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巨噬细胞迁移抑制因子对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的影响

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1380-1387页

作者：黄婷郑晓晗钟远吉魏艳召魏绪芳曹旭东冯晓丽赵振强海南医学院第一附属医院神经内科海南省海口市570100 海南医学院海南省海口市570100 海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海南省海口市570100 渥太华大学加拿大渥太华K1N6N5

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓... 详细信息

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓度基本固定。然而,MIF是否参与了人胚胎干细胞的存活、增殖和分化尚不清楚。目的:探究MIF对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的作用。方法:(1)培养人胚胎干细胞H9,CCK-8法检测并绘制细胞生长曲线,采用酶联免疫吸附法定量检测培养基中MIF水平。(2)为了明确外源性MIF对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,分为:对照组,细胞在干细胞培养基中正常培养;外源性MIF组,在干细胞培养基中分别添加30,100,300 ng/m L的MIF;MIF抑制剂ISO-1组,在干细胞培养基中分别添加2,7,21μmol/L的ISO-1;MIF+ISO-1组,在不同浓度ISO-1组中分别添加100 ng/m L MIF,采用CCK-8法检测上述各组细胞活力。(3)为进一步阐明MIF基因对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,采用CRISPRCas9技术构建MIF敲除的H9细胞系,观察建系情况。(4)为了明确高浓度MIF对人胚胎干细胞初步分化是否有影响,在培养基中分别添加100 ng/m L MIF和100 ng/m L CXCR4中和抗体,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)、免疫细胞荧光、蛋白质印迹法(Western blot)检测干细胞自我更新因子(KLF4、c-MYC、NANOG、OCT4、SOX2)及分化转录因子(FOXA2、OTX2)的表达水平。结果与结论:(1)人胚胎干细胞H9的对数生长期为3-6 d,正常生长的情况下自分泌MIF水平约为20 ng/m L,与细胞量无关;(2)与对照组相比,添加不同质量浓度MIF对人胚胎干细胞的增殖无影响(P>0.05);ISO-1明显抑制人胚胎干细胞的增殖,ISO-1浓度越大,抑制越明显(P<0.05);ISO-1中添加MIF可以减少ISO-1的抑制作用(P<0.05);(3)RT-q PCR检测MIF基因敲除约50%后,人胚胎干细胞生长活力显著降低并且无法建系成功;(4)在培养基中添加100 ng/m L外源性MIF,自我更新转录因子KLF4的m RNA、蛋白及荧光表达水平均下降;分化因子FOXA2的m RNA、蛋白及荧光表达水平均上升;(5)在培养基中添加100 ng/m L CXCR4中和抗体,KLF4的m RNA及蛋白表达水平均上升;FOXA2的m RNA及蛋白表达水平均下降,与MIF组表达趋势相反。综上所述,人胚胎干细胞自分泌的MIF是其存活所必需的;培养基中额外添加MIF并不能促进人胚胎干细胞增殖,但可以使自我更新因子KLF4表达下降,转录因子FOXA2表达上升,为下一步探明MIF对人胚胎干细胞分化的影响及机制提供了线索,MIF-CXCR4轴在其中起到一定的调控作用。

关键词：巨噬细胞迁移抑制因子人胚胎干细胞自分泌存活分化 CXCR4 KLF4 FOXA2

低氧环境对组织工程血管移植物胶原蛋白含量的提升作用

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华南理工大学学报(自然科学版) 2025年第1期53卷 129-135页

作者：林展翼肖聪许健宜刘青孙盱衡方丽君华南理工大学医学院广东广州510006 广东省人民医院(广东省医学科学院)心内科广东广州510080 季华实验室广东佛山528200

在血管组织工程领域,目前的主要技术方向集中于利用血管平滑肌细胞(VSMCs)在体外增殖和分泌富含胶原蛋白的细胞外基质(ECM),并且施加特定力学刺激重构出具有所需力学性能的生物材料。合适的氧气含量对于体外细胞三维培养至关重要,但在... 详细信息

在血管组织工程领域,目前的主要技术方向集中于利用血管平滑肌细胞(VSMCs)在体外增殖和分泌富含胶原蛋白的细胞外基质(ECM),并且施加特定力学刺激重构出具有所需力学性能的生物材料。合适的氧气含量对于体外细胞三维培养至关重要,但在组织工程血管移植物(TEVG)应用方面还缺乏足够研究。为此通过设计不同的氧气含量培养环境,对VSMCs增殖活性检测以确定细胞培养的氧气含量最佳值;进而,在常规氧含量和低氧含量下,对胶原蛋白的基因表达和蛋白分泌情况进行检测,并通过羟脯氨酸检测法对沉积在细胞层中的总胶原含量进行定量;最后,在聚乙醇酸(PGA)支架材料上接种VSMCs进行三维培养形成TEVG,通过组织切片染色和总胶原定量来观察低氧环境下TEVG的培养效果。结果显示:7%氧气条件下VSMCs细胞活性增长最快;低氧环境下VSMCs的Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)基因表达有所上调,在第5至第9天可以检测到更多胶原蛋白分泌到细胞培养基中,尤其是ColⅢ,并且第11天细胞层ECM中总胶原蛋白的含量为常氧组的3.1倍;7%氧气条件可促进PGA支架上VSMCs三维培养过程的胶原沉积,与常氧组相比总胶原含量提高至2.09倍,并形成更致密的胶原纤维。结果表明,选择低氧环境可以促进组织工程血管移植物胶原蛋白的含量,可为进一步优化TEVG的体外培养条件提供依据。

