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WWP1促进小鼠成釉细胞分化和牙釉质形成的作用研究

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中华口腔医学杂志 2025年第1期60卷 33-42页

作者：林静潇牛佳欣傅晶冯豪刘琰袁国华陈智武汉大学口腔医(学)院口颌系统重建与再生全国重点实验室口腔生物医学教育部重点实验室口腔医学湖北省重点实验室武汉430079

目的研究含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)在小鼠牙釉质形成中的作用。方法对出生后(P)7 d(P7)小鼠切牙和P3.5小鼠下颌第一磨牙牙胚的单细胞RNA测序数据进行可视化, 分析Wwp1在小鼠牙上皮中的整体表达情况。采用免疫组化染色观察W... 详细信息

目的研究含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)在小鼠牙釉质形成中的作用。方法对出生后(P)7 d(P7)小鼠切牙和P3.5小鼠下颌第一磨牙牙胚的单细胞RNA测序数据进行可视化, 分析Wwp1在小鼠牙上皮中的整体表达情况。采用免疫组化染色观察WWP1在不同时期小鼠切牙和下颌第一磨牙牙胚上皮中的表达。构建Wwp1基因敲除(Wwp1 KO)小鼠。分别收集P1、P7 Wwp1 KO及同窝对照小鼠各3只, P14、P28、2和3个月的Wwp1 KO及同窝对照小鼠各6只。采用显微CT分析小鼠磨牙及切牙的牙釉质形成量。采用扫描电镜观察小鼠切牙和磨牙牙釉质断面结构。能谱分析检测切牙断面釉柱表面钙磷含量。采用免疫荧光检测小鼠釉原蛋白(AMELX)表达。培养类成釉上皮细胞LS-8, 转染Wwp1 siRNA或过表达质粒, 采用蛋白质印迹法检测AMELX的表达。结果单细胞测序数据显示, Wwp1在小鼠切牙和下颌第一磨牙牙胚上皮细胞中高表达。免疫组织化学染色显示, 小鼠切牙和磨牙牙胚中WWP1高表达于分泌前期、分泌期、过渡期和成熟期的成釉细胞。不同于对照小鼠, Wwp1 KO小鼠下颌切牙呈现不透明白垩色。Wwp1 KO小鼠磨牙和切牙牙釉质体积[分别为(0.155±0.016)、(0.300±0.017)μm3]较对照小鼠[分别为(0.203±0.062)、(0.418±0.023)μm3]显著降低23.95%(P<0.001)和28.31%(P<0.001)。扫描电镜观察显示, Wwp1 KO小鼠釉柱低平、松散、结构紊乱。能谱分析结果显示, Wwp1 KO小鼠切牙牙釉质断面钙元素的质量百分比[(20.74±0.91)%]和钙磷比(1.93±0.01)均显著低于对照小鼠[分别为(30.30±3.83)%和2.02±0.01](均P<0.001)。免疫荧光结果显示, P1和P7的Wwp1 KO小鼠下颌第一磨牙牙胚成釉细胞中AMELX表达均显著低于对照小鼠(均P<0.001)。在LS-8细胞中敲低或过表达WWP1分别使AMELX蛋白表达下降或上升。结论 WWP1对小鼠牙釉质有促进成釉细胞分化和釉基质矿化的作用, 从而可以促进牙釉质的正常发育。

关键词：牙釉质含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1 泛素蛋白连接酶成釉细胞牙釉质发育缺陷釉原蛋白

基于生物信息学分析胃癌双微体中增强子的调控机制

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遗传 2025年

作者：安梦婷郭冠麟吴杰孙文靖贾学渊哈尔滨医科大学基础医学院医学遗传学教研室中国遗传资源保护与疾病防控教育部重点实验室(哈尔滨医科大学)

胃癌(gastric cancer,GC)在全球范围内的发病率和死亡率均居高位。双微体（double minutes,DMs）是一种染色体外的环状染色体，常携带有癌基因或耐药基因，其与肿瘤发生及耐药性密切相关。为深入探索双微体在胃癌发展中的作用及调控机... 详细信息

