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miR-26b-3p靶向CREB1调控神经胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 578-584页

作者：黄秋虎周建王子珍杨堃陈政纲海南医学院第一附属医院神经外科海南海口570102

目的探讨miR-26b-3p靶向调控环磷酸腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)表达水平影响胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法运用RT-qPCR和Western blotting检测不同级别胶质瘤中miR-26b-3p和CREB1的表达情况;生物信息学方法分析miR-... 详细信息

目的探讨miR-26b-3p靶向调控环磷酸腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)表达水平影响胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法运用RT-qPCR和Western blotting检测不同级别胶质瘤中miR-26b-3p和CREB1的表达情况;生物信息学方法分析miR-26b-3p与CREB1结合的靶向序列。采用双荧光素酶报告基因检测miR-26b-3p对CREB1的靶向调控机制;将胶质瘤U251细胞分为对照组、miR-26b-3p mimic组及miR-26b-3p inhibitor组,采用Western blotting检测CREB1的表达变化,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力的影响,采用划痕实验检测各组细胞迁移能力的影响,采用Transwell检测各组细胞侵袭能力的影响,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡的影响。结果miR-26b-3p的表达随着胶质瘤级别的增加而降低(P<0.05),而CREB1的表达则逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示miR-26b-3p可显著影响CREB13′UTR表达载体的荧光素酶活性,CREB1是miR-26b-3p下游靶基因。抑制miR-26b-3p表达可上调CERB1的表达,进而抑制细胞凋亡,促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭。过表达miR-26b-3p可下调CERB1的表达,促进细胞凋亡,抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.05)。结论miR-26b-3p可靶向调控CREB1的表达调节胶质瘤细胞的凋亡、增殖、迁移和侵袭,进而参与胶质瘤的发生发展。

关键词： CREB1 miR-26b-3p 胶质瘤增殖迁移侵袭

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气肿性胆囊炎1例

中华肝胆外科杂志 2024年第4期30卷 302-303页

作者：郑麟锋吕云福郑进方海南医学院附属海南医院肝胆胰外科海口570311

气肿性胆囊炎是急性胆囊炎的一种特殊类型,多见于糖尿病患者,可在胆囊腔及胆囊壁内发现气体存在。虽然气肿性胆囊炎较为罕见,但其病程进展快、病死率较高,一经诊断须立即手术治疗。本文报道了1例气肿性胆囊炎患者的诊治经过,采用先保守... 详细信息

气肿性胆囊炎是急性胆囊炎的一种特殊类型,多见于糖尿病患者,可在胆囊腔及胆囊壁内发现气体存在。虽然气肿性胆囊炎较为罕见,但其病程进展快、病死率较高,一经诊断须立即手术治疗。本文报道了1例气肿性胆囊炎患者的诊治经过,采用先保守再手术的治疗方案,患者经治疗后顺利康复出院。

关键词：急性胆囊炎胆囊壁气肿性胆囊炎胆囊腔特殊类型病程进展诊治经过病死率

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双侧输尿管肾源性腺瘤1例报告

中华泌尿外科杂志 2024年第2期45卷 148-149页

作者：周世英何书明海南医学院第二附属医院泌尿外科海口570311

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣... 详细信息

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣输尿管下段成形术。术后病理诊断为肾源性腺瘤。术后随访26个月,患者无复发和转移。

关键词：输尿管输尿管肿瘤肾源性腺瘤

成骨细胞来源的外泌体介导微小RNA-494影响骨质疏松症大鼠骨代谢与骨重建平衡

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解剖学报 2024年第3期55卷 302-310页

作者：林维李超艺唐捷张丕军海南医学院第二附属医院关节外科海口570311

目的探讨成骨细胞来源的外泌体(Exo)中微小RNA(miR)-494对骨质疏松症(OP)大鼠骨代谢与骨重建平衡的影响及其机制。方法从MC3T3-E1成骨细胞系中分离鉴定Exo,并将miR-494电转至Exo,Real-time PCR测定miR-494表达水平。40只SD大鼠随机分为... 详细信息