关键词：血管平滑肌细胞低氧环境组织工程血管移植物胶原蛋白

基于Nrf2/HO-1信号通路介导的炎症反应探讨天智颗粒对血管性痴呆大鼠神经炎症的影响

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中国免疫学杂志 2025年第4期 815-821+827页

作者：廖玲郑文张元亚黄晨刘娜杨丽华余鸿博上饶市人民医院全科医学科上饶市人民医院神经内科上饶市人民医院病理科上饶市人民医院检验科

目的：探究天智颗粒对血管性痴呆（VD）大鼠神经炎症的抑制作用。方法：60只大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（VD）、天智颗粒低剂量组（TZG-L）、天智颗粒高剂量组（TZG-H），每组15只。采用双侧颈总动脉闭塞构建VD大鼠模型，Sha... 详细信息

目的：探究天智颗粒对血管性痴呆（VD）大鼠神经炎症的抑制作用。方法：60只大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（VD）、天智颗粒低剂量组（TZG-L）、天智颗粒高剂量组（TZG-H），每组15只。采用双侧颈总动脉闭塞构建VD大鼠模型，Sham组不结扎。TZG-L组、TZG-H组每天灌胃天智颗粒5 g/kg、20 g/kg,Sham组、VD组灌胃等量生理盐水，持续8周。Y电迷宫实验检测大鼠认知能力；尼氏染色、FJC染色检测神经元损伤；TUNEL染色检测神经元凋亡；免疫荧光染色和Western blot检测颞叶皮层组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、TNF-α、Iba-1、GFAP、MPO、Nrf2、HO-1蛋白水平。PC12细胞分为对照组（Control）、谷氨酸组（Glutamate）、TZG-L组和TZG-H组。采用谷氨酸（20μmol/L）构建神经元损伤模型，TZG-L组、TZG-H组加入天智颗粒1 mg/ml、4 mg/ml。各组细胞孵育48 h,CCK8法和TUNEL染色检测细胞活性及凋亡；免疫荧光染色和Western blot检测细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、Nrf2、HO-1蛋白水平。结果：与Sham组相比，VD组大鼠认知能力降低，神经元TUNEL阳性细胞比例增加，Bcl-2水平降低，Bax、Caspase-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、TNF-α、Iba-1、GFAP、MPO、Nrf2、HO-1水平升高（均P<0.05）。与VD组相比，TZG-L组、TZG-H组大鼠认知能力升高，神经元TUNEL阳性细胞比例减少，Bcl-2、Nrf2、HO-1水平升高，Bax、Caspase-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、TNF-α、GFAP、Iba-1、MPO水平降低（均P<0.05）。Control组神经元形态正常；与Control组相比，Glutamate组神经元细胞变形，神经元活性降低，凋亡率升高，Bcl-2水平降低，Bax、Caspase-3、Nrf2、HO-1水平升高（均P<0.05）。与Glutamate组相比，TZG-L组、TZG-H组细胞损伤减轻，神经元活性升高，凋亡率减少，Bcl-2、Nrf2、HO-1水平升高，Bax、Caspase-3水平降低（均P<0.05）。结论：天智颗粒能够抑制VD大鼠神经元凋亡和NLRP3炎症小体表达，抑制小胶质细胞/星形胶质细胞激活和中性粒细胞浸润，改善VD神经炎症，可能通过激活神经元中Nrf2/HO-1信号通路发挥作用。

关键词：天智颗粒血管性痴呆神经炎症 Nrf2/HO-1信号通路

A型胰岛素抵抗综合征1个家系的胰岛素受体基因新发突变分析

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中华内科杂志 2025年第3期64卷 239-243页

作者：李一君杨国庆臧丽裴育陈康杜锦吕朝晖解放军总医院第一医学中心内分泌科北京100039 解放军总医院海南医院内分泌科三亚572013

探讨严重胰岛素抵抗综合征患者及其家系胰岛素受体基因(INSR)突变的遗传机制。对解放军总医院第一医学中心内分泌科收治的1例临床拟诊A型胰岛素抵抗综合征的患者进行INSR基因Sanger测序,并对其一级亲属相应INSR外显子进行扩增测序,同时... 详细信息