胃癌(gastric cancer,GC)在全球范围内的发病率和死亡率均居高位。双微体（double minutes,DMs）是一种染色体外的环状染色体，常携带有癌基因或耐药基因，其与肿瘤发生及耐药性密切相关。为深入探索双微体在胃癌发展中的作用及调控机制，本研究利用生物信息学方法通过分析CCLE细胞系数据库和TCGA实体瘤数据库中的基因组拷贝数变异数据，总结含双微体肿瘤样本的基因组特征，依此特征对胃癌样本进行分类。接着使用FANTOM5数据库、R包“GenomicRanges”、Bedtools工具以及MEME SUITE分析胃癌双微体上增强子及其调控的靶基因的功能。然后利用CIBERSORT包和GDSC药物数据库对TCGA中的含和不含的胃癌样本进行免疫细胞浸润分析和耐药分析。研究显示，胃癌中的双微体基因组特征包括一类拷贝数超过10且长度≥50 kb的基因组片段。双微体增强子的调控作用影响了耐药性和肿瘤免疫，其中增强子-转录因子-靶基因的调控回路扰动也与肿瘤免疫相关。进一步分析发现，双微体增强子调控的靶基因不仅导致了免疫相关基因表达的改变，还使得胃癌样本对常见化疗药物展现出更强的不敏感性，并且耐药相关靶基因在含双微体的胃癌样本中高表达并与不良预后密切相关。综上所述，该项研究为含有双微体的胃癌个体治疗提供了新的见解。

关键词：双微体增强子胃癌肿瘤免疫肿瘤耐药性生物信息学

黄精衍生的纳米囊泡抑制脂多糖诱导的炎症因子产生及其分子机制

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中国生物化学与分子生物学报 2025年第2期41卷 249-259页

作者：曹腾辉龙兴旺刘林王刚林李伟温州医科大学检验医学院(生命科学学院)生物化学与分子生物学系浙江省医学遗传学重点实验室浙江温州325035

植物外泌体样纳米囊泡是指从植物中分离的含有脂质、蛋白质、RNA和各种小分子的球状脂质囊泡,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化和药物载体等方面功效,然而黄精衍生的纳米囊泡的功能尚未见报道。本文利用超速离心和密度梯度离心,首次从黄精中获... 详细信息

植物外泌体样纳米囊泡是指从植物中分离的含有脂质、蛋白质、RNA和各种小分子的球状脂质囊泡,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化和药物载体等方面功效,然而黄精衍生的纳米囊泡的功能尚未见报道。本文利用超速离心和密度梯度离心,首次从黄精中获得了外泌体样纳米囊泡(rhizoma polygonati exosome-like nanovesicles,RP-EVs),并对其表征和抗炎功能进行探究。结果:RP-EVs是主要带负电荷,平均粒径为166.5±3.3 nm的球状脂质囊泡。细胞摄取实验显示,RP-EVs可以被巨噬细胞吞噬。qPCR以及ELISA研究表明,RP-EVs可以抑制脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激引起的白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)(P实验证实,RP-EVs具有一定的抗氧化功能(P实验,将RP-EVs腹腔注射至小鼠体内48 h,主要定位于小鼠的肝和脾。最后,利用腹腔注射LPS构建小鼠急性炎症模型,通过qPCR以及ELISA法检测炎症因子水平,发现RP-EVs可以缓解LPS引起的小鼠血清和脾中的炎症因子的表达(P<0.05)。总之,本论文首次分离获得了RP-EVs,并揭示了其抗炎功能和潜在的机制,将为中药来源的纳米囊泡的功能探究提供一定的参考,为炎症性相关疾病的治疗提供新的策略。

关键词：黄精外泌体样纳米囊泡炎症因子活性氧细胞核因子p65

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单个流体包裹体成分激光剥蚀原位分析方法及其在矿床学中的应用

