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肿瘤相关成纤维细胞外泌体对乏氧条件下肺腺癌细胞自噬的影响及其机制研究

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临床肺科杂志 2024年第8期29卷 1206-1212页

作者：麻佑锋韩利红王梦丽郑其帆洛阳市中心医院呼吸与危重症医学科河南洛阳471009 新乡医学院河南新乡453003 郑州大学河南郑州450001

目的探讨肿瘤相关成纤维细胞外泌体对乏氧条件下肺腺癌A549细胞自噬的影响及其机制。方法选取手术的肺癌标本及癌旁组织标本,进行肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)和成纤维细胞(NFs)的原代分离和鉴定;收集CAFs和NFs细胞培养上清,利用差速离... 详细信息

目的探讨肿瘤相关成纤维细胞外泌体对乏氧条件下肺腺癌A549细胞自噬的影响及其机制。方法选取手术的肺癌标本及癌旁组织标本,进行肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)和成纤维细胞(NFs)的原代分离和鉴定;收集CAFs和NFs细胞培养上清,利用差速离心法从细胞培养上清液中分离出外泌体(exo),并通过电子显微镜和Western Blot对分离出的外泌体进行鉴定;采用CoCL_(2)体外构建乏氧微环境,将A549细胞复苏并传代后,把外泌体与A549细胞共培养,共分为4组:常氧A549组、乏氧A549组、乏氧A549+CAFs-exo组、乏氧A549+NFs-exo组;利用Western印迹法检测不同细胞组中LC3Ⅱ、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达变化,并通过Western Blot确定各组中AMPK、p-AMPK、mTOR和p-mTOR的表达水平;采用CCK8法、划痕实验、Transwell法,研究外泌体在不同环境中与细胞共同培养后对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 Western Blot显示CAFs中FSP-1、FAP、a-SMA蛋白高表达,透射电镜观察到提取的外泌体具备典型的结构特征。与常氧A549组相比,乏氧A549各组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低(P<0.001),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,p-AMPK/AMPK比值上升,p-mTOR/mTOR比值下降(P<0.001);与乏氧A549组相比,乏氧A549+NFs-exo组细胞增殖、迁移、侵袭能力无明显变化,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR比值均无明显变化;与乏氧A549组相比,乏氧A549+CAFs-exo组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显强于乏氧A549组且LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,p-AMPK/AMPK比值上升,p-mTOR/mTOR比值下降。结论在乏氧微环境下,肿瘤相关成纤维细胞外泌体基于AMPK/mTOR信号通路,增强A549细胞自噬,可能是A549细胞抵抗乏氧环境、维持细胞增殖的机制之一。

关键词：肿瘤相关成纤维细胞外泌体非小细胞肺癌

基于转录组学初探胰高血糖素样肽/胰高血糖素双受体激动剂Mazdutide对高尿酸血症大鼠的降尿酸作用

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中国医学前沿杂志（电子版） 2024年第7期16卷 36-46页

作者：任艳爽张岩钊姜昱卿魏明月姜宏卫河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院内分泌代谢中心、河南省罕见病重点实验室、洛阳市临床多组学与转化医学重点实验室河南洛阳471003

目的通过转录组学初探一种胰高血糖素样肽/胰高血糖素双受体激动剂Mazdutide对高尿酸血症(hyperurice-mia,HUA)大鼠的降尿酸作用及其潜在机制。方法根据随机数字表法将Sprague Dawley大鼠分为8组(每组10只),分别是正常对照组(control,CO... 详细信息

