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新肾病1号方调控miR-199b-5p抑制肾小管上皮间充质转化改善肾纤维化的作用研究

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中草药 2024年第5期55卷 1600-1608页

作者：曾聪聪俞文秀王成功姜程曦程锦国温州医科大学附属第一医院中医科浙江温州325000 温州医科大学浙江温州325000 温州医科大学药学院浙江温州325000

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻... 详细信息

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻方法建立大鼠肾纤维化模型,给予药物干预14 d后,检测各组大鼠肾功能;苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肾脏组织病理变化;对假手术组、模型组和新肾病1号方高剂量组大鼠肾脏组织进行miRNA测序,筛选差异表达miRNAs,qRT-PCR验证,并进行靶基因的基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,生物信息学分析miRNAs与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、肾纤维化的关联性。免疫荧光法和Western blotting检测肾组织EMT相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,新肾病1号方组大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均明显降低(P<0.05、0.01),肾组织病理变化有所改善。miRNA测序分析发现,miR-199b-5p在模型组表达上调,而在新肾病1号方高剂量组表达下调,qRT-PCR验证了其mRNA相对表达量与测序结果基本一致;miR-199b-5p的靶基因中与EMT、肾纤维化相关功能的90个。与模型组比较,新肾病1号方组肾组织中EMT相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,αSMA)和波形蛋白(Vimentin)表达下调(P<0.05、0.001),E-钙黏蛋白(E-cadherin)和紧密连接蛋白-1(Zonula occludens1,ZO-1)表达上调(P<0.05)。结论新肾病1号方可能通过下调miR-199b-5p表达,抑制EMT,从而发挥抗肾纤维化的作用。

关键词：新肾病1号方上皮间充质转化肾纤维化 RNA测序 miR-199b-5p 柴胡皂苷黄芪甲苷盐酸小檗碱

肠道菌群导致卵巢切除小鼠骨髓内铁死亡的研究

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 643-648,661页

作者：谭曾林曾菁菁刘建纬边若瑜陈雷温州医科大学附属第一医院骨科浙江温州325000 温州医科大学宁波院区浙江宁波325000 温州医科大学基础医学院浙江温州325000 温州医科大学浙江温州325000

目的探讨肠道菌群是否激活骨髓内铁死亡引发绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)。方法通过Micro-CT分析正常组及卵巢切除(ovariectomy,OVX)组小鼠的股骨结构;通过16 S rRNA测序分析小鼠的肠道菌群结构;提取小鼠回肠、... 详细信息

目的探讨肠道菌群是否激活骨髓内铁死亡引发绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)。方法通过Micro-CT分析正常组及卵巢切除(ovariectomy,OVX)组小鼠的股骨结构;通过16 S rRNA测序分析小鼠的肠道菌群结构;提取小鼠回肠、结肠和股骨的RNA及蛋白,并检测其中炎性因子、紧密连接蛋白及铁死亡相关因子的表达水平;利用试剂盒检测股骨中丙二醛、还原型谷胱甘肽及组织铁含量。结果OVX组小鼠肠道菌群的物种多样性及丰富度显著增加,引起OVX小鼠肠道屏障功能受损。肠道屏障功能的受损引起骨髓的炎性反应及铁死亡的发生,最终导致了PMOP的发生发展。结论肠道菌群能够通过促进OVX小鼠骨髓炎症及骨髓内细胞铁死亡引起PMOP。

关键词：肠道菌群骨质疏松症炎症铁死亡·

外泌体源性miRNA-21-5p/Smad7在石英粉尘致大鼠肺纤维化中的作用

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环境与职业医学 2024年第8期41卷 861-866页

