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基于拉曼频移的SERS分析平台在胃癌早期诊断中的应用研究

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分析试验室 2024年第1期43卷 9-17页

作者：韦伟朱群山黄永石立新吴正杨永国刘佳袁梦轩王震光蒋丰娟扬州大学附属江都人民医院胃肠外科扬州225200 扬州大学附属江都人民医院消化内科扬州225200 扬州大学附属江都人民医院普通外科扬州225200 扬州大学附属江都人民医院病理科扬州225200 扬州大学附属江都人民医院放射科扬州225200 扬州大学附属江都人民医院检验科扬州225200

利用界面自组装方法制备了具有优良均一性、稳定性和SERS活性的金银纳米梭(Au-AgNSs)基底。通过将4-巯基苯甲酸(4-MBA)修饰在Au-AgNSs基底表面,并结合癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体,实现了Au-AgNSs基底的功能化。血清样本中CEA可被其抗体... 详细信息

利用界面自组装方法制备了具有优良均一性、稳定性和SERS活性的金银纳米梭(Au-AgNSs)基底。通过将4-巯基苯甲酸(4-MBA)修饰在Au-AgNSs基底表面,并结合癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体,实现了Au-AgNSs基底的功能化。血清样本中CEA可被其抗体捕获并使4-MBA发生形变,导致特征峰发生偏移。经验证,该基于拉曼频移的SERS分析平台具有优异的特异性、重复性和灵敏度,对血清中CEA的检测限(LOD)低至1.22 pg/mL。利用其对胃癌(GC)患者和健康受试者血清中CEA的表达水平进行测定,并与酶联免疫吸附测定法(ELISA)结果比较。结果表明,GC患者血清CEA表达水平高于健康受试者,且2种方法结果无明显差异。因此基于拉曼频移的SERS分析平台在GC诊断中具有应用价值。

关键词：拉曼频移表面增强拉曼散射胃癌早期诊断生物标志物

多黏菌素对头孢他啶/阿维巴坦与碳青霉烯共耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌作用研究

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中国抗生素杂志 2024年第5期49卷 544-551页

作者：陈玲霞邹雪寒张晓璠李曦潘红英浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院全科医学中心感染病科杭州310014 浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院检验医学中心检验科杭州310014

目的头孢他啶/阿维巴坦(CZA)是治疗碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)的一种有效的替代抗生素,在临床上被广泛应用,然而CZA耐药CRPA菌株的出现使得治疗铜绿假单胞菌感染的难度不断增加。本研究旨在通过体外时间杀菌分析,探讨多黏菌素(COL... 详细信息

目的头孢他啶/阿维巴坦(CZA)是治疗碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)的一种有效的替代抗生素,在临床上被广泛应用,然而CZA耐药CRPA菌株的出现使得治疗铜绿假单胞菌感染的难度不断增加。本研究旨在通过体外时间杀菌分析,探讨多黏菌素(COL)对携带不同碳青霉烯耐药基因的CZA耐药铜绿假单胞菌菌株的体外杀菌活性,为铜绿假单胞菌感染的临床治疗提供科学依据。方法从浙江省的一家三甲医院收集了CZA耐药的铜绿假单胞菌菌株。通过聚合酶链反应(PCR)和全基因组测序筛选了携带不同碳青霉烯耐药基因的5株代表性铜绿假单胞菌菌株,包括携带bla_(KPC-2)的PA4696、携带bla_(KPC-90)的PA2207、携带bla_(KPC-33)的PA1308、携带bla_(VIM)的PA2070、携带bla_(IMP-45)的PA6227。通过微量肉汤稀释法确认了实验菌株的抗生素敏感性。对COL敏感的菌株进行重复的时间杀菌实验。结果 5株CRPA菌株均对CZA耐药(MIC≥16/4 mg/L),对COL敏感(MIC≤2 mg/L);其中携带bla_(IMP-45)的菌株PA6227表现出特殊的药敏表型(ISMR),对亚胺培南(IPM)敏感(MIC=2 mg/L)而对美罗培南(MEM)(MIC=128 mg/L)等其他碳青霉烯类药物耐药。时间杀菌曲线显示,5株CZA耐药的铜绿假单胞菌菌株在前2~8 h被不同浓度的COL完全抑制,但随后恢复生长。结论 COL对CZA耐药的CRPA菌株具有体外杀菌活性,但不能单独使用。不同类型的碳青霉烯耐药基因会影响CZA的作用效果,但与COL的杀菌活性无关,携带不同碳青霉烯耐药基因的分离株均在不同时间恢复生长。在治疗铜绿假单胞菌感染时,可以调整给药间隔或药物浓度,以维持COL的浓度,从而获得更好的治疗效果。同时应注意具有ISMR这一特殊药敏表型的CRPA在临床上的出现,避免抗生素的不合理应用。