目的通过转录组学初探一种胰高血糖素样肽/胰高血糖素双受体激动剂Mazdutide对高尿酸血症(hyperurice-mia,HUA)大鼠的降尿酸作用及其潜在机制。方法根据随机数字表法将Sprague Dawley大鼠分为8组(每组10只),分别是正常对照组(control,CON组),高脂对照组(high-fat diet control group,HFD组),模型组(hyperuricemia,HUA组),Mazdutide低、中、高剂量组(Maz-LD组、Maz-MD组、Maz-HD组),索马鲁肽组(Semaglutide,Sema组),别嘌呤醇组(allopurinol,ALL组)。对照组大鼠每日灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液(sodium carboxymethylcellulose,CMC-Na),其余大鼠灌胃100 mg/kg腺嘌呤和1000 mg/kg氧嗪酸钾诱导HUA模型,Maz-LD组、Maz-MD组、Maz-HD组每3天1次皮下注射0.025 mg/kg、0.05 mg/kg、0.075 mg/kg的Mazdutide,Sema组每3天1次皮下注射0.05 mg/kg的Semaglutide,ALL组每日灌胃25 mg/kg的别嘌呤醇。连续给药19 d,检测大鼠血清尿酸(serum uric acid,SUA)、肌酐(serum creatinine,SCr)、尿尿酸(urinary uric acid,UUA)、尿蛋白(urine protein,U-Pro)水平;苏木素-伊红(he-matoxylin and eosin,HE)染色观察肾脏组织病理变化;通过转录组学探索Mazdutide在HUA大鼠中的作用。结果与HUA组比较,Maz-MD组、Maz-HD组与Sema组都降低了大鼠体重,别嘌呤醇对体重无影响;Maz-LD组SUA、SCr水平明显降低(P<0.05),Maz-MD组SUA、SCr、U-Pro水平显著降低(P<0.01、P<0.05、P<0.01),Maz-HD组SUA、SCr水平显著降低(P<0.01);各组UUA水平无明显差异。苏木素-伊红染色结果发现,Mazdutide改善了HUA大鼠的肾脏组织病理学变化。肾脏转录组学发现Mazdutide干预后,GCGR、Slc22a7、Slc23a3、Aqp2的表达量显著上调(P<0.001、P<0.05、P<0.01、P<0.05),Dnmt3a、Rest、Foxn3、Atp7a、Slc4a7(P<0.0001、P<0.01、P<0.01、P<0.01、P<0.05)的表达量显著下调,相关KEGG显著富集通路有胆汁分泌,肾素-血管紧张素系统,组氨酸代谢,铂耐药性,造血细胞系,补体和凝血级联反应。结论皮下注射0.05 mg/kg和0.075 mg/kg的Mazdutide(每3天1次)可显著降低HUA大鼠的SUA水平,改善肾功能、肾脏组织病理情况,且明显降低大鼠体重;通过回调GCGR、Slc22a7、Slc23a3、Aqp2、Dnmt3a、Rest、Foxn3、Atp7a、Slc4a7基因的表达水平,减少尿酸生成的前体物质,调节糖脂代谢、嘌呤代谢、胆汁分泌达到降尿酸作用。

关键词：高尿酸血症胰高血糖素样肽-1/胰高血糖素双受体激动剂转录组学

非洲猪瘟病毒CP312R蛋白的真核表达及单克隆抗体制备

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中国兽医学报 2024年第3期44卷 445-449,457页

作者：颜世君赵少若郝丽影白露露王同燕邓均华田克恭国家兽用药品工程技术研究中心河南洛阳471000 普莱柯生物工程股份有限公司河南洛阳471000 洛阳普泰生物技术有限公司河南洛阳471000

为制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CP312R蛋白的单克隆抗体,以真核表达ASFV的CP312R蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并通过间接免疫荧光法(IFA)对获得的单克隆抗体进行反应性鉴定。结果利用杆状病毒表达系... 详细信息

为制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CP312R蛋白的单克隆抗体,以真核表达ASFV的CP312R蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并通过间接免疫荧光法(IFA)对获得的单克隆抗体进行反应性鉴定。结果利用杆状病毒表达系统(baculovirus expression system,BES)构建获得重组转移载体pOET3-CP312R,与杆状病毒基因组flashBAC^(TM)ULTRA共转染Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒AcMNPV-CP312R,且该病毒以胞内可溶形式表达出重组ASFV CP312R蛋白质。通过蛋白质印迹法鉴定显示重组CP312R蛋白可以与ASFV阳性血清发生特异性反应。此外,筛选获得2株针对重组CP312R蛋白的单克隆抗体(McAb),间接ELISA方法鉴定抗体滴度不低于1∶1024000。IFA试验检测表明,单克隆抗体与非洲猪瘟抗原发生特异性反应。本研究为非洲猪瘟亚单位疫苗研发及血清学检测方法的建立提供物质储备。

关键词：非洲猪瘟 CP312R蛋白重组杆状病毒单克隆抗体间接ELISA

金属有机框架荧光传感器在食品中抗生素类兽药残留检测的研究进展

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食品与发酵工业 2024年第8期50卷 334-342,355页

