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酶解联合微生物发酵对弹性蛋白肽理化性质与功能特性的影响

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食品与发酵工业 2025年第3期51卷 154-161页

作者：鲁杏茹智文博吕静曾贝贝李带根厦门元之道生物科技有限公司福建厦门361100

为提高弹性蛋白肽(elastin peptide,EP)的理化性质与功能特性,该研究通过酶解联合微生物(副干酪乳杆菌YYS-K1)发酵制备弹性蛋白肽(elastin peptide by enzymolysis combined with microbial fermentation,EMEP),以单一蛋白酶解制备EP为对照,比较EMEP和EP的理化性质和功能特性的差异。结果表明:EMEP的糖胺聚糖的含量较EP提高了约1.73倍;两种EP中氨基酸组成和必需氨基酸占比无明显差异,而EMEP中的Gly和Leu含量占比明显高于EP;分子质量分布结果表明,EMEP中生物发酵制备法有利于进一步提高EP的理化性质和功能特性,为开发高质量的弹性蛋白肽产品提供理论依据。

关键词：弹性蛋白肽酶解联合微生物发酵蛋白酶解抗氧化活性生物活性

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中医证候动物模型在自身免疫病中应用的探讨

南京中医药大学学报 2025年第1期41卷 1-10页

作者：张宇曦王韬梁娟集萃药康生物科技股份有限公司江苏南京210061 广东药康生物科技有限公司广东佛山528200

自身免疫病是一类由免疫系统攻击自身组织和细胞引起的疾病,其发病机制复杂多样,涉及遗传、环境、免疫等多方面因素。中医药在治疗自身免疫病方面具有悠久的历史和丰富的经验,其辨证施治的理念为现代医学提供了新的思路和方法。然而,中... 详细信息

自身免疫病是一类由免疫系统攻击自身组织和细胞引起的疾病,其发病机制复杂多样,涉及遗传、环境、免疫等多方面因素。中医药在治疗自身免疫病方面具有悠久的历史和丰富的经验,其辨证施治的理念为现代医学提供了新的思路和方法。然而,中医药的多成分、多功能性使其现代研究面临挑战。随着现代医学的发展,中医证候动物模型在自身免疫病研究中的应用日益广泛。先从病因学模型、病理学模型和病因病理结合模型三方面概述了中医证候动物模型的类型,并以自身免疫病为例列举了中医证候动物模型的应用现状、优势及其面临的挑战,最后探讨新颖的人源化动物在模拟中医证候、评价中药疗效及阐明作用机制中的作用和前景。

关键词：动物模型自身免疫病中医证候病因学模型病理学模型病因病理结合模型人源化动物

ELISA法对大鼠血清中HLX43药代动力学的探索性研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：刘嘉豪张二辉刘晓平皖南医学院上海佐临生物科技有限公司

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Hu... 详细信息

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Human IgG（检测总抗体）或Anti-payload antibody（检测结合抗体），加入待测样品，用Goat anti-human IgG Monkey ads-HRP作为检测抗体进行检测，加入TMB底物显色一段时间后，加入终止液中止反应，使用酶标仪SoftMax软件在双波长450 nm/630 nm下读取吸收度，采用 A450 nm-A630 nm 读值进行数值拟合，参考相关法规要求进行初步验证后，SD大鼠静脉注射15 mg/kg HLX43取血检测血药浓度，并计算药代动力学参数。结果：确定分析方法的线性范围为200～6 000 ng/mL，对分析方法的标准曲线、精密度、准确度、钩状效应、稀释线性以及选择性（基质效应）的考察结果均可接受。对SD大鼠血清样品进行定量分析，得到HLX43的药代动力学参数，检测结合抗体和检测总抗体的方法所得出的t1/2分别为110.9 h和110.6 h，Cmax分别为343.3 μg/mL和386.3 μg/mL，AUC0-inf分别为13 977.511 h·μg·mL-1和16 916.523 h·μg·mL-1。结论：本研究建立了两种快速灵敏的方法用于HLX43的药动学研究，为抗体偶联药物的临床研究奠定了基础。

