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基于网络药理学及体外实验探究温下方正丁醇部位联合吉非替尼治疗非小细胞肺癌的作用机制

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 471-486页

作者：陈瑞杰毕倩宇施杰民钟婧韩晋涛季旭明湖州市中心医院浙江湖州313000 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 浙江省神经药理学与转化研究重点实验室浙江杭州310053 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

运用网络药理学、分子对接和体外实验探究温下方正丁醇部位(n-butanol fraction of Wenxia Formula,NWXF)联合吉非替尼(gefitinib,GEF)治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的潜在作用机制。超高效液相色谱-四极杆-静电... 详细信息

运用网络药理学、分子对接和体外实验探究温下方正丁醇部位(n-butanol fraction of Wenxia Formula,NWXF)联合吉非替尼(gefitinib,GEF)治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的潜在作用机制。超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap MS)检测NWXF的主要化学成分,利用SwissADME数据库筛选NWXF的活性成分,SwissTargetPrediction数据库获取NWXF活性成分的潜在作用靶点,OMIM和GeneCards数据库搜集NSCLC相关疾病靶点。运用Cytoscape 3.9.0软件和STRING数据库对共同靶点进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络构建和关键靶点筛选,利用DAVID数据库进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,预测其可能的作用机制。运用SYBYL-X 2.0软件对核心成分与关键靶点进行分子对接验证。MTT法检测NWXF和GEF单用及联用对人非小细胞肺癌细胞(A549、PC-9)增殖的抑制作用以及NWXF对人胚肺成纤维细胞MRC-5的作用,运用Q值评价两药联用的效果,TUNEL法检测NWXF和GEF单用及联用对A549、PC-9细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测NWXF和GEF单用及联用对A549、PC-9细胞EGFR、JNK、Bax mRNA表达的影响,蛋白印迹(Western blot,WB)法检测NWXF和GEF单用及联用对A549和PC-9细胞EGFR、p-EGFR、JNK、p-JNK、Bax蛋白表达的影响。结果共获取NWXF治疗NSCLC的77种活性成分、488个潜在靶点及49个关键靶点。GO富集分析结果显示,NWXF干预NSCLC可能与调控细胞增殖、凋亡过程及蛋白质磷酸化等生物学过程相关,KEGG富集分析结果显示,NWXF干预NSCLC可能与调控MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路及肿瘤中的microRNA等信号通路相关。NWXF中核心成分与关键靶点分子对接结果显示,91.9%的对接分值>5,表明核心成分与关键靶点有较好的结合能力。体外实验表明NWXF和GEF联用可协同抑制A549、PC-9细胞增殖,提高细胞凋亡率,抑制p-EGFR/EGFR、p-JNK/JNK蛋白表达水平和EGFR、JNK mRNA的表达水平,增加Bax mRNA和蛋白表达水平。综上,该研究利用网络药理学、分子对接和体外实验阐明NWXF联合GEF可协同治疗NSCLC,其作用机制与调控EGFR/JNK通路进而促进细胞凋亡相关。

关键词：温下方正丁醇部位吉非替尼非小细胞肺癌凋亡网络药理学分子对接机制

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鲜车前草的应用考证及现代临床应用

中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 159-169页

作者：赵日开蒋鑫杨卉妍苗明三河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析... 详细信息

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析。结果:古籍中车前草鲜用的频率很高,功效以清热、凉血、利尿、通淋为主,可用于治疗淋证、小便不通、小便溺血等内科病及疮痈、白虎丹等外科病,治疗面口五官热证如鼻衄、目赤肿痛、乳蛾喉痹等病的疗效极佳,在妇科及儿科疾病中也有广泛的应用。现代文献记载鲜车前草主治范围包括肾系、五官、脾胃、肺系、肝胆、皮肤外科及妇科儿科疾病,主要用于肾系湿热证及由于湿热毒蕴引起的皮肤外科诸证,功效以清热解毒,利尿通淋为主。民间从古至今都有采食鲜车前用于充饥或保健的报道。结论:鲜车前草临床应用广泛,具有极高的医用价值与经济价值,但是现代应用发展滞后,需要集策集力从“药材生产-储存运输-制剂研发-临床应用”各个环节入手推动鲜车前草应用发展。

关键词：鲜药车前草古籍考证临床应用

基于数据挖掘的角膜新生血管动物模型应用特点分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 166-173页

作者：赵日开杨卉妍刘莹蒋鑫苗明三河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:通过总结角膜新生血管(CNV)动物模型的造模特点,为建立理想的CNV动物模型提供参考依据。方法:该文以“角膜新生血管”为主题词在中国知网、万方数据、中华医学期刊全文数据库及PubMed数据库进行检索,筛选出2013—2023年中有关CNV... 详细信息

