的调控作用及对脑卒中大鼠神经元凋亡的影响。方法收集60例脑卒中患者及20例健康体检者血清,qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-138表达。中动脉线栓阻塞法建立大鼠脑卒中模型,设置假手术组、模型组、miR-138激动剂(miR-138 agomir)组、agomir-NC组、HIF-1α激活剂组、miR-138 agomir+HIF-1α激活剂组,每组15只。改良神经功能损害程度评分(mNSS)检测神经功能缺损症状;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;尼氏及TUNEL染色法检测神经元损伤及凋亡;免疫组化法检测海马组织M1型巨噬细胞极化表面标志物CD11c、NLRP3阳性表达;Western印迹检测HIF-1α、NLRP3、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、半胱天冬蛋白酶(Caspase)-1、pro-Caspase-1蛋白表达。结果miR-138在脑卒中患者血清中表达较健康者显著降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组海马组织神经元损伤及凋亡加重,促炎表型的巨噬细胞浸润明显(CD11c阳性表达升高),脑梗死面积及神经功能缺损评分升高,miR-138表达降低,HIF-1α活化介导的NLRP3炎症小体活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-138 agomir干预治疗可缓解脑卒中大鼠神经元损伤及凋亡,降低脑梗死面积及神经功能缺损评分,抑制HIF-1α活化介导的NLRP3炎症小体激活发挥的促炎作用,差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α激活剂可加重脑卒中大鼠神经元损伤及凋亡,并削弱miR-138 agomir发挥的抗HIF-1α/NLRP3活化、抗炎及抗凋亡作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-138表达,可通过抑制HIF-1α介导的NLRP3炎症小体活化,发挥抗脑卒中后神经元凋亡作用。

关键词： miR-138 脑卒中缺氧诱导因子-1α Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3 神经元凋亡

海南萝芙木果胶多糖通过MAPK/NF-κB信号通路调控小鼠溃疡性结肠炎的焦亡机制研究

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海南医学院学报 2024年

作者：王柳丹陈旭永吴海东苗新普海南医科大学附属海南医院海南省人民医院消化内科

目的：研究海南萝芙木果胶多糖(pecticpolysaccharides，PPs)对葡聚糖硫酸钠（dextransulfatesodiumsalt，DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）的治疗作用及其通过介导丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）/核因子κB（nuclearfactorkappa-B，NF-κB）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-bindingoligomerizationdomain-likereceptorprotein3，NLRP3）信号通路对结肠上皮细胞焦亡的影响。方法：将24只6-8周龄的C57雄性小鼠随机分成三组：正常对照组、模型组、和果胶多糖治疗组，每组8只。除正常组外，其余2组分别予以5%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)自由饮用7d制备UC小鼠模型，成功造模后，果胶多糖治疗组小鼠继续灌胃治疗7d。记录小鼠体重变化、便血情况和疾病活动指数(DAI)，分离完整结肠测量长度；苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化；免疫组化法检测检测Caspase-1、IL-1β与TNF-α的表达，Westernblotting检测结肠组织细胞焦亡（Caspase-1、IL-18、IL-1β、NLRP3、Cleaved-GSDMD）和MAPK/NF-κB通路（p38、p-p38、p65、p-p65、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK）蛋白表达；通过透射电镜观察细胞焦亡形态；双荧光素酶报告基因实验和 ChIP实验检测 NF-κB p65 与NLRP3启动子的结合情况。结果：与模型组相比，PPs治疗组能减缓小鼠体重下降，抑制结肠缩短、减轻结肠病理损伤，DAI评分低于DSS模型组(P<0.05)，结肠上皮细胞焦亡相关因子NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18、TNF-α、Cleaved-GSDMD的蛋白表达显著降低（P＜0.01），结肠组织中p38、p-p38、p65、p-p65、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK蛋白的表达显著降低(P<0.05)。透射电镜观察到细胞焦亡形态在部分细胞呈现焦亡的改变;双荧光素酶报告基因实验和 ChIP实验证实NF-κB p65 基因靶向作用于NLRP3基因的启动子区域，PPs通过增强促进NLRP3 的转录。结论：PPs可通过MAPK/NF-κB信号通路抑制细胞焦亡，从而抑制DSS小鼠结肠炎症；NF-κB 转录结合NLRP3启动子可能是影响结直肠细胞焦亡的关键机制。

