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伊布替尼联合BH3拟似物ABT737协同抗肿瘤作用及机制

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中国现代应用药学 2023年第12期40卷 1712-1719页

作者：董蓉谭笔琴阎优优严伟浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院浙江省临床肿瘤药理与毒理学研究室临床药学科杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院转化医学研究中心杭州310006

目的研究伊布替尼联合BH3拟似物ABT737的协同抗实体肿瘤作用及机制。方法以2种类型实体肿瘤细胞,人非小细胞肺癌细胞株A549、H1299和人脑胶质瘤细胞U251、U87为对象,采用SRB法检测不同浓度伊布替尼(20,15,10,7.5,5μmol·L^(-1))和BH... 详细信息

目的研究伊布替尼联合BH3拟似物ABT737的协同抗实体肿瘤作用及机制。方法以2种类型实体肿瘤细胞,人非小细胞肺癌细胞株A549、H1299和人脑胶质瘤细胞U251、U87为对象,采用SRB法检测不同浓度伊布替尼(20,15,10,7.5,5μmol·L^(-1))和BH3拟似物ABT737(20,15,10,7.5,5μmol·L^(-1))单独或共同作用24 h后的细胞增殖情况,计算细胞存活率和合用指数;采用克隆形成试验检验10μmol·L^(-1)伊布替尼与10μmol·L^(-1 )ABT737联合作用120 h后的细胞克隆形成情况;成球试验检测两药联合作用7 d对细胞成球能力的影响;采用PI染色结合流式细胞术检测10μmol·L^(-1)伊布替尼与10μmol·L^(-1 )ABT737联用对U87和U251细胞凋亡的影响;RT-PCR检测两药联合作用24 h后对U87和U251细胞中干细胞标记物Sox2、Nanog和Oct4 mRNA水平影响;Western blotting检测脑胶质瘤干细胞标记物CD44蛋白水平的表达。结果不同浓度伊布替尼与BH3拟似物ABT737在非小细胞肺癌和脑胶质瘤中均有协同作用,合用组增殖抑制率均高于单用组(P<0.05);两药合用可抑制细胞的克隆形成能力,协同诱导细胞凋亡;同时两者合用可抑制肿瘤干细胞标记物Sox2的mRNA表达水平,使CD44蛋白表达水平降低。结论伊布替尼联合ABT737可协同抑制实体肿瘤细胞的增殖,促进凋亡发生,其机制可能是通过抑制肿瘤干细胞蛋白的表达。

关键词：伊布替尼 ABT737 肝细胞 Sox2 CD44

两种对侧控制型功能性电刺激方案对脑卒中患者上肢功能影响的研究

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中国康复医学杂志 2023年第2期38卷 207-211,221页

作者：章晓峰张大威郑雅思俞李雯杨凌佳浙江省人民医院康复医学中心浙江省杭州市310014 杭州医学院附属人民医院康复医学科浙江省康复与运动医学研究所萧山区第一人民医院

目的:探讨两种对侧控制型功能性电刺激(CCFES)方案对脑卒中患者的患侧上肢整体运动功能、抓握能力、肱三头肌和伸腕肌群表面肌电信号的影响。方法:选取2021年1月至2021年11月期间在浙江省人民医院康复医学科住院治疗的脑卒中患者60例,... 详细信息

目的:探讨两种对侧控制型功能性电刺激(CCFES)方案对脑卒中患者的患侧上肢整体运动功能、抓握能力、肱三头肌和伸腕肌群表面肌电信号的影响。方法:选取2021年1月至2021年11月期间在浙江省人民医院康复医学科住院治疗的脑卒中患者60例,随机分为观察组(n=30)和对照组(n=30),两组患者均给予常规康复治疗,对照组给予伸腕肌群CCFES,而观察组在对照组的基础上增加肱三头肌CCFES,每日1次,每次20min,连续治疗3个月。分别在治疗前后用上肢Fugl-Meyer评分法(FMA-UE)和盒子积木测试(BBT)评定上肢的整体运动功能和抓握能力,并获取上肢肱三头肌和伸腕肌群的RMS比值。结果:治疗前两组患者各评定指标均无显著性差异(P>0.05),具有可比性。治疗3个月后,两组患者的FMA-UE评分、BBT评分、肱三头肌RMS比值和伸腕肌群RMS比值均较治疗前有所提高(P0.05)。结论:在伸腕肌群CCFES的基础上增加肱三头肌CCFES可显著改善脑卒中患者的上肢粗大运动功能。

