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基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的白术道地性研究

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中国现代应用药学 2023年第4期40卷 471-476页

作者：余欢欢张国亮史月姣陈栋杰王瑛徐靖李明焱李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江金华321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江金华321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江金华321200

目的对不同产地白术药材的化学成分进行系统分析,为白术的道地性研究提供依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS),结合质谱分子网络技术,快速鉴定白术的主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA... 详细信息

目的对不同产地白术药材的化学成分进行系统分析,为白术的道地性研究提供依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS),结合质谱分子网络技术,快速鉴定白术的主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对安徽、河北、浙江的25批白术进行多元统计分析,用VIP值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果不同产地的白术化学差异较为明显,共鉴定出10个差异化合物,其中浙江白术的姜黄烯、AtractylmacrolD、白术内酯Ⅲ、3β-羟基苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、β-Vatirenene和苍术酮等成分显著高于安徽或河北样品,可作为潜在的道地性标志物。结论本研究为全面评价白术药材的质量和道地性提供了依据,并发现不同产地白术的化学成分差异较大,可能与环境、品种和种植方式等有较大关系。

关键词：白术道地性 UPLC-Q-TOF-MS 多元统计分析质谱分子网络

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基于精益理念的中药制药工业数据挖掘及生产工艺持续改进策略研究:以去壁灵芝孢子粉制药过程为例

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中国中药杂志 2023年第3期48卷 829-834页

作者：仲怿范骁辉李振皓浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江大学药物信息学研究所浙江杭州310058 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司浙江杭州311121

在中药工业数字化转型进程中,如何高效治理和分析工业数据,科学挖掘并利用其中蕴藏的有价值信息来指导中药生产制造,一直是中药制药领域的研究热点和应用难点。该研究针对中药制药工艺较为粗放、产品质量一致性有待提高等现状,将贝叶斯... 详细信息

在中药工业数字化转型进程中,如何高效治理和分析工业数据,科学挖掘并利用其中蕴藏的有价值信息来指导中药生产制造,一直是中药制药领域的研究热点和应用难点。该研究针对中药制药工艺较为粗放、产品质量一致性有待提高等现状,将贝叶斯网络、卷积神经网络、帕累托多目标优化算法等先进计算工具与Shewhart控制图、过程性能指数等精益六西格玛分析工具相结合,提出一种可深入挖掘历史工业数据,指导制药工艺持续改进的策略,并以去壁灵芝孢子粉生产制造过程为研究载体进行验证。通过该策略优化,获得了可使去壁灵芝孢子粉水分、细度、粗多糖和总三萜等关键质量属性的过程性能指数Ppk均不小于1.33的关键参数可行区间组合。结果表明,该方法具有较高的工业应用价值,为中药生产工艺的持续改进提供了实用方法。

关键词：中药制药工业数据工艺持续改进贝叶斯网络卷积神经网络帕累托多目标优化去壁灵芝孢子粉

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基于结肠癌HCT116细胞三维培养模型的灵芝水提物抗肿瘤活性研究

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中国现代应用药学 2021年第13期38卷 1550-1558页

作者：潘海涛张国亮钱华王汉波徐靖赵建霞史月姣李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 武义寿仙谷中药饮片有限公司浙江武义321200 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200

