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天天胶囊及其原料芦荟在大鼠体内的存在形式研究

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中国中药杂志 2024年第6期49卷 1641-1660页

作者：张静郝北泉李寅庆王光路徐风刘广学尚明英蔡少青北京大学药学院生药学研究室北京100191 河北御芝林药业有限公司河北石家庄050035

为了阐明组方药材芦荟对天天胶囊体内存在形式(原形成分和代谢产物)的贡献,首次对芦荟、天天胶囊及去芦荟天天胶囊在大鼠体内的存在形式进行了研究。大鼠灌胃给药,每天1次,连续灌胃7 d。收集给药7 d的全部尿液和粪便,最后一次灌胃给药... 详细信息

为了阐明组方药材芦荟对天天胶囊体内存在形式(原形成分和代谢产物)的贡献,首次对芦荟、天天胶囊及去芦荟天天胶囊在大鼠体内的存在形式进行了研究。大鼠灌胃给药,每天1次,连续灌胃7 d。收集给药7 d的全部尿液和粪便,最后一次灌胃给药后分别于0.5、1、1.5 h收集血液。采用UHPLC⁃Q⁃TOF⁃MS检测和鉴定生物样品中的存在形式,分别鉴定了芦荟给药组、天天胶囊给药组、去芦荟天天胶囊给药组生物样品中的原形成分34、28、2个及代谢产物64、94、0个。代谢反应类型主要为甲基化、氢化、羟基化、脱羟基、葡萄糖醛酸结合、硫酸结合等。该研究首次阐明了芦荟、天天胶囊、去芦荟天天胶囊在大鼠体内的存在形式和部分代谢途径,为进一步揭示其显效形式奠定基础,并对中药芦荟和天天胶囊的作用机制及质量控制研究具有重要意义。

关键词：天天胶囊芦荟 UHPLC⁃Q⁃TOF⁃MS 体内代谢

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HPLC法测定替米沙坦中的有关物质

药物分析杂志 2024年第1期44卷 126-133页

作者：王春张素珍陶鸿珠彭亚赵斌锋浙江金立源药业有限公司绍兴312369

目的:建立高效液相色谱法测定替米沙坦原料药中的有关物质。方法:采用Waters Symmetry Shield RP8(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)色谱柱,以0.1%磷酸溶液(用三乙胺调pH至3.0)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长23... 详细信息

目的:建立高效液相色谱法测定替米沙坦原料药中的有关物质。方法:采用Waters Symmetry Shield RP8(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)色谱柱,以0.1%磷酸溶液(用三乙胺调pH至3.0)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长230 nm。结果:替米沙坦与9种已知杂质色谱峰之间的分离度均>1.5,定量限均0.999 5)。杂质Ⅰ~杂质Ⅸ的平均回收率分别为93.8%、99.8%、97.5%、99.2%、99.8%、98.3%、98.4%、99.2%、99.7%,RSD均<2.0%。改变流速、柱温、波长、流动相比例及pH后,对有关物质的检测结果无影响。3批替米沙坦中最大单杂含量均为0.02%,杂质总量<0.10%。结论:经方法学验证,本方法专属性强,灵敏、精密,准确度高,可用于替米沙坦原料药有关物质的测定。

关键词：替米沙坦原料药有关物质药典标准质量控制高效液相色谱法梯度洗脱

基于聚合酶链式反应⁃限制性内切酶长度多态性方法鉴别鹿角(马鹿)药材及其配方颗粒

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中国中药杂志 2024年第6期49卷 1517-1525页

作者：周海琴海丰胡剑虹李松陈盛君张开雪程梦娟江阴天江药业有限公司江苏江阴214434

鹿角为鹿科马鹿Cervus elaphus或梅花鹿C.nippon已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。目前市场上鹿角基原混杂,为快速准确地鉴别鹿角多基原及混伪品,研究通过比较马鹿、梅花鹿及其混伪品线粒体条形码Cytb基因序列差异,筛选获得鹿角... 详细信息

鹿角为鹿科马鹿Cervus elaphus或梅花鹿C.nippon已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。目前市场上鹿角基原混杂,为快速准确地鉴别鹿角多基原及混伪品,研究通过比较马鹿、梅花鹿及其混伪品线粒体条形码Cytb基因序列差异,筛选获得鹿角的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计鹿角特异性鉴别引物dishmy⁃F及dishmy⁃R,分别采集鹿角及其混伪品,建立鹿角配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR反应体系,对影响该方法重复性的Taq酶种类、PCR仪型号进行耐受性和适用性考察,再使用限制性内切酶MseⅠ对梅花鹿与马鹿的扩增产物进行酶切。结果显示,当退火温度为56℃,循环次数为35时,鹿角药材、标准汤剂及其配方颗粒经PCR反应及凝胶电泳后,马鹿可在近100 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带,且马鹿的条带较梅花鹿短约60 bp,而其他混伪品如驼鹿、驯鹿、白尾鹿、黑尾鹿、狍子、白唇鹿等及阴性对照均无条带。该研究建立的PCR⁃RFLP方法可快速准确的鉴别出鹿角药材、标准汤剂和配方颗粒中的马鹿成分,并可区分梅花鹿和其他混伪品,同时为其他中药配方颗粒质量标准研究提供了理论依据。