关键词：对侧控制型功能性电刺激脑卒中上肢表面肌电图

基于“流程再造”理论优化胸痛中心护理流程应用效果的观察

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中国中西医结合急救杂志 2022年第2期29卷 213-217页

作者：童晓珊王咏梅金建芬孟莎莎宁丽浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院导管室浙江杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院心内科浙江杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院护理部浙江杭州310006

目的评价基于“流程再造”理论优化胸痛中心(CPC)护理流程的应用效果。方法采用单中心回顾性成组对照研究方法。选择2016年1月至2020年2月在浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院CPC救治的417例急性心肌梗死(AMI)患者作为研究对象。将2... 详细信息

目的评价基于“流程再造”理论优化胸痛中心(CPC)护理流程的应用效果。方法采用单中心回顾性成组对照研究方法。选择2016年1月至2020年2月在浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院CPC救治的417例急性心肌梗死(AMI)患者作为研究对象。将2016年1月至2017年11月(CPC成立前)救治的158例患者作为对照组;2017年12月至2020年2月(CPC成立后实施护理流程优化)救治的259例患者作为观察组。比较两组救治效率和护理效果的差异。结果观察组门-球时间较对照组明显缩短(min:85.7±15.0比126.0±52.9,P50%比例均较对照组明显增加〔术后3级TIMI血流比例:95.0%(246/259)比87.3%(138/158),ST段抬高值下降幅度>50%:84.9%(220/259)比77.2%(122/158),均P人员经过多次系统培训和应急演练,均具备了较强的独立应急能力和较高的专业水准,达到了规范化CPC的护理工作标准要求,护理满意度得分也明显提高。

关键词：胸痛中心急性心肌梗死护理流程优化效果

两种红景天多糖的结构特征与TLR4激动活性研究

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中国药学杂志 2021年第13期56卷 1048-1053页

作者：滕飞顾杨琴寿泮婷阎优优张博杨波林能明浙江中医药大学药学院杭州310053 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院浙江省临床肿瘤药理与毒理学研究重点实验室杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院转化医学研究中心杭州310006

目的对比研究大花红景天(Rhodiola crenulata)和长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)多糖的结构特征与Toll样受体4(toll like receptor,TLR4)激动活性差异。方法采用水提醇沉法提取大花红景天和长鞭红景天的多糖成分,分离纯化分别得到了大... 详细信息

目的对比研究大花红景天(Rhodiola crenulata)和长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)多糖的结构特征与Toll样受体4(toll like receptor,TLR4)激动活性差异。方法采用水提醇沉法提取大花红景天和长鞭红景天的多糖成分,分离纯化分别得到了大花红景天多糖(Rhodiola crenulata polysaccharide,RCP)、长鞭红景天多糖(Rhodiola fastigiata polysaccharide,RFP)。并采用UV、IR、HPGPC、GC-MS等波谱方法分析RCP和RFP的多糖组成成分和结构;在HEK-Blue hTLR4细胞上对比RCP和RFP的TLR4激活率。结果RCP为均一多糖,相对分子质量约为125000,含阿拉伯糖和半乳糖,摩尔比为0.089:2.233;RFP为杂多糖,相对分子质量约为68000/134000,含鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖,摩尔比为0.646:1.148:2.206。在100μg·mL^(-1)的作用浓度下,RCP的TLR4激动率为87.59%,RFP的TLR4激动率为33.39%。结论RCP组分较RFP更加均一,TLR激动活性更强,为红景天属多糖成分的研究与开发提供参考。