目的探讨成骨细胞来源的外泌体(Exo)中微小RNA(miR)-494对骨质疏松症(OP)大鼠骨代谢与骨重建平衡的影响及其机制。方法从MC3T3-E1成骨细胞系中分离鉴定Exo,并将miR-494电转至Exo,Real-time PCR测定miR-494表达水平。40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-494模拟剂(miR-494)组和miR-494抑制剂组,每组10只。除对照组外,其余3组大鼠切除卵巢构建OP模型。模型制作成功后,miR-494组与miR-494抑制剂组分别接受含相应miRNA的Exo尾静脉注射,剂量为3×10^(9)个微粒。4周后,Micro-CT检测各组大鼠的骨参数,ELISA测定血清骨标志物,HE染色观察骨组织病理变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色检测破骨细胞数量,Western blotting测定骨重建相关蛋白及Toll样受体4(TLR4)相关通路蛋白表达水平。结果成功从MC3T3-E1细胞中分离得到典型杯状或圆形,直径约100 nm的Exo,其含有CD63、CD9、肿瘤易感性基因101(TSG101)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白,且能被MC3T3-E1细胞摄取。经电转处理后,miR-494模拟剂和miR-494抑制剂的Exo中miR-494的相对表达量明显升高和降低(P<0.05)。与模型组相比,miR-494组大鼠骨参数降低,血清骨标志物骨钙蛋白(BGP)、TRACP、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)升高,骨保护蛋白(OPG)、Ⅰ型前胶原N端肽(PⅠNP)降低,骨小梁结构紊乱,破骨细胞增加,骨组织内骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(RUNX2)下调,核因子κB受体激活剂配体(RANKL)上调,TLR4、核因子κB(NF-κB)p65及髓样分化主要响应蛋白88(MyD88)上调(P<0.05)。而miR-494抑制剂组情况则相反,骨参数和OPG、PⅠNP升高,BGP、TRACP、CTX-Ⅰ降低,骨结构恢复正常,破骨细胞减少,骨组织内BMP-2、RUNX2上调,RANKL下调,TLR4、NF-κB p65及MyD88下调(均P<0.05)。结论Exo传递miR-494可加重OP大鼠骨代谢异常,并抑制骨重建平衡,推测其作用机制可能与调控TLR4通路有关。

关键词：骨质疏松症微小RNA-494 外泌体骨代谢骨重建平衡实时定量聚合酶链反应免疫印迹法大鼠

腹主动脉瘤腔内修复术后髂支闭塞的治疗策略及其危险因素分析

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中国普通外科杂志 2024年第6期33卷 918-925页

作者：戚悠飞王惠暄刘飒华陈浩张文波吴鸿飞刘震东许语阳肖占祥李振振海南省人民医院/海南医学院附属海南医院血管外科海南海口570311 海南医学院海南海口571199

背景与目的:腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR)以其微创且术后恢复快的优势,已成为腹主动脉瘤(AAA)的首选治疗。髂支闭塞(ILO)是EVAR术后常见并发症,但其处理存在很多难点。因此,本文探讨EVAR术后ILO的治疗策略及其危险因素。方法:回顾性分析... 详细信息

背景与目的:腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR)以其微创且术后恢复快的优势,已成为腹主动脉瘤(AAA)的首选治疗。髂支闭塞(ILO)是EVAR术后常见并发症,但其处理存在很多难点。因此,本文探讨EVAR术后ILO的治疗策略及其危险因素。方法:回顾性分析海南省人民医院血管外科2013年8月—2022年8月间14例EVAR术后发生ILO的病例资料。以同期435例无ILO的EVAR病例作为对照,分析EVAR术后发生ILO危险因素。结果:14例患者行腔内或杂交手术治疗的平均手术时间(183.9±32.6)min,术中出血量(187.1±70.2)mL。10例经杂交手术取栓恢复腔内血流,2例杂交手术失败后行双侧股动脉人造血管旁路术,2例采用吸栓导管行经皮机械血栓清除术恢复腔内血流。清除髂支内血栓后,对髂支及远端髂外动脉(EIA)残余狭窄性病变行球囊扩张及支架成形术。术后所有患者下肢缺血症状完全缓解。随访期,所有患者未再发下肢缺血症状。单因素分析显示,EIA起始端直径(P=0.045)、髂动脉扭曲≥60°(P=0.003)、髂动脉狭窄≥50%(P=0.007)、髂支远端锚定于EIA(P=0.015)、髂支远端放大率≥15%(P=0.028)等因素与EVAR术后ILO的发生有关。结论:腔内或杂交手术治疗是EVAR术后ILO的首选治疗。关注ILO的危险因素,并在EVAR方案设计和操作时积极预防。