关键词：鹿角聚合酶链式反应⁃限制性内切酶长度多态性方法(PCR⁃RFLP) 分子鉴别

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仿刺参肠高抗凝血活性多糖筛选及其结构解析

食品科学 2024年

作者：毕英豪都红芳贾爱荣王凌英张绵松崔婷婷徐振鲁刘雪齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所威海人生药业集团股份有限公司山东省海洋功能食品技术创新中心威海人生药业有限公司

海参多糖的研究主要集中在体壁多糖，参肠多糖的研究相对较少。本论文以仿刺参肠为原料，提取得到粗多糖，经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱柱分离，按照洗脱液离子强度从低到高得到3 种多糖SCG1-SCG3。采用PMP柱前衍生高效液相... 详细信息

海参多糖的研究主要集中在体壁多糖，参肠多糖的研究相对较少。本论文以仿刺参肠为原料，提取得到粗多糖，经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱柱分离，按照洗脱液离子强度从低到高得到3 种多糖SCG1-SCG3。采用PMP柱前衍生高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）对3 种多糖进行单糖组成、分子量分析。采用活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、纤维蛋白原（Fibrinogen，FIB）含量评价多糖的抗凝血活性，筛选高抗凝血活性多糖并通过理化性质分析、红外光谱分析、核磁共振波谱分析对高抗凝血活性多糖进行结构分析。结果显示，仿刺参肠粗多糖的提取得率为2.75%，经阴离子交换色谱柱分离得到的3 种多糖，按照SCG1-SCG3的顺序，岩藻糖的比例逐渐升高，SCG3时，仅含有岩藻糖；分子量逐渐升高，分别为25.6 kDa，112.4 kDa，171.5 kDa，其中SCG3的分子量最大。3 种多糖对APTT均有显著的延长作用，按照SCG1-SCG3的顺序，延长作用逐渐增强，SCG3的延长作用最强且高于阳性对照低分子量肝素，20 μg/mL时，APTT已达500 s以上；3 种多糖对PT的延长作用有显著差别，SCG1-SCG2对PT的延长作用不明显，SCG3在浓度为200 μg/mL时，PT可达500 s以上；SCG1对TT几乎没有延长作用，SCG2-SCG3对TT均有显著延长作用，且SCG3的延长作用最明显，浓度为50 μg/mL时，TT已达500 s以上。此外，浓度在200 μg/mL以内时，SCG3即可显著降低FIB的含量，因此，SCG3是一种多机制高抗凝血活性多糖。结构分析结果显示，SCG3的总糖含量为50.36%，蛋白含量为0.67%，硫酸基含量为28.31%，表明SCG3是一种硫酸化岩藻多糖，即岩藻聚糖硫酸酯。红外光谱、核磁共振波谱进一步验证SCG3是一种高纯度岩藻聚糖硫酸酯，主要由糖基→3)-α-l-Fucp-（1→，→3）-α-l-Fucp(2SO4)-（1→及→3）-α-l-Fucp(2，4SO4)-(1→组成。

关键词：仿刺参参肠抗凝血岩藻聚糖硫酸酯结构解析

^(1)H-NMR定量测定黄芪注射液中亲水性成分和疏水性成分

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中草药 2024年第10期55卷 3321-3330页

作者：杨嘉誉徐绍静张琪应旭辉李文竹潘坚扬瞿海斌浙江大学药学院药物信息学研究所浙江杭州310058 正大青春宝药业有限公司浙江杭州310023

目的建立黄芪注射液中亲水性成分和疏水性成分的^(1)H-NMR定量分析方法。方法以10%氘代水(10%D2O)和氘代甲醇(CD3OD)为氘代溶剂制备黄芪注射液亲水性成分和疏水性成分的^(1)H-NMR样品。使用Bruker Avance Ⅲ 600型核磁共振波谱仪采集^(1... 详细信息