关键词：大花红景天长鞭红景天结构表征 Toll样受体4

人肺腺癌辐射耐受细胞株的建立及其放射抵抗机制探讨

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中国肺癌杂志 2023年第2期26卷 93-104页

作者：张静静马胜林吴琼浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院转化医学研究中心浙江大学癌症中心浙江省临床肿瘤药理与毒理学研究重点实验室杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市肿瘤医院胸部肿瘤科杭州310002 浙江省肿瘤医院浙江省中医药重点实验室中西医结合肿瘤学实验室杭州310022

背景与目的放疗是肺癌最常见的治疗方法之一,40%-50%的患者在放疗后会出现局部肿瘤未控或复发,放射抵抗是导致肺癌局部控制失败的重要原因。然而,体外放疗抵抗模型的缺乏是阻碍其机制研究的主要因素。因此,本研究旨在通过建立人肺腺癌H... 详细信息

背景与目的放疗是肺癌最常见的治疗方法之一,40%-50%的患者在放疗后会出现局部肿瘤未控或复发,放射抵抗是导致肺癌局部控制失败的重要原因。然而,体外放疗抵抗模型的缺乏是阻碍其机制研究的主要因素。因此,本研究旨在通过建立人肺腺癌H1975和H1299辐射耐受细胞株,为未来开展肺癌放射抵抗相关性研究创建体外模型,并初步探索其放射抵抗机制。方法对H1975和H1299细胞进行等剂量的X射线分次照射,构建辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR;采用克隆形成实验比较H1975和H1975DR细胞、H1299和H1299DR细胞的克隆形成能力,线性二次模型拟合细胞存活分数曲线;DNA损伤修复能力的检测采用彗星实验,并计算DNA尾部百分比(Tail DNA%);利用光学显微镜、CCK-8、FACS、细胞划痕和侵袭等方法比较细胞形态、细胞增殖能力、细胞凋亡水平和周期分布、细胞迁移和侵袭能力等生物学特性;通过Western blot免疫印迹分析DNA-PKcs、53BP1、RAD51、p-ATM等DNA损伤修复因子的表达。结果历经5个月的照射及持续培养获得稳定的辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR。X射线照射下,两株辐射耐受株的细胞增殖活性、克隆形成能力、DNA损伤修复能力均显著提高;细胞周期G2期/M期比例均显著下调,G0期/G1期比例上调;细胞迁移及侵袭能力显著增强。非同源末端连接(nonhomologous end-joining, NHEJ)修复通路的p-DNA-PKcs(Ser2056)、53BP1及同源重组(homologous recombination, HR)修复通路的p-ATM(Ser1981)、D51相对蛋白表达量较H1975及H1299均有不同程度的增高。结论通过等剂量分次照射可诱导H1975和H1299细胞株分化为肺腺癌辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR,为肺癌患者放疗抵抗的机制研究提供了体外细胞学模型。

关键词：肺肿瘤 DNA损伤修复辐射耐受

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中华肿瘤杂志 2016年第6期38卷 404-410页

作者：翁旭阎优优童莹慧范云曾健梅王霖玲林能明浙江中医药大学附属杭州第一医院肿瘤药理研究所 310006 杭州市第一人民医院转化医学研究中心 310006 浙江省肿瘤医院临床药学研究室杭州310022

目的研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keapl）／核转录因子E2相关因子2（Nil2）信号通路对肺癌A549细胞生长、转移和耐药的影响。方法利用慢病毒转染体系建立稳定过表达野生型Keapl的A549细胞株模型，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR... 详细信息

