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基于酶辅助的比率型电化学适配体传感器用于前列腺特异性抗原检测

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分析试验室 2024年第5期43卷 615-620页

作者：关志敏谢瑶瑶马会凯王萍河南科技大学基础医学与法医学院洛阳471000

基于核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助靶标循环策略,构建了比率型电化学适配体传感器,并用于前列腺特异性抗原(PSA)的检测。利用亚甲基蓝(MB)作为内置参考信号,当PSA存在时,发夹探针1(HP1)的适配体序列与PSA特异性结合,引起ExoⅢ的2次切割过程,... 详细信息

基于核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助靶标循环策略,构建了比率型电化学适配体传感器,并用于前列腺特异性抗原(PSA)的检测。利用亚甲基蓝(MB)作为内置参考信号,当PSA存在时,发夹探针1(HP1)的适配体序列与PSA特异性结合,引起ExoⅢ的2次切割过程,从而实现2次循环扩增反应,导致电极上更多的MB标记的发夹探针3(MB-HP3)被切割;再加入二茂铁(Fc)标记的DNA链(Fc-DNA)与MB-HP3酶切后的片段进行杂交;最终,Fc的信号(I_(Fc))增加,而MB的信号(I_(MB))基本保持不变。在最佳条件下,I_(Fc)/I_(MB)与PSA浓度的对数值在0.001~100 ng/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为0.24 pg/mL。该传感器在临床实际样品检测中具有较好的应用前景。

关键词：前列腺特异性抗原核酸外切酶Ⅲ 比率型电化学适配体传感器

CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的mi RNA21检测

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分析试验室 2024年第4期43卷 559-563页

作者：李甜邹红敏陈菲游芸张莉萍河南科技大学基础医学与法医学院洛阳471023

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切... 详细信息

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切一端带有荧光基团、另一端带有猝灭基团的单链DNA荧光报告探针,产生可检测的荧光信号。考察了CHA反应温度、发夹探针浓度、荧光报告探针浓度和Cas12a切割时间的影响。在优化条件下,荧光信号与miRNA21浓度的对数呈良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9924,检出限为1.1 pmol/L。利用本方法对miRNA21加标的胎牛血清样品进行分析,20 pmol/L和100 pmol/L miRNA21的回收率分别为(92.0±4.2)%和(94.1±4.7)%。CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的miRNA检测方法,使miRNA检测摆脱了热循环仪器,操作简单,通用性强,具有实际应用潜力。

关键词：催化发夹自组装 CRISPR/Cas12a miRNA21 荧光

维生素D缺乏对多囊卵巢综合征患者糖脂代谢及妊娠结局的影响

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新乡医学院学报 2024年第4期41卷 372-377页

作者：邢冠琳王芳柳胜贤郑州大学附属洛阳中心医院生殖医学科河南洛阳471000

目的探讨维生素D(VD)缺乏对多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床指标及妊娠结局的影响。方法选择2019年1月至2021年12月于郑州大学附属洛阳市中心医院生殖医学科行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵泡浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕的35... 详细信息

目的探讨维生素D(VD)缺乏对多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床指标及妊娠结局的影响。方法选择2019年1月至2021年12月于郑州大学附属洛阳市中心医院生殖医学科行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵泡浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕的358例PCOS患者为研究对象,根据VD水平将患者分为VD缺乏PCOS组和VD充足PCOS组。通过电子病历收集患者的年龄、不孕年限等一般临床资料。进入IVF-ET/ICSI周期前,测量患者身高、体质量,计算体质量指数(BMI);抽取空腹静脉血,应用电化学发光法检测血清25-羟维生素D[25-(OH)D]、血糖、胰岛素、三酰甘油、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。于月经第2~3天,抽取空腹静脉血2~3 mL,应用电化学发光仪检测血促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、雌二醇(E 2)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)、孕酮(P)、抗苗勒管激素(AMH)水平。记录促性腺激素(Gn)用量、Gn使用天数以及扳机日LH、E 2、P水平。记录获卵数、移植胚胎数、获卵率、分裂中期(MII)卵率、两原核胚胎(2PN)率、2PN卵裂率、优质胚胎率、移植日内膜厚度,计算生化妊娠率、临床妊娠率、流产率。应用logistic线性回归分析PCOS患者VD水平相关影响因素,多因素logistic回归分析PCOS患者临床妊娠影响因素。结果VD缺乏PCOS组患者E 2水平、LDL-C、空腹血糖显著高于VD充足PCOS组,AMH水平显著低于VD充足PCOS组(P0.05)。2组患者的GN用量、GN使用天数、扳机日LH水平、扳机日E 2水平、扳机日P水平、平均获卵数、移植胚胎数、获卵率、MⅡ卵率、2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、移植日内膜厚度、生化妊娠率、临床妊娠率、流产率比较差异无统计学意义(P>0.05)。去除年龄及体质量等混杂因素后,logistic线性回归分析结果显示,PCOS患者的25-(OH)D水平与AMH、胆固醇、FSH呈正相关(P0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,PCOS患者的BMI、25-(OH)D水平、三酰甘油、HOMA-IR、优质胚胎数、内膜厚度、扳机日孕酮水平与临床妊娠相关(P0.05)。结论VD缺乏可影响PCOS患者的糖脂代谢及妊娠结局。