目的建立黄芪注射液中亲水性成分和疏水性成分的^(1)H-NMR定量分析方法。方法以10%氘代水(10%D2O)和氘代甲醇(CD3OD)为氘代溶剂制备黄芪注射液亲水性成分和疏水性成分的^(1)H-NMR样品。使用Bruker Avance Ⅲ 600型核磁共振波谱仪采集^(1)H-NMR图谱,具体实验参数如下:Noesygppr1D脉冲序列;温度为298 K,数据点32 K,采集时间(AQ)为2.980 s,脉冲宽度(SW)为7211.54 Hz,弛豫延迟时间(D1)分别为15.0 s和20.0 s,频率偏移(O1)分别为2816.65 Hz和2930.31 Hz,接收器增益(RG)值为57,扫描次数(NS)32次。结果在^(1)H-NMR图谱中归属出33种成分,分别是异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、乳酸、焦谷氨酸、天冬酰胺、γ-氨基丁酸、脯氨酸、甲酸、乙酸、富马酸、苹果酸、琥珀酸、丙二酸、蔗糖、果糖、半乳糖、葡萄糖、胆碱、甜菜碱、葫芦巴碱、尿苷、腺苷、胞苷、鸟苷、腺嘌呤、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-葡萄糖苷以及异黄烷苷。对其中27种化学成分(异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、乳酸、焦谷氨酸、天冬酰胺、γ-氨基丁酸、脯氨酸、甲酸、乙酸、富马酸、苹果酸、琥珀酸、丙二酸、蔗糖、果糖、葡萄糖、胆碱、甜菜碱、葫芦巴碱、尿苷、腺苷、鸟苷、腺嘌呤、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷)进行定量,可定量的成分占注射液固含量90%以上。该方法的精密度、重复性、样品稳定性和耐用性良好,各个成分线性关系良好,r 2大于0.9990,加样回收回收率为98.19%~101.40%。结论建立了一种简单、快速、可靠的^(1)H-NMR定量方法用于测定黄芪注射液中的亲水性成分和疏水性成分,为黄芪注射液的质量评价提供了新的分析手段。

关键词：质子核磁共振黄芪注射液含量测定中药注射剂亲水性成分疏水性成分 ^(1)H-NMR定量分析方法异亮氨酸缬氨酸丙氨酸乳酸焦谷氨酸天冬酰胺 γ-氨基丁酸脯氨酸甲酸乙酸富马酸苹果酸琥珀酸丙二酸蔗糖果糖葡萄糖胆碱甜菜碱葫芦巴碱尿苷腺苷鸟苷腺嘌呤黄芪皂苷Ⅲ 黄芪甲苷毛蕊异黄酮苷

植物乳杆菌发酵黑木耳多糖的结构表征及降血糖机制研究

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食品与发酵工业 2024年

作者：何荣军胡溢鑫钟浩沈佶儿刘世柱孙培龙浙江工业大学食品科学与工程学院浙江方格药业有限公司

为探究植物乳杆菌N1发酵对黑木耳多糖的影响，采用乙醇沉淀提取多糖，经Sevage法脱蛋白，DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-300柱分离纯化，得到了纯化的黑木耳发酵多糖FAAP-2-1（fermented Auricularia auricula-judae polysaccharide-2-1，FAAP-2-1），建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型与斑马鱼糖尿病模型进行降血糖活性进行研究，利用实时荧光定量PCR法对其降血糖机制进行研究。结果发现，FAAP-2-1的相对分子质量为1.48×106Da，主要由半乳糖、甘露糖、木糖、岩藻糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸8种单糖组成，其比例为4.27:55.27:0.36:1.90:16.34:1.54:2.51:17.81。细胞实验和动物实验表明，FAAP-2-1可以恢复IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗量，使糖尿病斑马鱼血糖下降73.52%，上调糖尿病相关基因AKT、PI3K、IRS和GLUT2的相对表达量，通过PI3K/AKT信号通路恢复和改善糖尿病斑马鱼葡萄糖代谢异常的症状，改善胰岛素抵抗。

关键词：黑木耳多糖植物乳杆菌N1 发酵降血糖活性斑马鱼模型

代谢工程改造解脂耶氏酵母高效合成赤藓糖醇研究进展

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生物工程学报 2024年第3期40卷 665-686页

作者：黄良刚肖博文王文佳李雯张为宏周俊平蔡雪张博柳志强郑裕国浙江工业大学生物工程学院浙江杭州310014 浙江华康药业股份有限公司浙江衢州324302

赤藓糖醇是一种由微生物在高渗胁迫条件下生产的新型四碳糖醇,是良好的代糖产品,同时也是合成多种C4化合物(1,3-丁二烯、1,4-丁二醇、2,5-二氢呋喃等)的平台化合物。与其他多元醇相比,其主要通过生物发酵法生产,因此更具挑战性。解脂耶... 详细信息