作者：卢炀丁晓慧王甜甜徐萌彤郝嘉瑞李文静宋静山西医科大学公共卫生学院山西医科大学煤炭环境致病与防治教育部重点实验室山西医科大学国家卫健委尘肺病重点实验室

[背景]石英粉尘在肺部无法降解，职业生产过程中吸入大量石英粉尘会导致肺纤维化的发生，进而发展为矽肺病。近年来，研究发现外泌体可能通过携带微小核糖核酸（miRNA）参与纤维化疾病的发病过程，但其在矽肺进程中的作用机制仍然有待... 详细信息

[背景]石英粉尘在肺部无法降解，职业生产过程中吸入大量石英粉尘会导致肺纤维化的发生，进而发展为矽肺病。近年来，研究发现外泌体可能通过携带微小核糖核酸（miRNA）参与纤维化疾病的发病过程，但其在矽肺进程中的作用机制仍然有待研究。[目的]研究外泌体源miRNA-21-5p/抗生物皮肤生长因子母体同源蛋白7（Smad7）在石英粉尘致大鼠肺纤维化的中作用。[方法] 24只健康雄性SD大鼠被随机分为4组（每组6只）：对照4周组、对照16周组和石英4周组、石英16周组。在实验开始时，采用一次性非暴露式气管内染尘的方式分别向石英组和对照组大鼠气管内注入1 mL石英悬液(50 mg·mL-1)和1 mL生理盐水。染尘后第4周、16周行肺泡灌洗术获取肺泡灌洗液，采用聚乙二醇（PEG）沉淀法提取灌洗液内的外泌体，透射电子显微镜（TEM）进行形态学的鉴定，纳米追踪分析（NTA）检测外泌体的粒径，免疫印迹法（WB）检测外泌体的标志蛋白CD9和CD63。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定外泌体内miRNA-21-5p的表达水平；采用苏木精-伊红染色法（HE）染色及马松染色法（Masson）观察大鼠肺组织损伤及纤维化病变程度；采用羟脯氨酸（HYP）法检测肺组织胶原含量；采用WB检测肺组织Smad7蛋白的表达。[结果]病理染色结果显示，与对照组相比，染尘4周后大鼠肺组织炎细胞浸润，肺泡壁增厚，胶原蛋白增多，染尘16周后出现胶原蛋白沉积和矽结节；与对照组相比，染尘4周、16周时石英组大鼠肺组织中HYP的表达水平均增高（P <0.05）；透射电镜下可见外泌体呈经典的茶托样结构，NTA分析显示其平均粒径为95.8 nm,WB检测到外泌体标志蛋白CD9、CD81表达阳性；染尘4周、16周时，与对照组相比，石英组大鼠肺泡灌洗液内外泌体源性miRNA-21-5p表达均增高（P <0.05），肺组织Smad7蛋白表达量均降低（P <0.05）。[结论]外泌体源性miRNA-21-5p和Smad7可能参与了石英粉尘致大鼠肺纤维化的作用机制。

关键词：石英粉尘外泌体 miRNA-21-5p Smad7 肺纤维化

基于数据挖掘研究含白术-茯苓药对方剂的组方规律

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中国现代应用药学 2024年第14期41卷 1980-1988页

作者：杨伟金王婷婷朱燕舞朱珊珊陈静温州医科大学附属台州医院药剂科浙江台州317000 温州医科大学附属台州医院中医科浙江台州317000 温州医科大学附属台州医院台州市药物治疗与转化研究重点实验室浙江台州317000

目的基于《中医方剂大辞典》,整理分析含白术-茯苓药对方剂的配伍规律,为其临床应用及科学研究提供参考。方法检索筛选含白术-茯苓药对的方剂,提取方剂功效,白术与茯苓炮制品种、剂量、配比等相关数据,并进行标准化处理,利用Excel软件和... 详细信息