作者：谢三磊陶晓奇河南科技大学动物科技学院河南洛阳471000 西南大学动物医学院重庆400715 西南大学食品科学学院重庆400715

金属-有机框架材料(metal-organic frameworks,MOFs),是一类由金属离子或者是次级构筑单元与有机配体通过配位键自组装形成的材料,是近年快速发展的一种新型功能性检测材料。MOFs具有比表面积大、孔道尺寸可调和结构可控等优势,在构建... 详细信息

金属-有机框架材料(metal-organic frameworks,MOFs),是一类由金属离子或者是次级构筑单元与有机配体通过配位键自组装形成的材料,是近年快速发展的一种新型功能性检测材料。MOFs具有比表面积大、孔道尺寸可调和结构可控等优势,在构建高选择性和高灵敏度的发光传感器领域有着广阔的应用前景。该文对发光MOFs的不同荧光发光机理进行阐明和详细分类,总结了发光MOFs作为荧光传感器在抗生素类兽药残留检测中的应用实例,最后就目前存在的问题提出建议,并对未来的发展前景进行了展望。

关键词：金属-有机骨架材料荧光传感器荧光发光机理抗生素类兽药

黏膜免疫佐剂及其在牙龈卟啉单胞菌疫苗中的应用

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生物技术 2024年第3期34卷 395-402页

作者：王烁李智涛万储宁陈义祥高社干河南科技大学基础医学与法医学院河南洛阳471000 河南科技大学第一附属医院河南洛阳471000

病原体的感染通常从黏膜侵入机体,因此黏膜免疫是保护机体免受病原侵犯的重要策略之一。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)的感染起始于牙龈黏膜表面,激活局部黏膜免疫应答是预防Pg感染的有效途径。为了增强疫苗的黏膜免疫效... 详细信息

病原体的感染通常从黏膜侵入机体,因此黏膜免疫是保护机体免受病原侵犯的重要策略之一。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)的感染起始于牙龈黏膜表面,激活局部黏膜免疫应答是预防Pg感染的有效途径。为了增强疫苗的黏膜免疫效果,往往需要添加黏膜免疫佐剂。该文综述了近年来黏膜免疫佐剂的研究进展,归纳总结了不同类型黏膜免疫佐剂作用机制、优缺点以及在Pg疫苗中应用现状和效果。此外,探讨了黏膜免疫佐剂在Pg疫苗中潜在的应用价值和发展趋势,为Pg疫苗的研发和佐剂的选择提供新思路。

关键词：牙龈卟啉单胞菌黏膜免疫疫苗免疫佐剂

牙龈卟啉单胞菌诱发炎症微环境促进食管鳞状细胞癌发生

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中华肿瘤杂志 2024年第8期46卷 746-754页

作者：许海军齐义军伍当柔刘其伟陈攀李孟祥焦叶林阮豪杰李智涛高社干河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003 许昌学院医学院细胞行为学重点实验室许昌461000 洛阳理工学院数学与物理教学部洛阳471023 洛阳市第一人民医院病理科洛阳471000

