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类鼻疽伯克霍尔德菌基因BPSL1972缺失株的构建及其生物学特性分析

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中国热带医学 2024年第6期24卷 644-651,679页

作者：朱侨田申王彦双李雪苗章越李欣泽夏乾峰海南医学院热带医学院海南海口571199 海南医学院第二附属医院海南海口570216

目的研究可能的外排泵基因BPSL1972在类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei, Bp)中的生物学功能,以完善Bp的耐药形成机制。方法以Bp海南标准菌株HNBP001为对象,通过同源重组和电击转化分别构建BPSL1972基因敲除株及其回补株... 详细信息

目的研究可能的外排泵基因BPSL1972在类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei, Bp)中的生物学功能,以完善Bp的耐药形成机制。方法以Bp海南标准菌株HNBP001为对象,通过同源重组和电击转化分别构建BPSL1972基因敲除株及其回补株,通过酶切酶联的方法构建BPSL1972编码蛋白表达载体,通过His标签蛋白表达试剂盒对BPSL1972编码的蛋白表达,通过Western Blot技术对表达的蛋白进行验证,通过微量肉汤法、K-B法、比浊法、试管法、结晶紫染色和CCK-8试剂盒,依次比较了其在药敏、生长、生物膜形成和细胞毒力上的变化,通过Protscale在线网站、Protparam在线网站预测理化性质,利用SignalP 5.0在线网站预测BPSL1972编码蛋白的信号肽以及Smart在线网站预测了BPSL1972编码蛋白的跨膜结构域及基因功能,通过Phyre 2在线网站对BPSL1972编码蛋白3D结构进行构建并进行同源性分析。结果预测结果显示,BPSL1972编码蛋白是一类中性稳定的疏水性蛋白,其具有一个脂蛋白信号肽及一个跨膜结构区,属于RND外排泵系统,具有2个脂蛋白外膜外排蛋白,可能介导大环内酯类抗生素的耐药,其3D建模结果显示其与VceC和镰刀酸外排蛋白高度同源,可能介导离子活化剂的外排。测序结果显示缺失株和回补株构建成功。但缺失株在各生物学特性上与野生株无差异,并且对头孢类、喹诺酮类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、四环素类等抗生素及脱氧胆酸钠等表面活性剂也无明显差异。结论在Bp中可能存在能够代替BPSL1972的基因,或者BPSL1972可能为LysR家族的辅助基因,而这种辅助基因是次要的,因此导致了其缺失后没有发生功能变化,其对其他抗生素如镰刀酸是否存在耐药性及具体的代替或辅助功能还有待后续研究。

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌外排泵耐药

腹主动脉瘤腔内修复术后髂支闭塞的治疗策略及其危险因素分析

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中国普通外科杂志 2024年第6期33卷 918-925页

作者：戚悠飞王惠暄刘飒华陈浩张文波吴鸿飞刘震东许语阳肖占祥李振振海南省人民医院/海南医学院附属海南医院血管外科海南海口570311 海南医学院海南海口571199

背景与目的:腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR)以其微创且术后恢复快的优势,已成为腹主动脉瘤(AAA)的首选治疗。髂支闭塞(ILO)是EVAR术后常见并发症,但其处理存在很多难点。因此,本文探讨EVAR术后ILO的治疗策略及其危险因素。方法:回顾性分析... 详细信息

背景与目的:腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR)以其微创且术后恢复快的优势,已成为腹主动脉瘤(AAA)的首选治疗。髂支闭塞(ILO)是EVAR术后常见并发症,但其处理存在很多难点。因此,本文探讨EVAR术后ILO的治疗策略及其危险因素。方法:回顾性分析海南省人民医院血管外科2013年8月—2022年8月间14例EVAR术后发生ILO的病例资料。以同期435例无ILO的EVAR病例作为对照,分析EVAR术后发生ILO危险因素。结果:14例患者行腔内或杂交手术治疗的平均手术时间(183.9±32.6)min,术中出血量(187.1±70.2)mL。10例经杂交手术取栓恢复腔内血流,2例杂交手术失败后行双侧股动脉人造血管旁路术,2例采用吸栓导管行经皮机械血栓清除术恢复腔内血流。清除髂支内血栓后,对髂支及远端髂外动脉(EIA)残余狭窄性病变行球囊扩张及支架成形术。术后所有患者下肢缺血症状完全缓解。随访期,所有患者未再发下肢缺血症状。单因素分析显示,EIA起始端直径(P=0.045)、髂动脉扭曲≥60°(P=0.003)、髂动脉狭窄≥50%(P=0.007)、髂支远端锚定于EIA(P=0.015)、髂支远端放大率≥15%(P=0.028)等因素与EVAR术后ILO的发生有关。结论:腔内或杂交手术治疗是EVAR术后ILO的首选治疗。关注ILO的危险因素,并在EVAR方案设计和操作时积极预防。

