检索结果-南通市图书馆

作者：刘松涛华中农业大学

学位级别：硕士

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种重要的人兽共患病原菌,各个年龄段的猪只均可感染发病,可引发猪巴氏杆菌性肺炎、猪萎缩性鼻炎,是猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的重要致病因子之一,对我国养猪业发展造成了巨大影响。Pm根据... 详细信息

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种重要的人兽共患病原菌,各个年龄段的猪只均可感染发病,可引发猪巴氏杆菌性肺炎、猪萎缩性鼻炎,是猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的重要致病因子之一,对我国养猪业发展造成了巨大影响。Pm根据编码荚膜及脂多糖基因簇的不同,可分为5种(A、B、D、E、F)荚膜基因型和8种脂多糖基因型(L1-L8)。有研究表明,我国猪群中Pm流行菌株的基因型存在多样性,而现有的关于我国猪群中Pm的相关数据较少。因此,本研究从我国部分地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病猪的肺脏组织样品与鼻拭子样品中进行Pm的分离鉴定并对所分离的菌株进行荚膜分型、脂多糖分型、毒力因子检测以及耐药性分析。在此基础上,筛选优势基因型的流行菌株作为种子菌株制备猪巴氏杆菌病灭活疫苗,并对疫苗的安全性,免疫效力等进行初步评估,为巴氏杆菌病的防控奠定基础。主要研究结果如下:1.猪源Pm的分离鉴定及荚膜脂多糖分型在2019-2020年期间,从来源于我国部分地区(湖北、河北、河南、广东、浙江等16个省市)规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病以及无典型临床症状猪的肺脏组织样品与鼻拭子样品中共分离出158株Pm,样品平均分离率为11.5%。采用PCR方法对所分离的菌株进行荚膜分型,其中荚膜A型菌株95株(60%),D型菌株56株(36%),F型菌株7株(4%)。脂多糖分型鉴定出脂多糖L3型菌株45株(29%),L6型菌株105株(66%),未定型菌株8株(5%)。除去8株脂多糖未定型的菌株以外,其余150株Pm共包括4种荚膜脂多糖组合型,其中A:L3型菌株38株(25.3%),A:L6型菌株50株(33.3%),D:L6型菌株55株(36.7%),F:L3型菌株7株(4.7%)。2.猪源Pm毒力基因分布通过PCR方法对所分离的158株Pm进行23种毒力相关基因的检测,结果显示部分毒力基因如nan H、hgb B、hsf-2、plp B、omp A、oma87、ptf A、fim A、sod A、sod C、Fur、omp H的检出率均超过了80%;而毒力基因hgb A与nan B的检出率不足40%;此外,毒力基因tox A与tbp A未被检出。进一步分析发现部分毒力基因如hsf-1、pfh A以及pm HAS在不同荚膜基因型、脂多糖基因型以及荚膜脂多糖组合型Pm菌株中的检出率存在着显著的差异。3.猪源Pm耐药性分析对上述经PCR鉴定并分型的Pm分离株以及之前由本实验室分离的共211株Pm按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)公布的抗微生物药物敏感性执行标准(M100Ed30)进行药敏试验,结果表明所有的Pm分离株均对亚胺培南敏感;超过80%以上的Pm分离株对环丙沙星、头孢吡肟、替加环素、氨苄西林、氯霉素敏感;少数分离株对四环素和多粘菌素E敏感。通过PCR方法对所分离的158株Pm进行耐药基因检测,仅检出耐药基因tet B与flo R,检出率分别为38.3%和39.0%。4.猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备及免疫效果初步评估选取由本实验室分离并保存的A:L3型菌株HB03及D:L6型菌株HN05作为制备疫苗的种子菌株并对其开展生物学特性研究,将上述两个菌株扩大培养后经一系列操作获得制备疫苗所需菌液,并按一定比例与氢氧化铝佐剂混合制得猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗(抗原含量为2.5×10 CFU/m L)。以KM鼠作为动物模型通过安全性试验以及免疫接种试验对疫苗的安全性及免疫效力进行初步评估,安全性试验结果表明疫苗对小鼠的安全性良好,免疫接种试验结果表明在第二次接种疫苗后的第7天及第14天,小鼠体内产生了较高水平的抗体,且该疫苗能分别对HB03或HN05菌株攻毒提供80%以上的免疫保护率。

