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肝内胆管癌类器官模型的建立与应用

中华外科杂志 2024年第4期62卷 346-352页

作者：刘洋梁霄浙江大学医学院附属邵逸夫医院普外科杭州310020

肝内胆管癌(ICC)指起源于肝内二级胆管及其分支的胆管癌类型。作为一种常见的肝脏恶性肿瘤,ICC诊断与治疗的难点在于肿瘤的高度异质性和易耐药性。传统的药物筛选和肿瘤机制的研究局限于二维细胞水平及患者来源的肿瘤异种移植(PDX)模型... 详细信息

肝内胆管癌(ICC)指起源于肝内二级胆管及其分支的胆管癌类型。作为一种常见的肝脏恶性肿瘤,ICC诊断与治疗的难点在于肿瘤的高度异质性和易耐药性。传统的药物筛选和肿瘤机制的研究局限于二维细胞水平及患者来源的肿瘤异种移植(PDX)模型。但细胞模型无法还原肿瘤的异质性,PDX模型受限于成本高、耗时长等缺点,无法在临床上普及应用。为了解决上述两种模型的局限性,有研究者在二维细胞的基础上研发出类器官模型。类器官模型集合了以上两种培养方式的优点,在肿瘤研究方面具有独特的优势,为肿瘤发生发展的研究和治疗带来了新思路。这篇综述将主要讨论ICC类器官领域的最新研究进展,重点关注现有的培养方案及其在精准医疗和生物样本库建立中可能的应用。

关键词：胆管肿瘤类器官精准医疗药物筛选

自固定自脱型胰肠吻合引流支架应用于胰肠吻合术的动物实验研究

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中华外科杂志 2024年第7期62卷 697-702页

作者：刘小龙蒋桂星张一卓董昕俣洪德飞浙江大学医学院附属邵逸夫医院普外科杭州浙江大学医学院杭州

目的评估自固定自脱型胰肠吻合引流支架应用于胰肠吻合术的安全性和有效性。方法动物实验研究。基于胰肠吻合"瘘管愈合"学说创建的洪氏胰肠吻合技术研制自固定自脱型胰肠吻合引流支架, 动物实验前已完成10项生物相容性体外试验。实验于2... 详细信息

目的评估自固定自脱型胰肠吻合引流支架应用于胰肠吻合术的安全性和有效性。方法动物实验研究。基于胰肠吻合"瘘管愈合"学说创建的洪氏胰肠吻合技术研制自固定自脱型胰肠吻合引流支架, 动物实验前已完成10项生物相容性体外试验。实验于2022年2—9月完成。取25只普通级巴马小型猪, 采用丝线双重结扎胰腺颈部, 使结扎远端主胰管扩张建模。将建模成功的23只巴马猪采用分层随机法分为三组, 即胰肠吻合引流支架组(11只)、胰管对空肠黏膜手工缝合组(8只)、假手术组(4只)。比较支架组和手工缝合组的胰肠吻合时间、术后腹腔引流液淀粉酶浓度及胰肠吻合口承受的压力值。通过腹部X线片观察自固定自脱型胰肠吻合引流支架脱落时间。通过术后病理学检查观察胰肠吻合口愈合时间、愈合方式和狭窄率。采用独立样本t检验分析定量资料;采用Pearsonχ2检验分析分类资料。结果支架组和手工缝合组的胰管直径和胰腺质地、胰肠吻合时间、术后腹腔引流液淀粉酶浓度和胰肠吻合口承受压力值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。腹部X线检查结果显示, 引流支架组术后21 d胰肠吻合引流支架逐渐脱落排除体外, 术后3个月后支架均脱落。大体和镜下病理学检查结果显示, 支架组术后7 d吻合口愈合;手工缝合组术后14 d吻合口愈合。支架组和手工缝合组术后35 d内的吻合口狭窄率分别为2/8和6/8(χ2=4.000, P=0.046)。结论自固定自脱型胰肠吻合引流支架可安全有效地用于巴马小型猪的胰肠吻合术中, 与手工缝合法胰肠吻合技术相比, 吻合口愈合时间可能更早, 狭窄率可能更低。