关键词：主动脉瘤,腹血管内操作手术后并发症移植物闭塞,血管

半夏泻心汤加减联合维得利珠单抗治疗克罗恩病寒热错杂证的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 134-141页

作者：吉贞料王高岸方翔宇张丽咪海南医学院第二附属医院海口570311

目的:评价半夏泻心汤加减联合维得利珠单抗(VDZ)治疗活动期中重度克罗恩病(CD)寒热错杂证的临床疗效及对肠道菌群的影响。方法:将80例患者按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各40例。对照组,采用VDZ治疗;观察组,在对照组治疗的基础... 详细信息

目的:评价半夏泻心汤加减联合维得利珠单抗(VDZ)治疗活动期中重度克罗恩病(CD)寒热错杂证的临床疗效及对肠道菌群的影响。方法:将80例患者按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各40例。对照组,采用VDZ治疗;观察组,在对照组治疗的基础给予半夏泻心汤加减,每日1剂;连续治疗14周,并随访至52周。于治疗前、治疗后、随访结束时评估CD活动指数(CDAI)评分、CD简化内镜评分(SES-CD)、炎症性肠病患者生活质量问卷(IBDQ)和寒热错杂证评分。评估治疗前后血红蛋白(HGB)、血细胞比容(HCT)、白蛋白(ALB)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)和粪便钙卫蛋白(FC)。检测治疗前后肠道菌群。进行安全性评价。结果:与本组治疗前比较,治疗后两组患者CDAI、SES-CD和寒热错杂证评分下降(P<0.05),IBDQ评分升高(P<0.05);与本组治疗前比较,随访结束时两组CDAI、SES-CD和寒热错杂证评分升高(P<0.05),IBDQ评分下降(P<0.05)。与对照组治疗结束和随访结束时比较,观察组患者CDAI、SES-CD和寒热错杂证评分更低(P<0.05),IBDQ评分更高(P<0.05);治疗后和随访结束时,观察组临床缓解率(χ^(2)=4.381、3.962)和临床应答率(χ^(2)=5.541、4.306)均高于对照组,无应答率(χ^(2)=6.646、4.306)低于对照组(P<0.05),观察组内镜下缓解率(χ^(2)=4.072、3.985)和内镜应答率(χ^(2)=4.528、5.161)均高于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗后两组患者HGB、HCT和ALB升高(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组患者HGB、HCT和ALB升高更明显(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗后两组患者CRP、IL-6、TNF-α、IL-17和FC水平下降(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组患者CRP、IL-6、TNF-α、IL-17和FC降低更明显(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗后两组患者双歧杆菌、乳酸杆菌、普拉梭菌增加(P<0.05),变形菌、克雷伯菌、肠球菌下降(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组患者双歧杆菌、乳酸杆菌、普拉梭菌增加更明显(P<0.05),变形菌、克雷伯菌、肠球菌降低更明显(P<0.05)。研究期间未观察到使用半夏泻心汤加减相关不良反应。结论:半夏泻心汤加减联合VDZ治疗中重度活动期CD寒热错杂证患者,可起到增效作用,有着较好的近期和远期疗效,并可改善营养状态,调节肠道菌群,减轻炎性损伤,临床使用安全。

关键词：克罗恩病寒热错杂证维得利珠单抗半夏泻心汤炎症因子肠道菌群营养状况

Heidenhain变异型克-雅病1例并文献复习

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中华神经科杂志 2024年第6期57卷 600-606页

作者：李虞蒙秦赫炎刘肖君何杨利陈峰刘涛海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)神经内科海口570311 海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)医疗保健中心海口570311 海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)放射科海口570311

目的:探讨Heidenhain变异型克-雅病(HvCJD)的临床特点,以加深对其认识,减少误诊。方法:收集2022年8月4日入住海南省人民医院的1例HvCJD患者临床资料,回顾分析其临床特点并进行文献复习。结果:患者59岁,男性,以双眼视物模糊起病,随后出... 详细信息

目的:探讨Heidenhain变异型克-雅病(HvCJD)的临床特点,以加深对其认识,减少误诊。方法:收集2022年8月4日入住海南省人民医院的1例HvCJD患者临床资料,回顾分析其临床特点并进行文献复习。结果:患者59岁,男性,以双眼视物模糊起病,随后出现快速进行性认知功能减退。初次简易精神状态检查量表评分21/30分,蒙特利尔认知评估量表评分11/30分。头颅MRI弥散加权成像序列提示双侧额枕顶叶、岛叶皮质线样稍高信号,呈“飘带征”改变;T 2WI液体衰减反转恢复序列示双侧顶叶皮质信号稍高。脑电图可见不典型三相波。脑脊液14-3-3蛋白阳性。起病2个月后随访患者,发现其新出现肌阵挛。患者未经有效治疗,起病2个半月后死亡。经复习HvCJD相关36篇文献,该类型非常罕见,大多数Heidenhain变异型患者出现了枕叶皮质弥散加权成像高信号。后部皮质损伤可能影响主要和更高级别的视觉处理,导致各种视觉障碍。早期主要表现为视觉症状,如视力下降、视物模糊、皮质视野缺损及色觉障碍等。结论:HvCJD患者发病时仅出现视觉障碍,随后出现其他神经系统症状,病情进展迅速,多于短期内死亡。此病罕见,易误诊,目前并无有效治疗手段。