关键词：主动脉瘤,腹血管内操作手术后并发症移植物闭塞,血管

基于自噬角度探究A2AR对内毒素诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤的影响

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安徽医科大学学报 2024年 1636-1642页

作者：陈禺王小吉李合海南医学院第一附属医院普通外科海南医学院第一附属医院肝胆外科

目的探究腺苷A2A受体(A2AR)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤的影响及机制。方法首先将Caco-2细胞分为对照组、LPS组(10μg/ml LPS处理12 h)、A2AR激动剂(CGS21680)组(10μmol/L CGS21680预处理10 min)、CGS21680+LPS组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS处理12 h),CCK-8法测定各组细胞活力,ELISA法测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平,Western blot分析各组细胞中自噬相关蛋白微管相关轻链蛋白3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin1)的蛋白表达水平;再将Caco-2细胞分为对照组、LPS组(10μg/ml LPS处理12 h)、CGS21680+LPS组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS处理12 h)、CGS21680+LPS+雷帕霉素(Rapa)组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS与5μmol/L Rapa处理12 h),CCK-8法测定各组细胞活力,ELISA法测定各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平。结果与对照组比较,LPS组Caco-2细胞活力显著降低(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平显著升高(P <0.05),细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA相对表达量均显著上调(P <0.05),并检测到LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin1蛋白相对表达量显著上调(P <0.05);与LPS组比较,CGS21680+LPS组Caco-2细胞活力显著升高(P <0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平显著降低(P<0.05),细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA相对表达量均显著下调(P<0.05),且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin1蛋白相对表达量显著下调(P<0.05);此外,与CGS21680+LPS组比较,CGS21680+LPS+Rapa组Caco-2细胞活力又显著降低(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平也显著升高(P <0.05)。结论使用A2AR激动剂能够减轻内毒素LPS诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤,提高细胞活力,这可能与其抑制自噬水平有关。

关键词：腺苷A2A受体 Caco-2肠上皮细胞炎症性肠病脂多糖细胞损伤自噬

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颅缝早闭的诊治现状及未来研究方向

临床小儿外科杂志 2024年第2期23卷 101-108页

作者：李制一汪婧怡顾硕海南医学院第一附属医院神经外科，海口570100

颅缝早闭是一类先天性疾病,其特征是一条或多条颅骨缝过早闭合,导致头型异常、颅内压升高以及一些潜在发育问题。诊断方法以三维头颅CT成像为主,较新的诊断手段包括"黑骨"磁共振、三维摄影技术等。颅缝早闭通常需要手术纠正,从而为颅骨... 详细信息

颅缝早闭是一类先天性疾病,其特征是一条或多条颅骨缝过早闭合,导致头型异常、颅内压升高以及一些潜在发育问题。诊断方法以三维头颅CT成像为主,较新的诊断手段包括"黑骨"磁共振、三维摄影技术等。颅缝早闭通常需要手术纠正,从而为颅骨和大脑的生长创造条件,具体治疗方法取决于颅缝早闭的类型以及严重程度。常用手术方法包括内镜下条状颅骨切除术、浮动骨瓣颅骨切开术、颅骨牵张技术等。数字模拟、手术导航、增强现实(angmented reality,AR)等技术也已广泛应用于颅缝早闭的诊治。本文就近年来颅缝早闭的诊断治疗现状以及未来研究方向进行述评。

关键词：颅缝早闭诊断治疗儿童

miR-145通过Notch通路调节免疫功能及炎症反应介导创伤性脑损伤的神经保护

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中国免疫学杂志 2024年第3期40卷 497-502页

作者：胡德献孙衍昶冯基高莫业和海南医学院第二附属医院神经外科海口570311

目的:探讨miR-145对创伤性脑损伤(TBI)后炎症反应和免疫调节的作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TBI)、TBI+NC agomir组、TBI+miR-145 agomir组。改良神经损伤严重程度评分(mNSS)用于评估创伤后神经功能;MW... 详细信息

