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犬弓首蛔虫感染性幼虫宿主血清反应性微RNA的鉴定与功能分析

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浙江大学学报(农业与生命科学版) 2024年

作者：陈宜杨一帆陈学秋熊志威杨晨雨杨怡马光旭杜爱芳浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所

弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病，呈世界性分布，主要由犬弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点，首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首... 详细信息

弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病，呈世界性分布，主要由犬弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点，首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首蛔虫感染性幼虫，然后提取虫体样本的总RNA进行小RNA测序（small RNA-seq），最后开展处理组与未处理组的虫体微RNA(microRNAs, miRNAs)差异转录分析及靶基因预测。结果显示，在4个处理组样本和4个未处理组样本中共检测到972个miRNAs，其中血清刺激造成15个miRNAs的转录水平发生显著变化；靶基因预测发现，这些转录水平发生显著变化的miRNAs靶向宿主免疫细胞黏附与迁移、嗅觉信号传导等相关基因，提示在寄生虫与宿主互作中发挥作用。本研究鉴定到了一组具有宿主血清反应性的犬弓首蛔虫感染性幼虫miRNAs，为其在感染宿主、免疫调控以及致病机制中的具体作用研究奠定了基础。

关键词：弓首蛔虫血清反应性微RNA 感染与免疫致病机制

捻转血矛线虫胰岛素样肽编码基因的鉴定、表达与组织定位

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中国兽医学报 2024年第6期 1184-1193页

作者：刘伟吴飞陈学秋杜振东马光旭杜爱芳浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所浙江省动物预防医学重点实验室

胰岛素样肽(insulin-like peptides, ILPs)在线虫新陈代谢、信号转导、发育进程等生物学过程中发挥重要作用，是控制动物寄生线虫感染的潜在靶标。为探究ILPs在寄生线虫发育与感染中的具体作用，对捻转血矛线虫(Haemonchus contortus,**... 详细信息

胰岛素样肽(insulin-like peptides, ILPs)在线虫新陈代谢、信号转导、发育进程等生物学过程中发挥重要作用，是控制动物寄生线虫感染的潜在靶标。为探究ILPs在寄生线虫发育与感染中的具体作用，对捻转血矛线虫(Haemonchus contortus,***)ILPs编码基因进行全基因组鉴定、序列和进化分析；通过实时荧光定量PCR方法检测***不同发育时期ILPs编码基因的转录水平；经原核表达ILPs重组蛋白用于多克隆抗体制备及Western blot分析；采用间接免疫荧光定位试验明确ILPs在***虫体不同发育阶段的组织分布情况。结果显示，与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)相比，*** ILPs编码基因发生显著缩减，仅有3个具备拮抗性分子特性的ILPs编码基因；ILPs编码基因在***感染性三期幼虫阶段的转录水平最高；ILPs蛋白主要分布于感染性幼虫的肠道与皮下组织。本研究鉴定3个可能参与调控***幼虫发育进程及感染过程的拮抗性ILPs编码基因，为寄生线虫在宿主体内的滞育现象研究以及潜在干预靶标的筛选奠定了基础。

关键词：捻转血矛线虫胰岛素样肽原核表达组织定位发育调控幼虫滞育

应用mRNA展示技术探索地黄苷促进造血的关键靶点及分子机制

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科学通报 2024年第19期69卷 2701-2703页

作者：洪蒙莹杜雨棽孙仁浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所杭州310009 西湖大学医学院应急医学研究中心杭州310024

天然产物是在漫长的生物进化过程中通过自然筛选优化后保留的产物,具有独特的生物活性和药理作用,一直以来都是药物创新研发的重要源泉[1].然而,尽管其潜力巨大,但许多具有潜在药理活性的小分子细胞靶标仍然未知,这阻碍了它们的进一步... 详细信息

天然产物是在漫长的生物进化过程中通过自然筛选优化后保留的产物,具有独特的生物活性和药理作用,一直以来都是药物创新研发的重要源泉[1].然而,尽管其潜力巨大,但许多具有潜在药理活性的小分子细胞靶标仍然未知,这阻碍了它们的进一步开发和临床应用.药物靶标不仅决定了药物的疗效和安全性,也直接影响了新一代药物研发的方向和策略.