目的基于《中医方剂大辞典》,整理分析含白术-茯苓药对方剂的配伍规律,为其临床应用及科学研究提供参考。方法检索筛选含白术-茯苓药对的方剂,提取方剂功效,白术与茯苓炮制品种、剂量、配比等相关数据,并进行标准化处理,利用Excel软件和IBM SPSS Modeler 18.0软件进行数据挖掘。结果共收集整理3535首方剂,涉及578味中药,以甘温类药物为主,多归肝经;共涉及15种功效,以补益、祛湿等功效为主。白术-赤茯苓药对与补益、祛湿呈强关联;麸炒白术-茯苓药对与补益呈强关联。白术、茯苓用药剂量以≤15 g为主,配比以1∶1为主,均与补益作用呈强关联。与白术-茯苓配伍频次≥200的中药共39味,甘草、人参、陈皮、当归、白芍、肉桂、地黄、川芎8味药材为核心高频中药。结论本研究揭示的含白术-茯苓药对方剂的用药规律和配伍特点,可为今后的研究开发及临床应用提供参考。

关键词：白术-茯苓药对数据挖掘 Apriori算法配伍特征用药规律

大气PM_(2.5)暴露与帕金森病关系的meta分析

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环境与职业医学 2024年第2期41卷 168-174页

作者：王一先吴建军胡睿居静娟温州医科大学公共卫生学院浙江温州325035

[背景]现有研究提示大气细颗粒物(PM_(2.5))暴露与帕金森病(PD)可能存在关联,但目前的流行病学研究结论尚不一致。[目的]系统评价大气PM_(2.5)暴露与PD发病风险的相关性,并探讨可能的影响因素,以期为PD早期预防策略的制定提供相关信息。... 详细信息

[背景]现有研究提示大气细颗粒物(PM_(2.5))暴露与帕金森病(PD)可能存在关联,但目前的流行病学研究结论尚不一致。[目的]系统评价大气PM_(2.5)暴露与PD发病风险的相关性,并探讨可能的影响因素,以期为PD早期预防策略的制定提供相关信息。[方法]检索The Cochrane Library、PubMed、Web of Science、Medline、Embase、中国知网(CNKI)、万方和维普中文科技期刊数据库,检索词包括:帕金森病、PM_(2.5)、细颗粒物、Parkinson’disease、particulate matter 2.5。搜集关于大气中PM_(2.5)暴露与PD发生风险相关的队列研究,从各数据库建库检索至2023年6月26日。对文献进行筛选,提取纳入研究及其研究对象的基本信息、各研究的结局指标和结果测量数据以及主要偏倚风险的评估内容,用纽卡斯尔-渥太华量表评估纳入队列研究的文献质量,并使用Stata 15.0对数据进行meta分析、亚组分析、敏感性分析及发表偏倚风险评估。[结果]经筛选,纳入队列研究数12个,包括17443136例参与者,随访时间为3.5~22年,采用随机效应模型进行meta分析,结果显示:大气中PM_(2.5)暴露可使PD的发生风险增加6%[HR=1.06(95%CI:1.02~1.11),P=0.006]。亚组分析结果显示:大气PM_(2.5)的暴露使北美和东亚地区人群PD的发生风险分别增加6%[HR=1.06(95%CI:1.00~1.12),P=0.033]和17%[HR=1.17(95%CI:1.02~1.33),P=0.020],但对欧洲人群的影响无统计学意义。与平均年龄研究提示大气PM_(2.5)暴露可显著增加PD的发生风险[HR=1.06(95%CI:1.01~1.12),P=0.012;HR=1.06(95%CI:1.01~1.11),P=0.027],相反地,随访时间研究结果具有较好的稳定性。发表偏倚风险评估联合剪补法结果显示本研究结果稳健。[结论]大气中PM_(2.5)暴露可增加PD的发病风险,不同地区和年龄是影响PD发生风险的因素,随访时间和纳入的PD发生数可能影响研究结果。

关键词：帕金森病细颗粒物大气污染 meta分析

IL-10、TGF-β1在小鼠深静脉血栓中的时序性变化

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法医学杂志 2024年第2期40卷 179-185页

作者：吴娟娟黄俊杰张煜卓嘉英陈刚杨舒涵赵蕴琦范琰琰温州医科大学法医学系浙江温州325035 温州医科大学司法鉴定中心浙江温州325035 温州医科大学司法鉴定科学技术研究所浙江温州325035