目的探讨牙龈卟啉单胞菌诱发食管炎症微环境在小鼠食管鳞状细胞癌发生过程中的作用。方法采用数字表法随机将180只C57BL/6小鼠分为对照组、牙龈卟啉单胞菌组、4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌诱发食管炎症微环境在小鼠食管鳞状细胞癌发生过程中的作用。方法采用数字表法随机将180只C57BL/6小鼠分为对照组、牙龈卟啉单胞菌组、4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌+塞来昔布组和4NQO+牙龈卟啉单胞菌+抗生素(甲硝唑、新霉素、氨苄青霉素和万古霉素,ABC)组,每组30只。给予ABC饮水2周,之后8周,对照组和牙龈卟啉单胞菌组小鼠饮用纯水,其余4组给予含30μg/ml 4NQO的饮水。第11~12周,牙龈卟啉单胞菌组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌组、4NQO+牙龈卟啉单胞菌+塞来昔布组和4NQO+牙龈卟啉单胞菌+ABC组小鼠行上颌第2磨牙结扎;第11~34周,每周3次口腔感染牙龈卟啉单胞菌。第13~34周,4NQO+牙龈卟啉单胞菌+塞来昔布组和4NQO+牙龈卟啉单胞菌+ABC组小鼠分别接受塞来昔布和ABC处理。34周后处死小鼠,观察小鼠食管黏膜大体和形态学变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫组化检测小鼠食管组织中炎症和肿瘤相关分子表达。结果34周时,4NQO单独处理未能显著增加小鼠食管黏膜乳头状增生病灶数、病变面积和食管壁厚度,单纯性增生病灶数(中位数为1.00个,P<0.05)和轻、中度不典型增生病灶数(中位数为2.00个,P<0.01)显著增加,小鼠食管组织中白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、c-myc mRNA的表达量[分别为8.35(3.45,8.99)、6.90(2.01,9.72)、12.04(3.31,14.08)、2.21(1.80,3.04),均P<0.05]和磷酸化信号转导和转录激活因子3(pSTAT3)、Ki-67、磷酸化组蛋白2A变异体(pH2AX)蛋白的表达明显高于对照组。4NQO+牙龈卟啉单胞菌组小鼠食管黏膜病变显著,乳头状增生病灶数(中位数为2.00个)、病变面积(中位数为2.51 mm^(2))和食管壁厚度(中位数为172.52μm)最大,且均与对照组差异有统计学意义(均P<0.01),单纯性增生病灶数(中位数为1.00个,P<0.05)和轻、中度不典型增生病灶数(中位数为1.00个,P<0.01)显著增加,小鼠食管组织中IL-6、IL-1β、TNF-α、γ-干扰素(IFN-γ)、c-myc、cyclin D1 mRNA的表达量[分别为12.27(5.35,22.08)、13.89(10.04,15.96)、19.56(6.07,20.36)、11.37(8.23,20.07)、2.62(1.51,4.25)和4.52(2.68,7.83),P<0.05或P<0.01]和pSTAT3、环氧合酶2(COX-2)、Ki-67、pH2AX蛋白的表达均高于对照组。塞来昔布干预明显减少了4NQO联合牙龈卟啉单胞菌引起的黏膜病变面积(4NQO+牙龈卟啉单胞菌+塞来昔布组中位数为1.84 mm^(2),P<0.05)和浸润癌病灶数(4NQO+牙龈卟啉单胞菌+塞来昔布组中位数为0.00个,P<0.01),降低了pSTAT3和pH2AX的表达。ABC干预明显减少了4NQO联合牙龈卟啉单胞菌所诱导的乳头状增生病灶数(4NQO+牙龈卟啉单胞菌+ABC组中位数为1.00个,P<0.05)和浸润癌病灶数(4NQO+牙龈卟啉单胞菌+ABC组中位数为0.00个,P<0.01),降低了pSTAT3的表达,但对pH2AX的表达无明显影响。结论在4NQO诱导的基因组损伤基础上,牙龈卟啉单胞菌能通过诱发炎症微环境促进食管鳞状细胞癌的发生,使用COX-2抑制剂或ABC可以通过阻断IL-6/STAT3信号通路,减轻食管组织的炎症反应,抑制食管鳞状细胞癌的发生。

关键词：食管鳞状细胞癌牙龈卟啉单胞菌炎症微环境 4-硝基喹啉-1-氧化物白细胞介素6 信号转导和转录激活因子3 环氧合酶2 组蛋白2A变异体

钳夹型髋撞击症无透视与透视下髋臼成形术比较

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中国矫形外科杂志 2024年第12期32卷 1083-1088页

作者：于康康吴毅东李中耀甘露安明扬王明新王龙王耀霆张立宁常祺李春宝解放军总医院第四医学中心骨科医学部北京100853 解放军总医院第一医学中心康复医学科北京100853 中国人民解放军联勤保障部队第989医院全军军事训练医学研究所河南洛阳471031

[目的]比较无透视髋臼“一字成形”与目前常规术中透视髋臼成形术治疗钳夹型髋关节撞击综合征的临床效果。[方法]回顾性分析2021年10月—2023年2月在解放军总医院骨科采用髋关节镜术治疗的70例钳夹型髋撞击综合征患者的临床资料。根据... 详细信息