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大地构造与成矿学 2025年第1期49卷 130-141页

作者：高振丽杨武斌屈潘中国科学院广州地球化学研究所矿物学与成矿学重点实验室/广东省矿物物理与材料研究开发重点实验室广东广州510640

流体包裹体是矿物晶体生长过程中或生长后被捕获的微小珠滴,可以直接保存有关古流体的物理和化学信息,被广泛应用于矿床学研究。单个流体包裹体激光剥蚀分析能够原位测量流体包裹体中的多种元素组成,是有效检测成矿流体组成的重要分析手... 详细信息

流体包裹体是矿物晶体生长过程中或生长后被捕获的微小珠滴,可以直接保存有关古流体的物理和化学信息,被广泛应用于矿床学研究。单个流体包裹体激光剥蚀分析能够原位测量流体包裹体中的多种元素组成,是有效检测成矿流体组成的重要分析手段,目前主要有LA-ICP-MS、LIBS和LA-ICP-AES等方法,其中以LA-ICP-MS的优势最为明显。本文对流体包裹体原位分析过程中包裹体选择策略、包裹体剥蚀方法、检测测量方法及其定量计算原理等方面的研究进展进行综述,并认为光谱和质谱的联用分析技术可以有效地提高分析精确度和准确度,是未来单个流体包裹体原位分析应该重点发展的方向。同时,总结了近年来单个流体包裹体成分分析在矿床学研究中的重要应用和贡献,包括成矿流体的来源、成矿元素的迁移和沉淀过程。

关键词：流体包裹体微区分析激光剥蚀电感耦合等离子质谱仪激光诱导击穿光谱仪

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球霰石在药物装载及控释中的应用

生物化学与生物物理进展 2025年第1期52卷 162-181页

作者：宋晓慧潘明宇徐坚峰黄峥宇潘晴李庆宁宁波大学医学部基础医学院宁波315211 宁波大学医学部浙江省病理与生理学技术研究重点实验室宁波315211

目前,基于纳米材料的药物递送系统是生物医学交叉领域的研究热点,其核心问题之一是载药及控释,关键抓手之一是载体。球霰石是碳酸钙的一种晶型,呈多孔状,有来源丰富、制备容易、成本低、装载程序简单、生物相容性好等诸多突出优点。通... 详细信息

目前,基于纳米材料的药物递送系统是生物医学交叉领域的研究热点,其核心问题之一是载药及控释,关键抓手之一是载体。球霰石是碳酸钙的一种晶型,呈多孔状,有来源丰富、制备容易、成本低、装载程序简单、生物相容性好等诸多突出优点。通过合适的制备策略而得到的球霰石载体,不仅可以高效、稳定地携载药物,还可以获得理想的控释效果。近年来,基于球霰石载药及控释的研究取得了一定的新成果。本文介绍了球霰石的基本特性,特别对载药性能、控释能力及其调控,以及在细胞和动物水平的相关应用研究进展做了归纳、总结,并进行了比较及评述。此外,还对其存在的问题和发展趋势做了探讨。

关键词：球霰石载药药物控释药物递送纳米多孔材料

太湖底泥来源吸水链霉菌HU216代谢产物及其抗真菌活性

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农药学学报 2025年第1期27卷 116-125页

作者：何云飞王瑞俊朱礼显陈春同齐欢吴漪张立钦王继栋张绍勇湖州师范学院浙江省作物病虫生物学与生态调控重点实验室浙江湖州313000

太湖底泥中分离得到的吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)HU216具有广谱抗植物病原真菌活性。为进一步明确其活性代谢产物,通过硅胶、凝胶柱层析及制备高效液相色谱等方法对菌株发酵粗提物进行分离纯化,得到6个单体化合物;利用质... 详细信息

