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促旋酶(gyrase)B亚单位基因gyrB在鉴别细菌近缘种中的应用

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微生物学报 2008年第5期48卷 701-706页

作者：李献梅王小芬杨洪岩高秀芝崔宗均中国农业大学农学与生物技术学院中国农业大学生物质工程中心北京100094

单拷贝的gyrB是普遍存在于细菌中编码促旋酶B亚单位的基因,该基因进化速率快,每100万年的平均碱基替换率为0.7%～0.8%。研究证明,该区段基因能对假单胞菌、芽孢杆菌、弧菌、肠杆菌、分枝杆菌、气单胞菌、乳酸菌等不同属或科内的近缘种... 详细信息

单拷贝的gyrB是普遍存在于细菌中编码促旋酶B亚单位的基因,该基因进化速率快,每100万年的平均碱基替换率为0.7%～0.8%。研究证明,该区段基因能对假单胞菌、芽孢杆菌、弧菌、肠杆菌、分枝杆菌、气单胞菌、乳酸菌等不同属或科内的近缘种进行区分鉴定,还可通过设计种特异性引物进行定量PCR或者限制性片段分析,同时也能结合变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)追踪微生物的动态。gyrB基因弥补了非蛋白编码基因16SrDNA或者基因间隔序列(ITS)DNA无法区分近缘种的缺陷,给近缘种的鉴别或者其群体指纹图谱的分析带来了新的希望,为当前国内外用于近缘种研究的热点,是细菌系统发育分析上非常值得重视的新靶标。

关键词：促旋酶 gyrB 近缘种系统发育

低温协同超高压脲包法分离大豆油脱臭馏出物中饱和脂肪酸工艺研究

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安徽农业科学 2014年第3期42卷 882-885页

作者：袁野潘见孙艳辉徐金凤赵斌谢慧明合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心安徽合肥230009

[目的]从大豆油脱臭馏出物中高效分离出饱和脂肪酸。[方法]试验采用低温协同超高压脲包法,以棕榈酸乙酯的残留率和质量为主要考察指标,通过单因素试验考察了冷藏温度、冷藏时间和超高压处理压力3个因素对分离效果的影响,并以正交试验法... 详细信息

[目的]从大豆油脱臭馏出物中高效分离出饱和脂肪酸。[方法]试验采用低温协同超高压脲包法,以棕榈酸乙酯的残留率和质量为主要考察指标,通过单因素试验考察了冷藏温度、冷藏时间和超高压处理压力3个因素对分离效果的影响,并以正交试验法对该工艺进行了优化。[结果]试验表明,低温协同超高压脲包法分离大豆油脱臭馏出物的最佳工艺条件为冷藏温度4℃,冷藏时间90 min,压力300 MPa。在此条件下,棕榈酸乙酯的残留率为21.87%,质量从137.31 g减少到30.03 g。[结论]经过低温冷藏处理后,采用超高压脲包法可有效分离出大豆油馏出物中的饱和脂肪酸,为进一步的分离纯化创造了良好条件。

关键词：超高压脲包低温协同大豆油脱臭馏出物正交试验

刺五加果多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用

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生物技术 2022年第2期32卷 182-187,194页

作者：崔雪娇佟潇禹张彦龙曾伟民黑龙江大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150080 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150500

[目的]从刺五加果实中提取出刺五加果多糖(Acanthopanax senticosus fructose,ASPF),并研究其对RAW264.7细胞的免疫调控作用。[方法]通过热水浸提法对刺五加果实中的多糖进行提取并用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52层析柱分离得到刺五加果... 详细信息

[目的]从刺五加果实中提取出刺五加果多糖(Acanthopanax senticosus fructose,ASPF),并研究其对RAW264.7细胞的免疫调控作用。[方法]通过热水浸提法对刺五加果实中的多糖进行提取并用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52层析柱分离得到刺五加果多糖ASPF。采用乳酸脱氢酶法检测ASPF对细胞产生的毒性。CCK-8法检测巨噬细胞RAW264.7的增殖率和吞噬率,ELISA试剂盒检测该细胞分泌IL-6、IL-1β的分泌率并用Griess法测定细胞分泌NO的量。[结果]粗多糖的提取率为8.35%,ASPF在超过800μg/mL时会对RAW264.7细胞产生细胞毒性。ASPF在100μg/mL~800μg/mL时能显著地促进RAW264.7细胞的增殖和吞噬,与药物浓度呈正相关,且ASPF在800μg/mL时对细胞的增殖率和吞噬率的提高效果最佳;ASPF能促进RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-1β和NO,呈现剂量依赖性,且在ASPF浓度为800μg/mL时促进效果最佳。[结论]刺五加果多糖(ASPF)能对RAW264.7细胞的生长和吞噬起到促进作用,并且有提高该细胞分泌IL-6、IL-1β和NO的能力。