关键词：多黏菌素头孢他啶/阿维巴坦碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌时间杀菌曲线

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骨外尤因肉瘤的影像学表现

中国医学影像学杂志 2024年第6期32卷 599-603页

作者：史凤霞刘宇刘鹏谭显政范立新湖南省人民医院放射科湖南长沙410005 湖南省人民医院病理科湖南长沙410005

目的探讨骨外尤因肉瘤(EES)的影像学表现和临床病理特征。资料与方法回顾性分析2014年1月—2023年1月湖南省人民医院经手术病理证实的14例EES的临床、影像学资料及病理特征,其中7例行CT检查(增强5例),9例行MRI检查(增强8例)。结果病... 详细信息

目的探讨骨外尤因肉瘤(EES)的影像学表现和临床病理特征。资料与方法回顾性分析2014年1月—2023年1月湖南省人民医院经手术病理证实的14例EES的临床、影像学资料及病理特征,其中7例行CT检查(增强5例),9例行MRI检查(增强8例)。结果病灶位于脊柱旁3例,右咽旁间隙1例,纵隔1例,左大腿1例,左耻骨旁软组织1例,腹膜后1例,盆腔1例,前列腺2例,左肾1例,胰腺1例,肝脏1例。14例EES均表现为单发实性肿块,13例呈团块状,病灶最大径线48.0~180.0 mm。8例密度或信号不均匀,8例可见囊变坏死,1例钙化。增强后8例呈不均匀强化,12例呈重度或中重度强化。10例形态不规则,11例有周围器官或组织侵犯,3例无周围器官和组织结构侵犯,5例合并周围骨质破坏,1例合并左肾静脉和下腔静脉癌栓和血栓、髂静脉血栓。结论 EES临床症状无特异性,影像上多表现为骨外软组织内体积巨大的实性肿块,密度或信号多不均匀,形态不规则,常伴囊变、坏死并侵犯周围器官或组织,影像学对术前诊断、临床分期、治疗及疗效评估具有重要价值。

关键词：尤因肉瘤磁共振成像体层摄影术 X线计算机病理学

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基于T2WI和DWI的磁共振影像组学在术前预测直肠癌壁外血管侵犯的价值研究

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诊断学理论与实践 2024年第1期23卷 46-56页

作者：丁景峰敖炜群朱珍孙静徐良根郑世保俞晶晶胡金文同济大学附属普陀人民医院放射科上海200060 浙江省立同德医院放射科浙江310012

目的:探讨基于磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)T2加权成像(T2-weighted imaging,T2WI)和弥散加权成像(diffusion-weighted imaging,DWI)的影像组学,在术前预测直肠癌壁外血管侵犯(extramural vascular invasion,EMVI)的诊断效能。方法:回顾性收集2010年1月至2023年6月经术后病理证实为直肠腺癌且术前行直肠MRI扫描的患者168例,按7∶3随机分为训练集和验证集。提取T2WI、DWI的影像组学特征,采用最大相关最小冗余(the maximum relevance minimum redundancy,mRMR)和十倍交叉验证的最小绝对收缩与选择算子(the least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归分析降维并选择影像组学特征,计算每例患者的影像组学总评分(Radscore),使用Radscore建立影像组学模型。在训练集中,研究纳入了3个临床特征[年龄、性别、术前癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)]和6个磁共振影像学特征[ADC值、浸润深度、肿瘤长度、肿瘤部位、T分期、MRI壁外血管侵犯(magnetic resonance imaging-defined EMVI,mrEMVI)评分],通过单因素、多因素Logistic回归分析建立临床模型。联合Radscore和临床模型的独立危险因素,建立临床-影像组学模型(联合模型)。采用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估各模型的诊断效能,通过DeLong检验比较不同模型的效能差异,采用校准曲线评估列线图术前预测结果与术后病理真实状况的拟合度,运用决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)评价3种模型的临床应用价值。结果:联合模型、临床模型、影像组学模型ROC曲线在训练集和验证集中AUC分别为0.926、0.888、0.756和0.917、0.896、0.782,联合模型的诊断效能最佳。Delong检验显示,在训练集和验证集中,联合模型诊断效能高于影像组学模型(P0.05)。校准曲线显示列线图术前预测结果与术后病理结果一致性良好(P<0.05)。DCA结果表明,当风险阈值概率在0.24~0.77时,联合模型在临床上的获益高于临床模型和影像组学模型。结论:基于T2WI和DWI的MRI影像组学模型术前预测直肠癌EMVI有较高的诊断效能,联合临床模型中独立危险因素构建的临床-影像组学MRI模型(联合模型)进一步提高了诊断效能。