关键词：生物进化过程疗效和安全性药物研发药物靶标筛选优化天然产物创新研发分子细胞

基于网络药理学和分子对接探究芹菜素缓解奶牛热应激及低氧应激的潜力与机制

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中国农业科学 2024年第5期57卷 1010-1022页

作者：刘卓琳刘红云奶业科学研究所浙江大学动物科学学院

【目的】利用网络药理学和分子对接方法，系统预测芹菜素缓解奶牛热应激及低氧应激的作用机制。为芹菜素的应用提供参考。【方法】首先从TCMSP(中药系统药理学数据库)和Gene Cards(基因数据库)分别检索“Apigenin”“heat stress”“hyp... 详细信息

【目的】利用网络药理学和分子对接方法，系统预测芹菜素缓解奶牛热应激及低氧应激的作用机制。为芹菜素的应用提供参考。【方法】首先从TCMSP(中药系统药理学数据库)和Gene Cards(基因数据库)分别检索“Apigenin”“heat stress”“hypoxia”，获得芹菜素、热应激和低氧应激相关靶点，韦恩交集取得芹菜素缓解双重应激(热应激+低氧)的靶点集。利用STRING数据库构建双重靶点蛋白-蛋白互作(PPI)网络，使用Cytoscape 3.9.1软件的Cyto NCA插件分别对网络节点中心性进行计算，筛选得到核心靶点。利用David数据库的分析工具“Functional Annotation”对度值排名前30的芹菜素缓解双重应激靶点进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。同时，对以上靶点进行分子复合物检测分析(MCODE)得到核心基因簇，并进一步对核心基因簇进行GO和KEGG分析。根据KEGG通路富集结果与核心靶点信息构建芹菜素-双重应激靶点-信号通路网络。最后，使用Autodock vina程序将芹菜素与核心靶点逐一进行分子对接，利用Pymol软件和PLIP网站分析其相互作用模式并将结果可视化。【结果】TCMSP数据库检索得到芹菜素靶点68个，Gene Cards数据库中获得低氧相关基因6 661个，热应激相关基因9 046个，获得三者的交集靶点56个，即芹菜素缓解双重应激的可能靶点。靶点PPI网络的节点数为56，边数为436，平均节点度值为15.6，平均局部聚类系数为0.728,PPI富集P值研究利用网络药理学和分子对接方法挖掘了芹菜素缓解多重应激的潜力，为芹菜素及富含芹菜素的植物在奶牛生产上的应用提供了理论参考。

关键词：芹菜素奶牛热应激低氧网络药理学分子对接

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弓形虫多表位PLGA纳米疫苗的研究

动物医学进展 2024年第2期45卷 1-6页

作者：张飞跃伍孟琛吴海燕马光旭吴飞杜爱芳杨怡浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室浙江杭州310058

构建弓形虫多表位PLGA纳米疫苗并评估其可行性,预测弓形虫TgMIC3蛋白的B、T淋巴细胞优势抗原表位,联合抗原表位SAG1((238-256))、GRA7((20-28))和AS15,构建出新型多表位肽,用生物信息学工具对其理化性质、三级结构和分子对接能力等特征... 详细信息

构建弓形虫多表位PLGA纳米疫苗并评估其可行性,预测弓形虫TgMIC3蛋白的B、T淋巴细胞优势抗原表位,联合抗原表位SAG1((238-256))、GRA7((20-28))和AS15,构建出新型多表位肽,用生物信息学工具对其理化性质、三级结构和分子对接能力等特征进行分析;原核表达并纯化多表位重组蛋白(multi-epitope protein, MEP),通过Western blot鉴定纯化效果;搭建MEP-PLGA纳米递送体系,对纳米颗粒进行表征。结果表明,多表位肽为亲水性蛋白非过敏原,具有一定抗原性,抗原表位均呈现在蛋白表面,能与MHC分子H-2-Dd稳定结合;可在BL21(DE3)大肠埃希氏菌表达系统中稳定表达,并能被特异性抗体所识别;构建的MEP-PLGA纳米递送体系包封为54.42%,纳米颗粒饱满,大小均一。成功设计并构建出弓形虫多表位PLGA纳米疫苗,为弓形虫新型纳米疫苗的研发奠定了基础。

