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败酱草及其混伪品的显微鉴别特征与HPLC指纹图谱研究

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中草药 2024年第6期55卷 2066-2076页

作者：章蕾黄子洳林紫怡钟晓明程汝滨黄真浙江中医药大学药学院浙江杭州310053

目的对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异... 详细信息

目的对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜,采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究;优化败酱草总皂苷的提取工艺,比较不同品种的总皂苷含量;建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱,基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析,对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异;优化了败酱草总皂苷的提取工艺,结果表明,败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异;建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱,共标定了11个共有峰,明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异,通过相似度分析、聚类分析和主成分分析,可将败酱草及其混伪品进行准确区分;综合评价分析结果表明,败酱草及其混伪品的得分差异较大,其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异,为败酱草的准确鉴别和临床用药安全提供了技术支撑。

关键词：败酱草混伪品鉴别指纹图谱聚类分析主成分分析

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博落回本草考证及其鉴定研究

中国现代应用药学 2024年第6期41卷 750-759页

作者：章伟潘泽玥章蕾董姝洁仇凤梅黄真浙江中医药大学药学院杭州310053

目的开展博落回及其相似品种的中药鉴定研究。方法通过查阅历代本草书籍和近现代文献资料,对博落回进行系统梳理与考证;采用传统中药鉴定、显微鉴定、理化鉴定以及分子鉴定等鉴别方法对博落回及其相似品种进行鉴定。结果得到博落回本草... 详细信息

目的开展博落回及其相似品种的中药鉴定研究。方法通过查阅历代本草书籍和近现代文献资料,对博落回进行系统梳理与考证;采用传统中药鉴定、显微鉴定、理化鉴定以及分子鉴定等鉴别方法对博落回及其相似品种进行鉴定。结果得到博落回本草考证资料;博落回与小果博落回以及其他相似品种的性状、显微、理化、分子特征均有一定区别;分子鉴定结果显示,博落回rbcL序列长度在600~603 bp,平均GC碱基含量在43.95%~44.28%;博落回与其他相似品种间的变异位点存在较大差异,其中与小果博落回的变异位点最少;博落回与其相似品种的种间遗传距离均大于其最大种内遗传距离;基于rbcL构建的NJ树可对博落回与其他相似品种进行有效区分;博落回与其相似品种在rbcL二级结构上存在显著差异。结论构建了博落回与小果博落回以及其他相似品种的中药鉴定方法,为博落回的品种鉴定及后续中药资源开发提供实验基础。

关键词：博落回相似品种本草考证传统中药鉴定 rbcL分子标记

基于线粒体形态特征与UPLC-Triple-TOF-MS整合分析的人参/三七心肌保护物质辨析研究

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2766-2775页

作者：史雪敬陈彦羽蔡思怡邵青赵筱萍浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 浙江大学药学院浙江杭州310058 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌... 详细信息

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌细胞缺氧复氧损伤模型。采用荧光探针MitoTracker Deep Red标记心肌细胞线粒体,Hoechst 33342标记细胞核,使用高内涵荧光成像系统采集心肌细胞荧光图像,运用ImagePro Plus软件对图像自动批量处理并提取线粒体形态特征的量化参数,选取代表性参数用于评价线粒体形态功能改变进而筛选人参、三七有效组分;进一步整合UPLC-Triple-TOF-MS技术,筛选人参、三七有效成分。结果显示组分RS-2、RS-4、SQ-1、SQ-4可以同时显著提高线粒体3个形态参数值,增加线粒体长度、分支程度和面积,有效改善缺氧复氧损伤引起的心肌细胞线粒体形态改变。对有效组分的主要成分筛选发现20(R)-人参皂苷Rg_(3)、人参皂苷Re、七叶胆苷ⅩⅦ对心肌细胞线粒体保护作用最佳,进一步研究表明20(R)-人参皂苷Rg_(3)可能通过上调视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)和线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,MFN2)表达,人参皂苷Re和七叶胆苷ⅩⅦ通过上调OPA1蛋白表达,促进线粒体膜融合,减轻线粒体损伤,从而发挥心肌细胞的保护作用。该研究为从人参、三七中发现创新药物提供了实验依据,也为中药心肌保护有效组分与有效成分的规模化筛选提供了新方法。

关键词：人参三七线粒体形态缺氧复氧活性成分心肌保护荧光成像

基于CaMK4介导的细胞骨架重排探讨解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠足细胞损伤的影响