太湖底泥中分离得到的吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)HU216具有广谱抗植物病原真菌活性。为进一步明确其活性代谢产物,通过硅胶、凝胶柱层析及制备高效液相色谱等方法对菌株发酵粗提物进行分离纯化,得到6个单体化合物;利用质谱和核磁共振谱(1D,2D)等进行结构表征,鉴定为子囊霉素(ascomycin,1)、3-(1-羟丙基)苯酚(3-(1-hydroxypropyl)phenol,2)、阿比利醚(abierixin,3)、(2E,4Z)-8-羟基癸-2,4-二烯酸((2E,4Z)-8-hydroxydeca-2,4-dienoic acid,4)、库瓦烯(cuevaene A,5)和29-O-尼日利亚菌素(29-O-methylnigericin,6),并采用滤纸片法测定其对6种植物病原真菌的活性。活性测试结果表明,在供试浓度为60μg/滤纸片时,化合物1~6均表现出一定的抗真菌活性。其中化合物1~3对番茄灰霉病病原菌的抑制率分别为85.83%、75.74%和70.15%;对苹果树腐烂病病原菌的抑制率分别为89.38%、76.63%和62.25%;对玉米圆斑病病原菌的抑制率分别为63.40%、64.22%和58.50%,活性均高于阳性对照戊唑醇(36.76%);对番茄早疫病病原菌的抑制率分别为44.61%、34.31%和43.30%,其中化合物1和3的活性高于阳性对照戊唑醇(38.54%),表现出较好的抗真菌作用。对番茄果实接种灰霉病后的防治效果测试表明,化合物1~3能有效保护番茄果实免受灰霉病危害,具有开发为新型农用抗生素的应用价值。

关键词：吸水链霉菌代谢产物结构鉴定抗真菌活性

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烟盲蝽对丽蚜小蜂寄生效果的影响

应用昆虫学报 2025年

作者：彭玉帛田艳丽刘树生刘银泉浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室浙江省作物病虫生物学与生态调控重点实验室

【目的】了解捕食性天敌烟盲蝽Nesidiocoris tenuis和寄生性天敌丽蚜小蜂Encarsia formosa的种间互作关系，优化2种天敌联合应用方式以提高对烟粉虱Bemisia tabaci的防控效果。【方法】通过不同的天敌释放方式进行捕食观察和2种烟粉虱... 详细信息

【目的】了解捕食性天敌烟盲蝽Nesidiocoris tenuis和寄生性天敌丽蚜小蜂Encarsia formosa的种间互作关系，优化2种天敌联合应用方式以提高对烟粉虱Bemisia tabaci的防控效果。【方法】通过不同的天敌释放方式进行捕食观察和2种烟粉虱密度的种群试验，测定烟盲蝽对被丽蚜小蜂寄生后不同发育时间的烟粉虱若虫的捕食作用和偏好性，并评估烟盲蝽对丽蚜小蜂寄生率及控害效果的影响。【结果】烟盲蝽可以且偏好捕食被丽蚜小蜂寄生后寄生蜂处于卵期和幼虫期的烟粉虱若虫，而随着丽蚜小蜂发育至蛹期，烟盲蝽对丽蚜小蜂寄生的烟粉虱若虫的取食率从85%急剧减少到11%。在2种烟粉虱种群密度下，采取同时释放以及间隔10d先后释放丽蚜小蜂和烟盲蝽2种释放方式，烟盲蝽对丽蚜小蜂寄生率和控害效果影响较小；间隔3 d先后释放丽蚜小蜂和烟盲蝽，烟盲蝽会明显降低丽蚜小蜂的寄生率和控害效果。【结论】烟盲蝽对丽蚜小蜂的捕食量会随后者的发育阶段而变化，在联合应用这2种天敌对烟粉虱进行防控时，应避免丽蚜小蜂释放后3 d释放烟盲蝽，有助于减少烟盲蝽对丽蚜小蜂的捕食，增强对烟粉虱的联合控害效果。

