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4种布鲁氏菌病胶体金试纸条的比较研究

中国动物传染病学报 2024年

作者：黄晓兵杨磊刘爱军倪柏锋孙思琪浙江省动物疫病预防控制中心

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条... 详细信息

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条的敏感性、特异性等评价指标。结果表明：4个厂家试纸条的Cut-off值为标准血清抗体含量2.5 IU/mL～10 IU/mL，敏感性为8%～100%，特异性为93.10%～100%，符合率为72.29%～96.39%，AUC值为0.54～0.97；配对卡方检验结果显示：除厂家A外，厂家B、C、D的结果与真实结果均有显著性差异（P＜0.05）。A厂家试纸条的检测结果与真实结果符合率为95.18%，成本-效果分析结果表明，4个厂家的C/E值分别为15.76、31.52、19.71和20.75，厂家A试纸条准确诊断1份样品的成本最低。故推荐使用A厂家的胶体金试纸条开展宰前动物布病的筛查工作。

关键词：布鲁氏菌病胶体金法初筛比较分析

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽排泄物中15种喹诺酮类药物

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浙江农业学报 2024年

作者：裘丞军侯轩陈凯吴望君周炜段友刚浙江省动物疫病预防控制中心开化县农业事务管理中心

建立了应用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定畜禽排泄物中15种喹诺酮类药物残留量的分析方法。样品经冷冻干燥后粉碎过筛，N，N-二甲基甲酰胺（DMF）和0.1 mol·L-1盐酸溶液混合提取，HLB固相萃取柱净化，UPLC-MS/MS检... 详细信息

建立了应用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定畜禽排泄物中15种喹诺酮类药物残留量的分析方法。样品经冷冻干燥后粉碎过筛，N，N-二甲基甲酰胺（DMF）和0.1 mol·L-1盐酸溶液混合提取，HLB固相萃取柱净化，UPLC-MS/MS检测，基质匹配校准外标法定量。结果表明：15种喹诺酮在2～50 ng·mL-1浓度范围内线性良好，决定系数(R2)＞0.99，检出限为5 μg·kg-1，定量限为10 μg·kg-1，添加量为10、20、500 μg·kg-1浓度时，平均回收率为76.2%～109%，RSD为1.3%～12.4%（n=6）。该方法实现了较低的检测限、定量限，较高回收率和稳定性，可应用于畜禽排泄物中喹诺酮类药物残留量的监测，为畜禽排泄物在种植业中的科学施用提供准确指导，为间接监测养殖过程中各喹诺酮类药物的含量提供技术方法，指导养殖企业合理使用抗菌药物。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 喹诺酮类畜禽排泄物

柠条青贮对肉牛生长性能、瘤胃发酵参数及肉品质的影响

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饲料研究 2024年 27-31页

作者：杨森鲁莹汉中市动物疫病预防控制中心

试验旨在探讨柠条青贮对肉牛生长性能、瘤胃发酵参数及肉品质的影响，确定柠条青贮在肉牛养殖中的适宜添加比例。试验选择48头体重相近、体况良好的西门塔尔肉牛，随机分4个处理，每个处理12个重复，每个重复1头肉牛。对照组饲喂全株玉... 详细信息

试验旨在探讨柠条青贮对肉牛生长性能、瘤胃发酵参数及肉品质的影响，确定柠条青贮在肉牛养殖中的适宜添加比例。试验选择48头体重相近、体况良好的西门塔尔肉牛，随机分4个处理，每个处理12个重复，每个重复1头肉牛。对照组饲喂全株玉米青贮，试验组分别采用柠条青贮替代20%、40%、80%全株玉米青贮。预试期7 d，正式试验期90 d。结果表明，与对照组相比，饲喂40%的柠条青贮西门塔尔肉牛平均日增重提高了22.11%(P0.05）。研究表明，饲喂适宜比例的柠条青贮可以改善西门塔尔肉牛的生长性能及瘤胃发酵功能，提高肌肉品质，柠条青贮替代40%的全株玉米青贮较为适宜。