关键词：直肠癌壁外血管侵犯磁共振成像影像组学预测模型列线图

CDH1基因对小鼠胃类器官生长和E-caherin表达的作用机制

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世界华人消化杂志 2024年第2期32卷 141-147页

作者：邵伟余友杰夏海娜郑优优孙展杭严皓哲舟山市普陀区人民医院消化内科浙江省舟山市316100 舟山市普陀区人民医院血液肿瘤科浙江省舟山市316100 舟山市普陀区人民医院病理科浙江省舟山市316100 舟山市普陀区人民医院浙江舟山消化病防治研究所浙江省舟山市316100

背景CDH1基因编码的蛋白质E-cadherin在维持上皮组织完整性中发挥重要作用,了解CDH1基因对胃类器官生长和E-cadherin表达的作用机制对于揭示器官发育的分子基础至关重要.因此假设CDH1基因通过调控E-cadherin的表达参与调控胃类器官的发... 详细信息

背景CDH1基因编码的蛋白质E-cadherin在维持上皮组织完整性中发挥重要作用,了解CDH1基因对胃类器官生长和E-cadherin表达的作用机制对于揭示器官发育的分子基础至关重要.因此假设CDH1基因通过调控E-cadherin的表达参与调控胃类器官的发育和生长过程.目的探究钙黏蛋白1(cadherin-1,CDH1)基因对小鼠胃类器官生长和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的作用机制.方法采用CRISPR/Cas9基因敲除技术获得CDH1^(-/-)C57BL/6品系小鼠10只,及野生型(WT)C57BL/6品系小鼠10只作为实验对照组.分离小鼠胃组织并培养胃类器官,免疫荧光染色观察胃类器官中E-cadherin表达,比较小鼠胃类器官数量和直径,MTT检测胃类器官细胞活力,蛋白质印迹法和RT-PCR法检测胃类器官中E-cadherin蛋白和mRNA表达.结果在光学显微镜下可见小鼠胃组织在培养基中不断生长与分裂,从第0 d开始组织在24 h内形成囊性结构,然后经历快速生长阶段.器官样细胞扩展为大的3D球形结构,到第5 d后逐渐出芽并开始形成胃类器官,提示胃类器官初步构建.免疫荧光染色结果显示,WT C57BL/6小鼠胃类器官中E-cadherin呈阳性表达,进一步提示胃类器官成功构建.和WT C57BL/6小鼠相比,CDH1^(-/-)C57BL/6小鼠胃类器官数量、胃类器官直径、吸光度值及胃类器官中E-cadherin蛋白和E-cadherin mRNA相对表达量均明显减少(P<0.05).结论CDH1基因敲除可抑制胃类器官生长形成及E-cadherin表达.

关键词： CDH1 胃类器官生长 E-cadherin

首发脑卒中认知功能障碍的DCE-MRI影像学特征及其诊断价值

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中国医学物理学杂志 2024年第3期41卷 327-332页

作者：王璐陈壮军邱龙海王金本海南西部中心医院放射科海南儋州571700 儋州市人民医院心内科导管室海南儋州571700

目的:探讨动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)参数对首发脑卒中认知功能障碍的诊断价值,以期为临床早期评估脑卒中认知功能障碍发生风险、制定干预方案提供参考。方法:选取122例首发脑卒中患者作为研究对象,根据其是否发生认知功能障碍分... 详细信息