目的:通过总结角膜新生血管(CNV)动物模型的造模特点,为建立理想的CNV动物模型提供参考依据。方法:该文以“角膜新生血管”为主题词在中国知网、万方数据、中华医学期刊全文数据库及PubMed数据库进行检索,筛选出2013—2023年中有关CNV动物实验的相关文献,通过Excel 2021表格建立数据库,对其实验动物品系、性别、造模方法、检测指标、应用类别等内容进行整理,分析CNV动物模型的模型特点。结果:经过对比分析发现造模时的动物品系以SD大鼠(87次、29.49%),新西兰白兔(52次、17.63%)为主;动物性别推荐单一性别,目前以雄性为主;药效验证和机制研究的造模方法均以碱烧伤法居多;指标检测方式包括表观指标观察、组织病理学检测、免疫组化(IHC)、蛋白免疫印迹法(Western blot)及多种聚合酶链式反应(PCR)检测为主;检测指标包括表观指征、角膜组织病理、CNV调控相关指标等。结论:模型复制推荐碱烧伤法诱导的SD大鼠CNV模型,指标主要选择CNV的生长情况、角膜组织病理检测及血管内皮生长因子(VEGF)相关检测,依照需求增选角膜表观指征及血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、分泌粒蛋白Ⅲ(Scg3)等CNV调控相关基础指标。临床治疗CNV用药以抗炎药物与抗VEGF药物为主,缺乏中医药应用,模型的完善需要增加中医证候要素。

关键词：角膜新生血管数据挖掘动物模型应用分析中医证候要素

丹参活性成分及其复方在治疗神经系统疾病中的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：宋蔚宁张淑香卢芳王智泽程汝阳刘树民黑龙江中医药大学研究生院黑龙江中医药大学中医药研究院

神经系统疾病又称为神经病变，其包含范围比较广泛，主要有阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、亨廷顿等神经退行性疾病，还有抑郁症、蛛网膜下腔出血、脑缺血再灌注损伤、血管性痴呆等其他神经系统疾病。这些疾病严重威胁着患者的健... 详细信息

神经系统疾病又称为神经病变，其包含范围比较广泛，主要有阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、亨廷顿等神经退行性疾病，还有抑郁症、蛛网膜下腔出血、脑缺血再灌注损伤、血管性痴呆等其他神经系统疾病。这些疾病严重威胁着患者的健康和生活，并给社会和家庭带来了沉重的负担。神经系统疾病的发病机制非常复杂，主要包括神经炎症、氧化应激、细胞凋亡、内质网应激、线粒体功能障碍、脑源性神经营养因子缺乏、胆碱能活性降低、轴突损伤和脱髓鞘等机制。近年来，神经系统疾病的发病率和致死率逐年升高，目前西医治疗常以对症为主，且存在嗜睡、过度镇静、头晕头痛、心动过速、肝功能损害、代谢紊乱等诸多不良反应及术后不能完全治愈等问题。丹参作为一种传统中药，具有活血祛瘀、凉血清心、养血安神等功效，可以通过多靶点、多通路、多途径发挥对神经系统疾病的治疗和保护作用。研究发现丹参含有的水溶性酚酸类化合物和脂溶性二萜醌类化合物可以作为治疗神经系统疾病的主要物质基础。该文总结了近十年丹参活性成分及复方在神经系统疾病中的作用，以期为丹参活性成分及复方在神经系统疾病中的开发和应用提供理论基础和研究思路。

关键词：丹参丹酚酸丹参酮迷迭香酸复方研究进展

沉默信息调节因子5在心血管疾病中的作用研究进展

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 405-409页

作者：于达云许锦文凌霜上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

心血管疾病(cardiovascuar diseases,CVDs)的死亡率位居首位,严重威胁人类健康。沉默信息调节因子5(silent information regulator 5,SIRT5)作为一个新型的去酰基化修饰酶,广泛分布于心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞等心血管细胞中... 详细信息

心血管疾病(cardiovascuar diseases,CVDs)的死亡率位居首位,严重威胁人类健康。沉默信息调节因子5(silent information regulator 5,SIRT5)作为一个新型的去酰基化修饰酶,广泛分布于心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞等心血管细胞中,可通过脱乙酰化、脱琥珀酰化和脱丙二酰化而在多种CVDs中发挥重要作用。该文将从能量代谢、调控炎症反应和氧化应激等方面讨论SIRT5的病理生理学机制,以及SIRT5在心肌梗塞、心肌肥大、心律失常、动脉粥样硬化和心力衰竭等CVDs中所扮演的角色,并且总结了目前SIRT5相关抑制剂和激动剂的研究进展,从而为靶向SIRT5提供防治CVDs的策略。