探讨严重胰岛素抵抗综合征患者及其家系胰岛素受体基因(INSR)突变的遗传机制。对解放军总医院第一医学中心内分泌科收治的1例临床拟诊A型胰岛素抵抗综合征的患者进行INSR基因Sanger测序,并对其一级亲属相应INSR外显子进行扩增测序,同时在糖代谢正常及2型糖尿病人群中对发现的突变位点进行验证,通过MutationTaster、SIFT、PolyPhen2软件进行蛋白功能损害预测。先证者及其父亲的INSR第20号外显子均发现尚未报道的c.3652G/A杂合错义突变,导致Asp1218Asn突变,而糖代谢正常及2型糖尿病人群均不存在该位点突变。多种预测方法均提示该变异对基因/蛋白质结构或功能造成有害影响。INSR第20号外显子c.3652G/A杂合突变是新发现导致A型胰岛素抵抗综合征的致病性突变。

关键词： A型胰岛素抵抗综合征胰岛素受体基因突变

苦碟子注射液联合阿司匹林和氯吡格雷治疗急性脑梗死的临床研究

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现代药物与临床 2025年第3期40卷 643-647页

作者：杜朝品包元飞戴轶伟南通市第三人民医院神经内科

目的探讨苦碟子注射液与阿司匹林肠溶片、硫酸氢氯吡格雷片对急性脑梗死患者的协同治疗效果。方法选择研究对象为南通市第三人民医院2022年8月—2024年2月收治的急性脑梗死患者92例，将入选的92例患者随机分为对照组（46例）与治疗组... 详细信息

目的探讨苦碟子注射液与阿司匹林肠溶片、硫酸氢氯吡格雷片对急性脑梗死患者的协同治疗效果。方法选择研究对象为南通市第三人民医院2022年8月—2024年2月收治的急性脑梗死患者92例，将入选的92例患者随机分为对照组（46例）与治疗组（46例）。对照组口服硫酸氢氯吡格雷片75 mg/次、阿司匹林肠溶片100 mg/次，1次/d。于对照组基础上，治疗组加用静脉滴注苦碟子注射液（0.9%氯化钠注射液500mL+苦碟子注射液40 mL）,1次/d。两组均治疗14 d。比较两组的临床疗效、神经功能、脑血流动力学指标和血清炎症因子变化情况。结果治疗后，相较于对照组的总有效率85.61%，治疗组总有效率95.65%明显更高（P<0.05）。相较于治疗前，两组治疗后的NIHSS评分明显减少（P<0.05），治疗组NIHSS评分明显低于对照组（P<0.05）。相较于治疗前，两组治疗后的平均血流速度明显加快，外周阻力明显减小（P<0.05），其中治疗组的平均血流速度更快，外周阻力更小（P<0.05）。与治疗前相比，两组的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平均降低（P<0.05），且治疗组血清TNF-α、IL-6水平更低（P<0.05）。结论硫酸氢氯吡格雷片、阿司匹林肠溶片与苦碟子注射液协同作用可提升急性脑梗死患者的临床疗效，可改善神经功能、优化脑血流动力学，并降低炎症因子水平。

关键词：苦碟子注射液阿司匹林肠溶片硫酸氢氯吡格雷片急性脑梗死 NIHSS评分平均血流速度外周阻力肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6

动态心电图诊断冠心病患者心肌缺血与心律失常的价值及研究

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中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生 2025年第2期 155-158页

作者：徐石邳州市人民医院心内科江苏邳州 221300

评估冠心病中使用动态心电图进行检查的价值和对临床影响。方法需要选择合适数量患上冠心病(78例)的病人(2023年1月至2024年10月),然后对收纳的病人使用普通和动态心电图进行检查,是来比对这两种检查方式的不同,从而定下结论。结果经... 详细信息

评估冠心病中使用动态心电图进行检查的价值和对临床影响。方法需要选择合适数量患上冠心病(78例)的病人(2023年1月至2024年10月),然后对收纳的病人使用普通和动态心电图进行检查,是来比对这两种检查方式的不同,从而定下结论。结果经临床研究证实,动态心电图价值高,可以获取较高的检出率、心肌缺血、心律失常、ST段抬高、压低等的检出率,与普通心电图对比有差异的(P<0.05)。结论动态心电图能够取得临床诊断依据,为后续开展治疗提供准确的数据,具有价值,值得使用与推广。

关键词：动态心电图常规心电图冠心病心肌缺血心律失常

以运动处方为核心的心脏康复方案对冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗后心功能及活动耐力的影响

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中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生 2025年第2期 181-184页