目的研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keapl）／核转录因子E2相关因子2（Nil2）信号通路对肺癌A549细胞生长、转移和耐药的影响。方法利用慢病毒转染体系建立稳定过表达野生型Keapl的A549细胞株模型，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot法检测Keapl过表达对A549细胞中Nrf2基因及其靶基因表达的影响。采用黄酰罗丹比色法、流式细胞术、克隆形成实验、Transwell侵袭实验、体外划痕实验等方法研究Keapl过表达对A549细胞生长、转移和耐药的影响。结果Keapl过表达可引起A549细胞中Nrf2蛋白以及Nrf2靶基因mRNA的表达降低，并使A549细胞的增殖能力和克隆形成能力降低。Keapl过表达可使A549细胞阻滞于G1／G2期，其中A549．Keapl细胞中G0／G1期细胞的比例为（80．2±5．9）％，明显高于A549．GFP细胞中G0／G1期细胞的比例[（67．1±0．9）％，P〈0．05]。Keapl过表达可降低A549细胞的迁移和侵袭能力，A549．Keapl细胞的迁移率仅为（35．0±7．1）％，明显低于A549．GFP细胞的迁移率[（52．5±10．6）％，P〈0．05]；A549-Keapl细胞的侵袭数量为（156．33±17．37）个／高倍视野，明显低于A549．GFP细胞的侵袭数量[（306．67±22．19）个／高倍视野，P〈0．05]。过表达Keapl的A549细胞对卡铂和吉西他滨的敏感性增加，其中卡铂对A549．GFP细胞的IC50为（107．8±12．9）μmol／L，对A549．Keapl细胞的IC50为（52．1±3．3）μmol／L，差异有统计学意义（P〈0．01）；吉西他滨对A549-GFP细胞的IC50为（9．9±0．5）μmol／L，对A549．Keapl细胞的IC。为（6．8±1．2）μmol／L，差异亦有统计学意义（P〈0．01）。结论Keapl过表达影响肺癌A549细胞中Nrf2和下游靶基因的表达，抑制肿瘤细胞的增殖和转移，增加细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：肺肿瘤 A549细胞 Keap1 Nrf2 增殖转移抗药性肿瘤

慢病毒介导短发夹RNA特异性沉默黏蛋白3A表达对肝外胆管癌细胞生长增殖能力的影响

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中华肝胆外科杂志 2019年第8期25卷 616-621页

作者：刘成行黄海琇杨建锋浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院消化内科杭州310006 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院转化医学研究中心杭州310006 江苏省昆山市中医院

目的探索慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)沉默黏蛋白3A(Muc3A)表达对肝外胆管癌QBC939细胞生长和增殖能力的影响。方法设计、合成针对Muc3A基因的shRNA干扰序列,重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度。转染肝外胆管癌QBC939细胞,采... 详细信息

目的探索慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)沉默黏蛋白3A(Muc3A)表达对肝外胆管癌QBC939细胞生长和增殖能力的影响。方法设计、合成针对Muc3A基因的shRNA干扰序列,重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度。转染肝外胆管癌QBC939细胞,采用最佳药物筛选浓度筛选获得稳定阳性细胞株。将肝外胆管癌QBC939细胞分为三组培养:慢病毒介导shRNA转染细胞(转染组)、空病毒转染细胞(阴性对照组)及未转染细胞(空白对照组)。蛋白印记(western blot)检测shRNA对Muc3A基因的沉默效率;MTS法检测细胞生长情况,平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功包装慢病毒,病毒悬液的滴度为1×10^8 TU/ml;病毒液感染EHCCQBC939细胞,Western blot证实shRNA序列定向插入慢病毒载体质粒中;选择3μg/ml嘌呤霉素最佳筛选浓度,获得稳定细胞株;Western blot结果分别显示转染组Muc3A表达明显低于阴性对照组与空白对照组(P0.05)。结论慢病毒介导shRNA转染干扰Muc3A基因表达后可明显抑制肝外胆管癌QBC939细胞的生长增殖和克隆能力,提示Muc3A能促进肝外胆管癌细胞的生长与克隆增殖。