关键词：酶联免疫吸附分析(ELISA) 定量测定抗体偶联药物药代动力学

蛹虫草水提物及其对HaCaT细胞氧化损伤的保护作用

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菌物学报 2025年

作者：孙彦庆张京良朱宗敏江晓路尚丽丽宗雯雯青岛黛优佳生物科技有限公司青岛海洋生物医药研究院

本研究对蛹虫草水提物（CME）的主要活性成分及抗氧化活性进行分析，并建立H2O2诱导的HaCaT氧化损伤模型，探究其对皮肤细胞氧化损伤的保护作用。结果显示，CME中富含多糖、多酚、腺苷、虫草素、N6-（2-羟乙基）腺苷等活性物质，且能够... 详细信息

本研究对蛹虫草水提物（CME）的主要活性成分及抗氧化活性进行分析，并建立H2O2诱导的HaCaT氧化损伤模型，探究其对皮肤细胞氧化损伤的保护作用。结果显示，CME中富含多糖、多酚、腺苷、虫草素、N6-（2-羟乙基）腺苷等活性物质，且能够有效清除DPPH、ABTS和·OH自由基，IC50分别为0.63、2.97和3.24 mg/mL，提示其具有良好的抗氧化能力；在H2O2诱导的HaCaT细胞中，CME随浓度递增而显著地提高细胞活力，其中50 μg/mL CME预处理可使HaCaT细胞存活率由55.39%提高到 83.90%；分析其作用机制，CME可能通过上调细胞内SOD、GSH-Px和CAT等抗氧化酶活力，减少细胞内丙二醛（MDA）含量，极显著地降低细胞内活性氧（ROS）水平（P＜0.01），从而平衡氧化和抗氧化体系降低氧化损害。因此，CME具有保护皮肤细胞氧化损伤的作用，提示其具有成为天然抗氧化剂应用于化妆品等领域的潜力。

关键词：蛹虫草水取物过氧化氢氧化损伤抗氧化

交联透明质酸钠凝胶对近距离放射治疗中危及器官的隔离防护作用

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 700-706页

作者：刘建建张燕崔志伟王东方刘旭杨盛林柴谦刘凤林华熙生物科技股份有限公司山东省济南市250000 山东省食品药品审评查验中心山东省济南市250000

背景:交联透明质酸钠凝胶具备良好的力学性能、生物相容性与降解性,可作为肿瘤放射治疗中的隔离防护材料,用于保护危及器官免受多余辐照剂量的损伤。目的:探究交联透明质酸钠凝胶在近距离放射治疗中减少危及器官受照剂量等方面的安全性... 详细信息

背景:交联透明质酸钠凝胶具备良好的力学性能、生物相容性与降解性,可作为肿瘤放射治疗中的隔离防护材料,用于保护危及器官免受多余辐照剂量的损伤。目的:探究交联透明质酸钠凝胶在近距离放射治疗中减少危及器官受照剂量等方面的安全性及有效性。方法:取周龄相同、体质量相近的无特定病原体级昆明小鼠作为实验对象,共16只,采用随机数字表法分为实验组与对照组,每组8只。在实验组小鼠背部皮下植入125Ⅰ放射性粒子,随后环绕放射性粒子周边注射交联透明质酸钠凝胶,在对照组小鼠背部皮下仅植入125Ⅰ放射性粒子。注射完成后,采用螺旋CT扫描测量放射性粒子与表皮的距离,采用辐射剂量仪检测体表辐射剂量;注射后10周内,观察小鼠生长状态及存活率、皮肤放射损伤情况及凝胶存留量。结果与结论:①螺旋CT扫描显示植入的凝胶相对集中,并且使放射性粒子与表皮之间产生有效的间隔距离。实验组小鼠体表辐射剂量明显低于对照组(P<0.01)。②在实验观察期内,两组小鼠均存活,对照组小鼠在实验观察后期出现明显烦躁等不稳定表现,部分实验组小鼠出现类似行为;两组小鼠日摄食量无明显变化,体质量呈现相同的增长趋势。植入放射性粒子后两组小鼠均出现不同程度的放射性皮肤损伤,自注射后第23天开始至实验结束,实验组小鼠皮肤放射损伤评分均低于对照组(P<0.01)。植入后第10周,实验组6只小鼠皮下无明显凝胶残留,2只小鼠皮下存在极少量散在的凝胶状样品。③结果表明,注射交联透明质酸钠凝胶可通过物理占位作用增加125Ⅰ放射性粒子放射靶区和靶外危及器官的间隔空间,有效降低危及器官的受照剂量,对危及器官起到隔离防护作用。