关键词：外科手术手术后并发症胰肠吻合瘘管愈合吻合口狭窄动物实验

二氢丹参酮通过抑制Akt信号通路激活来增强索拉非尼对肝细胞癌的抗癌作用

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生物化学与生物物理进展 2024年第6期51卷 1445-1457页

作者：王伟贾胜楠樊孙甫徐力善浙江医院肛肠外科杭州310030 浙江医院普通外科杭州310030 哈尔滨医科大学附属第四医院肝胆外科哈尔滨150001

目的索拉非尼是唯一被批准用于治疗晚期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的一线药物。然而索拉非尼的耐药性使得治疗效果并不理想。尽管索拉非尼耐药性的机制尚不清楚,但在HCC中的耐药性可能通过Akt信号通路的激活而发生。二氢... 详细信息

目的索拉非尼是唯一被批准用于治疗晚期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的一线药物。然而索拉非尼的耐药性使得治疗效果并不理想。尽管索拉非尼耐药性的机制尚不清楚,但在HCC中的耐药性可能通过Akt信号通路的激活而发生。二氢丹参酮(dihydrotanshinone,DHT)是中药丹参的亲脂性成分,具有多种抗肿瘤活性并可抑制Akt活化。DHT联合索拉非尼治疗HCC的作用机制尚未明确。本文旨在研究DHT是否可增强索拉非尼对HCC的抗癌活性。方法采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞仪检测索拉非尼和DHT对HCC细胞Huh7和HepG2细胞活力、细胞凋亡和药物敏感性的影响。通过蛋白质印迹分析Akt、P-Akt、Caspase3、GSK-3β、P-GSK3-β、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、P-S6K、细胞周期蛋白D1、Bcl-xl、Bcl-2和Bax的表达水平。使用单因素方差分析(analysis of variance,ANOVA)和Dunnett检验对所有数据进行统计学比较。采用SPSS 20.0统计软件进行统计分析。结果DHT通过减少Akt的激活来抑制HCC细胞的增殖和促进细胞凋亡。DHT抑制Akt下游因子的表达和激活,包括GSK-3β和S6K,这些因子调节细胞凋亡反应,并被索拉非尼激活和上调。索拉非尼和DHT均下调细胞周期蛋白D1的表达,DHT上调Bax的表达并下调Bcl-2和Bcl-xl的表达。索拉非尼对Bcl-2家族蛋白质表达的影响不大。结论DHT可能通过抑制Akt信号通路的激活来增强索拉非尼的HCC细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用。

关键词：二氢丹参酮索拉非尼 Akt 肝细胞癌细胞凋亡

基于临床可视化参数建立肺磨玻璃结节生长预测模型

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中国医学科学院学报 2024年第2期46卷 169-175页

作者：周莹莹陈志军浙江省舟山医院胸心外科浙江舟山316021

目的应用三维重建技术提取临床可视化参数,建立持续存在的肺磨玻璃结节(GGN)生长预测模型,并验证该模型对GGN生长的预测效能。方法回顾性分析2015年3月至2022年12月浙江省舟山医院肺结节联合门诊规律随访的肺GGN共354例。利用3D Slicer... 详细信息

目的应用三维重建技术提取临床可视化参数,建立持续存在的肺磨玻璃结节(GGN)生长预测模型,并验证该模型对GGN生长的预测效能。方法回顾性分析2015年3月至2022年12月浙江省舟山医院肺结节联合门诊规律随访的肺GGN共354例。利用3D Slicer软件半自动分割提取结节的定量影像学特征,根据随访结果将结节分为稳定组和增长组,按7∶3比例采用简单随机法分为训练集和测试集。采用临床和影像学特征参数建立预测模型,并在验证集中检验预测模型的预测效能。结果共纳入男119例、女235例,中位年龄55.0(47.0,63.0)岁,平均随访(48.4±16.3)个月,训练集247例、验证集107例。二元Logistic回归分析结果表明年龄(95%CI=1.010~1.092,P=0.015)和质量(95%CI=1.002~1.067,P=0.035)是影响结节增长的独立预测因素。由于结节质量M=V×(平均CT值+1000)×0.001(M为质量,V为体积),球体体积V=3/4πR^(3)(R为半径),因此,最终选择年龄、二维直径、平均CT值构建logit回归风险预测模型,预测模型为:ln[P/(1-P)]=-1.300+0.043×年龄+0.257×二维直径+0.007×平均CT值。应用拟合优度检验检验模型对验证集中观察数据的拟合程度(χ^(2)=4.515,P=0.808),预测模型校验图显示,受试者工作特征曲线下面积为0.702。结论患者年龄和结节质量是促进肺部GGN增长的独立危险因素,本研究建立并验证了预测GGN生长可能性的模型,可为后续GGN管理策略的制定提供有效依据。

