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巨噬细胞迁移抑制因子对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的影响

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1380-1387页

作者：黄婷郑晓晗钟远吉魏艳召魏绪芳曹旭东冯晓丽赵振强海南医学院第一附属医院神经内科海南省海口市570100 海南医学院海南省海口市570100 海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海南省海口市570100 渥太华大学加拿大渥太华K1N6N5

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓... 详细信息

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓度基本固定。然而,MIF是否参与了人胚胎干细胞的存活、增殖和分化尚不清楚。目的:探究MIF对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的作用。方法:(1)培养人胚胎干细胞H9,CCK-8法检测并绘制细胞生长曲线,采用酶联免疫吸附法定量检测培养基中MIF水平。(2)为了明确外源性MIF对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,分为:对照组,细胞在干细胞培养基中正常培养;外源性MIF组,在干细胞培养基中分别添加30,100,300 ng/m L的MIF;MIF抑制剂ISO-1组,在干细胞培养基中分别添加2,7,21μmol/L的ISO-1;MIF+ISO-1组,在不同浓度ISO-1组中分别添加100 ng/m L MIF,采用CCK-8法检测上述各组细胞活力。(3)为进一步阐明MIF基因对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,采用CRISPRCas9技术构建MIF敲除的H9细胞系,观察建系情况。(4)为了明确高浓度MIF对人胚胎干细胞初步分化是否有影响,在培养基中分别添加100 ng/m L MIF和100 ng/m L CXCR4中和抗体,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)、免疫细胞荧光、蛋白质印迹法(Western blot)检测干细胞自我更新因子(KLF4、c-MYC、NANOG、OCT4、SOX2)及分化转录因子(FOXA2、OTX2)的表达水平。结果与结论:(1)人胚胎干细胞H9的对数生长期为3-6 d,正常生长的情况下自分泌MIF水平约为20 ng/m L,与细胞量无关;(2)与对照组相比,添加不同质量浓度MIF对人胚胎干细胞的增殖无影响(P>0.05);ISO-1明显抑制人胚胎干细胞的增殖,ISO-1浓度越大,抑制越明显(P<0.05);ISO-1中添加MIF可以减少ISO-1的抑制作用(P<0.05);(3)RT-q PCR检测MIF基因敲除约50%后,人胚胎干细胞生长活力显著降低并且无法建系成功;(4)在培养基中添加100 ng/m L外源性MIF,自我更新转录因子KLF4的m RNA、蛋白及荧光表达水平均下降;分化因子FOXA2的m RNA、蛋白及荧光表达水平均上升;(5)在培养基中添加100 ng/m L CXCR4中和抗体,KLF4的m RNA及蛋白表达水平均上升;FOXA2的m RNA及蛋白表达水平均下降,与MIF组表达趋势相反。综上所述,人胚胎干细胞自分泌的MIF是其存活所必需的;培养基中额外添加MIF并不能促进人胚胎干细胞增殖,但可以使自我更新因子KLF4表达下降,转录因子FOXA2表达上升,为下一步探明MIF对人胚胎干细胞分化的影响及机制提供了线索,MIF-CXCR4轴在其中起到一定的调控作用。

关键词：巨噬细胞迁移抑制因子人胚胎干细胞自分泌存活分化 CXCR4 KLF4 FOXA2

程序性评价在全科临床诊疗思维课程评价中的应用

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中国全科医学 2025年第4期28卷 420-426页

作者：翟佳燚陆媛石建军于德华同济大学附属杨浦医院全科医学科上海市200090 上海市嘉定区嘉定镇街道社区卫生服务中心 201899 同济大学医学院全科医学系上海市200090 上海市全科医学与社区卫生发展研究中心 200090

背景全科临床诊疗思维是全科医生为患者提供高质量诊疗服务的关键,但因其属于无法被直接观察的抽象能力,所以并不适合用传统的方法进行评价。目的本文旨在通过优化课程教学评价方法提高全科医生临床诊疗思维培训效率,丰富医学教育评价... 详细信息