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2357-2362页

作者：宋子瑜李莹黄硕范永升田丰源浙江中医药大学附属第一医院杭州310018 浙江中医药大学杭州310053 浙江中医药大学附属第二医院杭州310005

目的:从CaMK4介导的足细胞细胞骨架重排探讨解毒祛瘀滋肾方治疗狼疮性肾炎(LN)足细胞损伤的作用机制。方法:将8只C57BL/6小鼠设为对照组,24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、激素组、解毒祛瘀滋肾方组,每组8只。对照组和模型组灌胃蒸馏... 详细信息

目的:从CaMK4介导的足细胞细胞骨架重排探讨解毒祛瘀滋肾方治疗狼疮性肾炎(LN)足细胞损伤的作用机制。方法:将8只C57BL/6小鼠设为对照组,24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、激素组、解毒祛瘀滋肾方组,每组8只。对照组和模型组灌胃蒸馏水,激素组灌胃强的松(5mg/kg)混悬液,解毒祛瘀滋肾方组灌胃解毒祛瘀滋肾方(36g/kg)水煎剂,连续干预8周。ELISA检测小鼠血清抗双链DNA抗体、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,全自动生化仪检测小鼠尿蛋白水平;HE染色观察肾脏病理改变;RT-PCR法检测肾脏Ssh1、Limk1、Cfl1 mRNA表达;免疫荧光染色法观察肾脏nephrin、synaptopodin、F-actin、G-actin、CaMK4表达。培养小鼠肾足细胞系(MPC-5),采用R848干预后,给予空白或解毒祛瘀滋肾方含药血清处理12 h,CCK-8法检测细胞活力;TUNEL法检测细胞凋亡,Fluo-4钙离子探针检测细胞内钙离子富集,免疫荧光染色法观察CaMK4表达。结果:体内实验中,与模型组比较,解毒祛瘀滋肾方组小鼠的血清抗双链DNA抗体、TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.01,P<0.05),尿蛋白水平显著降低(P<0.01),肾脏病理损伤改善,肾脏nephrin、synaptopodin蛋白表达水平上调;稳定细胞骨架相关转录因子Ssh1、Limk1、Cfl1 mRNA表达上升(P<0.05,P<0.01),肾脏F-actin表达水平上调,F/G-actin比率回升(P<0.05),同时肾脏CaMK4表达下降(P<0.01)。细胞实验中,与空白组比较,R848诱导细胞凋亡增多,胞内钙离子大量富集(P<0.01),CaMK4表达增加;解毒祛瘀滋肾方含药血清干预可减少细胞凋亡,减少内钙离子富集(P<0.01),下调细胞CaMK4表达。结论:解毒祛瘀滋肾方可能通过调控CaMK4的足细胞细胞骨架重排,改善LN中肾脏足细胞损伤,缓解SLE病情。

关键词：解毒祛瘀滋肾方狼疮性肾炎足细胞细胞骨架钙离子信号

基于非靶代谢组学研究薏苡仁脂亚微乳诱导胰腺癌细胞铁死亡的分子机制

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中草药 2024年第21期 7313-7324页

作者：薛帅沈玲霜陈俊艳陈凯迪陈容戚雨薇王杭婕汪红李玮程桂林穆朝峰熊阳谷满仓浙江中医药大学药学院浙江中医药大学附属第一医院浙江大学医学院附属第一医院浙江中医药大学中医药科学院浙江中医药大学松阳研究院

目的阐明薏苡仁脂亚微乳（Coicis Semen lipid submicron emulsion,CSE）调控代谢重编程诱导胰腺癌细胞铁死亡的作用机制。方法构建高脂饮食原位胰腺癌荷瘤小鼠模型，探讨CSE抗肿瘤作用；利用UPLC-MS/MS技术检测胰腺肿瘤细胞内小分子... 详细信息