赤藓糖醇是一种由微生物在高渗胁迫条件下生产的新型四碳糖醇,是良好的代糖产品,同时也是合成多种C4化合物(1,3-丁二烯、1,4-丁二醇、2,5-二氢呋喃等)的平台化合物。与其他多元醇相比,其主要通过生物发酵法生产,因此更具挑战性。解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)是合成赤藓糖醇的首选底盘,成为发酵法生产赤藓糖醇的研究热点。目前解脂耶氏酵母工业化生产赤藓糖醇的过程中还存在着亟需突破的瓶颈问题,如合成代谢弱、副产物多以及工业属性不高等。近年来,根据产业化需求定制高版本底盘菌株取得了一定进展,如以葡萄糖和甘油为底物,利用代谢工程改造的解脂耶氏酵母合成赤藓糖醇的最高水平分别达196 g/L和150 g/L,但难以进一步突破菌株生产上限。本文综述了解脂耶氏酵母代谢工程改造合成赤藓糖醇的研究进展,从代谢合成途径、模块化代谢工程改造以及辅助策略提升工业属性等方面,系统分析了解脂耶氏酵母发酵法生产赤藓糖醇的代谢路径及改造策略,为增强解脂耶氏酵母生产赤藓糖醇的研究工作提供一定的研究思路。

关键词：解脂耶氏酵母赤藓糖醇代谢工程基因编辑工业属性提升

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中药库拉索芦荟化学成分的液质定性分析

广西植物 2024年第2期44卷 313-326页

作者：张静郝北泉李寅庆皮国沛徐风刘广学尚明英蔡少青北京大学药学院生药学研究室北京100191 河北御芝林药业有限公司石家庄050035

为阐明中药库拉索芦荟(Aloe barbadensis)叶的汁液浓缩干燥物的化学成分,该研究采用HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MS n技术,结合对照品对比和文献检索,对其进行系统的定性分析。以水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),质... 详细信息

为阐明中药库拉索芦荟(Aloe barbadensis)叶的汁液浓缩干燥物的化学成分,该研究采用HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MS n技术,结合对照品对比和文献检索,对其进行系统的定性分析。以水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),质谱使用ESI离子源,采用负离子模式分析液质数据。结果表明:(1)首次阐明中药库拉索芦荟中蒽醌类(芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)、蒽酮类(芦荟素A、芦荟糖苷A)、色酮类(芦荟新苷D、7-O-甲基芦荟新苷A、altechromone A、芦荟苦素、芦荟新苷G、芦荟新苷C)、α-吡喃酮类(芦荟宁A、芦荟宁B)四类成分的主要化合物的裂解途径。蒽醌类化合物的裂解途径以失去CO_(2)和CO为主,蒽酮类化合物的裂解途径以己糖苷的裂解和失去CO为主,色酮类化合物的裂解途径以己糖苷的裂解和酯基的水解为主,α-吡喃酮类的裂解途径主要包括己糖苷的裂解、CO_(2)和H_(2)O的丢失等。(2)共检测到168种化学成分,参考相关文献、数据库和对照品数据共鉴定/指认了其中的78种化学成分,包括3种蒽醌类成分、29种蒽酮类成分、35种色酮类成分、7种α-吡喃酮类成分、4种其他类成分;78种化学成分中有23种为新发现的库拉索芦荟叶的化学成分,其中aloinoside D、isoeleutherin、ethylidene-aloenin等14种成分具有抗菌、抗炎或清除自由基等药理活性。该研究结果进一步丰富了中药库拉索芦荟的化学成分信息,为芦荟的药效物质基础研究及质量控制奠定了基础。

关键词：芦荟 HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MS^(n) 蒽醌蒽酮色酮化学成分裂解途径

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格列齐特缓释片的剂量倾泻研究

中国医药工业杂志 2024年第4期55卷 565-570页

作者：刘梦婷孙国祥沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016 华夏生生药业(北京)有限公司北京102600

通过在0.1 mol/L盐酸中添加不同浓度乙醇和提高转速2种方法,评估格列齐特(1)缓释片自制制剂和参比制剂发生剂量倾泻的风险。采用HPLC法进行检测,并对检测方法进行了方法学验证。研究结果显示,参比制剂与自制制剂在加入不同浓度乙醇的盐... 详细信息

通过在0.1 mol/L盐酸中添加不同浓度乙醇和提高转速2种方法,评估格列齐特(1)缓释片自制制剂和参比制剂发生剂量倾泻的风险。采用HPLC法进行检测,并对检测方法进行了方法学验证。研究结果显示,参比制剂与自制制剂在加入不同浓度乙醇的盐酸及提高转速后的释放行为基本一致,相似因子(f_(2))均大于50,且均无剂量倾泻现象。此外,1在含乙醇的盐酸中降解非常迅速,1 h降解约40%,产生杂质A和杂质C,且杂质含量已远超质量标准规定的可接受限度,应引起重视。在服用1缓释片时应禁止饮酒,避免因杂质超标而增加未知的安全风险。

关键词：剂量倾泻降解格列齐特缓释片体外释放