检索结果-南通市图书馆

用于多基因表达检测的猕猴桃macroarray阵列

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果树学报 2007年第6期24卷 854-857页

作者：张波徐昌杰陈昆松浙江大学果实分子生理与生物技术实验室农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室杭州310029

基因阵列是开展高通量功能基因组学研究的有效手段之一。对适用于多年生果树猕猴桃的macroarray阵列进行了探索,构建了含有42个基因的macroarray阵列,与α-32P标记的cDNA探针杂交产生清晰信号,有效分辨了不同基因或基因家族不同成员的... 详细信息

基因阵列是开展高通量功能基因组学研究的有效手段之一。对适用于多年生果树猕猴桃的macroarray阵列进行了探索,构建了含有42个基因的macroarray阵列,与α-32P标记的cDNA探针杂交产生清晰信号,有效分辨了不同基因或基因家族不同成员的表达差异。DNase处理可去除基因组DNA污染,提高结果准确性。

关键词：猕猴桃 macroarray 基因表达构建

乙酰水杨酸调控猕猴桃果实后熟软化进程中的Ad-EXP1基因表达

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果树学报 2007年第6期24卷 778-782页

作者：杨绍兰陈妙金张波李鲜徐昌杰陈昆松浙江大学果实分子生理与生物技术实验室农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室杭州310029

以布鲁诺猕猴桃(Actinidia deliciosa ***)成熟果实为材料,根据植物α-expansin(EXP)基因的氨基酸保守序列设计简并引物,利用RT-PCR方法结合3’RACE扩增得到1个长为957bp的cDNA片段(Ad-EXP1)。该基因片段编码211个氨基酸,与其它植物该... 详细信息

以布鲁诺猕猴桃(Actinidia deliciosa ***)成熟果实为材料,根据植物α-expansin(EXP)基因的氨基酸保守序列设计简并引物,利用RT-PCR方法结合3’RACE扩增得到1个长为957bp的cDNA片段(Ad-EXP1)。该基因片段编码211个氨基酸,与其它植物该基因核苷酸同源性为59%～85%,氨基酸同源性为73%～91%。Northern杂交结果表明,Ad-EXP1基因在采收当天的果实中表达很弱,随着果实成熟衰老进程加快趋于增强;乙酰水杨酸(ASA)处理延缓果实后熟软化和乙烯生成,也显著抑制Ad-EXP1基因表达。鉴于Ad-EXP1表达丰度与乙烯生成、果实软化程度的一致性,推测该基因在猕猴桃果实后熟软化进程中起着重要作用。

关键词：猕猴桃 EXP(α—expansin) 果实成熟乙烯软化 ASA

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红梨资源及其果实着色机制研究进展

果树学报 2011年第3期28卷 485-492页

作者：张东滕元文浙江大学园艺系农业部园艺植物生长发育与品质调控重点开放实验室杭州310029

近几年,随着杂交选育的优良红色砂梨品种在我国的推广栽培,红梨资源及其果实着色机制的研究受到国内学者越来越多的关注。红梨资源分布广泛,具有复杂的遗传背景和丰富的遗传多样性,涵盖了包括西洋梨、砂梨、白梨、秋子梨和新疆梨在内的... 详细信息

近几年,随着杂交选育的优良红色砂梨品种在我国的推广栽培,红梨资源及其果实着色机制的研究受到国内学者越来越多的关注。红梨资源分布广泛,具有复杂的遗传背景和丰富的遗传多样性,涵盖了包括西洋梨、砂梨、白梨、秋子梨和新疆梨在内的世界梨主栽系统,商业价值也很高。红梨着色主要缘于果皮中花色苷的积累,花色苷经由类黄酮代谢途径合成,参与其中的PAL、CHS、CHI、F3H、DFR、ANS和UFGT等主要结构基因已被克隆,一个重要的调节基因PyMYB 10也已被分离和鉴定。红梨着色规律在各种类间差异较大,果皮中的花色苷一般分布在果皮表层下的皮下细胞内。光照和温度是影响红梨花色苷代谢的重要环境因子,基于光温调控机制开发的套袋、采后人工光源诱导和蒸发冷却等人为调控措施正在或有望在红梨生产中得到应用。通过对上述研究进展的综述,期望为今后我国红梨领域的研究提供帮助。

关键词：红梨资源花色苷着色机制

白菜雄性不育相关新基因BcMF1的分离及特征分析

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中国农业科学 2008年第4期41卷 1119-1127页