关键词：多杀性巴氏杆菌毒力基因耐药性二价灭活疫苗

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蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠降血脂作用的研究与机制初探

蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠降血脂作用的研究与机制初探

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作者：张蕾第二军医大学

学位级别：硕士

一、研究背景目前认为高脂血症是心脑血管病的最重要的危险因素之一。心血管疾病是发达国家人口中死亡的重要原因,虽然发病机理尚未完全阐明,但与血脂升高是密切相关的。血脂主要是指血清中的胆固醇和甘油三酯。无论是胆固醇含量增高,... 详细信息

一、研究背景目前认为高脂血症是心脑血管病的最重要的危险因素之一。心血管疾病是发达国家人口中死亡的重要原因,虽然发病机理尚未完全阐明,但与血脂升高是密切相关的。血脂主要是指血清中的胆固醇和甘油三酯。无论是胆固醇含量增高,还是甘油三酯的含量增高,或是两者皆增高,统称为高脂血症。高脂血症可分为原发性和继发性2类。原发性与先天性和遗传有关,是由于单基因缺陷或多基因缺陷,使参与脂蛋白转运和代谢的受体、酶或载脂蛋白异常所致,或由于环境因素(饮食、营养、药物)和通过未知的机制而致。继发性多继发于代谢性紊乱疾病(糖尿病、高血压、黏液性水肿、甲状腺功能低下、肥胖、肝肾疾病、肾上腺皮质功能亢进),或与其他因素(年龄、性别、季节、饮酒、吸烟、饮食、体力活动、精神紧张、情绪活动)有关。高脂血症的治疗,目前所用的方法有：口服药物治疗、中医中药治疗、饮食治疗和运动治疗等。现有的传统药物治疗方法,疗效多不明显,故有必要进一步寻找疗效更好、副作用更少的调脂新药。因此,如何防治高脂血症已成为国内外科学工作者的一个重要研究课题。近年来的许多研究表明,许多天然化学物中的活性成分在高脂血症的预防和治疗过程中疗效稳定、毒性小,不良反应少,可长期使用。在这之中,自20世纪80年代以来,壳聚糖及其衍生物以其独有的理化性质成为全世界研究的热点,并在医药、食品、化工、环保、农业等诸多应用领域取得了突破性进展壳聚糖(chitosan)是天然多糖甲壳素(chitin)的脱乙酰基产物,学名聚氨基葡糖,也称为壳聚胺、几丁聚糖,是甲壳素最基本、最重要的衍生物,于1859年由法国人Rouget首先得到。壳聚糖是自然界中少见的带正电荷的高分子聚合物,它含有游离氨基,属于碱性多糖,其相对分子质量,从数十万到数百万不等。这类多糖既可生物合成,又可生物降解,与动物的器官组织及细胞有良好的生物相容性,无毒。降解过程中产生的低分子寡聚糖在体内不积累,几乎没有免疫原性。目前已知壳聚糖及其衍生物具有降血糖、抗氧化、抗微生物、增强免疫、调节血脂、抑制肿瘤等药理活性。在以往壳聚糖研究中,大多数是以虾、蟹为原料,而以蝇蛆为原料制备壳聚糖甚少。其实,蝇蛆中的壳聚糖含量高且质量优于虾、蟹等,应用前景十分可观。蝇蛆壳聚糖在治疗高脂血症方面有着自己独特的优势,其治疗高脂血症过程并非单纯降脂,还能改善血糖、纠正能量代谢紊乱,改善微循环,防治并发症的发生和发展,具有开发应用价值。随着其降血脂机制的更深入研究,蝇蛆壳聚糖必将在高脂血症的治疗和预防中发挥更大的作用。本研究根据高脂血症的营养代谢特点,建立稳定的高脂血症大鼠模型,以研究蝇蛆壳聚糖在降血脂方面所表现出的调节血脂、改善脂代谢,并从临床营养学角度切入,采用生物化学、分子生物学等研究手段,重点从蝇蛆壳聚糖调节血脂活性,阻止血清胆固醇升高,改善肝脏脂代谢功能,调节机体血糖,增进胃肠动力等方面初步探讨蝇蛆壳聚糖降血脂的作用机制,为防治高脂血症及其并发症、改善高脂血症患者生活质量提供新的实验依据。研究内容包括4个部分。二、研究内容第一部分实验性高脂血症大鼠模型的建立目的：成功建立适用于进行高脂血症营养治疗研究的动物模型,其模型要稳定、可靠、重复性好。方法：雄性SD大鼠20只,随机分为正常对照组(10只)和模型组(10只)。高脂饲料配制：用1%胆固醇,10%猪油,10%蛋黄粉,0.1%胆盐及78.9%基础饲料配制而成。动物在适应性喂养1w之后,禁食(不禁水)12h后眼眶静脉丛采血,分离血清后用生化分析仪检测血脂4项,即总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。正常对照组自由采食基础饲料；模型组自由采食高脂饲料,连续喂养8w。第56d禁食不禁水,12h后眼眶静脉丛采血,分离血清后用生化分析仪检测血脂4项,以确定高脂模型是否成功。结果：造模前各组大鼠体重差异无统计学意义(P＞0.05)。给高脂饲料8周后,高脂模型组大鼠体重显著增加,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。高脂模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著升高,HDL-C无明显变化,表明高脂模型造模成功。第二部分蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠脂代谢的影响目的：通过对实验大鼠的血脂,包括血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、肝脂酶(HL)、脂蛋白脂酶(LPL)、总脂酶含量的测定,探讨蝇蛆壳聚糖调节血脂、改善脂代谢以降低血脂的机制。方法：雄