关键词：柠条青贮肉牛生长性能瘤胃发酵参数肉品质

基于TPO18基因蛋白的兔豆状囊尾蚴感染间接ELISA检测方法的建立

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中国兽医学报 2024年第6期 1213-1222页

作者：王泽祥罗永禄薛萍车亮王由森苟惠天孙晓林甘肃农业大学动物医学院兰州市永登县动物疫病预防控制中心平凉市动物疫病预防控制中心

豆状囊尾蚴病是由豆状带绦虫(Taenia pisiformis)的幼虫——豆状囊尾蚴(Cysticercus pisiformis)寄生于家兔等啮齿类动物所引起的一种寄生虫病，该病威胁养兔业发展和兔肉食品安全。为了鉴定TPO18抗原在豆状囊尾蚴和豆状带绦虫的分布，... 详细信息

豆状囊尾蚴病是由豆状带绦虫(Taenia pisiformis)的幼虫——豆状囊尾蚴(Cysticercus pisiformis)寄生于家兔等啮齿类动物所引起的一种寄生虫病，该病威胁养兔业发展和兔肉食品安全。为了鉴定TPO18抗原在豆状囊尾蚴和豆状带绦虫的分布，并建立兔豆状囊尾蚴病抗体间接ELISA检测方法，本研究原核表达兔豆状囊尾蚴18 kDa抗原，经蛋白纯化获得了可溶性的TPO18蛋白。TPO18蛋白免疫家兔制备了效价达1∶51 200多克隆抗体。蛋白免疫印迹鉴定多克隆抗体与兔豆状囊尾蚴总蛋白、豆状带绦虫总蛋白及重组蛋白TPO18的反应原性，免疫组织化学法鉴定兔豆状囊尾蚴和豆状带绦虫虫体TPO18抗原分布，多克隆抗体与兔豆状囊尾蚴总蛋白、豆状带绦虫总蛋白及重组蛋白TPO18具有良好的反应原性，兔豆状囊尾蚴TPO18抗原主要分布于生发层和绒毛层，豆状带绦虫TPO18抗原主要分布在吸盘及吸盘周围和集合管上层细胞及绒毛层。以TPO18重组抗原包被酶标板，优化确定间接ELISA各项技术参数，建立基于TPO18抗原的间接ELISA抗体检测方法。经优化后的ELISA检测方法的检测条件为血清稀释度1∶100,抗原包被质量浓度为5 mg/L,抗原包被条件37℃1 h+4℃过夜，封闭条件1%BSA 37℃封闭60 min,血清反应时间60 min,酶标二抗稀释度1∶1 000,酶标二抗作用时间60 min,底物反应时间15 min,临界值0.295。ELISA方法的灵敏性、特异性和重复性检测结果表明，该方法灵敏度较高，特异性较好，不与兔瘟、兔肝片吸虫、兔球虫、兔弓形虫等的阳性血清发生交叉反应；批内和批间重复性试验的变异系数均小于7%,重复性良好。运用该ELISA方法与剖检检测试验分别对86份临床血清样品检测，两种方法检测结果符合率为97.7%。综上所述，本研究成功建立了兔感染豆状囊尾蚴抗体的间接ELISA方法，为兔感染豆状囊尾蚴后感染情况监测提供了新的监测方法。

关键词：兔豆状囊尾蚴 18 kDa抗原免疫组织化学酶联免疫吸附试验特异性敏感性

日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响

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中国饲料 2024年第13期 76-79页

作者：陈敏艳安加俊贾培龙陕西省动物疫病预防控制中心陕西西安710016 咸阳市动物疫病预防控制中心陕西咸阳713899

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 ... 详细信息

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 g益生菌,试验60 d。结果表明:(1)试验II组犊牛平均日增重较对照组提高了18.31%(P 0.05)。(2)血液生化指标中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、胆固醇和甘油三酯各组之间差异不显著(P> 0.05);试验II组Ig G和IL-6等免疫指标较对照组分别提高了26.08%和20.17%(P 0.05)。(3)试验II组瘤胃氨态氮和丁酸含量较对照组分别提高了49.85%和45.17%,乙酸含量降低了34.24%(P 0.05)。以上结果表明,犊牛日粮中添加复合益生菌能够促进犊牛的生长性能,提高免疫功能和瘤胃发酵功能。本试验中,以添加3 g/(头·d)的复合益生菌较适宜。

关键词：犊牛复合益生菌生长性能免疫瘤胃发酵

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基于体外自连接的猪圆环病毒2型感染性克隆构建方法

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生物工程学报 2024年第7期40卷 2333-2345页

作者：孙仁杰杨永乐王雅婷谢荣辉张传亮方维焕李肖梁赵灵燕浙江省动物疫病预防控制中心浙江杭州311199 湘湖实验室浙江杭州311231 浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室浙江杭州310058