关键词：溃疡性结肠炎(UC) 果胶多糖(PPs) 海南萝芙木 MAPK信号通路核因子-κB 细胞焦亡

宏基因组学二代测序技术在海南省三亚市45例疑似肺部感染患者病原体检测中的应用

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疾病监测 2024年

作者：何吕芬赵光强林于金王彬李沙王立程钟山朱雄海南省三亚市人民医院检验科/中心实验室海南省三亚市人民医院呼吸内科

目的应用宏基因组学二代测序（mNGS）技术检测疑似肺部感染患者的病原体，评估mNGS筛查病原体的应用价值，提高临床对于肺部感染患者病原学特征的认识。方法收集2023年2月至2023年9月海南省三亚市人民医院收治的45例疑似肺部感染患者... 详细信息

目的应用宏基因组学二代测序（mNGS）技术检测疑似肺部感染患者的病原体，评估mNGS筛查病原体的应用价值，提高临床对于肺部感染患者病原学特征的认识。方法收集2023年2月至2023年9月海南省三亚市人民医院收治的45例疑似肺部感染患者的肺泡灌洗液，采用mNGS与常规微生物综合试验（CMT）方法筛选病原体，回顾性分析患者的下呼吸道微生物特征。利用Spearman，分析病原体每百万序列数（RPM）与炎症因子的相关性。结果在45例患者中，利用mNGS技术，检出41例阳性，单一感染7例，混合感染34例，包括37例细菌、19例真菌、26例病毒、1例肺炎支原体和1例鹦鹉热衣原体；检出46种病原体，包括26种细菌、8种真菌、10种病毒、2种其他病原体。CMT检出23例阳性，单一感染13例，混合感染10例，包括14例细菌、16例真菌、3例病毒。采用mNGS技术分离出的病原体中，细菌检出率居前5位的分别是铜绿假单胞菌（20.00%）、纹带棒杆菌（17.78%）、鲍曼不动杆菌（15.56%）、肺炎链球菌（13.33%）、肺炎克雷伯菌（11.11%），真菌和病毒检出率最高的分别是白色念珠菌（24.44%）和人类γ疱疹病毒4型(22.22%）。病原体RPM与炎症因子呈一定的相关性。结论mNGS可以初步筛选肺泡灌洗液的病原体，能提高病原体检出率，炎症因子可为评估病原体感染提供参考，但需进一步验证。

关键词：宏基因组二代测序技术支气管肺泡灌洗液肺部感染诊断价值

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CCN家族蛋白在糖尿病肾病中的作用

海南医学院学报 2024年第16期30卷 1271-1275,1280页

作者：陈瑶魏佳莉海南省人民医院/海南医科大学附属海南医院肾内科海南海口570311

糖尿病肾脏疾病(DKD)是一类以进行性肾组织纤维化为特征的肾脏疾病。在明确糖尿病为肾损害病因并排除其他原因引起的慢性肾脏病(CKD)前提下,1型和2型糖尿病患者出现持续性白蛋白尿,或估算肾小球滤过率进行性下降大于3个月,或肾活检符合... 详细信息

糖尿病肾脏疾病(DKD)是一类以进行性肾组织纤维化为特征的肾脏疾病。在明确糖尿病为肾损害病因并排除其他原因引起的慢性肾脏病(CKD)前提下,1型和2型糖尿病患者出现持续性白蛋白尿,或估算肾小球滤过率进行性下降大于3个月,或肾活检符合DKD病理诊断,可诊断为DKD。细胞通讯网络(CCN)家族蛋白是一组细胞间基质蛋白,参与调解生长、凋亡、衰老、自噬、迁移、分化和炎症等重要细胞病理生理改变。新近研究显示,CCN家族蛋白在DKD大鼠肾脏模型中表达显著上调,提示其在DKD肾小管上皮细胞发生上皮-间充质转化(EMT)和肾间质纤维化进展中发挥重要作用。本文综述了CCN家族蛋白介导DKD肾脏损伤的作用及机制,以探索DKD潜在的治疗靶点。

关键词： CCN家族蛋白糖尿病肾病上皮-间充质转化肾纤维化

泛素-蛋白酶体系统在溃疡性结肠炎中的研究进展

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海南医学院学报 2024年第18期30卷 1425-1432页

作者：陈旭永王柳丹苗新普海南医学院附属海南医院海南省人民医院消化内科海南海口570100

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种发生在肠黏膜的慢性复发性非特异性的炎症性肠病,目前认为其发病机制可能与肠上皮屏障、肠道微生态及免疫等因素相关,且临床上治疗效果欠佳。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome system,... 详细信息