目的采用结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝水提物(Ganoderma lucidum water extract,GLWE)的抗肿瘤作用。方法采用紫外-可见光分光光度法测定GLWE中灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)、三萜和甾醇的含量,HPLC分析GLP中水溶性单糖的组成和比例;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型,评价GLWE的抗肿瘤及辅助抗肿瘤活性;CCK-8法检测细胞活力;Real-time PCR检测细胞mRNA表达水平;Western blotting检测细胞蛋白表达水平。结果 GLWE中GLP和三萜及甾醇的含量分别为20.92%和7.18%,其中GLP主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、D-木糖、L-岩藻糖组成;GLWE和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)作用48 h可呈浓度依赖性抑制2D和3D培养的HCT116细胞增殖;与2D培养相比,3D培养的HCT116细胞中整合素β1(Integrin β1)和钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA的表达显著升高,并对GLWE和5-FU的敏感性降低;在HCT116细胞3D培养模型中,GLWE既可降低CDK2、CDK4和Bcl-2蛋白的表达,升高p21、p27、cleaved caspase-3和cleaved PARP蛋白的表达,还可显著降低Integrin β1和E-cadherin mRNA的表达,并加强5-FU的抗肿瘤活性。结论 GLWE通过抑制细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制3D培养的HCT116细胞增殖,并通过抑制Integrin β1和E-cadherin mRNA的表达增强5-FU的抗肿瘤活性。

关键词：灵芝结肠癌三维培养 E-cadherin Integrinβ1

加强型Q460C方钢管间隙N型节点承载力研究

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哈尔滨工业大学学报 2025年第1期57卷 149-160页

作者：叶岳松赵东平王万祯肖林峰宁波大学土木工程与地理环境学院浙江宁波315211 中建丝路(陕西)建设发展有限公司西安710076 宁波市能源地下重点实验室浙江宁波315211 宁波市房屋建筑设计研究院有限公司浙江宁波315042

为考察加强构造对N型节点失效机理和承载力的影响规律,对加强节点和基本节点进行了主管轴压静力加载试验,试验结果表明:基本节点的破坏模式为主管上翼缘受拉鼓曲开裂,加强节点破坏模式为加劲板屈曲和覆板焊缝受拉开裂;加强节点的承载力... 详细信息

为考察加强构造对N型节点失效机理和承载力的影响规律,对加强节点和基本节点进行了主管轴压静力加载试验,试验结果表明:基本节点的破坏模式为主管上翼缘受拉鼓曲开裂,加强节点破坏模式为加劲板屈曲和覆板焊缝受拉开裂;加强节点的承载力较基本节点提高了9.4%~36.5%;增加覆板厚度,可明显提高节点承载力。采用ABAQUS软件对覆板和加劲板加强的Q460C方钢管间隙N型节点进行了有限元参数研究,考察了主管宽厚比γ、主支管厚度比η、主支管宽度比β、受拉支管与主管夹角θ、支管间距与主管宽度比ξ对节点破坏模式、应力分布、主管荷载-位移曲线和覆板焊缝断裂指数I f的影响规律。根据试验和数值模拟结果,提出了覆板和加劲板加强的Q460C方钢管间隙N型节点承载力计算式和构造设计建议。

关键词： Q460C方钢管 N型节点有限元模拟承载力计算式

基于CiteSpace的灵芝孢子粉研究知识图谱分析

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中国现代应用药学 2021年第12期38卷 1416-1425页

作者：赵建霞李振宇张国亮徐靖王瑛李明焱李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州310000 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的对灵芝孢子相关研究进行文献计量、可视化分析,探讨并综述其研究热点及发展趋势。方法在中国知网、Pubmed和Web of Science数据库检索灵芝孢子粉相关的文献,并根据文献语言的不同分为中文与英文2个部分,应用CiteSpace对文献中的国... 详细信息

目的对灵芝孢子相关研究进行文献计量、可视化分析,探讨并综述其研究热点及发展趋势。方法在中国知网、Pubmed和Web of Science数据库检索灵芝孢子粉相关的文献,并根据文献语言的不同分为中文与英文2个部分,应用CiteSpace对文献中的国家、机构、关键词和主题词、被引情况进行共现分析,绘制对应知识图谱、时间线视图,进而推断灵芝孢子粉的研究热点及趋势。对灵芝孢子主要研究热点、趋势、临床研究及物质基础等方面的研究进行总结。结果共获得相关文献1477篇,包括989篇中文文献、488篇英文文献,发文量均呈增涨趋势,且国家及机构共现分析表明发文的主要是中国与中国机构,研究热点领域为药理药效方面,主要以抗肿瘤、免疫调节、抗癫痫等药效研究为主。近5年新兴的灵芝孢子粉的研究集中在免疫检查点、肠道菌群等前沿领域。结论灵芝孢子粉在抗肿瘤、免疫调节、抗癫痫等方面的药理作用研究广泛,具有良好的应用前景,但物质基础和质量控制研究较为薄弱,有待进一步深化。