目的检测小鼠深静脉血栓发展过程中白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达变化,探讨其在血栓形成时间推断中的应用价值。方法对实验组小鼠建立下腔静脉结扎模型,分别... 详细信息

目的检测小鼠深静脉血栓发展过程中白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达变化,探讨其在血栓形成时间推断中的应用价值。方法对实验组小鼠建立下腔静脉结扎模型,分别于术后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d过量麻醉处死小鼠,在结扎点的下方提取形成血栓的下腔静脉段。对照组小鼠不进行结扎,提取与实验组相同部位的正常下腔静脉段作为对照样本。应用免疫组织化学染色、蛋白质印迹法和real-time qPCR检测IL-10和TGF-β1在血栓形成期间的表达变化。结果免疫组织化学染色结果显示,IL-10主要表达于血栓中的单核细胞,TGF-β1主要表达于血栓中的单核细胞和成纤维样细胞。蛋白质印迹法以及real-time qPCR检测结果显示,各实验组IL-10和TGF-β1的表达水平均高于对照组。IL-10的mRNA及蛋白水平分别于术后7 d和10 d达到峰值,术后7 d的mRNA表达量是对照组的(4.72±0.15)倍,术后10 d的蛋白表达量是对照组的(7.15±0.28)倍。TGF-β1的mRNA及蛋白水平分别于术后10 d和14 d达到峰值,术后10 d的mRNA表达量是对照组的(2.58±0.14)倍,术后14 d的蛋白表达量是对照组的(4.34±0.19)倍。结论深静脉血栓演变期间IL-10和TGF-β1呈现时序性表达变化,IL-10和TGF-β1的表达水平可以为血栓形成时间推断提供参考依据。

关键词：法医病理学深静脉血栓形成白细胞介素-10 转化生长因子-β1 时序性表达小鼠

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成纤维细胞生长因子与男性生殖调控

中华男科学杂志 2024年第1期30卷 3-8页

作者：李校堃国际生长因子研究院/温州医科大学浙江温州325035

睾丸是雄性哺乳动物的生殖腺,主要功能为精子产生和雄激素合成。睾丸的结构及其功能的维持由生精细胞、支持细胞和间质细胞等多种细胞组成的复杂信号网络所支持。除了下丘脑-垂体-性腺轴以外,多种性激素和细胞因子也参与睾丸功能的调控... 详细信息

睾丸是雄性哺乳动物的生殖腺,主要功能为精子产生和雄激素合成。睾丸的结构及其功能的维持由生精细胞、支持细胞和间质细胞等多种细胞组成的复杂信号网络所支持。除了下丘脑-垂体-性腺轴以外,多种性激素和细胞因子也参与睾丸功能的调控。成纤维细胞生长因子(FGF)是一类具有促细胞增殖、诱导组织分化和调控器官发育的重要活性蛋白,其在男性生殖系统的多个组织中均有表达。本文将概述FGF及其受体通路对睾丸细胞增殖和分化调控、精子发生诱导、男性生育力维持等方面的作用。

关键词：成纤维细胞生长因子男性生殖调控机制

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中国食管癌时空分布特征研究

中华肿瘤杂志 2024年第7期46卷 657-662页

作者：赖少萍粟海媚刘亚文张孟齐黄振秋刘佳欣黄宏温州医科大学公共卫生学院温州325035 温州医科大学公共卫生学院/浙江省流域水环境与健康风险研究重点实验室温州325035

目的采用空间流行病学方法,以县(市、区)为尺度,探索中国居民食管癌发病率和死亡率的时间变化趋势和空间分布特征,为食管癌的防治工作提供本土化证据。方法数据来源为国家癌症中心发布的2008—2019版《中国肿瘤登记年报》中2005—2016... 详细信息