目的:探讨动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)参数对首发脑卒中认知功能障碍的诊断价值,以期为临床早期评估脑卒中认知功能障碍发生风险、制定干预方案提供参考。方法:选取122例首发脑卒中患者作为研究对象,根据其是否发生认知功能障碍分为发生组(n=53)与未发生组(n=69),另选取53例非脑血管性认知功能障碍患者作为对照组,入院后均行DCE-MRI检查,比较3组及不同认知功能障碍程度患者DCE-MRI影像学参数[组织间隙-血浆速率常数(Kep)、容积转运常数(K_(trans))、细胞外间隙容积分数(V_(e))、血浆容积分数(V_(p))],分析DCE-MRI影像学参数与认知功能障碍程度的相关性及诊断价值,并分析其对首发脑卒中认知功能障碍危险度的评估价值。结果:发生组与未发生组DCE-MRI定量参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)均高于对照组,发生组DCE-MRI定量参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)高于未发生组(P<0.05);不同认知功能障碍程度患者DCE-MRI影像学参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)比较有统计学意义(P<0.05),且随着认知功能障碍程度加重,患者DCE-MRI影像学参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)明显升高;K_(trans)、V_(e)、V_(p)均与认知功能障碍程度呈正相关关系(P<0.05);DCE-MRI定量参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)联合诊断的AUC为0.921,明显较单独指标高(P<0.05);DCE-MRI参数K_(trans)、V_(e)、V_(p)高水平者认知功能障碍发病风险分别是低水平的3.077、1.944、2.313倍。结论:DCE-MRI可用于首发脑卒中认知功能障碍诊断,为临床早期预测卒中后认知功能障碍提供参考依据。

关键词：首发脑卒中认知功能障碍动态对比增强磁共振成像诊断价值危险度

脓毒症患者外周血HMGB1、LncRNA Peg13的表达及相关性

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武汉大学学报（医学版） 2024年第6期45卷 663-669页

作者：马梦洁王丹于丽侠沈佳聪朱钰文李明晖浙江省绍兴市人民医院/浙江大学绍兴医院感染性疾病科浙江绍兴312000

目的:探讨脓毒症患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及长链非编码RNA(LncRNA) Peg13的表达及其临床价值。方法:选取2021年6月至2022年12月浙江省绍兴市人民医院收治的脓毒症患者44例,另纳入同期健康体检患者(非脓毒症)36例作为对照组... 详细信息

目的:探讨脓毒症患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及长链非编码RNA(LncRNA) Peg13的表达及其临床价值。方法:选取2021年6月至2022年12月浙江省绍兴市人民医院收治的脓毒症患者44例,另纳入同期健康体检患者(非脓毒症)36例作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中HMGB1的含量,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测外周血LncRNA Peg13相对表达量,采用Spearman及Pearson相关性检验评价外周血HMGB1、LncRNA Peg13以及炎症因子对脓毒症的诊断价值,并分析LncRNA Peg13的表达与HMGB1及炎症指标(WBC、CRP、PCT、ESR)和细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)的相关性。同时将脓毒症组分别按照是否发生多器官功能障碍及是否发生休克进行危险分层,分析外周血HMGB1、LncRNA Peg13与疾病严重程度的相关性。结果:脓毒症组外周血HMGB1含量(pg/mL)高于非脓毒症组(2 965.18±1 389.71 vs 27.64±8.56,P<0.001);且LncRNA Peg13在脓毒症组中的相对表达量高于非脓毒症组(20.80±8.07 vs 0.00±0.00,P<0.001)。外周血HMGB1用于脓毒症诊断的ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度分别为0.909(95%CI:0.824~0.962,P<0.000 1),90.91%,100%;外周血LncRNA Peg13用于脓毒症诊断的AUC、灵敏度、特异度分别为0.989(95%CI:0.934~1.000,P<0.000 1),97.93%,100%。脓毒症组患者外周血HMGB1水平与外周血LncRNA Peg13相对表达量呈一定负相关(r=-0.521,P<0.001),与外周血CRP水平及ESR水平呈正相关(r=0.516,r=0.310,P<0.001);与外周血WBC、PCT、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平无明显相关性。脓毒症组患者外周血LncRNA Peg13相对表达量与外周血CRP水平及ESR水平呈负相关(r=-0.375,r=-0.315,P<0.05);与外周血WBC、PCT、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平无明显相关性。脓毒症组中MODS组外周血HMGB1含量(pg/mL)高于非MODS组(3748.90±637.72vs2249.84±1082.71,P<0.001),而LncRNA Peg13相对表达量MODS组低于非MODS组(18.95±5.96 vs 25.64±8.27,P=0.004);脓毒症组中休克组与非休克组之间外周血HMGB1含量与LncRNA Peg13相对表达量无明显差异。结论:脓毒症患者中HMGB1含量及LncRNA Peg13表达水平显著上调,两者含量呈负相关。且HMGB1水平对疾病的严重程度有一定的预测价值。