关键词： CiteSpace 知识图谱分析药理药效物质基础灵芝孢子粉

去壁灵芝孢子粉片的含量测定与免疫调节及心脏保护功能研究

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中国现代应用药学 2024年第2期41卷 203-212页

作者：杨继鸿张国亮李丛舒骆光鑫徐靖王瑛史月姣李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心... 详细信息

目的研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心肌及内皮细胞氧化应激模型、脂多糖诱导的小胶质细胞炎症模型的影响,通过巨噬细胞形成能力、巨噬细胞吞噬能力、抗神经炎症能力、心脏收缩舒张改善能力、抗心肌及内皮细胞氧化应激损伤能力等多个指标评估其免疫调节及心脏保护作用。结果 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片可以提高巨噬细胞形成及吞噬能力,改善心脏收缩舒张功能,减少神经炎症并缓解心肌及内皮细胞因氧化应激而造成的损伤,从而起到免疫调节和心脏保护作用。结论 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片有望用于免疫功能调节及心脏功能保护。

关键词：去壁灵芝孢子粉片免疫调节心脏保护

LC-MS快速分析紫苏水煎液中的主要化学成分

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药物分析杂志 2015年第8期35卷 1417-1423页

作者：史月姣王瑛朱惠照郑化先朱卫东徐靖李明焱浙江省珍稀植物药工程技术研究中心武义321200 浙江寿仙谷医药股份有限公司武义321200 浙江寿仙谷珍稀植物药研究院.武义321200

目的:采用液相色谱,结合四极杆飞行时间串联质谱(QTOF/MS)和离子阱质谱(IT/MS)2种质谱检测器,分析鉴定中药紫苏水煎液中的主要化学成分。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18RRHD柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.05%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度... 详细信息

目的:采用液相色谱,结合四极杆飞行时间串联质谱(QTOF/MS)和离子阱质谱(IT/MS)2种质谱检测器,分析鉴定中药紫苏水煎液中的主要化学成分。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18RRHD柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.05%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,柱温30℃,进样体积10μL;采用QTOF获取化合物的分子式,并用数据依赖扫描辨别质核比接近的离子碎片;结合IT/MS的多级质谱分析推断可能的结构并验证鉴定结果。结果:通过联合使用2种不同原理的质谱仪并参照数据库和文献资料从紫苏水煎液中鉴定了27个化合物,包括9个黄酮及其苷类成分,10个有机酸类成分,5个氨基酸、2个缩氨酸和1个核苷,其中4个成分经由对照品比对确证。结论:该方法通过联合使用QTOF/MS和IT/MS,为化合物的快速解析提供了更多数据,提高了分析的速度和准确性,为中药复杂组分的分析提供了一种可行的方法。

关键词：紫苏液相色谱四极杆飞行时间串联质谱离子阱质谱中药成分分析黄酮苷类有机酸类芹菜素-二葡萄糖醛酸苷刺槐黄素-芸香苷木犀草素-二葡萄糖醛酸苷野黄芩素-二葡萄糖醛酸苷迷迭香酸

铁皮石斛新品种“仙斛2号”的选育和特征特性研究

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中国药学杂志 2013年第19期48卷 1677-1680页

作者：李明焱王瑛郑化先李建淼徐靖朱惠照朱君俏谢小波金华寿仙谷药业有限公司武义321200 浙江寿仙谷医药股份有限公司武义321200 浙江寿仙谷珍稀植物药研究院武义321200 浙江省农业科学院园艺研究所杭州310021