目的采用空间流行病学方法,以县(市、区)为尺度,探索中国居民食管癌发病率和死亡率的时间变化趋势和空间分布特征,为食管癌的防治工作提供本土化证据。方法数据来源为国家癌症中心发布的2008—2019版《中国肿瘤登记年报》中2005—2016年食管癌发病率(粗率)和死亡率(粗率),采用Joinpoint模型进行时间趋势分析。选取2016年肿瘤登记地区作为空间特征分析的研究区域,共计487个县(市、区),覆盖27.6%的中国人口数。使用Arcgis 10.6软件进行空间自相关分析揭示空间分布特征,使用SaTScan 9.5软件进行空间扫描统计分析空间聚类特征,计算不同窗口下的对数似然比(LLR)和相对危险度(RR),LLR值最大的区域代表最有可能的聚类。结果2005—2016年中国食管癌发病率和死亡率呈现先升后降的趋势。2016年食管癌的发病率和死亡率具有空间正相关性特征,高发病率和高死亡率主要聚集在淮河流经的地区,一级聚集区(高发病率聚集区LLR=6374.41,RR=2.37,P<0.001)主要分布在华东地区的江苏省、安徽省、山东省和华中地区的河南省东部、河北省南部,二级聚集区(高发病率聚集区LLR=1971.19,RR=1.91,P<0.001)主要分布在甘肃省、宁夏回族自治区、陕西省、四川省等中西部地区。结论2010年以来中国食管癌发病率和死亡率有所下降。食管癌疾病负担具有明显的空间差异性,对于淮河流域等高危聚集区应因地制宜采取措施。

关键词：食管肿瘤空间自相关扫描统计量高危聚集地理环境

急性缺血性脑卒中患者颅内血栓成分及调节性T细胞表达与患者临床结局的相关性

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浙江大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 160-167页

作者：罗佳马骏中国医科大学绍兴医院神经内科浙江绍兴312030

目的:分析急性缺血性脑卒中取栓患者的血栓成分及调节性T细胞表达与临床结局的关系。方法:连续纳入中国医科大学绍兴医院神经内科2021年6月至2022年10月接受颅内动脉取栓治疗的急性缺血性脑卒中患者。收集患者临床相关资料,对取栓术中... 详细信息

目的:分析急性缺血性脑卒中取栓患者的血栓成分及调节性T细胞表达与临床结局的关系。方法:连续纳入中国医科大学绍兴医院神经内科2021年6月至2022年10月接受颅内动脉取栓治疗的急性缺血性脑卒中患者。收集患者临床相关资料,对取栓术中改良脑梗死溶栓(mTICI)分级和发病3个月改良Rankin量表(mRS)评分等临床结局进行评价。所有血栓标本均进行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色,血栓红细胞、纤维蛋白/血小板以及调节性T细胞行半定量分析。结果:共纳入具有完整血栓数据的44例患者,其中红细胞型15例、混合型11例、纤维蛋白/血小板型18例,三组间ORG 10172急性脑卒中治疗分类试验(TOAST)病因分型差异具有统计学意义(P0.05)。按TOAST病因分型分为大动脉粥样硬化型28例和心源性栓塞型16例。大动脉粥样硬化型患者血栓的红细胞比例明显高于心源性栓塞型[分别为58.0%(44.2%,72.5%)和24.5%(12.7%,48.0%),P0.05)。采用多因素二元logistic回归分析,纳入年龄、手术时间、CD4^(+)CD25^(+)T细胞数等变量,发现血栓CD4^(+)CD25^(+)T细胞数是患者神经功能结局的独立影响因素(OR=1.369,95%CI:1.101~1.701,P<0.01)。结论:血栓中红细胞、纤维蛋白/血小板成分与患者功能结局无明显相关性,但调节性T细胞表达增高与缺血性脑卒中患者神经功能结局良好相关。

关键词：急性缺血性脑卒中血栓红细胞纤维蛋白/血小板调节性T细胞预后回顾性研究