关键词：交联透明质酸钠凝胶 125I粒子危及器官隔离防护动物实验近距离放射治疗

黑龙江大豆根瘤菌及根际促共生菌株的筛选及应用

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生物技术通报 2025年第1期41卷 252-262页

作者：刘克寒杨升辉黄巧云崔文靖中化环境控股有限公司北京100071 济宁岚德生物科技有限公司济宁272000 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 绿氮生物科技有限公司北京100094

【目的】黑龙江是我国大豆的主产区,有着丰富的大豆根瘤菌资源,针对该区域筛选优质抗逆大豆根瘤菌及根际促共生菌株对于大豆的提质增产至关重要。【方法】从黑龙江采集根瘤、根际土分离纯化大豆根瘤菌、根际菌,通过rpoB、16S rRNA基因... 详细信息

【目的】黑龙江是我国大豆的主产区,有着丰富的大豆根瘤菌资源,针对该区域筛选优质抗逆大豆根瘤菌及根际促共生菌株对于大豆的提质增产至关重要。【方法】从黑龙江采集根瘤、根际土分离纯化大豆根瘤菌、根际菌,通过rpoB、16S rRNA基因测序进行种属鉴定。在试管培养条件下进行根瘤菌菌株对盐胁迫(1.2%NaCl)、干旱胁迫(15%PEG6000)的耐受性评价。胁迫耐受根瘤菌菌株接种到黑河43,筛选高效共生菌株。代表性根瘤菌菌株及其根际促共生菌株混合菌接种到黑河43,获得高效共生根瘤菌及促共生显著的菌株。【结果】(1)分离获得大豆根瘤菌136株,其中129株慢生型根瘤菌(分属于Bradyrhizobium elkanii、***、B. diazoefficiens、B. yuanmingense、B. liaoningense);7株快生型根瘤菌(分属于Sinorhizobium fredii、Sinorhizobium sp.)。(2)分离获得拮抗大豆根腐病病原菌(镰刀菌)的菌株6株(B1-B6,分属于Bacillus velezensis、B. subtilis、B. licheniformis、***、B. megaterium),其中有4株(B1、B2、B4、B5)具有产IAA的能力。(3)获得耐盐或耐旱代表性大豆根瘤菌28株,其中有两株大豆根瘤菌B. japonicum GN1、B. diazoefficiens GN10对盐胁迫、干旱胁迫均具有较好抗性,并且通过共生表型的筛选确定GN10是代表菌株中最为高效的大豆根瘤菌。(4)混合接种大豆表型结果表明,B. velezensis B4相比于其余5株芽胞杆菌可以显著提升*** GN10的共生表现。【结论】成功获得耐盐、耐旱且共生效率高的慢生大豆根瘤菌1株,同时获得对共生表现促进效果显著的贝莱斯芽胞杆菌1株,为高效复合根瘤菌菌剂的开发及应用提供有力支撑。

关键词：大豆根瘤菌胁迫耐受高效共生根际促生菌共接种

基于UPLC-QTOF MS/MS技术研究甜叶菊绿原酸类成分的降解机制

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质谱学报 2025年第1期46卷 65-77页

作者：吴娟娟王子璇连运河侯丽娟牛志平王文昌吴迪晨光生物科技集团邯郸有限公司河北邯郸056000 河北省植物资源综合利用重点实验室河北邯郸057250 晨光生物科技集团股份有限公司河北邯郸057250 河北晨光检测技术服务有限公司河北邯郸056000

本文以甜叶菊绿原酸为研究对象,利用高效液相色谱检测样品中3-咖啡酰奎宁酸(3-CQA)、4-咖啡酰奎宁酸(4-CQA)、5-咖啡酰奎宁酸(5-CQA)、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸(3,4-diCQA)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5-diCQA)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(4,5-... 详细信息

本文以甜叶菊绿原酸为研究对象,利用高效液相色谱检测样品中3-咖啡酰奎宁酸(3-CQA)、4-咖啡酰奎宁酸(4-CQA)、5-咖啡酰奎宁酸(5-CQA)、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸(3,4-diCQA)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5-diCQA)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(4,5-diCQA)等7种绿原酸类成分的含量,并利用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF MS/MS)法鉴定绿原酸在不同诱发条件下的降解产物及降解途径。结果表明,样品中绿原酸总量在溶剂、光、热、pH值等诱发条件下均呈下降趋势。通过分析降解产物,甜叶菊绿原酸在溶剂中存放易发生烷基化反应,在光照条件下易发生降解,在高温环境中易发生脱水和烷基化,在酸碱介质中易发生水解和构型转化。综上,脱水、降解、水解和异构化是甜叶菊绿原酸受外界环境干扰时可能发生的4种损失途径。本研究不仅深化了对绿原酸理化性质的理解,也为制定有效的保存策略,确保绿原酸类成分在药品、保健品及化妆品等产品中的质量控制提供了科学依据和实践指导。