关键词：弓形虫多表位重组蛋白 PLGA纳米疫苗

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哮喘中嗜酸性粒细胞异质性研究进展

生理学报 2024年第04期 643-652页

作者：陈严应颂敏张超浙江大学呼吸疾病研究所浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科浙江大学国际健康医学研究院

哮喘是一种以慢性气道炎症为主要病理特征的异质性疾病，其中超过半数以上的患者由过敏原诱发，称为过敏性哮喘。炎症发生时，特异性趋化因子在受损的气道局部释放，募集大量嗜酸性粒细胞，活化后释放大量的炎症介质和细胞因子，进一步... 详细信息

哮喘是一种以慢性气道炎症为主要病理特征的异质性疾病，其中超过半数以上的患者由过敏原诱发，称为过敏性哮喘。炎症发生时，特异性趋化因子在受损的气道局部释放，募集大量嗜酸性粒细胞，活化后释放大量的炎症介质和细胞因子，进一步加剧气道炎症，嗜酸性粒细胞的数目与哮喘的严重程度呈正相关。近年来，嗜酸性粒细胞在哮喘发病机制中的作用受到广泛关注，相关的靶向药物和治疗策略也有大量研究。本文主要综述嗜酸性粒细胞异质性在哮喘发生、发展中重要作用的研究进展，并为未来的个性化和精准治疗提供新的思路。

关键词：哮喘气道炎症嗜酸性粒细胞异质性

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捻转血矛线虫blister-5基因序列特征及表达特性分析

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中国农业大学学报 2024年第10期 199-207页

作者：汤洪宁吴飞项继忠童丹妮杜振东陈学秋马光旭杨怡浙江大学动物科学学院/浙江省动物预防医学重点实验室湖州咩咩羊牧业有限公司

为明确捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）中Kunitz型蛋白BLI-5的表达特性，利用生物信息学软件对其基因结构、保守结构域、进化关系和蛋白质三维结构进行分析；基于WormBase数据库，分析捻转血矛线虫发育过程各个阶段Hc-bli-5与Hc-b... 详细信息

为明确捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）中Kunitz型蛋白BLI-5的表达特性，利用生物信息学软件对其基因结构、保守结构域、进化关系和蛋白质三维结构进行分析；基于WormBase数据库，分析捻转血矛线虫发育过程各个阶段Hc-bli-5与Hc-bli-4的相对转录丰度；通过构建原核表达载体诱导表达重组蛋白，并制备多克隆抗体，采用虫体组织免疫荧光试验分析目标蛋白（Hc-BLI-5）在捻转血矛线虫中的组织定位情况。结果显示：1)Hc-bli-5基因全长2 088 bp，由4个外显子和3个内含子组成，Hc-BLI-5共有195个氨基酸，132～192位氨基酸为Kunitztype super family结构域，是一种丝氨酸蛋白酶抑制因子。2）进化树分析发现，丝氨酸枯草杆菌蛋白酶超家族蛋白BLI-5在寄生线虫和自由生活线虫中均有较为密切的进化关系，捻转血矛线虫与柏氏血矛线虫（Haemonchus placei）在该基因的进化关系上最为接近，聚集在进化树的同一小分支上。3）蛋白质结构对比分析显示，捻转血矛线虫和秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）BLI-5具有一定的相似性，尤其是Kunitz结构域。4）各时期转录丰度检测显示，Hc-bli-5与Hc-bli-4的表达趋势有一定的重叠，提示二者可能互相作用、参与共同的生物学过程。5）组织定位研究表明，Hc-BLI-5蛋白主要表达于捻转血矛线虫的表皮和肌肉组织。综上，Hc-bli-5可能与Hc-bli-4相互作用参与捻转血矛线虫蜕皮过程。本研究明确了Hc-bli-5的序列特征及其蛋白的表达特性，为探索其是否参与捻转血矛线虫蜕皮过程及其作用机制提供了理论依据。

