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RAD51B-AS1通过上调RAD51B促进卵巢癌的恶性生物学行为（英文）

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2024年第7期 581-607页

作者：韦欣仪王聪慧汤桑桑杨倩沈璋瑾朱佳伟程晓东王新宇谢幸许君芬吕卫国浙江大学医学院附属妇产科医院浙江省妇女生殖健康实验室浙江大学医学院附属妇产科医院妇科肿瘤科浙江大学医学院第一附属医院妇产科浙江省妇产疾病临床医学研究中心浙江大学癌症研究院

长链非编码RNA(lncRNA)在卵巢癌的发生发展中起着不可或缺的作用，但它们在卵巢癌进展中的潜在作用在很大程度上仍是未知。为了研究新型lncRNA RAD51B-AS1在卵巢癌中的具体作用和机制，我们通过逆转录-定量聚合酶链反应实验验证了RAD51B... 详细信息

长链非编码RNA(lncRNA)在卵巢癌的发生发展中起着不可或缺的作用，但它们在卵巢癌进展中的潜在作用在很大程度上仍是未知。为了研究新型lncRNA RAD51B-AS1在卵巢癌中的具体作用和机制，我们通过逆转录-定量聚合酶链反应实验验证了RAD51B-AS1的表达；使用CCK-8实验、集落形成实验、transwell实验和流式细胞术检测细胞的增殖、转移和凋亡水平；建立小鼠异种移植瘤模型检测肿瘤发生情况。结果显示：RAD51B-AS1在人高转移卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中显著上调；同时，RAD51B-AS1显著增强卵巢癌细胞的增殖、转移和抵抗失巢凋亡的能力。生物遗传学预测分析显示，RAD51B-AS1的唯一靶基因为RAD51B。随后的基因功能实验表明，RAD51B与RAD51B-AS1具有相同的生物学效应。体外和体内实验均表明，过表达RAD51B-AS1促进的恶性生物学行为可以通过沉默RAD51B的表达部分或完全逆转。由此可见，RAD51B-AS1可促进卵巢癌的恶性生物学行为，并激活Akt/Bcl-2信号通路，这些作用可能与其正向调节RAD51B的表达有关。RAD51B-AS1有望作为一种新的分子生物标志物，用于卵巢癌不良预后的诊断和预测，并作为疾病管理的潜在治疗靶点。

关键词：卵巢癌(OC) 长链非编码RNA(LncRNA) 转移失巢凋亡

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临床蛋白质组学与结直肠癌精准诊治研究进展

科学通报 2024年

作者：邵营宽徐凯伦董琦郭天南袁瑛邵吉民西湖实验室(生命科学和生物医学浙江省实验室) 西湖智能蛋白质组中心浙江大学医学院病理学与病理生理学系西湖大学医学院/生命科学学院浙江大学癌症研究院浙江省恶性肿瘤临床医学研究中心浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所(恶性肿瘤预警与干预教育部重点实验室) 西湖大学未来产业研究中心

蛋白质组学(proteomics)是研究细胞、组织、体液或生物体的全部蛋白质的新兴交叉科学,对蛋白质进行整体的定性、定量和动态鉴定,并阐释其生物学功能. 21世纪以来,随着质谱(mass spectrometry, MS)技术进步,蛋白质组学获得了快速发展.肿... 详细信息