关键词：超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF MS/MS) 甜叶菊绿原酸稳定性

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一种鳄嘴花源多肽的改造及体外抗炎活性研究

天然产物研究与开发 2025年

作者：朱方莉何炳蔚曲丽萍上海贝泰妮生物科技有限公司云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司云南云科特色植物提取实验室有限公司

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活... 详细信息

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活性评分网站和多肽毒性预测筛选出无毒且评分大于0.8的25条多肽。将其与丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）靶点进行分子对接，筛选出3条优于MAPK抑制剂西替利嗪的多肽序列。采用固相合成法合成这3条多肽后，测试其对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抑制作用，最终发现了具有优异抗炎潜力的多肽序列WDDC。为了避免与人源蛋白重复并提高稳定性，引入了甘氨酸和乙酰基，改造后的多肽命名为Ac-WDDCG。结果显示，Ac-WDDCG能够显著抑制人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）中Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor family，NLRP3）信号通路相关基因[Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）、NLRP3和核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）]的mRNA表达（P ＜0.05），显著降低RAW 264.7细胞炎症模型中下游炎症因子[肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和NO]的分泌水平（P ＜0.01），并减少了CuSO4诱导的斑马鱼中性粒细胞迁移（P ＜0.05）。提示Ac-WDDCG具有较好的抗炎活性，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。

关键词：鳄嘴花多肽丝裂原活化蛋白激酶 Nod样受体蛋白3信号通路炎症因子

高CO_(2)短激处理对油菜护绿和贮藏品质的影响

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食品工业科技 2025年第2期46卷 308-316页

作者：段慧敏彭梦菲张旭薪代理响郑家轩刘霞天津科技大学食品科学与工程学院天津300457 天津鲜食原品生物科技有限公司天津300450

气体短激诱发果蔬抗性,延长其保鲜期并提高贮后品质。为探究高二氧化碳(Carbon dioxide,CO_(2))短激对油菜护绿保鲜品质的影响,本文以油菜为研究对象,分析了50%、70%、90%浓度的CO_(2)气体短激处理油菜30 min,于4±0.5℃条件下贮藏20 d... 详细信息

气体短激诱发果蔬抗性,延长其保鲜期并提高贮后品质。为探究高二氧化碳(Carbon dioxide,CO_(2))短激对油菜护绿保鲜品质的影响,本文以油菜为研究对象,分析了50%、70%、90%浓度的CO_(2)气体短激处理油菜30 min,于4±0.5℃条件下贮藏20 d期间油菜色泽、黄化指数、叶绿素含量、呼吸强度、乙烯释放量、多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)和过氧化物酶(Phenylalanine ammonialyase,POD)、失重率、硬度、V_(C)含量、可溶性固形物(Soluble solids content,SSC)和感官品质的变化规律。研究结果表明,与对照组相比,随着贮藏时间的增加,高CO_(2)短激处理组均能够有效维持油菜的外观,延缓黄化现象的发生,叶绿素含量显著高于对照组(P<0.05),黄化指数显著低于对照组(P<0.05),其中90%CO_(2)处理组的效果最优,护绿效果明显。贮藏20 d时,50%CO_(2)、70%CO_(2)、90%CO_(2)的总叶绿素含量分别比对照组高10.85%、17.46%、25.08%。同时,高CO_(2)短激处理减弱了贮藏期间油菜的呼吸强度和乙烯释放量,对PPO和POD活性有明显的抑制作用,显著延缓失重率升高和硬度的下降,保持较高的V_C含量和SSC,极大地提高了感官品质得分。由此可知,高浓度CO_(2)短激处理能够更好地维持油菜的贮藏品质,与对照组在室温下较短(2~3 d)的货架期相比,延长贮藏期至20 d,为油菜护绿保鲜技术的开发提供了理论依据。

关键词：高CO_(2) 短激油菜护绿贮藏品质

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