关键词：捻转血矛线虫蜕皮 Hc-bli-5 序列特征表达特性

伴多位点垂直型骨吸收的Ⅲ期牙周炎多学科联合治疗7年纵向观察1例

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中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 715-720页

作者：王芳蔡霞何福明谈龙李晓军浙江大学医学院附属口腔医院牙周病科·浙江大学口腔医学院、浙江省口腔疾病临床医学研究中心、浙江省口腔生物医学研究重点实验室、浙江大学癌症研究院杭州310006 浙江大学医学院附属口腔医院修复科·浙江大学口腔医学院、浙江省口腔疾病临床医学研究中心、浙江省口腔生物医学研究重点实验室、浙江大学癌症研究院杭州310006 浙江大学医学院附属口腔医院正畸科·浙江大学口腔医学院、浙江省口腔疾病临床医学研究中心、浙江省口腔生物医学研究重点实验室、浙江大学癌症研究院杭州310006

伴垂直型骨吸收且存在深牙周袋的重度牙周炎是临床治疗难点。改变患牙预后并获得牙周组织再生有助于满足患者的美观和功能需求。本文报道1例伴多位点垂直型骨吸收的Ⅲ期牙周炎患者,通过牙周基础治疗、牙周手术治疗以及联合正畸和种植修... 详细信息

伴垂直型骨吸收且存在深牙周袋的重度牙周炎是临床治疗难点。改变患牙预后并获得牙周组织再生有助于满足患者的美观和功能需求。本文报道1例伴多位点垂直型骨吸收的Ⅲ期牙周炎患者,通过牙周基础治疗、牙周手术治疗以及联合正畸和种植修复治疗,纵向观察7年,患者牙周状况稳定,垂直型骨吸收位点获得有效再生,下前牙修复效果满意。

关键词：纵向观察牙周炎患者牙周基础治疗种植修复重度牙周炎前牙修复牙周状况牙周组织再生

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种植位点角化龈增量的时机和术式考量

中华口腔医学杂志 2024年第2期59卷 182-190页

作者：杨杭倪杰陆薇李晓军何福明浙江大学医学院附属口腔医院修复科·浙江大学口腔医学院浙江省口腔疾病临床医学研究中心浙江省口腔生物医学研究重点实验室浙江大学癌症研究院杭州310006 浙江大学医学院附属口腔医院牙周科·浙江大学口腔医学院浙江省口腔疾病临床医学研究中心浙江省口腔生物医学研究重点实验室浙江大学癌症研究院杭州310006

近年,种植位点周围2 mm角化龈宽度(KMW)的生物学作用和美学作用已逐渐受到重视,如何对角化龈不足的患者进行增量受到临床医师越来越广泛的关注。游离龈移植(FGG)是角化龈增量的金标准,但种植术前、种植手术同期、种植体骨整合期、种植... 详细信息

近年,种植位点周围2 mm角化龈宽度(KMW)的生物学作用和美学作用已逐渐受到重视,如何对角化龈不足的患者进行增量受到临床医师越来越广泛的关注。游离龈移植(FGG)是角化龈增量的金标准,但种植术前、种植手术同期、种植体骨整合期、种植二期手术以及修复负载后还可根据不同的适应证使用位点保存术(ARP)、上皮下结缔组织移植(CTG)以及根向复位瓣(APF)等方式获得2 mm以上的角化龈增量效果。本文总结对种植患者不同时期进行角化龈增量的考量因素以及术式选择,以期为种植体周围角化龈不足的防治策略提供参考。

关键词：牙种植牙龈美学,牙科角化龈增量游离龈移植上皮下结缔组织移植根向复位瓣