作者：王华新王永勤曹家树向珣余小林叶纨芝浙江大学蔬菜研究所细胞与分子生物学实验室/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室北京农业生物技术研究中心

【目的】筛选与白菜雄性不育性状相关的新基因,为研究植物雄性不育的分子机制提供依据。【方法】利用cDNA-AFLP技术分析白菜核雄性不育两用系‘ZUBajh97-01AB’的表达差异,在可育株群中扩增出1条特异条带BcMF-A15T17,通过RACE和PCR技术... 详细信息

【目的】筛选与白菜雄性不育性状相关的新基因,为研究植物雄性不育的分子机制提供依据。【方法】利用cDNA-AFLP技术分析白菜核雄性不育两用系‘ZUBajh97-01AB’的表达差异,在可育株群中扩增出1条特异条带BcMF-A15T17,通过RACE和PCR技术扩增得到该基因的cDNA和DNA全长序列,并用Northern杂交验证了该基因的表达特征。【结果】该基因被命名为BcMF1,它的cDNA全长为1684bp,基因全长为1985bp,BcMF1基因仅在两用系可育株群的中、大花蕾中特异表达。推测的BcMF1蛋白含有471个氨基酸,与拟南芥未知功能蛋白家族DUF1216成员的相似性较高,预测该蛋白是一个定位在胞外的分泌蛋白。【结论】BcMF1基因是一个与白菜细胞核雄性不育相关的新基因。

关键词：白菜(Brassi cacampestris L.ssp.chinensis Makino) 雄性不育基因克隆 BcMF1基因特征分析

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猕猴桃基因组DNA文库的构建

果树学报 2004年第3期21卷 204-207页

作者：许文平徐昌杰陈昆松张上隆浙江大学果实分子生理与生物技术实验室/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室浙江杭州310029

采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(***)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回收长为14～23kb的酶切片段。部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与LambdaFIXII载体连接,... 详细信息

采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(***)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回收长为14～23kb的酶切片段。部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与LambdaFIXII载体连接,连接产物用GigapackⅢPackagingExtract进行包装,最后得到含有1.05×106pfu的基因组文库,扩增后文库滴度为2.5×109pfu/mL。利用6对根据植物基因保守区或猕猴桃基因序列设计的专一引物对基因组文库和基因组DNA进行PCR扩增,均得到与预计长度相符的目的基因片段。

关键词：猕猴桃基因组DNA文库 PCR

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阔叶猕猴桃抗生素敏感性及遗传转化的研究

核农学报 2006年第4期20卷 287-291,302页

作者：毕静华高月刘永立叶庆富浙江大学园艺系/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室浙江杭州310029 浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029

以阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia)叶片为外植体,研究了各种抗生素对形态分化和器官形成的影响,并以叶盘为受体,通过根癌农杆菌介导法获得了抗性愈伤组织和抗性芽,组织化学染色表明gus基因已在植物组织中表达。研究结果表明,对不定芽... 详细信息

以阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia)叶片为外植体,研究了各种抗生素对形态分化和器官形成的影响,并以叶盘为受体,通过根癌农杆菌介导法获得了抗性愈伤组织和抗性芽,组织化学染色表明gus基因已在植物组织中表达。研究结果表明,对不定芽分化来说,头孢霉素(Cef)效果明显好于羧苄青霉素(Carb)。Cef浓度为300mg.L-1时效果最好,再生频率达100%,平均再生芽数达最大为9.76个芽/外植体。生根过程中高浓度的Cef(≥200mg.L-1)明显抑制生根,而Carb对生根没有显著影响。在卡那霉素(Kan)和Carb组合处理中,Carb对生根没有显著影响,但Kan明显抑制生根。随着Kan浓度的升高,生根率和平均根数迅速减少,当浓度升高到50mg.L-1时,生根完全被抑制。因此,农杆菌介导的阔叶猕猴桃遗传转化中愈伤组织和不定芽诱导过程宜选用300mg.L-1Cef来抑制农杆菌生长,Kan筛选的临界浓度为20mg.L-1。在抗性芽生根过程中Kan浓度应该控制在50mg.L-1以内,并改用Carb作为杀菌剂,生根效果会更好。该研究确定了农杆菌介导的阔叶猕猴桃叶片遗传转化中使用抗生素的种类和用量,为通过基因工程对阔叶猕猴桃进行遗传改良奠定了基础。