目的保护野生铁皮石斛资源,选育铁皮石斛优良品种,促进铁皮石斛产业健康发展。方法采用系统育种方法从野生铁皮石斛种质资源中选育出高产、优质的铁皮石斛新品种;品种(系)间遗传差异分析采用ISSR分子标记技术。结果经驯化栽培、筛选、... 详细信息

目的保护野生铁皮石斛资源,选育铁皮石斛优良品种,促进铁皮石斛产业健康发展。方法采用系统育种方法从野生铁皮石斛种质资源中选育出高产、优质的铁皮石斛新品种;品种(系)间遗传差异分析采用ISSR分子标记技术。结果经驯化栽培、筛选、稳定性和品比实验,获得了富含石斛多糖、适应性强、产量高的铁皮石斛新品种"仙斛2号"。与对照品种"云南软脚"、"仙斛1号"比较,"仙斛2号"移栽定植12个月、24个月、36个月后的新鲜茎叶和茎产量均显著或极显著高于对照,干品率和干品石斛多糖含量极显著高于"云南软脚"。ISSR分子标记分析表明"仙斛2号"与其他铁皮石斛品种(系)存在明显遗传差异。"仙斛2号"于2011年12月通过了浙江省非主要农作物品种审定。结论 "仙斛2号"是一个综合性状优良的铁皮石斛新品种,为铁皮石斛的人工栽培提供了更多的良种选择。

关键词：铁皮石斛仙斛2号选育特征特性

基于结肠癌HCT116细胞三维培养模型的灵芝组分抗肿瘤活性研究

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中国现代应用药学 2023年第13期40卷 1795-1809页

作者：潘海涛陈栋杰张国亮胡凌娟王晓彤仲怿杨继鸿李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 杭州市余杭区伯宇智慧健康研究院杭州311100 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的基于结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝组分(Ganoderma components,Gc)的抗肿瘤作用。方法采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定3种Gc的化学组成;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型,评价Gc1、Gc2、Gc3... 详细信息

目的基于结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝组分(Ganoderma components,Gc)的抗肿瘤作用。方法采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定3种Gc的化学组成;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型,评价Gc1、Gc2、Gc3和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对2D和3D培养的HCT116细胞增殖的影响,并在HCT116细胞3D培养模型中分析Gc3对周期、凋亡、耐药、脂代谢及5-FU抗肿瘤活性的影响;采用CCK-8法检测细胞活力;Real-time PCR检测细胞mRNA表达水平;Western blotting检测细胞蛋白表达水平;采用HPLC检测细胞内5-FU含量。结果从Gc1、Gc2和Gc3中分别鉴定出76,69和17个化合物;与2D培养相比,3D培养的HCT116细胞增殖率更低,周期促进蛋白CDK2、CDK4、CDK6及脂肪酸合成蛋白FASN、SREBP1的表达显著下调,周期抑制蛋白p21和p27、脂滴分解蛋白ATGL及药物抵抗基因ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达水平显著上调;Gc1、Gc2、Gc3和5-FU作用48 h可呈浓度依赖性抑制2D和3D培养的HCT116细胞增殖,且Gc3的抑制作用显著强于Gc1和Gc2;在HCT116细胞3D培养模型中,Gc3可显著降低CDK2、CDK4、Bcl-xl、ATGL、LC3B的表达水平,升高p21、p27、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP1的表达水平,过表达LC3B或ATGL均可减弱Gc3诱导的细胞毒性;Gc3还可显著抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达,提高细胞内5-FU的浓度,并加强5-FU的抗肿瘤活性。结论Gc3通过抑制细胞自噬和脂滴分解而诱导3D培养的HCT116细胞凋亡,并通过抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达加强5-FU的抗肿瘤活性。

关键词：灵芝结肠癌三维培养脂解脂噬