蛋白质组学(proteomics)是研究细胞、组织、体液或生物体的全部蛋白质的新兴交叉科学,对蛋白质进行整体的定性、定量和动态鉴定,并阐释其生物学功能. 21世纪以来,随着质谱(mass spectrometry, MS)技术进步,蛋白质组学获得了快速发展.肿瘤是具有高度异质性和动态演化的疾病,基于质谱技术的临床蛋白质组学可以分析肿瘤组织中的肿瘤细胞、间质细胞、免疫细胞、细胞外基质,以及其他体液的蛋白质组变化,为认识肿瘤病变机制以及发现肿瘤生物标志物和治疗靶标等提供了重要技术手段,多个跨国学术组织已经开展大规模临床肿瘤样本蛋白质组研究.结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是全世界第三常见癌症以及第二癌症相关死因.我国近年来社会和经济发展迅猛,人们的生活方式和饮食结构出现了变化,结直肠癌的发病率与死亡率持续上升,同时患者呈现出越来越年轻的趋势.近年来,临床蛋白质组学在阐明结直肠癌发生发展分子机制、寻找生物标记物和药物靶点、推动临床肿瘤精准诊治研究等方面取得了重要研究进展.未来随着单细胞和原位空间蛋白质组学技术以及人工智能等技术的发展,将进一步推动大规模的临床样本蛋白质组研究,并联合多组学研究,为降低肿瘤发病率和死亡率发挥重要作用.本文主要对国内外临床蛋白质组学在结直肠癌精准诊治研究中的进展进行综述.

关键词：临床蛋白质组学结直肠癌病变机制生物标志物和药物靶标精准诊治

黑种草子总生物碱对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用

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中成药 2024年第7期 2376-2381页

作者：周梦乔胡兴江张乔刘雪玲吴霞吴明兰李小冬李卫芬叶子奇浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心浙江大学医学院附属第一医院浙江省药物临床研究与评价技术重点实验室浙江省中药临床评价与转化研究中医药重点实验室临床药学部浙江大学动物科学学院饲料科学研究所分子动物营养学教育部重点实验室

目的探索黑种草子总生物碱(TAN)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用。方法通过UPLC-TOF-MS/MS对TAN化学成分进行分析。体内实验建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型，分别给予SASP(200 mg/kg)和TAN(2.5、5.0 mg/kg),连续7 d。给药... 详细信息

目的探索黑种草子总生物碱(TAN)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用。方法通过UPLC-TOF-MS/MS对TAN化学成分进行分析。体内实验建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型，分别给予SASP(200 mg/kg)和TAN(2.5、5.0 mg/kg),连续7 d。给药结束后，检测小鼠体质量、疾病活动指数、结肠长度、结肠病理损伤、IL-1β、IL-18、IL-6、NF-κB、IκBα蛋白表达及其磷酸化水平。体外实验建立LPS和Nigericin双重诱导的THP-1细胞模型，给予TAN(12.5、25、50μg/mL)和MCC950(NLRP3抑制剂，5μmol/L)处理，采用ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6水平。结果 TAN主要由多种含量较大的特征型单体生物碱组成。TAN(2.5、5.0 mg/kg)能改善DSS诱导的小鼠体质量减轻、疾病指数升高、结肠缩短和病理损伤，降低DSS所致的结肠炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6分泌及NF-κB、IκBα蛋白磷酸化水平。体外炎症模型证实，TAN可抑制LPS和Nigericin双重诱导的THP-1细胞上清中的IL-1β、IL-18、IL-6水平。结论 TAN含有多种结构类似的单体生物碱，具有改善溃疡性结肠炎小鼠炎症的作用，该作用可能与其抑制NF-κB通路有关。

关键词：黑种草子总生物碱溃疡性结肠炎炎症 NF-κB

乙肝相关肝细胞癌患者外周血T细胞表面PD-1分子的表达及临床意义

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肝胆胰外科杂志 2024年第5期36卷 306-309页

作者：程俊峰厉学民任超吴晓康傅俊豪浙江大学医学院附属金华医院肝胆胰外科一区浙江金华321000 浙江大学医学院附属金华医院中心实验室浙江金华321000

目的探讨乙肝相关肝细胞肝癌(HCC)患者外周血T细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)分子的表达及临床意义。方法收集2021年6月至2022年7月浙江大学医学院附属金华医院肝胆胰外科收治的乙肝相关HCC手术患者共50例(肝癌组),并选择性别、年龄匹配... 详细信息