关键词：心血管疾病沉默信息调节因子5 琥珀酰化线粒体能量代谢炎症

基于肝代谢组学研究毛蕊花糖苷防治痛风性关节炎的机制

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 224-231页

作者：于承禄卢芳于栋华徐晓敏徐鹏刘树民黑龙江中医药大学研究生院黑龙江哈尔滨150006 黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150006

对痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)大鼠给予毛蕊花糖苷(acteoside)后,进行肝代谢组学研究,运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,寻找相关潜在生物标志物及相关代谢通路。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋... 详细信息

对痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)大鼠给予毛蕊花糖苷(acteoside)后,进行肝代谢组学研究,运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,寻找相关潜在生物标志物及相关代谢通路。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱(0.3 mg·kg^(-1))组以及毛蕊花糖苷高(200 mg·kg^(-1))、中(100 mg·kg^(-1))、低(50 mg·kg^(-1))剂量组,每组7只,共计42只。连续给药7 d,每日1次。给药期间采用尿酸钠诱导大鼠GA模型。观察大鼠关节肿胀程度和滑膜组织病理变化,测定大鼠滑膜组织中炎症因子白细胞介素^(-1)β(IL^(-1)β)、白细胞介素^(-1)8(IL^(-1)8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。对大鼠肝脏进行UPLC-Q-TOF-MS数据采集,利用Progenesis QI和EZ info进行数据分析,并联合人类代谢组学数据库(HMDB)和京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)找出相关潜在生物标志物和代谢通路。结果表明,毛蕊花糖苷可改善GA大鼠关节肿胀,减轻滑膜组织损伤并降低炎症因子表达水平。共鉴别出19个共同的生物标志物,毛蕊花糖苷可对其中17个标志物进行回调,共富集到7条代谢通路,包括甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢等,其中甘油磷脂代谢发生强烈扰动。代谢组学分析发现毛蕊花糖苷可能通过调控甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、牛磺酸与亚牛磺酸代谢,减少炎症因子表达,来改善GA大鼠症状,为日后研究和开发提供一定的参考。

关键词：毛蕊花糖苷痛风性关节炎肝代谢组学甘油磷脂代谢

基于巨噬细胞极化研究加味黄芪建中汤治疗糖皮质激素耐药或复发免疫性血小板减少症作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：胡美薇杨阳陈春梅郑兵荣苏锋琴浙江中医药大学附属第二医院

目的：探索加味黄芪建中汤通过调控SOCS3转录活性影响巨噬细胞极化治疗糖皮质激素耐药或复发的免疫性血小板减少症(ITP)的作用及机制。方法：收集同期初发ITP10例、健康者标本10例、糖皮质激素耐药/复发ITP 43例，其中43例糖皮质激素耐... 详细信息

目的：探索加味黄芪建中汤通过调控SOCS3转录活性影响巨噬细胞极化治疗糖皮质激素耐药或复发的免疫性血小板减少症(ITP)的作用及机制。方法：收集同期初发ITP10例、健康者标本10例、糖皮质激素耐药/复发ITP 43例，其中43例糖皮质激素耐药/复发的ITP患者分为26例艾曲泊帕治疗组和17例艾曲泊帕+加味黄芪建中汤联合治疗组。磁珠分选各组外周血中CD14+CD68+巨噬细胞，RT-qPCR检测iNOS和CD206，流式分析M1型指标CD86和M2型指标CD163。对于43例糖皮质激素耐药/复发的ITP患者，分别于治疗前、治疗后2周、4周PCR检测各组的iNOS和CD206，ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及IL-10。并于磁珠分选外周血CD14+单个核细胞，治疗前，治疗后4周以及过表达SOCS3，采用Western blot法检测SOCS3、JAK2和STAT3。结果：1)与健康组比较，初发ITP和糖皮质激素耐药/复发ITP的M1型巨噬细胞增加，M2型巨噬细胞减少(P<0. 05)，以糖皮质激素耐药/复发ITP明显(P<0.05)。2)与治疗前比较，艾曲泊帕治疗组和艾曲泊帕+加味黄芪建中汤联合治疗组血小板数量均明显升高(P<0. 05)，艾曲泊帕+加味黄芪建中汤组升高尤为明显(P<0. 05)。与治疗前比较，我们发现治疗组均促进M2型极化指标CD206的上调，血清IL-10含量明显升高(P<0. 05)；同时抑制M1型极化指标iNOS的降低(P<0. 05)，血清TNF-α和IL-6含量降低(P<0. 05)；SOCS3活性升高，JAK2-STAT3通路抑制(P<0. 05)，其中艾曲泊帕+加味黄芪建中汤组略明显。3)糖皮质激素耐药/复发ITP患者外周单个核细胞过表达SOCS3，JAK2/STAT3下调，血清TNF-α和IL-6含量也明显下降，而血清IL-10含量上升(P<0. 05)。结论：加味黄芪建中汤可能通过升高SOCS3转录活性，抑制JAK2-STAT3磷酸化，促进M2型巨噬细胞的极化，从而对糖皮质激素耐药或复发ITP有更好的治疗效果。