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种发生在肠黏膜的慢性复发性非特异性的炎症性肠病,目前认为其发病机制可能与肠上皮屏障、肠道微生态及免疫等因素相关,且临床上治疗效果欠佳。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome system,UPS)是细胞内蛋白质降解的主要途径,主要通过降解错误折叠的蛋白质来维持细胞稳态。其功能异常会导致细胞稳态失调,对UC的发生发展具有重要影响作用。本文对UPS中泛素化、去泛素化、泛素连接酶以及泛素相关制剂治疗与UC发病机制之间的关系进行了概述,旨在为UC的诊疗研究提供新的思路。

关键词：溃疡性结肠炎泛素蛋白酶体泛素连接酶治疗应用

肠脂肪酸结合蛋白在肠黏膜屏障损伤相关疾病中的作用研究进展

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海南医学院学报 2024年第12期30卷 939-946页

作者：苏小优万燕陈超超蓝程海南省人民医院海南医学院附属海南医院消化内科海南海口570311

肠道是人体持续暴露于外部环境的最大器官之一,发挥着重要的物理及化学屏障作用保护人体免受致病菌侵害,肠黏膜屏障作为肠道的重要组成部分,其完整性对维持肠道微生态平衡起关键作用,肠黏膜屏障破坏可导致肠道菌群失调及易位,与多种疾... 详细信息

肠道是人体持续暴露于外部环境的最大器官之一,发挥着重要的物理及化学屏障作用保护人体免受致病菌侵害,肠黏膜屏障作为肠道的重要组成部分,其完整性对维持肠道微生态平衡起关键作用,肠黏膜屏障破坏可导致肠道菌群失调及易位,与多种疾病的发生发展相关。肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I‑FABP)是脂肪酸结合蛋白家族中的一种,对肠道损伤具有特异性,在肠道发生损伤、缺血、肠黏膜屏障损伤及通透性增加时会迅速释放入血液循环,I‑FABP水平升高是反映肠道损伤的重要标志物,临床上很多疾病常合并肠道功能障碍,本文主要对I‑FABP的结构特征、功能及其与肠黏膜屏障相关疾病的关系进行综述。

关键词：肠脂肪酸结合蛋白结构特征功能肠黏膜屏障肠道损伤

洛伐他汀通过调控Akt通路对缺氧/复氧心肌细胞损伤的保护作用

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中国临床药理学杂志 2024年第19期40卷 2826-2830页

作者：韩小虎腾丽峰吴清柳李儒正海南省人民医院/海南医学院附属海南医院心脏外科海南海口570311 海南省人民医院/海南医学院附属海南医院心血管内科海南海口570311

目的探索洛伐他汀对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用,及其对蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,并分为对照组、模型组、抑制组、联合组和低、中、高剂量实验组。对照组给予正常培养液常规培养,其... 详细信息

目的探索洛伐他汀对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用,及其对蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,并分为对照组、模型组、抑制组、联合组和低、中、高剂量实验组。对照组给予正常培养液常规培养,其他6组均进行缺氧/复氧处理。低、中、高剂量实验组分别添加1、2和5μmol·L^(-1)洛伐他汀;抑制组添加1μmol·L^(-1)LY294002;联合组添加5μmol·L^(-1)洛伐他汀和1μmol·L^(-1)LY294002。用噻唑蓝法检测细胞活力,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,用蛋白质印迹法检测磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平。结果高剂量实验组、抑制组、联合组、模型组和对照组的细胞活力分别为(64.38±7.10)%、(21.64±1.32)%、(51.89±2.25)%、(47.18±6.66)%和(100.00±7.69)%,细胞凋亡率分别为(13.67±1.42)%、(38.52±2.42)%、(21.12±2.27)%、(20.42±3.33)%和(4.93±0.40)%,p-Akt蛋白相对表达水平分别为0.54±0.04、0.04±0.01、0.25±0.03、0.20±0.01和0.45±0.02。高剂量实验组的上述指标与模型组比较,联合组的上述指标与高剂量实验组和抑制组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论洛伐他汀能够通过激活Akt信号通路对缺氧/复氧心肌细胞损伤起到保护作用。

关键词：洛伐他汀大鼠心肌细胞H9c2 缺氧/复氧磷脂酰肌醇-3-激酶信号通路