目的探讨乙肝相关肝细胞肝癌(HCC)患者外周血T细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)分子的表达及临床意义。方法收集2021年6月至2022年7月浙江大学医学院附属金华医院肝胆胰外科收治的乙肝相关HCC手术患者共50例(肝癌组),并选择性别、年龄匹配的30单纯慢性乙肝患者作为对照组。采用流式细胞学方法检测两组患者外周血CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表面PD-1分子的表达率并比较两组PD-1表达的差异,并分析其与临床病理参数的关系。结果乙肝相关HCC患者外周血CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表面PD-1分子表达率高于单纯慢性乙肝患者[(14.28±7.73)%vs(11.95±4.0)%,(18.22±8.21)%vs(13.04±4.85)%,均P0.05);在术前AFP>400 ng/mL,中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)≥2.81,肿瘤最大径≥5 cm,存在微血管浸润的患者中PD-1分子表达率更高(均P<0.05);且肿瘤分化程度越低,肿瘤中国肝癌分期(CNLC)越靠后,PD-1分子表达率越高。结论外周血T细胞表面PD-1分子表达可能参与乙肝相关HCC的发生、发展,并与肝癌患者的临床病理特征具有相关性。

关键词：程序性死亡受体1(PD-1) 肝细胞癌慢性乙型肝炎外周血 T细胞中性粒细胞/淋巴细胞比值

基于OCT和机器学习的肿瘤类器官多维形态表征及药物作用研究

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中国激光 2024年

作者：毛川伟杨珊珊梁霄王玲徐铭恩浙江大学医学院附属邵逸夫医院普外科浙江省医学信息与生物三维打印重点实验室杭州电子科技大学自动化学院

肿瘤类器官是研究肿瘤生物学和个体患者药物敏感性的新工具。现有人工接种类器官和破坏性终点测试相结合方法可表征类器官药物作用，但要求样本间具有高度均一性，且缺乏对药物作用的时序分析。本文拟构建一种类器官簇生长的综合评价方... 详细信息

肿瘤类器官是研究肿瘤生物学和个体患者药物敏感性的新工具。现有人工接种类器官和破坏性终点测试相结合方法可表征类器官药物作用，但要求样本间具有高度均一性，且缺乏对药物作用的时序分析。本文拟构建一种类器官簇生长的综合评价方法，探讨类器官簇生长的形态特征与药物作用关联机制，为基于患者来源肿瘤类器官（PDOs）的癌症新药筛选或临床药敏检测提供新的表征手段。我们提出了结合光学相干层析成像（OCT）和基于机器学习的类器官分割与分类技术，对类器官簇内成百上千个类器官进行纵向、准确、无标记、并行形态学表征。在欠采样处理基础上，对多个类器官样本进行聚类分析（3个类别），获取类器官簇内类器官类别信息及基于类别的多维形态参数统计信息。进而对各类别数目及形态参数统计信息进行特征筛选和主成分分析（选择特征值大于1的4个主成分），构建类器官簇生长水平综合评价模型。研究结果显示，类器官对药物的反应与形态变化间存在紧密关联，尤其是药物所致的囊状类器官转变为实体类器官。此外，本文提出的基于OCT三维成像和机器学习技术的类器官簇生长水平综合评价模型与传统生化测试三磷酸腺苷（ATP）之间一致性高（82.9%），而基于综合评价模型的相对生长值与ATP值有更高一致性（90.4%）。该方法可以揭示药物作用下类器官的形态学变化规律，可以为基于PDOs的癌症新药筛选或临床药敏检测提供新技术平台。

关键词：光学相干层析成像类器官形态表征药物作用

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重视对早发性结直肠癌的认识

中华胃肠外科杂志 2024年第5期27卷 430-435页

作者：胡烨婷肖乾丁克峰郑树浙江大学医学院附属第二医院大肠外科、恶性肿瘤预警与干预教育部重点实验室、浙江省恶性肿瘤临床医学研究中心杭州310009 消化系统医药基础研究创新中心(教育部) 杭州310058

50岁以下人群中早发性结直肠癌(EOCRC)的发病率和死亡率呈上升趋势。尽管传统流行病学研究已经做了较为深入的研究,筛选出与EOCRC相关的环境因素,但对其病因、机制及治疗的认识还远远不够。因此,本文总结了EOCRC的当前研究进展,特别关... 详细信息