关键词：克-亚综合征视觉障碍 Heidenhain变异型克-雅病病例报告

葛根素通过Notch1信号通路抑制Raw264.7细胞向破骨细胞的分化

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中国组织工程研究 2024年第35期28卷 5636-5641页

作者：刘春丽闫雨娟莫礼文吴志杰张黎海南医学院口腔医学院海南省海口市571101

背景:前期研究表明葛根素干预后破骨细胞的分化被抑制,Notch1、HES1、Jagged1等Notch信号通路相关蛋白表达量下降,但Notch1信号通路对于葛根素抑制破骨细胞分化的作用机制尚不明确。目的:探究Notch信号通路对葛根素抑制小鼠巨噬细胞Raw2... 详细信息

背景:前期研究表明葛根素干预后破骨细胞的分化被抑制,Notch1、HES1、Jagged1等Notch信号通路相关蛋白表达量下降,但Notch1信号通路对于葛根素抑制破骨细胞分化的作用机制尚不明确。目的:探究Notch信号通路对葛根素抑制小鼠巨噬细胞Raw264.7分化为破骨细胞的影响。方法:将Raw264.7细胞分为7组干预培养,空白对照组采用DMEM高糖完全培养基培养,破骨细胞诱导组采用破骨诱导培养基培养,葛根素干预组在破骨诱导的同时加入50μmol/L葛根素培养,葛根素+Notch1 si RNA对照组、葛根素+Notch1 si RNA组、葛根素+Notch1过表达对照组、葛根素+Notch1过表达组分别采用Notch1 si RNA对照序列、Notch1 si RNA序列、Notch1过表达对照质粒、Notch1过表达质粒转染Raw264.7细胞后,加入破骨诱导培养基和葛根素进行培养。培养7 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数量和大小,F-actin染色观察破骨细胞骨架形成情况,RT-PCR检测破骨细胞形成标志物的基因表达水平。结果与结论:(1)抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示:葛根素干预可以抑制破骨细胞的生成,Notch1沉默会进一步减少破骨细胞的生成数量,Notch1过表达后破骨细胞生成数量明显增加;(2)F-actin染色显示:Raw264.7细胞经破骨诱导可以形成边界清晰的F-actin环,葛根素干预会抑制细胞骨架的形成,Notch1沉默会增强葛根素的抑制作用,而Notch1过表达则能减弱葛根素的抑制作用;(3)RT-PCR检测显示,葛根素可以抑制抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K和c-Fos的m RNA表达,Notch1沉默后上述3个因子的m RNA表达进一步降低,Notch1过表达后上述3个因子的m RNA表达增加。结果表明:Notch信号通路在Raw264.7细胞分化为破骨细胞的过程中发挥作用,葛根素通过抑制Notch信号通路抑制Raw264.7细胞分化为破骨细胞。

关键词：葛根素 Raw264.7细胞 Notch1 过表达沉默破骨诱导破骨细胞牙周炎

舌GLI1基因改变的间叶性肿瘤1例并文献复习

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华西口腔医学杂志 2024年

作者：解娜黄幼生吴文婷翁阳海南医学院口腔医学院海南医学院第一附属医院病理科深圳市龙华区中心医院

GLI1基因改变的间叶性肿瘤是一种较为罕见的间叶性肿瘤，好发于头颈部，为世界卫生组织头颈部肿瘤分类（第5版）中新增的肿瘤类型。本文报道1例发生于左舌部的GLI1基因改变的间叶性肿瘤，并对相关文献进行回顾复习。

关键词：舌肿瘤 GLI1 间叶性肿瘤病理组织学

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TBI后应激性肠屏障损害的研究进展

海南医学院学报 2024年第14期30卷 1111-1120页

作者：叶敏杨文菲王丹心周建谭绍英谢碧姣李玉敏许铃孙海王涛海南医学院海南海口571199 海南医学院第一附属医院海南海口570100

创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害增加了患者的死亡风险,严重影响疾病预后,目前其发病机制和治疗策略仍不完全清楚。本文旨在总结创伤性脑损伤应激性肠屏障损害的病理机制和保护策略等关键问题的研究进展,发现肠上皮细胞通透性增加、紧... 详细信息