目的:探讨miR-145对创伤性脑损伤(TBI)后炎症反应和免疫调节的作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TBI)、TBI+NC agomir组、TBI+miR-145 agomir组。改良神经损伤严重程度评分(mNSS)用于评估创伤后神经功能;MWM测试评估TBI后小鼠的神经认知功能;流式细胞术检测各组小鼠脑组织中Tregs数量;ELISA检测各组小鼠海马中炎症细胞因子表达;免疫组化检测各组小鼠海马中活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1表达;RT-qPCR检测M1/M2小胶质细胞/巨噬细胞标志物基因iNOS、CD11b、CD206和Arg1表达;TUNEL染色和神经元细胞核免疫荧光标记(NeuN)的双重染色检测神经元凋亡。结果:与Sham组比较,TBI组小鼠海马组织中miR-145表达显著降低,神经功能损伤增加,脑组织中Tregs在CD4+T细胞群中百分比降低,海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10和TGF-β表达显著升高,活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1数量增多,iNOS、CD11b、CD206和Arg1表达水平显著升高,神经元凋亡升高,Notch1、p21和Hes1 mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05);与TBI+NC agomir组比较,TBI+miR-145 agomir组小鼠海马中miR-145表达显著升高,神经功能损伤减轻,脑组织中Tregs在CD4+T细胞群中的百分比显著升高,海马中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著降低,抗炎因子IL-4、IL-10和TGF-β表达显著升高,活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1数量显著减少,iNOS和CD11b表达降低,CD206和Arg1表达水平显著升高,神经元凋亡减少,Notch1、p21和Hes1 mRNA和蛋白水平均显著降低(均P<0.05)。结论:miR-145过表达通过提高Tregs水平,促进小胶质细胞M2极化,调节创伤后神经炎症反应及改善行为功能障碍,这一机制可能通过Notch信号通路介导。

关键词： miR-145 创伤性脑损伤炎症免疫调节 Notch信号通路

低氧诱导因子HIF-1A调控GLUT3表达促进胶质瘤增殖的影响

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海南医学院学报 2024年

作者：陈泰学羊良旺陈申波高振忠李争争王艳刘晓召杨堃海南医学院第一附属医院神经外科

目的：探讨乏氧环境下HIF-1A对胶质瘤GLUT3表达的影响及其机制。方法：CGGA数据库分析HIF-1A与GLUT3表达相关性及其对预后影响；CoCL2诱导胶质瘤细胞乏氧环境，Western blotting检测U251与U87细胞中GLUT3基因表达变化；Western blottin... 详细信息

目的：探讨乏氧环境下HIF-1A对胶质瘤GLUT3表达的影响及其机制。方法：CGGA数据库分析HIF-1A与GLUT3表达相关性及其对预后影响；CoCL2诱导胶质瘤细胞乏氧环境，Western blotting检测U251与U87细胞中GLUT3基因表达变化；Western blotting检测过表达HIF-1A对GLUT3及AKT蛋白表达的影响；体外CCK8细胞增殖实验检测shGLUT3对胶质瘤细胞增殖的影响。结果：CGGA数据库中HIF-1A与GLUT3的mRNA表达呈正相关（P=9.2e-05），并且共表达对胶质瘤患者预后不良（P<0.000 1）。Western blotting实验提示CoCL2诱导乏氧环境下HIF-1A与GLUT3基因表达升高，并随着CoCL2的浓度增加而表达增加；在过表达HIF-1A的细胞中GLUT3蛋白表达升高；在乏氧环境下U251和U87细胞中p-AKT蛋白表达升高，而总AKT蛋白表达无变化，且AKT抑制剂能有效抑制HIF-1A上调的GLUT3表达。CCK8细胞增殖实验表明敲低GLUT3能显著抑制胶质瘤细胞的增殖（P<0.0001）。结论：胶质瘤中HIF-1A与GLUT3的表达呈正相关；乏氧环境下胶质瘤GLUT3表达升高；HIF-1A可能通过PI3K/AKT信号通路调节GLUT3基因的表达，促进胶质瘤的增殖。

关键词：胶质瘤氧诱导因子葡萄糖转运酶3 细胞增殖