关键词：肺癌肺磨玻璃结节三维重建建模预测

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沉默信息调节因子1激活剂SRT1720减轻大鼠急性颅脑损伤的机制

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中国组织工程研究 2024年第28期28卷 4447-4454页

作者：钱龙杰苏文利朱文献王毅鑫上海市普陀区中心医院急诊外科上海市310000

背景:有研究显示在急性颅脑损伤小鼠模型中,以药物激活沉默信息调节因子1的转录和翻译水平后能明显升高脑组织中沉默信息调节因子1的表达,降低脑组织炎症应激和氧化应激水平,改善神经功能。目的:探讨腹腔注射沉默信息调节因子1激活剂SRT... 详细信息

背景:有研究显示在急性颅脑损伤小鼠模型中,以药物激活沉默信息调节因子1的转录和翻译水平后能明显升高脑组织中沉默信息调节因子1的表达,降低脑组织炎症应激和氧化应激水平,改善神经功能。目的:探讨腹腔注射沉默信息调节因子1激活剂SRT1720减轻大鼠急性颅脑损伤的机制。方法:取90只SD大鼠,采用随机数字表法分为3组,每组30只:假手术组不造模;模型组、激活剂组建立急性颅脑损伤模型,6 h后假手术组、模型组、激活剂组分别腹腔注射二甲亚砜溶液、二甲亚砜溶液、SRT1720,1次/d,连续注射28 d。设定取材时间点,检测大鼠神经功能、脑组织含水量、脑组织氧化应激与炎症反应、脑组织形态、细胞凋亡与血管新生以及脑组织中沉默信息调节因子1蛋白表达。结果与结论:①注射7,14,28 d时,与假手术组比较,模型组大鼠改良神经功能缺损评分、脑组织含水量及细胞凋亡率均升高(P<0.05);与模型组比较,激活剂组大鼠改良神经功能缺损评分、脑组织含水量及细胞凋亡率均降低(P<0.05);②注射7,14,28 d时,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中活性氧自由基、髓过氧化物酶水平升高(P<0.05),血清中丙二醛、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平升高(P<0.05),血清中超氧化物歧化酶水平降低(P<0.05);与模型组比较,激活剂组大鼠大鼠脑组织中活性氧自由基、髓过氧化物酶水平降低(P<0.05),血清中丙二醛、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平降低(P<0.05),血清中超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05);③注射7,14,28 d的免疫组化染色显示,模型组大鼠脑组织中新生血管数量多于假手术组(P<0.05),激活剂组大鼠脑组织中新生血管数量多于模型组(P<0.05);注射7,14,28 d的Western blot检测显示,模型组大鼠脑组织中沉默信息调节因子1蛋白表达低于假手术组(P<0.05),激活剂组大鼠脑组织中沉默信息调节因子1蛋白表达高于模型组(P<0.05);注射7,14,28 d的苏木精-伊红染色显示,激活剂组大鼠脑组织损伤程度轻于模型组;④结果表明,腹腔注射SRT1720通过下调急性颅脑损伤大鼠脑组织氧化和炎性应激水平、抑制神经细胞凋亡、促进血管新生来减轻脑组织损伤。

关键词：沉默信息调节因子1信号急性颅脑损伤氧化应激炎症性应激细胞凋亡

ADAM8通过激活STAT3信号通路促进结肠癌的上皮间质转化

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现代肿瘤医学 2024年第15期 2681-2687页

作者：曹赛雅刘洋唐东豪李妍茸李佳贤王杰陈超上海中医药大学附属普陀医院普外科安徽医科大学普陀中心临床学院普外科

目的:探讨去整合素样金属蛋白酶8(A disintegrin and metalloproteinase 8,ADAM8)对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库分析ADAM8在结肠癌癌组织和正常组织中的表达水平。采用荧光定量PCR检测ADAM8在结肠癌细胞(C... 详细信息