50岁以下人群中早发性结直肠癌(EOCRC)的发病率和死亡率呈上升趋势。尽管传统流行病学研究已经做了较为深入的研究,筛选出与EOCRC相关的环境因素,但对其病因、机制及治疗的认识还远远不够。因此,本文总结了EOCRC的当前研究进展,特别关注流行病学、筛查现状、临床症状和预后情况,为包括精准筛查在内的二级预防提供新依据,为改善EOCRC治疗提供诊疗新思路。

关键词：结直肠肿瘤,早发性流行病学筛查临床特征

和厚朴酚通过Hippo-YAP信号通路影响鼻咽癌CNE1细胞周期与凋亡

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第6期59卷 621-629页

作者：吴楷元刘乐邬振华黄琦谢如姣周磊王淼宁波市医疗中心李惠利医院、宁波大学附属李惠利医院耳鼻咽喉头颈外科宁波315040 浙江大学医学院附属妇产科医院生殖遗传学重点实验室(教育部)和生殖内分泌科杭州310006

目的:探究和厚朴酚对CNE1鼻咽癌细胞周期和凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度的和厚朴酚处理CNE1细胞,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法测定细胞的活性;将CNE1细胞分为空白对照组,10、20、40 μmol/L... 详细信息

目的:探究和厚朴酚对CNE1鼻咽癌细胞周期和凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度的和厚朴酚处理CNE1细胞,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法测定细胞的活性;将CNE1细胞分为空白对照组,10、20、40 μmol/L和厚朴酚处理组和10 μg/ml顺铂组。流式细胞术检测细胞周期分布,线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞线粒体膜电位,原位末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫印迹检测细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞周期蛋白D1(G 1/S specific cyclin D1,cyclin D1)蛋白表达;体外培养CNE1细胞,和厚朴酚处理后进行转录组测序,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Yes激酶相关蛋白(yes-associated protein delta,YAP)mRNA表达,免疫印迹检测磷酸化YAP蛋白(phospho-YAP,p-YAP)以及细胞核中YAP蛋白表达水平,免疫荧光检测YAP蛋白核分布;将细胞分为对照组、哺乳动物STE20样激酶1/2(mammalian STE20-like kinase 1/2 inhibitor,MST1/2)抑制剂(XMU-MP-1)组、和厚朴酚组、XMU-MP-1+和厚朴酚组,利用免疫印迹、流式细胞术和TUNEL法观察Hippo通路在和厚朴酚影响CNE1细胞周期与凋亡中的作用。采用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析。结果:与对照组比较,和厚朴酚处理组CNE1细胞活力、线粒体膜电位、PCNA与cyclin D1蛋白表达水平显著降低( P值均<0.05),G 0/G 1期细胞比例和TUNEL阳性细胞率显著增加( P值均<0.05)。转录组分析结果发现,差异基因主要富集在Wnt信号通路、肿瘤坏死因子通路和Hippo信号通路等。和厚朴酚处理后,细胞中YAP mRNA表达和细胞核中YAP蛋白表达水平降低,p-YAP蛋白水平升高,较对照组差异有统计学意义( P值均<0.05)。与和厚朴酚组比较,XMU-MP-1+和厚朴酚组细胞中的p-YAP蛋白表达水平降低(1.157±0.076比0.479±0.038, t=37.120, P<0.05),细胞核中YAP的蛋白表达水平升高(0.143±0.012比0.425±0.031, t=29.181, P<0.05),G 0/G 1期细胞比例降低[(72.494±3.309)%比(58.747±2.865)%, t=17.265, P<0.05]、细胞凋亡水平减少[(53.158±3.376)%比(29.621±2.713)%, t=28.584, P<0.05]。结论:和厚朴酚能够引起CNE1鼻咽癌细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,这可能是通过调控Hippo/YAP信号通路来实现的。