关键词：高脂血症蝇蛆壳聚糖血清总胆固醇甘油三酯高密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白胆固醇游离脂肪酸肝脂酶脂蛋白脂酶血糖胃肠功能

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温胆汤通过调控PI3K/Akt/mTOR通路介导的脂肪细胞自噬对肥胖痰湿证炎症状态的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第14期29卷 1-10页

作者：喻松仁刘彩玲周丽钟友宝熊乃鑫徐佳玲刘春燕程绍民王萍江西中医药大学南昌330004 南昌市新建区中医院南昌330100

目的:观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠脂肪细胞炎症因子、自噬活性标志物及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路关键分子蛋白表达的影响,探讨肥胖痰湿证炎症状态形成的物质基础及温胆汤的干预机制。... 详细信息

目的:观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠脂肪细胞炎症因子、自噬活性标志物及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路关键分子蛋白表达的影响,探讨肥胖痰湿证炎症状态形成的物质基础及温胆汤的干预机制。方法:将126只SD大鼠随机分成2组,即空白组16只和造模组110只,空白组喂养基础饲料,造模组喂养高脂饲料建立肥胖痰湿证动物模型,共8周。造模成功后,视体质量情况,按顺序淘汰体质量过轻者,遴选出48只肥胖大鼠,随机分为模型组、奥利司他组(32.40 mg·kg^(-1))、雷帕霉素组(2 mg·kg^(-1))、温胆汤低、中、高剂量组(4.45、8.90、17.80 g·kg^(-1)),每组8只;另在空白组大鼠中随机选取8只设为正常组,各用药组按剂量(以生药量计算)给予灌胃,模型和正常组给予等体积蒸馏水灌胃,每天1次,共6周。检测或计算大鼠体质量、Lee’s指数、脂体比和肥胖率,采用免疫组化二步法检测脂肪细胞自噬活性标志物动物自噬启动蛋白1(ULK1)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、人自噬相关蛋白5(Atg5)、p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脂肪细胞炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、IL-4、IL-10、IL-13和转化生长因子(TGF)-β的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脂肪细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子classⅠ-PI3K、磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)、Akt、mTORC1、ULK1、结节性硬化症(TSC)1、TSC2的表达。结果:与空白组比较,造模组体质量和Lee’s指数显著升高(P20%,有形体肥胖、活动度下降,食欲下降,皮毛无光泽、蓬松,便溏,对外界反应能力下降,饮水量减少等痰湿证表现,与正常组比较,模型组体质量、Lee’s指数、脂体比、脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达、促炎和抗炎细胞因子水平均明显升高(P分子蛋白表达明显升高(P所有自噬活性标志物蛋白表达显著升高(P分子蛋白表达明显降低(P分子蛋白除PI3K外表达明显降低(P所有信号通路关键分子蛋白表达显著降低(P分子蛋白除PI3K外表达均明显降低(P分子PIP3、mTORC1、TSC1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),而自噬活性标志物Beclin1、Atg5蛋白、炎性因子TNF-α、IL-13含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:肥胖痰湿证炎症状态的形成与PI3K/Akt/mTOR通路介导的脂肪细胞自噬密切关联,且温胆汤可有效干预肥胖痰湿证大鼠的慢性炎症状态,其作用机制可能与调控该信号通路进而改善脂肪细胞自噬有关。