关键词：刺五加果多糖免疫调节细胞因子

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三峡水库支流甲烷排放研究进展

湖泊科学 2024年第1期36卷 17-33页

作者：毛羽丰何蕊序李宏杨胜发余薇薇叶开来林彤白小霞何强重庆交通大学国家内河航道整治工程技术研究中心重庆400074 重庆交通大学水利水运工程教育部重点实验室重庆400074 重庆大学三峡库区生态环境教育部重点实验室重庆400045

甲烷(CH_(4))对全球温室效应有着较大的贡献。三峡水库自2003年蓄水以来,其CH_(4)排放问题已受到广泛关注。但三峡水库反季节的运行方式,使支流库湾CH_(4)的产生和传输过程受到多方面的影响,进而导致其CH_(4)排放效应尚不十分明确。本... 详细信息

甲烷(CH_(4))对全球温室效应有着较大的贡献。三峡水库自2003年蓄水以来,其CH_(4)排放问题已受到广泛关注。但三峡水库反季节的运行方式,使支流库湾CH_(4)的产生和传输过程受到多方面的影响,进而导致其CH_(4)排放效应尚不十分明确。本文综述了三峡水库支流CH_(4)排放的研究进展,典型支流的CH_(4)排放通量普遍高于干流,位于三峡水库库尾的部分支流CH_(4)排放通量高于三峡水库库首及库中支流。大多数典型支流的CH_(4)通量在夏季均达到全年峰值,而在冬季高水位运行期均处于相对较低的水平。同时本文主要从水环境条件、水动力条件、人类活动及气象条件4个方面阐述了三峡水库支流CH_(4)排放的影响因素。1)水环境条件:支流水华后藻类衰亡分解过程会驱动CH_(4)释放,且藻类的演替过程会加剧CH_(4)的产生;温度可以直接影响CH_(4)的生成速率和消耗速率,也能通过促进藻的生长间接影响CH_(4)排放;支流相对较低的甲烷氧化菌丰度是其CH_(4)通量较高的原因之一。2)水动力条件:蓄水期CH_(4)主要以扩散的方式进行释放,支流较低的流速促进了悬浮物的沉积,上游沉积物中的CH_(4)含量高于下游;泄水期CH_(4)主要以冒泡的方式进行释放,下游沉积物中TOC急剧增加,但干流的入侵会削弱支流的温度分层,破坏藻类生长环境,间接影响CH_(4)通量。3)人类活动:农业耕作使支流水体中的营养物浓度增加,甲烷氧化菌的丰富度降低,细菌群落的营养相关代谢增强;建设用地扩大、支流筑坝增加抑制了有机物的传输,增加了水体中的产CH_(4)底物,促进了CH_(4)的产生。4)气象条件:降雨会携带更多营养物质进入支流,同时会增加水体浊度、破坏水体的温度分层,从而对CH_(4)的产生和传输过程造成影响。最后对未来的研究热点进行了展望,以期为三峡水库CH_(4)排放的控制和管理提供参考。

关键词：三峡水库支流甲烷排放水环境条件水动力条件人类活动气象条件

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难溶性药物共晶的溶出与吸收研究进展

药学学报 2024年第8期59卷 2205-2215页

作者：张少钲单识宇郭敏珊蔡挺中国药科大学药学院江苏南京210009 中国药科大学工学院江苏南京211198 中国药科大学教育部智能制药关键技术工程研究中心江苏南京211198

药物共晶是改善难溶性药物溶出与生物利用度有效的策略之一,但其在溶出过程中容易发生相转变导致原料药重结晶,失去增溶优势,该问题已成为难溶性药物共晶应用的主要瓶颈之一。选择合适的添加剂能够有效抑制药物共晶溶出过程中的相转变,... 详细信息