关键词：维生素D 多囊卵巢综合征糖脂代谢妊娠结局

应用检测阴性病例对照研究处置登革热暴发疫情

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医学动物防制 2024年第5期40卷 475-479页

作者：孙毅莹朱鑫李双玲李亚静王海峰洛阳市疾病预防控制中心传染病预防控制所河南洛阳471000 河南省疾病预防控制中心

目的应用检测阴性病例对照研究处置洛阳市1起登革热本地暴发疫情,为有针对性地制定登革热防控措施提供参考依据。方法对2019年洛阳市Y区登革热暴发疫情进行流行病学调查,采用检测阴性病例对照研究,使用χ^(2)检验及多因素logistic回归... 详细信息

目的应用检测阴性病例对照研究处置洛阳市1起登革热本地暴发疫情,为有针对性地制定登革热防控措施提供参考依据。方法对2019年洛阳市Y区登革热暴发疫情进行流行病学调查,采用检测阴性病例对照研究,使用χ^(2)检验及多因素logistic回归分析流行危险因素;采集血液标本,使用快速免疫血清测试卡检测登革热病毒NS1抗原,免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)抗体,采用PCR检测核酸;采用布雷图指数法监测蚊媒密度,评价综合防治效果。结果本次疫情共报告登革热病例38例,发病年龄以60~<70岁为主,占44.74%;男女比例为1.24∶1;职业主要为农民,占50.00%。病例对照研究的单因素分析显示,是否去过K老村(χ^(2)=36.330,P<0.05)、是否去过K村卫生室(χ^(2)=20.963,P<0.05)、在K村卫生室采取的治疗方式是“开药”还是“输液”(χ^(2)=9.770,P<0.05)、是否在老村有地(χ^(2)=10.640,P<0.05)、是否自觉蚊子叮咬(χ^(2)=6.991,P<0.05)是此次登革热疫情的主要影响因素;多因素logistic回归分析显示,去过K老村(OR=0.053,95%CI:0.010~0.279)、去过K村卫生室(OR=0.053,95%CI:0.010~0.279)是危险因素。结论蚊媒活跃季节开展拆迁工作时,全面的消杀应及时跟进;蚊媒活跃季节应在全市推广爱国卫生运动,清理蚊虫孳生环境,降低媒介生物密度,防止疫情扩散蔓延。

关键词：检测阴性病例对照研究登革热暴发疫情

miR-1273g-3p调控TGF-β/Smad4信号通路影响结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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实用肿瘤杂志 2024年第3期39卷 219-227页

作者：夏添明李朝辉王云帅王皇建刘大威武会斌韩保卫新乡医学院洛阳市中心医院普外科河南洛阳471000

目的探讨miR-1273g-3p调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/mothers against decapentaplegic homolog 4(Smad4)信号通路对结直肠癌细胞生物学功能的影响。方法采用人结肠上皮细胞株NCM460为对照,对人结直肠癌细胞株HCT116和SW480采用qRT-PCR检测细胞的miR-1273g-3p表达。采用Western blot检测TGF-β和Smad4蛋白的表达。将miR-1273g-3p抑制剂转染至HCT116和SW480细胞中(miR-1273g-3p抑制剂组),并设立转染抑制剂对照剂的空载对照(抑制剂对照组)。采用qRT-PCR验证转染效果。将转染后的HCT116细胞皮下注射至BALB/c裸鼠体内。采用qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞中TGF-β和Smad4 mRNA和蛋白的表达。采用细胞增殖和细胞毒性分析(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、划痕实验和transwell小室侵袭实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过BiBiServ及TargetScan网站预测mi R-1273g-3p与TGF-β的相关性,并用双荧光素酶报告基因实验验证miR-1273g-3p与TGF-β的结合情况。结果与人结肠上皮细胞NCM460比较,人结直肠癌细胞HCT116和SW480中miR-1273g-3p、TGF-β蛋白和Smad4蛋白均高表达(均P0.05)。结论抑制miR-1273g-3p的表达可抑制结直肠癌细胞HCT116和SW480的增殖、迁移和侵袭能力。此作用可能与TGF-β/Smad4信号通路有关。

关键词：结直肠癌 miR-1273g-3p TGF-β/Smad4信号通路细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