关键词：加味黄芪建中汤糖皮质激素耐药/复发免疫性血小板减少症巨噬细胞极化细胞因子信号转导抑制因子3 酪氨酸蛋白激酶2-信号转导和转录激活因子3通路

牡蛎蛋白酶解肽制备工艺优化及其对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌和氧化应激的影响

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食品工业科技 2024年第9期45卷 168-176页

作者：刘璐李晶峰兰梦李冬冰张凯月王跃龙申嘉明李春楠张辉孙佳明长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 长春中医药大学药学院吉林长春130117

为探究牡蛎在药食同源领域的研究与开发,本实验采用响应面法优化牡蛎蛋白酶解肽酶法制备工艺,并研究其对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌和氧化应激的影响。以水解度为考察指标,采用仿生酶解法,在单因素实验的基础上,根据响应面分析法优化牡... 详细信息

为探究牡蛎在药食同源领域的研究与开发,本实验采用响应面法优化牡蛎蛋白酶解肽酶法制备工艺,并研究其对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌和氧化应激的影响。以水解度为考察指标,采用仿生酶解法,在单因素实验的基础上,根据响应面分析法优化牡蛎蛋白酶解肽的制备工艺。同时构建过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠睾丸间质细胞(TM3)氧化损伤模型,通过细胞存活率、DAPI染色、睾酮(Testosterone,T)分泌量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量研究牡蛎蛋白酶解肽对TM3细胞睾酮分泌和氧化应激的影响。结果表明:牡蛎蛋白酶解肽的最佳酶解条件为:料液比1:10 g/mL、胃蛋白酶量为1.1%、酶解时间为1.0 h、胰蛋白酶量为2.1%、酶解时间3.1 h,此条件下的水解度为39.43%±0.42%。牡蛎蛋白酶解肽对H2O2诱导的TM3细胞均有不同程度的增殖活性,可显著(P<0.05)增加TM3细胞睾酮分泌量、SOD酶活力和降低(P<0.05)MDA含量,并且在牡蛎蛋白酶解肽物质量浓度为200μg/mL时效果最好。综上所述,响应面法优化酶解工艺有效可行,牡蛎蛋白酶解肽可极显著的促进TM3细胞增殖,促进睾酮分泌量,增加SOD酶活力,降低MDA含量(P<0.01)。

关键词：牡蛎蛋白酶解肽响应面优化仿生酶解睾酮氧化应激

基于UPLC-Q-TOF-MS技术及化学计量学方法分析不同种源浙贝母药材成分差异

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中药材 2024年 2542-2548页

作者：赵明方方可儿唐瑞孙贝贝杜伟锋李昌煜葛卫红浙江中医药大学药学院浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江中医药大学中药饮片有限公司

目的:采用UPLC-Q-TOF/MS结合多元统计分析快速、简便、准确鉴别不同种源浙贝母的差异性,并寻找其差异性成分。方法:采用Waters CSH-C18（100 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱;以0.1%甲酸溶液-含0.1%甲酸的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱;在正负... 详细信息

目的:采用UPLC-Q-TOF/MS结合多元统计分析快速、简便、准确鉴别不同种源浙贝母的差异性,并寻找其差异性成分。方法:采用Waters CSH-C18（100 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱;以0.1%甲酸溶液-含0.1%甲酸的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱;在正负离子模式下采集6个种源浙贝母的质谱数据,根据高分辨质谱提供的精确相对分子质量和碎片离子信息,结合相关文献,同时借助Scifinder和Reaxys数据库,对不同种源浙贝母的化学成分进行分析鉴定。结果:共鉴定和推测出39个成分,包括生物碱类18个、脂肪酸类7个、酯类8个、萜类2个、其他类4个。多元统计分析结果表明不同种源的浙贝母可以得到良好的区分,同时聚类结果也体现了不同种源浙贝母药材间的差异性和相似性,不同种源间存在17个差异成分,且呈现不同的变化规律。结论:该研究能快速准确和简便的鉴别浙贝母药材种源差异性,可为浙贝母药材内在质量的综合评价和控制提供参考,可作为发展浙贝母药材的道地性及探讨其质量的一种手段。

关键词：浙贝母种源差异 UPLC-Q-TOF-MS 化学成分化学计量学