药物共晶是改善难溶性药物溶出与生物利用度有效的策略之一,但其在溶出过程中容易发生相转变导致原料药重结晶,失去增溶优势,该问题已成为难溶性药物共晶应用的主要瓶颈之一。选择合适的添加剂能够有效抑制药物共晶溶出过程中的相转变,提高难溶性药物共晶溶出与吸收程度;此外,复杂的胃肠道给药环境与药物共晶体内吸收行为,均会对药物共晶的生物利用度产生明显影响。因此,本文总结了关于难溶性药物共晶溶出与吸收的研究进展,期望为药物共晶制剂处方的开发提供指导。

关键词：药物共晶难溶性药物相转变体外溶出体内吸收

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高硫酸盐矿山废水的处理方法研究进展

应用化工 2022年第8期51卷 2355-2361页

作者：王晓青冯启言宫敏梁浩乾中国矿业大学矿山生态修复教育部工程研究中心江苏徐州221116 中国矿业大学环境与测绘学院江苏徐州221116

基于国内外相关研究成果及工程案例,对高硫酸盐矿山废水的成因、主要的处理技术及存在问题进行了综述。酸性高硫酸盐矿山废水可采用中和沉淀法、石灰石沟渠法、缺氧石灰石沟渠法、硫酸盐还原生物反应器、可渗透反应墙、人工湿地等处理技... 详细信息

基于国内外相关研究成果及工程案例,对高硫酸盐矿山废水的成因、主要的处理技术及存在问题进行了综述。酸性高硫酸盐矿山废水可采用中和沉淀法、石灰石沟渠法、缺氧石灰石沟渠法、硫酸盐还原生物反应器、可渗透反应墙、人工湿地等处理技术,碱性高硫酸盐矿山废水主要采用反渗透、电渗析、离子交换树脂、纳滤等处理技术。在实际工程应用过程中,由于高硫酸盐矿山废水,一般同时含有重金属、氟化物等,需要根据矿山废水污染物类型,同时考虑污染物排放标准和环境质量标准,综合评估硫酸盐的处理方法,实现硫酸盐处理的低成本、低能耗化和资源化。

关键词：高硫酸盐矿山废水处理方法

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模块化工程大肠杆菌从头合成丁香酚

天津大学学报（自然科学与工程技术版） 2022年第7期55卷 728-736页

作者：赵广荣曹嘉誉马雅婷邱泽天李嘉天津大学化工学院天津300350 教育部合成生物学前沿科学中心和系统生物工程重点实验室天津300350

丁香酚是一种绿色生物农药,主要用于防治番茄灰霉病、葡萄霜霉病和马铃薯晚疫病等主要的农业病害.目前丁香酚是从丁香和罗勒等植物中提取制备,其规模和产能受到限制,还存在废渣排放影响生态环境的问题.本研究采用合成生物学和模块化工... 详细信息

丁香酚是一种绿色生物农药,主要用于防治番茄灰霉病、葡萄霜霉病和马铃薯晚疫病等主要的农业病害.目前丁香酚是从丁香和罗勒等植物中提取制备,其规模和产能受到限制,还存在废渣排放影响生态环境的问题.本研究采用合成生物学和模块化工程策略,设计构建工程大肠杆菌,以期微生物从头合成丁香酚.将丁香酚异源合成途径分成3个模块,分别是上游的阿魏酸合成模块、中游的松柏醇合成模块和下游的丁香酚合成模块,对每个模块进行不同来源基因的组合筛选和表达优化.利用His标签、敲除甲基供体合成途径中的全局调控基因metJ,优化了上游模块(PcTAL-HpaBC-AtCOMT),减少了中间产物咖啡酸的积累,提高了阿魏酸合成.筛选了4CL和醇脱氢酶基因来源,研究了表达模式,获得最优的中游模块是双顺反子表达At4CL1-AtCCR1,单顺反子表达YahK,松柏醇产量最高.对3个酰基转移酶基因和4个丁香酚合成酶基因进行组合筛选,获得最优的下游模块是单顺反子PhCFAT和GdlEGS2,丁香酚合成最多.最后,在酪氨酸高产底盘中表达丁香酚合成途径,对初始葡萄糖、酵母提取物和诱导剂浓度等进行优化.在适宜的培养基和发酵条件下,丁香酚的产量为114.67mg/L.本文采用模块化代谢工程策略优化丁香酚异源合成途径,改造底盘菌株,首次实现了微生物从头合成丁香酚,具有重要应用前景.