目的阐明薏苡仁脂亚微乳（Coicis Semen lipid submicron emulsion,CSE）调控代谢重编程诱导胰腺癌细胞铁死亡的作用机制。方法构建高脂饮食原位胰腺癌荷瘤小鼠模型，探讨CSE抗肿瘤作用；利用UPLC-MS/MS技术检测胰腺肿瘤细胞内小分子代谢物和相关差异代谢途径；采用试剂盒检测CSE对脂肪细胞与胰腺癌细胞共培养模型中胰腺癌细胞内谷胱甘肽（glutathione,GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、脂质蓄积、过氧化水平、活性氧（reactive oxygen species,ROS）、游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）、亚铁离子、线粒体形态、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）的影响；免疫组化染色、组织染色检测胰腺肿瘤组织内GPX4和溶质载体家族7成员11(recombinant solute carrier family 7,SLC7A11)的表达、脂质蓄积及脂质过氧化水平。结果 CSE能够显著抑制胰腺肿瘤的生长（P<0.001）；影响胰腺癌细胞内谷胱甘肽代谢和甘油磷脂代谢通路（P<0.01）；增加脂肪细胞与胰腺癌细胞共培养模型中胰腺癌细胞内脂质积累、ROS和FFA水平、脂质过氧化和亚铁离子含量（P<0.05），降低GSH、GPX4水平和MMP(P<0.05)。铁死亡抑制剂（ferrostatin-1,Fer-1）与CSE联用能逆转CSE介导的胰腺癌细胞铁死亡（P<0.05、0.01）。结论 CSE可通过诱导细胞GSH耗竭和过氧化脂质蓄积，破坏细胞内氧化还原平衡，诱导铁死亡从而抑制胰腺癌细胞生长。

关键词：薏苡仁脂亚微乳胰腺癌代谢组学氧化还原失衡铁死亡

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保元汤加减方对正常小鼠免疫功能的影响

中成药 2024年第5期46卷 1677-1683页

作者：胡雪灵苏洁颜美秋俞静静周衡朴傅萌郑佳亿陈紫妍吕圭源陈建真浙江中医药大学浙江杭州310053

目的探究保元汤加减方对正常小鼠免疫功能的影响。方法将120只BALB/c小鼠随机分成3个免疫组(免疫Ⅰ组、免疫Ⅱ组、免疫Ⅲ组),每组40只。每个免疫组小鼠按体质量随机分成正常组和保元汤加减方低、中、高剂量组(0.9、1.4、1.9 g/kg),每组1... 详细信息

目的探究保元汤加减方对正常小鼠免疫功能的影响。方法将120只BALB/c小鼠随机分成3个免疫组(免疫Ⅰ组、免疫Ⅱ组、免疫Ⅲ组),每组40只。每个免疫组小鼠按体质量随机分成正常组和保元汤加减方低、中、高剂量组(0.9、1.4、1.9 g/kg),每组10只。连续灌胃给药30 d后,检测免疫Ⅰ组小鼠行为学指标、脾脏T淋巴细胞增殖能力,NK细胞活性,血常规指标,血清中免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)、补体4(C4)水平,外周血及脾脏中T、B淋巴细胞比例;检测免疫Ⅱ组小鼠溶血空斑数、半数溶血值;检测免疫Ⅲ组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,脾脏中CD4、CD8表达。结果与正常组比较,保元汤加减方可升高小鼠自主活动次数和抓力,增强脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性,增加溶血空斑数、半数溶血值、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数、全血白细胞(WBC)、淋巴细胞(LYMPH)数量和比例及IgM、IgG、C4水平、外周血和脾脏的CD4^(+)T细胞占比及CD4^(+)/CD8^(+)比值、脾脏CD4阳性表达量及CD4/CD8比值(P<0.05,P<0.01);降低外周血CD3^(+)T、CD8^(+)T细胞占比、脾脏CD8^(+)T细胞占比(P<0.05,P<0.01)。结论保元汤加减方具有增强免疫力功能。

关键词：保元汤加减方免疫功能免疫细胞免疫分子

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超声实时引导下胸锁关节炎的介入治疗研究

中国超声医学杂志 2024年第10期 1173-1177页

作者：徐森胤黄斌徐洁郭绍锋浙江中医药大学浙江医院

目的胸锁关节炎是一种罕见且通常伴有疼痛和局部隆起的疾病。本研究旨在评估超声引导下药物注射治疗胸锁关节炎的有效性。方法本研究纳入了22例胸锁关节炎患者[男性18例，女性4例，平均年龄(42.75±11.19)岁],均接受了超声引导下的胸... 详细信息