关键词：胆管肿瘤细胞增殖胆管上皮癌黏蛋白3A 短发夹RNA 慢病毒

高危筛查联合家系筛查法筛查成人血液透析人群中法布里病患者——附法布里病GLA IVS4+919G>A突变1例家系报道

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中华肾脏病杂志 2024年第1期40卷 18-23页

作者：陈冰蓉童敏青路智红毛建华浙江大学医学院附属儿童医院肾脏内科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州310052 浙江省永康市第一人民医院永康321300

目的采用高危筛查联合家系筛查法筛查成人血液透析人群中潜在的法布里病患者,探讨提高法布里病诊断效率的方法。方法该研究为横断面调查研究。研究对象为2022年11月至2023年2月在浙江省永康市第一人民医院接受血液透析治疗的成人终末期... 详细信息

目的采用高危筛查联合家系筛查法筛查成人血液透析人群中潜在的法布里病患者,探讨提高法布里病诊断效率的方法。方法该研究为横断面调查研究。研究对象为2022年11月至2023年2月在浙江省永康市第一人民医院接受血液透析治疗的成人终末期肾病患者。对纳入患者行法布里病高危筛查。男性患者采用干血纸片α-半乳糖苷酶A(α-galactosidase A,α-Gal A)测定行高危筛查,女性患者采用干血纸片脱乙酰基三己糖酰基鞘酯醇(glycosphingolipids,Lyso-GL-3)测定行高危筛查,对筛查结果异常者行GLA基因检测以明确法布里病诊断。对确诊者的家系成员进行GLA基因筛查,并用干血纸片法测定α-Gal A酶活性和Lyso-GL-3水平。对确诊法布里病患者行尿常规、血生化、眼部、听力、头颅磁共振成像、心电图等检查,评估相关器官损害情况。结果共244例血液透析患者入选该研究,年龄25~81岁(中位年龄61岁),男139例(56.97%),女105例(43.03%)。高危筛查发现1例女性法布里病患者,基因检测示GLA IVS4+919G>A变异,患病率为0.41%。筛查该法布里病患者的41名家族成员,最终确诊法布里病患者12例(包括先证者),女性9例,男性3例。其中酶学检查异常者9例,底物异常者10例,基因测序异常者11例。12例患者均无肢端疼痛、少汗、血管角质瘤、角膜异常、听力损害等表现。心脏损害8例,尿检查异常(白蛋白尿/血尿)9例,肾功能异常1例,头颅磁共振成像异常4例。结论通过对成人血液透析患者进行高危和家系联合筛查,成功发现1个GLA IVS4+919G>A突变家系,共确诊12例法布里病患者。高危筛查联合家系筛查可有效地发现潜在的法布里病患者,提高其筛查效率。

关键词：法布里病肾透析早期诊断高危筛查家系筛查

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肿瘤热疗研究进展

中华放射肿瘤学杂志 2021年第8期30卷 862-866页

作者：赵妍妍许雅思吴琼马胜林张仕蓉浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院转化医学研究中心浙江省临床肿瘤药理与毒理学研究重点实验室310006

肿瘤疾病的热疗安全有效、不良反应低,且与其他治疗方法如放疗、化疗等有协同作用,近年来已成为继手术、放化疗和生物治疗后的一种抗肿瘤治疗的重要辅助手段。热疗主要通过直接对肿瘤细胞产生抑制作用和热诱导的放射增敏效应来发挥提高... 详细信息

肿瘤疾病的热疗安全有效、不良反应低,且与其他治疗方法如放疗、化疗等有协同作用,近年来已成为继手术、放化疗和生物治疗后的一种抗肿瘤治疗的重要辅助手段。热疗主要通过直接对肿瘤细胞产生抑制作用和热诱导的放射增敏效应来发挥提高放化疗效果的作用,故现在热疗正逐渐应用于肿瘤的综合治疗中。本文主要对肿瘤热疗在联合传统化疗、放疗、免疫治疗以及新材料中的应用和研究进展等内容进行综述。

关键词：肿瘤/热疗法肿瘤/化学疗法肿瘤/放射疗法肿瘤/免疫疗法生物材料