关键词：脓毒症长链非编码RNA HMGB1 炎症因子

3.0 T MRI化学交换饱和转移成像定量评估肾脏氧化还原代谢的实验研究

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中华放射学杂志 2024年第3期58卷 324-329页

作者：虞心田潘靓邢兆宇米文夏陈杰邢伟江苏大学医学院镇江212000 常州市第一人民医院放射科常州213003 常州市第一人民医院泌尿外科常州213003

目的探讨3.0 T MRI化学交换饱和转移(CEST)成像在体外模型和实验动物中定量评估肾脏氧化还原代谢的可行性。方法制备生理浓度的氧化还原代谢物体外模型,包括还原型代谢物(谷氨酸、丙氨酸、谷胱甘肽)和氧化型代谢物(2-酮戊二酸、丙酮酸... 详细信息

目的探讨3.0 T MRI化学交换饱和转移(CEST)成像在体外模型和实验动物中定量评估肾脏氧化还原代谢的可行性。方法制备生理浓度的氧化还原代谢物体外模型,包括还原型代谢物(谷氨酸、丙氨酸、谷胱甘肽)和氧化型代谢物(2-酮戊二酸、丙酮酸、谷胱甘肽二硫化物、氢氧化铵),采用3.0 T MRI扫描仪进行CEST成像,成像方法为固定射频持续时间为2000 ms,采集不同饱和脉冲强度(B1)值(1、2、3、4μT)的CEST图像;固定B1值为2μT,采集不同射频持续时间(1500、2000 ms)的CEST图像,获取最佳扫描参数。采用最佳扫描参数对7只正常实验兔左侧肾脏进行CEST成像,测量兔肾皮质和外髓的非对称磁化传递率(MTRasym),差异的比较采用配对t检验。结果体外模型实验显示氧化还原代谢物CEST扫描最佳B1值为2μT、最佳射频持续时间为2000 ms。谷胱甘肽二硫化物、谷胱甘肽、谷氨酸、丙氨酸的MTRasym峰值分别在3.75、3.5、3、1.5 ppm处,丙酮酸、2-酮戊二酸、氢氧化铵的峰值在1 ppm处,且还原型代谢物的MTRasym信号峰值高于氧化型代谢物。在B1值为2μT、射频持续时间为2000 ms的条件下,在1、3、3.5、3.75 ppm处,兔肾皮质的MTRasym信号分别为(2.60±1.10)%、(2.86±1.32)%、(3.04±1.06)%、(2.98±0.91)%,兔肾外髓的MTRasym信号分别为(1.00±0.56)%、(2.43±0.94)%、(2.29±0.88)%、(1.98±0.58)%,兔肾皮质的MTRasym信号均高于外髓信号,差异有统计学意义(t=3.04,P=0.023;t=2.56,P=0.043;t=3.50,P=0.013;t=3.45,P=0.014)。结论3.0 T MRI CEST成像可用于定量评估体外模型及正常实验兔肾脏氧化还原代谢。

关键词：磁共振成像化学交换饱和转移肾脏氧化还原动物实验

Circ038467通过靶向miR-940调控缺氧缺糖诱导神经细胞损伤的机制

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中国药理学通报 2024年 887-893页

作者：孔炫栋周黎琴王宁吴天涯赵明浙江省诸暨市人民医院药事部浙江省诸暨市人民医院神经外科浙江中医药大学第一临床医学院

目的探讨circ0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ0038467、miR-NC、miR... 详细信息

目的探讨circ0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ0038467、miR-NC、miR-940 mimics分别转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h,si-circ0038467和anti-miR-NC或antimiR-940分别共转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h;qRT-PCR法检测circ-0038467、miR-940的表达量;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;LDH法检测细胞损伤情况;双荧光素酶报告实验用于靶向关系检测;Western blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达。结果OGD诱导的神经细胞中circ0038467上调且miR-940下调(P <0.01);转染si-circ0038467或miR-940 mimics后,细胞存活率升高(P <0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平下降(P <0.01);circ0038467可靶向结合miR-940;相对于OGD+si-circ0038467+anti-miR-NC组,细胞存活率在OGD+si-circ003 8467+anti-miR-940中降低(P <0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平增加(P <0.01)。结论干扰circ0038467可上调miR-940表达保护神经细胞免受OGD诱导的氧化应激以及凋亡。

关键词：大鼠皮质神经细胞 circ 038467 miR-940 细胞增殖凋亡氧糖剥夺