背景全科临床诊疗思维是全科医生为患者提供高质量诊疗服务的关键,但因其属于无法被直接观察的抽象能力,所以并不适合用传统的方法进行评价。目的本文旨在通过优化课程教学评价方法提高全科医生临床诊疗思维培训效率,丰富医学教育评价。方法于2022年9—12月,以同济大学医学院38名全科方向硕士研究生为对象,根据学习与工作经历分为在职组16名与住培组22名。培训课程包含核心、案例、结果3个模块,采取混合式教学方法开展实践。定量评价的内容为技能评分表、PBL评分表与案例评分表,主观评价的内容来自多源反馈。结果两组学员核心和案例模块首次课程评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);两个模块末次课程得分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。将总体学员以及两组学员核心和案例模块首、末次课程的定量评价得分比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。主观评价性质分为肯定性评价与改进性评价,问诊能力、体格检查、辅助检查、健康管理、慢病管理课程的肯定性评价占比较低,而改进性评价占比较高;医患沟通、病历书写、多病共存、心身疾病、未分化疾病课程的肯定性评价占比较高,而改进性评价占比较低。结论程序性评价能够丰富全科思维评价体系、促进学员循序建构全科思维,同时也发现了“翻转课堂”是程序性评价的呈现形式。

关键词：全科医学教学教育,研究生程序性评价临床诊疗思维翻转课堂

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铜死亡在胃癌中的研究进展

海南医学院学报 2025年

作者：张秋艳许培怡翟婧陈璞邓雪婷缪林张秀华南京医科大学第二附属医院消化医学中心

铜是人体内必需的微量元素，参与众多生理功能。铜死亡（cuprotosis）是一种新近发现的由细胞内铜离子积累触发的调节性细胞死亡形式，且与线粒体呼吸密切相关。研究表明，铜代谢与铜死亡在肿瘤的形成和进展中发挥着关键作用。与铜死亡... 详细信息

铜是人体内必需的微量元素，参与众多生理功能。铜死亡（cuprotosis）是一种新近发现的由细胞内铜离子积累触发的调节性细胞死亡形式，且与线粒体呼吸密切相关。研究表明，铜代谢与铜死亡在肿瘤的形成和进展中发挥着关键作用。与铜死亡相关的基因在胃癌的预后模型中显示出潜在价值。本文旨在综述铜死亡在胃癌的诊断、治疗和预后方面的研究与应用，以期为胃癌的诊疗和预后评估提供新的见解和策略。

关键词：铜代谢铜死亡胃癌治疗预后

床旁高渗盐水造影肺灌注电阻抗断层成像技术在肺动脉内膜剥脱术后应用2例并文献复习

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协和医学杂志 2025年

作者：蔡秋燕刘旺林程卫刘晶晶张超纪刘剑州隆云何怀武中国医学科学院北京协和医院重症医学科海南西部中心医院重症医学科中国医学科学院北京协和医院心外科

肺电阻抗断层成像（electrical impedance tomography，EIT）作为一种床旁无创、连续、动态、无辐射的肺通气监测技术，目前已广泛应用于急危重症患者的诊疗。除肺通气监测外，近年来高渗盐水造影肺灌注EIT床旁监测也备受关注。本文介... 详细信息

肺电阻抗断层成像（electrical impedance tomography，EIT）作为一种床旁无创、连续、动态、无辐射的肺通气监测技术，目前已广泛应用于急危重症患者的诊疗。除肺通气监测外，近年来高渗盐水造影肺灌注EIT床旁监测也备受关注。本文介绍高渗盐水造影肺灌注EIT技术床旁评估2例肺动脉内膜剥脱术后患者的肺灌注情况，为该技术在此类患者围术期管理中的应用提供参考。

关键词：床旁高渗盐水造影电阻抗断层成像肺灌注慢性血栓栓塞性肺动脉高压肺动脉内膜剥脱术

卵巢抵抗综合征和早发性卵巢功能不全诊断与个体化管理进展

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实用医学杂志 2025年第01期 146-152页

作者：尚丹丹刘萍刘利贞庞益伟周超滨州医学院附属医院妇科海南西部中心医院生殖医学科滨州医学院附属医院生殖医学科

卵巢抵抗综合征（ROS）与早发性卵巢功能不全（POI）同属于高促性腺激素性闭经，两者存在相似的临床特点，通常较难鉴别，ROS易被误诊为POI，给后续治疗带来极大挑战。因此，了解ROS和POI的病因、临床特点和诊断标准，尽早明确诊断并制... 详细信息