关键词：温胆汤肥胖痰湿证磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路自噬慢性炎症作用机制

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水产动物致病酵母菌研究进展

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大连海洋大学学报 2021年第4期36卷 687-693页

作者：申洪彬包杰姜宏波沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110866

酵母菌是指以芽殖分裂或形成子囊孢子为主,细胞呈椭圆形的单细胞真核生物,广泛分布于自然界中,常被用于发酵行业。在水产养殖中常将有益酵母培养物作为饲料添加剂,而有些酵母菌为水产养殖动物致病性病原菌,严重威胁着水产养殖动物的产... 详细信息

酵母菌是指以芽殖分裂或形成子囊孢子为主,细胞呈椭圆形的单细胞真核生物,广泛分布于自然界中,常被用于发酵行业。在水产养殖中常将有益酵母培养物作为饲料添加剂,而有些酵母菌为水产养殖动物致病性病原菌,严重威胁着水产养殖动物的产量和经济效益,如何防治致病性酵母菌已成为必须解决的关键问题。明确水产动物致病酵母菌的种类、宿主范围、传播途径及侵染机制,有助于更好地对其进行防治。本文对水产动物致病酵母菌的种类、危害、流行情况、传播途径、检测方法和防治技术等方面的研究进展进行了综述,并提出未来应在致病酵母菌的流行病学与分子流行病学调查、致病酵母菌病原的生活史与入侵机制及绿色生物渔药与免疫制剂的开发与应用等方面重点开展研究的建议,以期为水产动物致病酵母菌的防治和科学研究提供参考。

关键词：水产动物致病酵母菌传播途径侵染机制检测方法防治技术

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禽腺病毒的分子生物学及载体构建

禽腺病毒的分子生物学及载体构建

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中国科协首届学术年会

作者：章金刚李茂祥金奇向华杜华茂胡敬东侯云德殷震解放军农牧大学兽医学院

以腺病毒为载体的基因工程疫苗是近年来研究的热点之一,将对人类健康和动物保健起到积极的作用。与哺乳动物腺病毒相比,禽类腺病毒的研究相对滞后。针对养禽业生产实际和病毒疫苗的发展方向,笔者在国内外率先提出并开展了以Ⅲ群禽腺病...

以腺病毒为载体的基因工程疫苗是近年来研究的热点之一,将对人类健康和动物保健起到积极的作用。与哺乳动物腺病毒相比,禽类腺病毒的研究相对滞后。针对养禽业生产实际和病毒疫苗的发展方向,笔者在国内外率先提出并开展了以Ⅲ群禽腺病毒——减蛋综合征病毒(EDSV)

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硫化氢对糖尿病动脉粥样硬化的作用及机制研究

硫化氢对糖尿病动脉粥样硬化的作用及机制研究

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脂质组学与脂蛋白的新功能——第十二届全国脂质与脂蛋白学...

作者：谢利平顾月孟国梁马妍唐欣季勇南京医科大学病理生理学系

目的:硫化氢(H2S)作为一种气体信号分子在心血管疾病中起着重要的调控作用,但关于其在糖尿病加剧或诱发动脉粥样硬化(AS)进程中是否有拮抗作用,目前尚无报道,本课题从整体动物结合离体细胞实验,探讨硫化氢(H2S)对糖尿病AS的影响及Nrf2...

目的:硫化氢(H2S)作为一种气体信号分子在心血管疾病中起着重要的调控作用,但关于其在糖尿病加剧或诱发动脉粥样硬化(AS)进程中是否有拮抗作用,目前尚无报道,本课题从整体动物结合离体细胞实验,探讨硫化氢(H2S)对糖尿病AS的影响及Nrf2信号通路在其中的作用。方法:6-8周LDLR-/-小鼠,腹腔注射STZ诱导糖尿病,后给予高脂饲料构建糖尿病AS动物模型,在给予高脂饲料的同时,给或不给H2S缓释剂GYY4137(50mg/kg/day)4周。给药结束后,血脂试剂盒检测外周血中血脂水平;油红O染

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