目的:探讨去整合素样金属蛋白酶8(A disintegrin and metalloproteinase 8,ADAM8)对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库分析ADAM8在结肠癌癌组织和正常组织中的表达水平。采用荧光定量PCR检测ADAM8在结肠癌细胞(CaCO-2、HCT8、HT29、HCT116、SW620、LOVO)中的相对表达。通过慢病毒稳转构建过表达ADAM8的结肠癌细胞系。通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测ADAM8的表达水平。通过CCK-8实验和集落克隆实验检测过表达ADAM8对结肠癌细胞体外增殖能力的影响。通过Transwell实验和划痕实验检测过表达ADAM8对结肠癌细胞体外迁移能力的影响。Western blot法检测EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin和E-cadherin以及信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白STAT3和p-STAT3的相对表达水平。结果:与正常组织相比，ADAM8在结肠癌癌组织中表达升高(P<0.001);ADAM8在结肠癌细胞HCT116和LOVO中相对表达量较低(P<0.05);CCK-8实验和集落克隆实验结果显示过表达ADAM8促进了结肠癌细胞增殖能力(P<0.05);Transwell和划痕实验结果显示过表达ADAM8促进了结肠癌细胞迁移能力(P<0.001);Western blot结果显示过表达ADAM8能够下调EMT相关蛋白E-cadherin表达，上调Snail、N-cadherin和Vimentin表达并激活STAT3信号通路(P<0.05)。结论:ADAM8可通过激活STAT3信号通路促进结肠癌细胞的增殖和迁移，提示ADAM8可能是结肠癌治疗的潜在靶点。

关键词：结肠癌 ADAM8 STAT3信号通路上皮间质转化

蟾毒灵抑制M2型巨噬细胞介导的结直肠癌迁移和上皮间质转化

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 310-315页

作者：唐东豪陈进宝贾琳琳沈东晓尚靖冯月娇卢佳豪肖增友何钰洁王杰安徽医科大学上海普陀中心临床学院普外科上海200062 安徽医科大学第五临床医学院合肥230032 上海中医药大学附属普陀医院普外科上海200062

目的探讨蟾毒灵(BU)抑制M2型巨噬细胞介导结直肠癌转移的作用。方法用佛波酯(PMA)诱导人急性白血病单核细胞(THP-1)分化为M0型巨噬细胞,48h后用含有白细胞介素-4(IL-4)和IL-13的培养基处理M0型巨噬细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、... 详细信息

目的探讨蟾毒灵(BU)抑制M2型巨噬细胞介导结直肠癌转移的作用。方法用佛波酯(PMA)诱导人急性白血病单核细胞(THP-1)分化为M0型巨噬细胞,48h后用含有白细胞介素-4(IL-4)和IL-13的培养基处理M0型巨噬细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、形态学、实时荧光定量(RT-qPCR)实验观察其表面标志物和形态变化,RT-PCR和ELISA实验检测M2型巨噬细胞的表面标志物转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10。通过ELISA实验比较M2型巨噬细胞和结直肠癌细胞HCT116上清液中IL-6分泌水平,通过Transwell实验、划痕实验、RT-qPCR和Western blot实验检测条件培养基对结直肠癌细胞HCT116的的影响。在条件培养基中加入BU后,通过Western blot、Transwell实验、划痕实验、和RT-qPCR实验观察可以HCT116中AKT/PI3K蛋白以及迁移和上皮间质转化能力的变化。结果将THP-1成功诱导成为M2型巨噬细胞。M2型巨噬细胞通过分泌IL-6激活了HCT116中AKT/PI3K蛋白磷酸化,促进了其迁移和上皮间质转化能力。BU可以抑制M2巨噬细胞介导的HCT116迁移和上皮间质转化。结论M2型巨噬细胞释放IL-6激活了结直肠癌细胞AKT/PI3K信号通路,促进了其迁移和上皮间质化。此外,BU可以抑制其促迁移和上皮间质化作用。