卵巢抵抗综合征（ROS）与早发性卵巢功能不全（POI）同属于高促性腺激素性闭经，两者存在相似的临床特点，通常较难鉴别，ROS易被误诊为POI，给后续治疗带来极大挑战。因此，了解ROS和POI的病因、临床特点和诊断标准，尽早明确诊断并制定合理的治疗方案对于有生育要求的患者至关重要。该文系统、全面地探讨了ROS与POI的病因和发病机制、临床特点与诊断以及个体化管理等方面的研究进展，旨在为临床医师提供参考，以便尽早明确诊断，避免误诊误治，并通过个体化管理，帮助患者改善症状并实现生育愿望。

关键词：卵巢抵抗综合征早发性卵巢功能不全诊断个体化管理

青蒿素通过改善心肌线粒体功能减轻脓毒症小鼠心肌损伤的实验研究

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海南医学院学报 2025年

作者：张琪赵长甲姜波薛庆许航任珊石河子大学第一附属医院新疆生产建设兵团危重症疾病临床医学研究中心石河子大学第一附属医院重症医学一科

目的探讨青蒿素（ART）减轻不同菌种所致脓毒症小鼠心肌损伤的作用及其可能机制。方法 104只C57/BL小鼠随机分为假手术组（sham组）、革兰氏阳/阴性脓毒症组（G+/G-sepsis组）、革兰氏阳/阴性脓毒症+ART不同剂量组（5mg/kg、10mg/kg、1... 详细信息

目的探讨青蒿素（ART）减轻不同菌种所致脓毒症小鼠心肌损伤的作用及其可能机制。方法 104只C57/BL小鼠随机分为假手术组（sham组）、革兰氏阳/阴性脓毒症组（G+/G-sepsis组）、革兰氏阳/阴性脓毒症+ART不同剂量组（5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg）。造模后12h取材，HE染色观察心肌病理变化并评分，ELISA法测定小鼠血清CK-MB、cTnI浓度。以ART 25mg/kg剂量组探讨其减轻脓毒症小鼠心肌损伤的作用机制，将小鼠随机分为sham组、革兰氏阳/阴性脓毒症组（G+/G-sepsis组）、革兰氏阳/阴性脓毒症+（ART 25mg/kg）组，造模后12h取材，心脏超声检测小鼠心脏LVEF、LVFS、LVEDD、LVESD、EDV、ESV水平，行透射电镜观察心肌线粒体损伤并评分。结果与sham组相比，G+/G-sepsis组心肌损伤和炎症细胞浸润严重、CK-MB、cTNI明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；ART各剂量组显著减轻心肌纤维损伤和炎症细胞浸润，损伤评分、血清CK-MB、cTnI水平较G+/-sepsis组呈浓度依赖性下降，差异均有统计学意义（P<0.05）；与sham组相比，G+/-sepsis组心肌收缩功能下降、心肌线粒体呈严重的形态损伤及评分，差异有统计学意义（P<0.05）；与G+/-sepsis组相比，ART25mg/kg组心肌收缩功能得到改善且评分下降、仅少部分线粒体形态破坏，差异有统计学意义（P<0.05）。结论青蒿素对金黄色葡萄球菌/大肠埃希菌所致脓毒症小鼠心肌损伤有保护作用，其机制可能与改善心肌线粒体功能相关。

关键词：脓毒症心肌损伤青蒿素心肌线粒体

封闭抗体水平与复发性流产相关性的Meta分析

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中国循证医学杂志 2018年第9期18卷 941-946页

作者：朱娟段恬筱羊在家马燕琳黄海溶海南医学院第一附属医院生殖中心海口570102 海南医学院海口571199

目的系统评价封闭抗体水平与复发性流产的相关性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、CNKI、CBM、Wan Fang Data和VIP数据库,搜集封闭抗体水平与复发性流产相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2017年5月。由2名研究者独立筛选文献... 详细信息

目的系统评价封闭抗体水平与复发性流产的相关性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、CNKI、CBM、Wan Fang Data和VIP数据库,搜集封闭抗体水平与复发性流产相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2017年5月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入12个病例-对照研究,包括3 413例研究对象。Meta分析结果显示:封闭抗体阴性与复发性流产的发生具有相关性,其差异具有统计学意义[OR=6.10,95%CI(2.40,15.51),P=0.000 1]。结论当前证据表明,封闭抗体缺乏是复发性流产的危险因素之一。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。