[目的]比较无透视髋臼“一字成形”与目前常规术中透视髋臼成形术治疗钳夹型髋关节撞击综合征的临床效果。[方法]回顾性分析2021年10月—2023年2月在解放军总医院骨科采用髋关节镜术治疗的70例钳夹型髋撞击综合征患者的临床资料。根据医患沟通结果,35例在无透视下行髋臼一字成形术(无透视组);另外35例常规在透视下行髋臼成形术。比较两组围手术期、随访和影像资料。[结果]两组患者均顺利手术,术中无重要血管、神经损伤等严重并发症。无透视组在手术时间[(110.1±14.8) min vs (128.5±22.5) min, P0.05)。两组患者均获随访12个月以上,平均(26.4±5.5)个月。与术前相比,末次随访时两组的VAS评分均显著减少(P0.05);末次随访时,透视组的VAS评分、mHHS评分小于无透视组,iHOT-12评分高于无透视组,但两组间差异均无统计学意义(P>0.05)。影像方面,与术前相比,末次随访时,两组患者的外侧中心-边缘角(lateral center-edge angle, LCEA)和髋臼指数(acetabular index, AI)均较术前显著改善(P0.05)。[结论]关节镜下无透视与常规透视髋臼成形术均能获得良好的临床效果,两种方法的临床效果无明显差异,但前者能节省手术时间并减少辐射对健康的影响。

关键词：髋关节撞击综合征钳夹型关节镜手术髋臼成形术

基于深度学习算法的自动勾画系统在头颈部危及器官勾画精度的研究

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中国医学物理学杂志 2024年第5期41卷 548-553页

作者：胡兴刚王娴张扬张玉雷李校宣陈猛普洱市人民医院肿瘤中心云南普洱665000 洛阳市中心医院放疗科河南洛阳471000

目的:评估和分析3种基于深度学习技术的自动勾画系统在勾画头颈部危及器官(OAR)中的准确度。方法:以放疗医师手工勾画的OAR为标准,通过体积相似性系数(DSC)、豪斯多夫距离(HD)、感兴趣区域质心偏差(COMD)、过分割率(FNR)、欠分割率(FPR)... 详细信息

目的:评估和分析3种基于深度学习技术的自动勾画系统在勾画头颈部危及器官(OAR)中的准确度。方法:以放疗医师手工勾画的OAR为标准,通过体积相似性系数(DSC)、豪斯多夫距离(HD)、感兴趣区域质心偏差(COMD)、过分割率(FNR)、欠分割率(FPR)、Jaccard系数(JC)、灵敏度指数(SI)及包容性系数(II)等参数评估PV-iCurve、RT-Mind和AccuContour自动勾画系统在头颈部OAR勾画的精度。结果:脑的FNR、JC、SI值,脑干的FPR、II值,左眼的FPR、FNR、JC、SI值,下颌骨的FPR、FNR、SI、II值,左腮腺的FPR、FNR、SI、II值及脊髓的DSC、FPR、JC、II值均显示3种勾画系统间存在统计学差异(P0.05)。结论:通过多个参数的比较,发现3种软件在不同OAR勾画中的勾画精度不同,难以进行整体横向比较,因此这些参数仅作为参考,不能用于评估勾画结果作为临床治疗的标准,虽然3种软件都有较好的勾画结果,但仍需医师仔细审核和做必要的修改。

关键词：自动勾画头颈部危及器官深度学习

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基于“岗课赛证”融合的高职院校护理专业健康评估教学改革实践

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河南医学高等专科学校学报 2024年第4期36卷 530-533页

作者：马瑞周勇浩马静河南推拿职业学院基础医学部河南洛阳471023

为切实提高高职院校护理专业人才健康评估水平,此研究基于“岗课赛证”融合背景,针对高职院校护理专业《健康评估》课程,以护士执业资格考试、护理岗位需求以及护理临床工作程序为依据重组教学内容,构建理实一体教学模式,合理运用多种... 详细信息

为切实提高高职院校护理专业人才健康评估水平,此研究基于“岗课赛证”融合背景,针对高职院校护理专业《健康评估》课程,以护士执业资格考试、护理岗位需求以及护理临床工作程序为依据重组教学内容,构建理实一体教学模式,合理运用多种教学方法及多元评价体系,注重课程思政与专业知识相互融合,着重以突出学生临床实践能力及综合素质的培养为目标积极进行了教学改革及实践,有效提升了高职院校护理专业健康评估课程的教学效果,也为“岗课赛证”背景下进一步做好高职院校护理专业专业课程教学改革提供了有力借鉴。

关键词：岗课赛证健康评估教学改革

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