关键词：丁香酚大肠杆菌代谢工程合成生物学

基于抗凝血酶活性效价的麝香质量生物评价方法研究

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中国中药杂志 2018年第10期43卷 2112-2117页

作者：罗云谭婷梁新丽赵海平廖正根杨明江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004 江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心江西南昌330006

该文尝试建立麝香体外抗凝血酶活性效价测定方法,探索品种和产地对麝香抗凝血酶生物活性的影响,为麝香质量生物评价提供科学依据。采用凝血酶滴定法,考察麝香供试品溶液浓度、纤维蛋白原浓度、凝血酶浓度、凝血酶滴定时间间隔对麝香抗... 详细信息

该文尝试建立麝香体外抗凝血酶活性效价测定方法,探索品种和产地对麝香抗凝血酶生物活性的影响,为麝香质量生物评价提供科学依据。采用凝血酶滴定法,考察麝香供试品溶液浓度、纤维蛋白原浓度、凝血酶浓度、凝血酶滴定时间间隔对麝香抗凝血酶活性测定的影响,并比较不同品种和产地麝香抗凝血酶活性的大小。结果显示,麝香供试品溶液浓度在一定范围内（0.010.02 g·m L-1）,纤维蛋白原浓度为0.5%,凝血酶浓度为10 U·m L-1,滴定间隔时间为1 min,每次滴定2μL时,麝香供试品溶液浓度与凝血酶消耗体积呈良好的线性关系（r=0.991 4）。不同产地林麝麝香抗凝血酶活性效价为（105.0±10.4）U·g-1,马麝麝香抗凝血酶活性效价为（102.4±5.5）U·g-1,原麝（安徽）麝香抗凝血酶活性效价为（97.7±6.6）U·g-1,人工麝香抗凝血酶活性效价为（58.6±6.4）U·g-1。结果表明,抗凝血酶活性效价测定方法简便、快速、准确、可靠,可用于麝香质量生物评价;品种和产地对麝香抗凝血酶活性影响较大,在麝人工饲养时应注意品种和产地的选择;人工麝香和天然麝香的抗凝血酶活性差异较大,提示人工麝香处方配比可能有待进一步优化。

关键词：麝香抗凝血酶活性凝血酶滴定法产地品种生物测定

秸秆发酵中乳酸菌复合系SFC－2对杂菌的抑制作用

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微生物学报 2008年第7期48卷 879-886页

作者：马静静王小芬高丽娟杨洪岩崔宗均中国农业大学农学与生物技术学院、生物质工程中心北京100193 北京市理化分析测试中心北京100089

【目的】为探明秸秆发酵用乳酸菌复合系SFC-2对杂菌的抑制作用。【方法】从秸秆自然发酵体系中,利用平板划线法、纸片扩散法和变性梯度凝胶电泳(DGGE)筛选出13株菌作为研究该乳酸菌复合系抑菌作用的对象。【结果】(1)通过16S rDNA序列... 详细信息

【目的】为探明秸秆发酵用乳酸菌复合系SFC-2对杂菌的抑制作用。【方法】从秸秆自然发酵体系中,利用平板划线法、纸片扩散法和变性梯度凝胶电泳(DGGE)筛选出13株菌作为研究该乳酸菌复合系抑菌作用的对象。【结果】(1)通过16S rDNA序列分析显示13株分离菌中9株菌的近缘种为Enterobacter cloacae、Klebsiella oxytoca、Bacillus cereus、Klebsiella pneumoniae、Citrobacter freundii、Klebsiella terrigena、Citrobacter sp.,这些均为常见的致病菌或条件致病菌。(2)将筛选出的致病菌作为被测试菌株,用SFC-2的发酵上清液处理表明:SFC-2复合系的抑菌作用高于复合系分离的单一菌株和单一菌株人工组合的抑制作用。(3)SFC-2培养的14～48h内动态检测结果表明:发酵上清液的有机酸含量有显著差异,但抑菌活性差异不显著;发酵上清液经热处理后抑菌活性不发生变化,蛋白酶K处理后抑菌活性部分丧失。

关键词：乳酸菌复合菌系抑菌作用抑菌机理