目的胸锁关节炎是一种罕见且通常伴有疼痛和局部隆起的疾病。本研究旨在评估超声引导下药物注射治疗胸锁关节炎的有效性。方法本研究纳入了22例胸锁关节炎患者[男性18例，女性4例，平均年龄(42.75±11.19)岁],均接受了超声引导下的胸锁关节间隙药物注射。通过门诊及电话随访，记录治疗前后患者的胸锁关节疼痛视觉模拟评分(VAS)及胸锁关节间隙宽度(L),并进行比较。结果治疗前所有患者均有胸锁关节区疼痛和体表隆起症状，7例患者上肢抬举受限。初步筛查显示，8例C-反应蛋白(CRP)阳性，2例红细胞沉降率(ESR)增高，2例人类白细胞抗原B27(HLA-B27)阳性，6例抗核抗体(ANA)阳性，4例尿酸增高。术后关节间隙显著缩小，血流信号减少。治疗前后对比显示，术后1周和1个月的关节间隙宽度和VAS评分均显著降低(P<0.01),表明疼痛显著缓解，治疗有效。结论超声引导下的关节间隙药物注射是一种对胸锁关节炎患者有效、简便且安全的治疗方法。

关键词：胸锁关节炎超声引导介入治疗

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中药多糖防治酒精性肝病的作用机制研究进展

中国中药杂志 2024年

作者：陈昱帆姜何马青骆启晗黄朔邱将陈傅喆单子怡邱萍浙江中医药大学第二临床医学院浙江中医药大学基础医学院浙江中医药大学第一临床医学院浙江中医药大学药学院

酒精性肝病（alcoholic liver disease， ALD）作为全球慢性肝病的主要病因，对人类健康构成了严重威胁。尽管目前已有多种药物用于治疗ALD，但疗效并不确切，因此迫切需要寻找新的治疗途径。近年来，中药多糖因其多功能性、高效性和低... 详细信息

酒精性肝病（alcoholic liver disease， ALD）作为全球慢性肝病的主要病因，对人类健康构成了严重威胁。尽管目前已有多种药物用于治疗ALD，但疗效并不确切，因此迫切需要寻找新的治疗途径。近年来，中药多糖因其多功能性、高效性和低副作用而备受关注，并在防治ALD方面展现巨大潜力。越来越多的研究表明，中药多糖可以通过抑制氧化应激、调节脂质代谢、调节肠道菌群及调控程序性细胞死亡等多种作用机制改善ALD。该文综述了近年来中药多糖在抗ALD药理作用及其调控机制方面的研究进展，旨在为中药多糖在ALD的预防和治疗中提供科学依据和理论支撑。

关键词：中药多糖酒精性肝病氧化应激脂质代谢程序性细胞死亡肠-肝轴

掌叶覆盆子HMGR基因家族的鉴定及表达分析

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核农学报 2024年第6期38卷 1024-1034页

作者：陈俊宇姚玲窕许张婷吴淑婧彭依晴俞振明浙江中医药大学药学院浙江杭州311403 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)是药用植物萜类产物骨架生物合成的重要酶之一。为了明确掌叶覆盆子HMGR蛋白的功能,使用生物信息学手段对RcHMGR家族成员的分类、基因结构、染色体定位、启动子信息等进行了系统分析,并比较了不同... 详细信息

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)是药用植物萜类产物骨架生物合成的重要酶之一。为了明确掌叶覆盆子HMGR蛋白的功能,使用生物信息学手段对RcHMGR家族成员的分类、基因结构、染色体定位、启动子信息等进行了系统分析,并比较了不同组织、果实不同成熟阶段及MeJA处理下RcHMGR基因的表达量。结果表明,RcHMGR基因家族共有7个成员,分布于3条染色体上,编码444~601 aa蛋白序列。RcHMGR蛋白分为4个亚家族,亚细胞定位于内质网,均含有HMGR保守功能域。RcHMGR家族基因的启动子上包含激素响应、光响应和低温响应等多种顺式元件。RcHMGR家族基因在掌叶覆盆子不同组织、果实不同成熟阶段和MeJA处理下的表达量均存在显著差异,其中RcHMGR5在果实中高丰度表达,并受到MeJA强烈诱导,与类胡萝卜素在掌叶覆盆子果实中的积累规律相一致,推测是类胡萝卜素合成途径的关键酶。上述结果为后续研究RcHMGR基因家族在萜类生物合成中的功能奠定了基础。

关键词：掌叶覆盆子 HMGR 表达分析 MeJA 类胡萝卜素

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