关键词：蟾毒灵 M2型巨噬细胞结直肠癌

血清miR-203及miR-214表达水平与乳腺癌改良根治术后复发转移的关系

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中华内分泌外科杂志（中英文） 2024年第2期18卷 212-216页

作者：王国平陈凌郭驰杨君无吴祖剑浙江省立同德医院普外科杭州311400 浙江省立同德医院甲乳外科杭州311400 浙江中医药大学附属二院甲乳外科杭州310005 不详

目的探讨血清miR-203及miR-214表达水平与乳腺癌患者改良根治术后复发转移的关系。方法选择2019年9月至2020年9月在浙江省立同德医院和浙江中医药大学附属二院接受改良根治术治疗的78例乳腺癌患者作为研究对象,同时纳入同期在浙江省立... 详细信息

目的探讨血清miR-203及miR-214表达水平与乳腺癌患者改良根治术后复发转移的关系。方法选择2019年9月至2020年9月在浙江省立同德医院和浙江中医药大学附属二院接受改良根治术治疗的78例乳腺癌患者作为研究对象,同时纳入同期在浙江省立同德医院进行健康体检的80例正常体检者作为健康对照组。采用实时聚合酶链式反应法测量血清miR-203及miR-214的相对表达量。术后3年对患者进行随访,观察是否发生复发转移。结果乳腺癌患者的血清miR-203相对表达量为1.05±0.16,显著高于健康对照组的0.76±0.11,差异有统计学意义(t=6.33,P14%、血清miR-203表达水平较高及血清miR-214表达水平较低是乳腺癌术后复发转移的独立危险因素。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清miR-203预测乳腺癌术后复发转移的敏感度为71.4%,特异度为78.0%;血清miR-214预测乳腺癌术后复发转移的敏感度为78.6%,特异度为80.0%;两者联合预测乳腺癌术后复发转移的敏感度为89.3%,特异度为82.0%。结论血清miR-203及miR-214表达水平与乳腺癌患者改良根治术后复发转移有关,两者联合有较好的预测价值。

关键词：乳腺癌 miR-203 miR-214 复发转移

顺行带蒂股前外侧皮瓣和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损

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中华显微外科杂志 2024年第2期47卷 172-177页

作者：蔡灵敏郑杰郑良军台州骨伤医院手足外科浙江台州317500

目的探讨顺行带蒂股前外侧皮瓣(ALTF)和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损的效果及临床体会。方法2015年1月至2020年1月,台州骨伤医院手足外科采用顺行带蒂ALTF和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损35例,其中男28例,女7... 详细信息

目的探讨顺行带蒂股前外侧皮瓣(ALTF)和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损的效果及临床体会。方法2015年1月至2020年1月,台州骨伤医院手足外科采用顺行带蒂ALTF和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损35例,其中男28例,女7例,年龄22~63岁,平均37岁。创面面积13.0 cm×28.0 cm~18.0 cm×46.0 cm,根据创面大小设计样布增大约10%为所需的皮瓣面积,皮瓣大小为15.0 cm×30.0 cm~20.0 cm×49.0 cm,供瓣区创面直接缝合或取中厚、全厚皮片覆盖并加压包扎。35例患者均在术后4周进行手术断蒂。术后定期门诊及上门随访,观察皮瓣成活、外观、创面愈合及并发症等情况。术后12个月,根据张浩等标准对患者皮瓣外观及愈合情况进行评价,根据Johner-Wruhs标准对患肢功能恢复情况进行评价。结果35例患者均获得12~27(平均18)个月的随访。皮瓣二期手术断蒂后均完全成活,21例创面Ⅰ期愈合,14例创面延期愈合;28例皮瓣臃肿,7例接近正常;21例皮瓣温度正常,14例稍低;21例皮瓣感觉部分存在,14例无感觉;21例供区瘢痕明显,14例为轻度瘢痕;术后12个月,根据张浩等标准,术后总评分为6~9分;根据患肢功能恢复Johner-Wruhs评定方法,患肢功能恢复优14例,良14例,可7例,优良率为80%。结论顺行带蒂ALTF和腹部带蒂皮瓣瓦合修复前臂大面积软组织缺损短中期效果满意,值得临床进一步观察和研究。

关键词：股前外侧皮瓣腹部带蒂皮瓣前臂软组织缺损修复