关键词：烟盲蝽丽蚜小蜂烟粉虱种间互作集团内捕食

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牛早期胚胎丢失原因及干预措施研究进展

中国畜牧杂志 2025年

作者：余昊天王少华王华南张坤浙江省奶牛遗传改良与乳品质研究重点实验室浙江大学动物科学学院

牛的繁殖率低，以奶牛为例，母牛第一情期受胎率约为35%。牛的低繁殖率已成为制约养牛业生产效率和优良品种推广的关键因素，其中胚胎丢失问题尤为突出。胚胎丢失是指由于胚胎发育不正常导致的死亡或流产，给养牛业带来犊牛生产、品种... 详细信息

牛的繁殖率低，以奶牛为例，母牛第一情期受胎率约为35%。牛的低繁殖率已成为制约养牛业生产效率和优良品种推广的关键因素，其中胚胎丢失问题尤为突出。胚胎丢失是指由于胚胎发育不正常导致的死亡或流产，给养牛业带来犊牛生产、品种推广等方面的经济损失。胚胎丢失多发生在胚胎发育的早期阶段，并受多因素影响。因此，采取有针对性的有效措施对减少胚胎丢失、提升经济回报具有重要意义。本文侧重奶牛，概述了牛早期胚胎发育的生理机制，分析了环境、疾病、营养、繁殖管理和遗传育种等5个方面对牛胚胎丢失的影响，并提出相应的解决策略，以期为胚胎丢失问题提供指导性建议，推动养牛业持续发展。

关键词：奶牛早期胚胎丢失胚胎发育热应激繁殖管理

猴头菇纳米囊泡制备、结构表征及抗氧化活性分析

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食品工业科技 2025年第2期46卷 218-230页

作者：杨雪丽牛犇陈杭君吴伟杰王冠楠房祥军穆宏磊郜海燕中国计量大学生命科学学院浙江杭州310018 浙江省农业科学院食品科学研究所农业农村部果品采后处理重点实验室浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室中国轻工业果蔬保鲜与加工重点实验室浙江杭州310021

目的:优化猴头菇纳米囊泡的制备方法,考察其抗氧化活性以及对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用差速离心与蔗糖密度梯度离心联用法制备猴头菇纳米囊泡(Hericium erinaceus-derived extracellular nanovesicles,HEDENVs),采用单... 详细信息

目的:优化猴头菇纳米囊泡的制备方法,考察其抗氧化活性以及对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用差速离心与蔗糖密度梯度离心联用法制备猴头菇纳米囊泡(Hericium erinaceus-derived extracellular nanovesicles,HEDENVs),采用单因素实验和响应面试验对纳米囊泡的制备条件进行优化,并用激光纳米粒度仪与透射电镜对其粒径、Zeta电位和形貌进行表征;利用液相色谱质谱联用仪(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)对纳米囊泡进行脂质组学和蛋白质组学分析;通过DPPH、ABTS^(+)和O_(2)^(-)自由基清除率评价纳米囊泡的抗氧化活性;H_(2)O_(2)构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型,采用激光共聚焦显微镜测定细胞中ROS含量变化。结果:纳米囊泡最佳制备条件:蔗糖浓度25%,离心时间2 h,离心转速86000 r/min,此时纳米囊泡的浓度为402.24μg/mL;纳米囊泡为具有膜结构的小泡,粒径110.7±16.9 nm,PDI 0.551,Zeta电位-14.2 mV;基于脂质组学和蛋白质组学分析,鉴定出纳米囊泡中大约含有346种脂质与52种蛋白质。体外抗氧化结果表明,400μg/mL纳米囊泡的DPPH自由基清除率为94.79%、ABTS^(+)自由基清除率为96.67%、O_(2)^(-)自由基清除率为96.83%;在H_(2)O_(2)构建的Caco-2细胞氧化损伤模型中,纳米囊泡能显著减少损伤细胞中ROS的产生。结论:体外多种抗氧化评价方法表明纳米囊泡具有一定的抗氧化活性。

关键词：猴头菇纳米囊泡工艺优化结构表征组学分析 Caco-2细胞抗氧化

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