关键词：阔叶猕猴桃根癌农杆菌抗生素 Gus 叶片再生

一种植物表达载体的构建及其在金柑上的瞬时表达

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果树学报 2008年第3期25卷 431-434,F0003页

作者：张岚岚刘小花陈昆松徐昌杰浙江大学华家池校区园艺系／农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室杭州310029

以植物表达载体pCambia1301的带内含子的GUS(iGUS)基因替换植物表达载体pBI121中的GUS基因,构建了以pBI121为基础载体并含有iGUS的植物表达载体pLZ13。农杆菌染色表明,pCamiba1301和pLZ13两载体中的iGUS基因均不会导致GUS染色反应。以... 详细信息

以植物表达载体pCambia1301的带内含子的GUS(iGUS)基因替换植物表达载体pBI121中的GUS基因,构建了以pBI121为基础载体并含有iGUS的植物表达载体pLZ13。农杆菌染色表明,pCamiba1301和pLZ13两载体中的iGUS基因均不会导致GUS染色反应。以金柑不同组织为材料,通过农杆菌介导开展瞬时表达研究,结果表明,pLZ13和pCambia1301两载体的iGUS在CaMV35S启动子调控下的表达没有差异,证明构建的pLZ13是一种同时适于瞬时表达和转基因研究的植物表达载体。

关键词：金柑 iGUS 瞬时表达启动子转基因植物表达载体 4

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‘小香水’梨果实后熟过程中挥发性组分分析

园艺学报 2012年第1期39卷 151-158页

作者：李国鹏贾惠娟王强张茂君滕元文浙江大学园艺系农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室杭州310058 吉林农业科学院果树研究所吉林公主岭136100

采用顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联用技术分析了秋子梨'小香水'(Pyrus ussuriensis Maxim.'Xiaoxiangshui')果实后熟过程中果实挥发性组分的变化。结果表明,'小香水'梨果实在20℃后熟过程中挥发性组分的种类及含量均表现为增多的趋... 详细信息

采用顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联用技术分析了秋子梨'小香水'(Pyrus ussuriensis Maxim.'Xiaoxiangshui')果实后熟过程中果实挥发性组分的变化。结果表明,'小香水'梨果实在20℃后熟过程中挥发性组分的种类及含量均表现为增多的趋势。共检测到酯类、醛类、醇类、酸类及萜类5大类共计38种挥发性物质,其中15种为整个后熟过程中的共有组分。5大类挥发性组分中酯类物质的种类最多,其含量在后熟过程中增幅最大,后熟9d时达到最高。'小香水'梨在后熟过程中共检测出包括醛类和酯类在内的10种特征香气组分,其中2-甲基丁酸乙酯、己酸乙酯及丁酸乙酯在9d时香气值分别为668.09、279.58、190.60。20℃后熟6～9d为食用最佳时期。

关键词：秋子梨挥发性组分顶空固相微萃取

果胶甲酯酶抑制子在植物生长发育和逆境胁迫中的作用

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分子植物育种 2024年

作者：关月费雅婷朱祝军茹磊浙江农林大学园艺科学学院农业农村部亚热带果品蔬菜质量安全控制重点实验室浙江省山区农业高效绿色生产协同创新中心

果胶是植物细胞壁的主要组分，果胶的甲酯化程度与模式影响果胶的形态与理化性质。果胶甲酯酶抑制子(pectin methylesterase inhibitor， PMEI)通过抑制果胶甲酯酶(pectin methylesterases， PME)调节果胶侧链的甲酯化修饰。果胶作为植... 详细信息

果胶是植物细胞壁的主要组分，果胶的甲酯化程度与模式影响果胶的形态与理化性质。果胶甲酯酶抑制子(pectin methylesterase inhibitor， PMEI)通过抑制果胶甲酯酶(pectin methylesterases， PME)调节果胶侧链的甲酯化修饰。果胶作为植物细胞壁的主要组分，参与植株的营养生长与生殖生长。PMEI调节果胶去甲酯化的进程在植物生长发育和逆境胁迫中发挥重要作用。本综述阐述PMEI的作用机制、生物学功能、以及PMEI如何作用于PME，并对PMEI调控植株生长发育及逆境胁迫的机制研究提出了展望，以期为利用PMEI调控植物生长发育及逆境胁迫反应提供依据。

关键词：果胶果胶甲酯酶果胶甲酯酶抑制子