创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害增加了患者的死亡风险,严重影响疾病预后,目前其发病机制和治疗策略仍不完全清楚。本文旨在总结创伤性脑损伤应激性肠屏障损害的病理机制和保护策略等关键问题的研究进展,发现肠上皮细胞通透性增加、紧密连接、内质网应激、细胞自噬、缺血再灌注损伤可能是创伤性脑损伤应激后肠屏障损害的主要机制。此外,本文还综述了迷走神经刺激、益生菌、外源性补充饥饿素、氧疗等对创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害的保护作用。本文将为探索精准有效的创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害防治提供新视角和干预靶点。

关键词：创伤性脑损伤肠屏障损害病理机制保护策略研究进展

基于地黄生、熟的肾气丸治疗糖尿病肾病模型小鼠药效差异研究

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海南医学院学报 2024年第15期30卷 1121-1128页

作者：张琳王献张文龙裴海鹏任天爱谢毅强李凯海南医学院海南海口571199

目的:探讨地黄生、熟的肾气丸对DKD模型小鼠的药效差异及可能的相关机制。方法:选取8只SPF级6~8周龄雄性db/m小鼠作为正常对照组(Control组),另选取24只SPF级6~8周龄雄性db/db小鼠按测定血糖随机分组为:模型对照组(Model组)、肾气丸生... 详细信息

目的:探讨地黄生、熟的肾气丸对DKD模型小鼠的药效差异及可能的相关机制。方法:选取8只SPF级6~8周龄雄性db/m小鼠作为正常对照组(Control组),另选取24只SPF级6~8周龄雄性db/db小鼠按测定血糖随机分组为:模型对照组(Model组)、肾气丸生地黄组(S-L组)与肾气丸熟地黄组(S-R组),每组db/db小鼠8只。造模成功后,S-L组与S-R组每日分别灌服含有生、熟地黄的肾气丸水煎液(10.4 g/kg),正常组与模型组每日灌服等量生理盐水,连续56 d,检测二者对DKD模型小鼠末次给药24 h后空腹血糖、24 h尿蛋白定量(UP)、微量白蛋白(mAIB)、尿肌酐(Ucr)含量;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆红素(TBIL)含量;HE染色观察肾脏组织病理形态学变化;Western blot法检测各组PI3K、Akt的蛋白含量。结果:与C组相比,Mo组小鼠空腹血糖、GSP、mAIB、Scr、UP、Ucr、TC、TG、LDL-C、ALT、AST、TBIL均增高,HDL-C、Ucr降低,HE染色显示肾小球系膜增生、肾小球系膜细胞增多、系膜基质沉积明显,PI3K、Akt蛋白的表达下调。与Mo组比较,S-L组与S-R组在生化指标上较Mo型组均有好转,HE染色显示肾小球病理损伤有所改善,并能上调PI3K、Akt的蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);但治疗后两组对比,S-R组BUN、SCr、UP含量明显更低(P<0.05),AST低于S-L组差异明显(P<0.05)。结论:肾气丸中生、熟地黄均可改善DKD引起的肾功能损伤,而肾气丸熟地黄组在治疗DKD小鼠时药效更显著,其机制可能与上调肾组织中PI3K、Akt的表达水平有关。

关键词：生地黄熟地黄肾气丸糖尿病肾病药效研究

微小RNA与炎症性肠病及其相关机制的研究进展

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海南医学院学报 2024年第2期30卷 139-147页

作者：陈沐莉田元元孙晓宁海南医学院附属海南医院消化内科海南海口570311 海南医学院海南海口571199

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种以慢性胃肠道炎症为特征的复杂多因素疾病,主要表现为肠道黏膜免疫细胞和促炎细胞因子聚集,为人类高发的一种免疫性消化系统疾病,可分为溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩... 详细信息

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种以慢性胃肠道炎症为特征的复杂多因素疾病,主要表现为肠道黏膜免疫细胞和促炎细胞因子聚集,为人类高发的一种免疫性消化系统疾病,可分为溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD)。IBD的发病机制错综复杂,大量研究表明遗传、环境、微生物、免疫、自噬等因素均可能参与IBD发病。微小RNA(microRNA,miRNA)在IBD的病理生理学中发挥着重要作用,研究证实miRNA在靶向调节肠道屏障内稳态、免疫反应和肠上皮自噬的作用机制方面具有重要作用,不仅被证实为IBD的重要诊断性生物标记物,还为IBD治疗策略展示新前景。本文主要阐述miRNA在UC和CD中的表达差异,总结miRNA与IBD发病中的肠道屏障、免疫稳态、细胞自噬机制的联系,以及miRNA参与IBD诊断与治疗过程的研究进展,为IBD疾病发展提供新见解。

关键词：炎症性肠病发病机制微小RNA(miRNA) 肠道屏障免疫稳态细胞自噬