作者：郑瑶溧阳市人民医院心内科江苏常州 213300

评定以运动处方为核心的心脏康复方案在冠心病经皮冠状动脉介入后的应用。方法选取经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的冠心病86例,术后生命体征稳定,可以进行心脏康复。使用随机摸球法分组。各组基础干预相同,对照组采用心脏康复方案;观察组... 详细信息

评定以运动处方为核心的心脏康复方案在冠心病经皮冠状动脉介入后的应用。方法选取经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的冠心病86例,术后生命体征稳定,可以进行心脏康复。使用随机摸球法分组。各组基础干预相同,对照组采用心脏康复方案;观察组采用以运动处方为核心的心脏康复方案。评定各组人员的心功能、运动耐力以及总体康复效果。结果经干预4周、干预8周时,各组人员LVEF均上升,LVEDD均下降;并且干预4周和干预8周,观察组人员LVEF高于对照组,LVEDD低于对照组(P<0.05)。经干预4周、干预8周时,各组人员活动耐力均提高;并且干预4周和干预8周,观察组人员运动耐力高于对照组(P<0.05)。观察组的康复总有效率高于对照组(P<0.05)。结论对于冠心病PCI患者,以运动处方为核心的心脏康复方案是一种理想的干预方案,有利于提高总体康复,提高心功能及活动耐力。

关键词：以运动处方为核心心脏康复方案冠心病经皮冠状动脉介入

冠心病患者PCI术后不同时间血清miR-93-5p、IL-25水平变化及其与冠状动脉ISR的关系

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中南医学科学杂志 2025年第1期53卷 110-113页

作者：张立杰王晓玲宋巧凤贾洪娟张振飞周文华唐山市人民医院心内科河北唐山063001

目的探讨冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后不同时间血清微小核糖核酸(miR)-93-5p、血清白细胞介素(IL)-25水平变化及其与冠状动脉支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选取行PCI术的冠心病患者222例为研究对象,根据PCI术后复查冠状动脉造... 详细信息

目的探讨冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后不同时间血清微小核糖核酸(miR)-93-5p、血清白细胞介素(IL)-25水平变化及其与冠状动脉支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选取行PCI术的冠心病患者222例为研究对象,根据PCI术后复查冠状动脉造影结果将其分为ISR组30例和非ISR组192例,检测所有患者术前1天和术后24 h、7天、6个月的血清miR-93-5p、IL-25水平并进行比较。采用多因素Logistic回归分析法分析ISR发生的相关影响因素。结果术后7天ISR组的IL-25水平高于非ISR组(P<0.05)。ISR组术后24 h、7天IL-25水平较术前1天升高(P<0.05);非ISR组术后24 h IL-25水平较术前升高(P<0.05)。术后7天ISR组的血清miR-93-5p水平低于非ISR组(P<0.05)。ISR组术后24 h、7天血清miR-93-5p水平较术前1天降低(P<0.05);非ISR组术后24 h血清miR-93-5p水平较术前1天降低(P<0.05)。术后24 h及术后7天的IL-25水平是ISR发生的危险因素,术后24 h及术后7天的miR-93-5p水平是ISR发生的保护因素(P<0.05)。结论血清miR-93-5p、IL-25水平可作为预测冠心病患者PCI术后ISR的参考指标。

关键词： miR-93-5p 白细胞介素-25 经皮冠状动脉介入治疗支架内再狭窄影响因素

PBL教学联合介入手术观摩在心内科临床教学中的应用

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中文科技期刊数据库(引文版)教育科学 2025年第3期 183-186页

作者：戴禛溧阳市人民医院心内科江苏常州 213300

探讨PBL教学联合介入手术观摩在心内科临床教学中的应用效果。方法选取2023年1月至2024年12月本院心内科实习、进修医师共37人作为研究对象,根据PBL教学联合介入手术观摩教学模式实施时间先后顺序进行分组,将2023年度的18名医师作为对... 详细信息

探讨PBL教学联合介入手术观摩在心内科临床教学中的应用效果。方法选取2023年1月至2024年12月本院心内科实习、进修医师共37人作为研究对象,根据PBL教学联合介入手术观摩教学模式实施时间先后顺序进行分组,将2023年度的18名医师作为对照组,采用传统教学模式,将2024年度的19名医师作为观察组,采用PBL教学联合介入手术观摩教学模式,教学结束后,比较两组学员的理论知识掌握程度、临床病例分析能力以及教学满意度。结果观察组学员理论知识及临床病历分析考核成绩均高于对照组[(89.94±2.59)分vs(83.44±3.29)分、(87.11±1.97)分vs(81.39±3.40)分],差异具有统计学意义,P心内科临床教学中能够有效提高教学效果与教学整体满意度。

关键词： PBL教学介入手术观摩心内科临床教学教学满意度