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醋酸甲羟孕酮联合化疗治疗子宫内膜癌术后患者的临床疗效

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癌症进展 2024年第5期22卷 554-558页

作者：李鹏程熊丽丽沈乾坤丁勇哲河南科技大学第一附属医院妇科河南洛阳471000 河南科技大学基础医学院临床医学系河南洛阳4710000

目的探讨醋酸甲羟孕酮联合化疗治疗子宫内膜癌术后患者的临床疗效。方法根据腹腔镜手术后治疗方法的不同将98例子宫内膜癌患者分为对照组(n=49,单纯化疗)和观察组(n=49,醋酸甲羟孕酮联合化疗)。比较两组患者的肿瘤标志物[肿瘤特异性生... 详细信息

目的探讨醋酸甲羟孕酮联合化疗治疗子宫内膜癌术后患者的临床疗效。方法根据腹腔镜手术后治疗方法的不同将98例子宫内膜癌患者分为对照组(n=49,单纯化疗)和观察组(n=49,醋酸甲羟孕酮联合化疗)。比较两组患者的肿瘤标志物[肿瘤特异性生长因子(TSGF)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平、性激素[雌二醇(E_(2))、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、性激素结合球蛋白(SHBG)]水平、生活质量[欧洲癌症研究与治疗组织生命质量测定量表(EORTC QLQ-C30)]、不良反应发生情况、复发率及复发间隔时间。结果治疗后,两组患者TSGF、XIAP、TNF-α、E_(2)水平均低于本组治疗前,观察组患者TSGF、XIAP、TNF-α、E_(2)水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。随访6个月,观察组患者的复发率低于对照组,复发间隔时间长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论醋酸甲羟孕酮联合化疗治疗子宫内膜癌术后患者的临床疗效较好,可降低肿瘤标志物水平和复发率,提高生活质量,且安全性较好。

关键词：子宫内膜癌醋酸甲羟孕酮化疗肿瘤标志物生活质量复发

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血清rasP21与职业性肿瘤的关系

洛阳医专学报 1997年第1期16卷 56-61页

作者：王新朝田敏洛阳医专预防医学系

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黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺优化

中成药 2024年第6期46卷 1818-1823页

作者：李杰李越婷李慧贞张畅畅河南科技大学基础医学与法医学院河南洛阳471023

目的优化黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺。方法以葡萄糖-乳酸(1∶5)为低共熔溶剂。在单因素试验基础上,以提取时间、含水量、液料比为影响因素,生物碱得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间35... 详细信息

目的优化黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺。方法以葡萄糖-乳酸(1∶5)为低共熔溶剂。在单因素试验基础上,以提取时间、含水量、液料比为影响因素,生物碱得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间35 min,含水量26%,液料比33∶1,生物碱得率为7.22%。结论该方法稳定可靠,切实可行,可为黄连开发利用提供参考。

关键词：黄连生物碱超声提取工艺低共熔溶剂 Box-Behnken响应面法

锌指蛋白382在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的表达及临床意义

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新乡医学院学报 2024年第1期41卷 37-42页

作者：刘思哲安万花郭淑利王慧睿肖蓬莉王万里王双琳新乡医学院河南新乡453003 洛阳市中心医院血液科河南洛阳471009

目的探讨锌指蛋白382(ZNF382)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其与DLBCL患者临床病理特征和预后的关系。方法选择2014年1月至2018年12月洛阳市中心医院血液科收治的57例DLBCL患者为研究对象。收集患者的活检病理标本及临床资... 详细信息

目的探讨锌指蛋白382(ZNF382)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其与DLBCL患者临床病理特征和预后的关系。方法选择2014年1月至2018年12月洛阳市中心医院血液科收治的57例DLBCL患者为研究对象。收集患者的活检病理标本及临床资料;另取洛阳市中心医院病理科保存的20例反应性增生淋巴结组织作为对照组。采用En vision二步法检测DLBCL组织和反应性增生淋巴组织中ZNF382表达,比较DLBCL组织和反应性增生淋巴组织中ZNF382表达差异。采用单因素分析ZNF382表达与DLBCL患者年龄、性别、肿瘤原发部位、Ann Arbor分期、国际预后指数(IPI)评分、Hans分型、B症状、骨髓浸润、巨大包块、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、β2微球蛋白(β2-MG)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、Ki67、化学治疗方案等临床资料的关系;采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,应用log-rank检验和Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素生存分析。结果DLBCL组织中ZNF382表达水平显著低于反应性增生淋巴结组织(Z=-5.056,P0.05)。57例DLBCL患者中治疗有效者36例(63.20%),无效者21例(36.80%);治疗有效患者肿瘤组织中ZNF382表达水平显著高于治疗无效患者(Z=-2.895,P70%、非生发中心B细胞样淋巴癌、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、ZNF382低表达是DLBCL患者预后不良的危险因素(P<0.05);多因素分析结果表明,淋巴结内原发、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、ZNF382低表达是DLBCL患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论ZNF382蛋白在DLBCL组织中呈低表达,与DLBCL的发生、发展及预后密切相关,可作为评估DLBCL预后的指标。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤锌指蛋白382 临床病理特征预后