关键词：复发性流产封闭抗体 Meta分析系统评价病例-对照研究

应用CRISP清单,提升我国全科医学和基本医疗研究报告的质量

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中国全科医学 2025年第4期28卷 393-401页

作者：杨辉汪洋陈庆奇刘晨曦顾杰赵洋秦江梅曹新阳 Elizabeth Sturgiss William R.Phillips 许岩丽 Monash大学公共卫生与预防医学学院澳大利亚墨尔本市VIC 3168 上海市全科医学与社区卫生发展研究中心 200090 同济大学附属杨浦医院全科医学科上海市200090 香港大学家庭医学及基层医疗学系中国香港特别行政区999077 华中科技大学同济医学院医药卫生管理学院湖北省武汉市430000 复旦大学附属中山医院全科医学科上海市200032 复旦大学附属中山医院国际医疗部上海市200032 新南威尔士大学乔治全球健康研究院澳大利亚悉尼2050 墨尔本大学人口与全球健康学院澳大利亚墨尔本3010 国家卫生健康委卫生发展研究中心北京市100044 《中国全科医学》杂志社有限公司北京市100053 School of Primary and Allied Health Care Monash UniversityMelbourneVictoriaAustraliaVIC 3168 University of Washington SeattleWashington98195

基本医疗(初级保健)研究报告内容的条目共识(CRISP)工作组于2023年提出了CRISP清单,以支持改善上述领域研究报告的质量、实用性和传播性。《中国全科医学》英文版的学术编辑团队对CRISP清单进行了中文翻译,并通过这篇述评,在回顾我国全... 详细信息

基本医疗(初级保健)研究报告内容的条目共识(CRISP)工作组于2023年提出了CRISP清单,以支持改善上述领域研究报告的质量、实用性和传播性。《中国全科医学》英文版的学术编辑团队对CRISP清单进行了中文翻译,并通过这篇述评,在回顾我国全科医学和基本医疗研究的内涵和发展现状的基础上,归纳了该领域的科研报告中目前存在的主要问题,如“以作者为中心”“过度重视塑造权威性”“盲目生搬国际经验”“缺乏对方法学的透明报告”“在论文中压入大量冗繁信息”以及“遮蔽关键信息”等。最后,编辑团队推荐和鼓励中国的全科医学和基本医疗服务研究的作者、编辑和学术评议专家尝试使用CRISP清单,在改善中国全科医学和基本医疗研究报告质量的同时,进一步完善该工具在学科发展研究、临床研究、卫生服务研究、卫生政策研究、教育和培训研究以及社区流行病学研究等亚领域中的应用。

关键词：全科医学基本医疗研究报告内容共识

小鼠胚胎及人包皮成纤维细胞按比例制成混合饲养层上的人胚胎干细胞生长状态

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第3期12卷 424-428页

作者：李斌彭秋平卢伟英徐雯金应霞黄元华海南医学院海南医学院附属医院生殖医学中心海南省海口市570102 海南医学院附属医院生殖医学中心

目的:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题,观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。方法... 详细信息

目的:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题,观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。方法:实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。①对象:包皮来自于行包皮环切的儿童,由海南医学院附属医院泌尿外科提供,儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5～14.5d的胎鼠11只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:将去除头、四肢和内脏的胎鼠按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养,待生长汇合后冻存部分原代细胞,用丝裂霉素C处理2.0～3.0h后,按1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后,按1:0,3:1,1:1,1:3,0:1比例混合,然后以1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即混合饲养层。③实验评估:观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态。并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层,观察人胚胎干细胞体外分化情况。结果:①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较:生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满,而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实,其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较:小鼠胚胎成纤维细胞:人包皮成纤维细胞按1:1混合时,人胚胎干细胞显著堆积生长,克隆边缘清晰、隆起明显且饱满,按1:3混合时无明显变化,优于其余3种混合比例。③混合饲养层上人胚胎干细胞未分化状态的检测:碱性磷酸酶染色及OCT-4抗原表达均呈强阳性,分别在200～300bp和300～400bp处可见OCT-4和端粒酶 mRNA表达的特异性条带。④体外分化实验:能形成拟胚体,贴壁后人胚胎干细胞可分化为多种形态的细胞。结论:①与小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞常规饲养层相比,二者混合饲养层能够更好的支持人胚胎干细胞的体外传代培养,获得更佳的克隆形态。②小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合比例为1:1时效果较好。

关键词：人胚胎干细胞成纤维细胞饲养层混合