关键词：鼻咽肿瘤 Hippo/Yes激酶相关蛋白和厚朴酚细胞周期细胞凋亡

通过机械力刺激乙型肝炎病毒X基因(HBX)转染的肝星状细胞制备血液透析用双层仿生血管（英文）

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2024年第6期25卷 499-513页

作者：刘弘毅周媛媛郭鹏郑雄伟陈炜斌张世超付雨周旭万郑赵斌赵一麟厦门大学附属中山医院肿瘤微创与介入治疗科厦门大学医学院厦门市健康医疗大数据中心福建省慢性肝病肝癌重点实验室(厦门大学附属中山医院) 厦门市细胞介入及介入医学材料重点实验室

人工血管的移植（AVG）造瘘被广泛用于肾衰竭患者的血液透析治疗。然而，目前临床使用的人工血管的弹性和顺应性较差，容易导致狭窄，形成血栓。用于透析的理想人造血管应模拟天然血管的结构和成分，而天然血管主要由血管内细胞分泌的... 详细信息

人工血管的移植（AVG）造瘘被广泛用于肾衰竭患者的血液透析治疗。然而，目前临床使用的人工血管的弹性和顺应性较差，容易导致狭窄，形成血栓。用于透析的理想人造血管应模拟天然血管的结构和成分，而天然血管主要由血管内细胞分泌的细胞外基质（ECM）中的胶原蛋白维持。研究发现，在乙型肝炎病毒（HBV）诱导的肝纤维化中，肝星状细胞（HSCs）变得异常活跃，并产生过多的ECM纤维。此外，机械刺激可促进ECM分泌并重塑ECM的纤维结构。基于上述因素，我们用乙型肝炎病毒X基因（HBX）转染HSCs细胞，在体外模拟HBV病毒感染的过程。随后，将HBX-HSCs细胞种植入由聚己内酯-聚氨酯（PCL-PU）制备的内层致密、外层多孔的双层支架，通过机械力刺激HBX-HSCs分泌大量的胶原纤维，并促进其与血管支架的多孔结构进行交联。由此，我们获得了一种ECM-PCL-PU复合仿生血管，其在脱细胞后可作为透析用血管。最后，我们将制备得到的血管支架植入兔颈部动静脉瘘模型。该血管支架具有很强的拉伸强度和顺畅的血流，并在兔子体内形成了自体血管。综上，我们的研究展示了利用人体细胞创建仿生透析血管的方法，为创建临床透析血管通路提供了一种新方法。

关键词：复合双层仿生血管细胞外基质肝星状细胞乙型肝炎病毒X基因(HBX) 机械力

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糖蛋白过敏原N-糖链与过敏的相关性研究

生物化学与生物物理进展 2024年第5期51卷 1023-1033页

作者：张瑜芯刘瑞杰张绍兴袁舒颖陈妍雯叶以琳林谦阁芦鑫荣童永亮陈力孙桂芹浙江中医药大学医学技术与信息工程学院杭州310053 嘉兴妇幼保健院检验科嘉兴314009 上海交通大学医学院附属仁济医院宁波医院宁波市杭州湾医院中心实验室宁波315336 复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生健康委员会重点实验室上海200032

糖蛋白是一种含有寡糖链的蛋白质,糖链与蛋白质之间以共价键相连。N-糖蛋白为常见过敏原之一,主要来源于食物、吸入物、昆虫毒素等,能够引起过敏反应。N-糖蛋白过敏原的N-糖链结构影响过敏原与IgE的结合,影响抗原提呈细胞(APC)对过敏原... 详细信息

糖蛋白是一种含有寡糖链的蛋白质,糖链与蛋白质之间以共价键相连。N-糖蛋白为常见过敏原之一,主要来源于食物、吸入物、昆虫毒素等,能够引起过敏反应。N-糖蛋白过敏原的N-糖链结构影响过敏原与IgE的结合,影响抗原提呈细胞(APC)对过敏原的识别和提呈。本文在介绍与过敏相关的N-糖蛋白、常见N-糖蛋白过敏原的N-糖链结构及与过敏相关的糖基化酶的基础上,进一步分析过敏原N-糖链影响过敏的机制,为临床预防与治疗过敏性疾病提供新的思路。

关键词：过敏反应 N-糖基化 N-糖链结构糖基化相关酶过敏机制