本研究旨在建立一种快速构建猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆的方法。以临床分离的PCV2 LX株为模板,利用DNA无缝克隆技术成功构建了PCV2环状感染性克隆。同时,在基因组体外自连接的构建过程以及拯救病毒的生... 详细信息

本研究旨在建立一种快速构建猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆的方法。以临床分离的PCV2 LX株为模板,利用DNA无缝克隆技术成功构建了PCV2环状感染性克隆。同时,在基因组体外自连接的构建过程以及拯救病毒的生长特性上,将本方法与常规酶切连接方法进行了比较。本方法无须分析和引入限制性内切酶位点,避免了传统酶切连接的繁琐,能更高效地进行PCV2基因组的编辑。构建的感染性克隆经脂质体转染细胞,成功拯救获得可以稳定传代的重组病毒,并且重组病毒在PK-15细胞和3D4/31细胞(猪肺泡巨噬细胞系)上具有更强的增殖能力。综上所述,本研究构建了一种基于体外自连接的PCV2反向遗传操作系统,为PCV2基因工程疫苗的研发提供新策略,为其他新发圆环病毒(PCV3和PCV4)感染性克隆的构建提供借鉴。

关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆体外自连接病毒拯救

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羊肠道病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王勤欧云文何博刘俐君达州职业技术学院开江县动物疫病预防控制中心达州市动物疫病预防控制中心

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有... 详细信息

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有良好的反应活性，建立的间接ELISA方法检测BDV、BVDV、GPV、ORF、SPA阳性血清均为阴性，对CEV阳性血清的最低检出效价可达1︰25 600，与IFA方法的符合率为93.33%（28/30），检测四川地区816份羊血清样品的CEV阳性感染率达7.72%（63/816）。表明建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性，可用于CEV临床抗体检测及流行病学调查。

关键词：羊肠道病毒 VP1蛋白原核表达间接ELISA 抗体检测

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽排泄物中20种磺胺类药物的残留

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分析科学学报 2024年第1期40卷 57-64页

作者：裘丞军薛银邱鑫磊黄娟陈晓林陈洁浙江省动物疫病预防控制中心浙江杭州311199 浙江环茂自控科技有限公司浙江杭州311100

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定畜禽排泄物中20种磺胺类药物残留量的分析方法。样品经冷冻干燥后粉碎过筛,90%酸化乙腈提取,HLB固相萃取柱净化,UPLC-MS/MS检测,基质匹配校准外标法定量。结果显示,20种磺胺类药物在2... 详细信息

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定畜禽排泄物中20种磺胺类药物残留量的分析方法。样品经冷冻干燥后粉碎过筛,90%酸化乙腈提取,HLB固相萃取柱净化,UPLC-MS/MS检测,基质匹配校准外标法定量。结果显示,20种磺胺类药物在2~250 ng/mL浓度范围内,线性良好,相关系数均>0.99,检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。在添加浓度分别为5、10、500μg/kg时,平均回收率为78.0%~117%,相对标准偏差(n=6)为1.1%~14.2%。该方法具有较低的检出限、定量限及较高的回收率和稳定性,可应用于畜禽排泄物中20种磺胺类药物残留量的监测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 磺胺类畜禽排泄物

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免疫代谢物衣康酸对不同疾病调控作用及其作用机制研究进展

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生物工程学报 2024年

作者：程钟坤赵静贤刘言言徐凌赵光伟倪兴维杨晓伟西南大学动物医学院贵州省动物疫病预防控制中心

衣康酸(itaconate)是免疫细胞三羧酸(tricarboxylic acid， TCA)循环的一种重要中间代谢物，由免疫应答基因1(immune response gene 1， IRG1)编码的乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase1， ACOD1)催化顺乌头酸脱羧产生。2011年，研究人员发现在LPS刺激小鼠巨噬细胞中衣康酸显著升高。此后作为新发现的代谢物，衣康酸成为免疫代谢学的研究热点。研究发现衣康酸通过调控炎症、重塑细胞代谢和参与遗传调控等方式在不同疾病中发挥重要调控作用。本文将从衣康酸的结构、对不同疾病调控作用及其作用机制这3个方面，综述衣康酸的研究进展。

关键词：衣康酸免疫代谢物炎症细胞代谢遗传调控