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兔源大肠杆菌、奇异变形杆菌和球虫混合感染及药物敏感性分析

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畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 4204-4212页

作者：王佳宁张自强王帅帅刘玉梅河南科技大学动物科技学院洛阳471000

旨在确定引起河南某规模化兔场病死兔发病的病原及其药物敏感性。本研究对河南某规模化兔场中病死兔进行剖检并采集3份病死兔病料组织,通过问诊,结合发病情况、临床表现、剖检变化、细菌的分离培养、生化试验、16S rRNA PCR鉴定、构建... 详细信息

旨在确定引起河南某规模化兔场病死兔发病的病原及其药物敏感性。本研究对河南某规模化兔场中病死兔进行剖检并采集3份病死兔病料组织,通过问诊,结合发病情况、临床表现、剖检变化、细菌的分离培养、生化试验、16S rRNA PCR鉴定、构建系统进化树和药敏试验,确定引起该兔场发病的病原及其药物敏感性。结果显示,经细菌分离培养得到2株大小不等的革兰阴性短杆菌(分别命名为LY-01和LY-02株),其分别符合大肠杆菌和奇异变形杆菌的生化特性。经PCR鉴定发现,LY-01和LY-02的16S rRNA基因序列片段大小分别为833 bp和1500 bp。经同源比对分析发现LY-01与OR717622.1同源性为99.88%;LY-02与CP042907.1同源性为99.93%。经球虫检查发现,其粪便中存在大量球虫卵,其OPG值分别为0.64×10^(4)、0.62×10^(4)和0.68×10^(4),均达到肠球虫感染标准。药敏试验结果显示,分离得到的大肠杆菌和奇异变形杆菌同时对青霉素和头孢曲松敏感。综上,本研究为家兔养殖过程中大肠杆菌、奇异变形杆菌和球虫混合感染的防治提供了理论依据。

关键词：兔大肠杆菌奇异变形杆菌球虫分离鉴定耐药性

关于洛阳动物疫病强制免疫“先打后补”情况的思考

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河南畜牧兽医 2024年第17期45卷 35-37页

作者：叶逢春洛阳市农业农村局河南洛阳471000

动物疫病强制免疫疫苗“先打后补”是一项强化畜禽养殖经营者的强制免疫主体责任,提高财政资金使用效率的补助政策。为此,以洛阳市“先打后补”实施情况为基础展开分析思考,并就河南省和外省先进经验进行对比,提出了推进工作的几条设想... 详细信息

动物疫病强制免疫疫苗“先打后补”是一项强化畜禽养殖经营者的强制免疫主体责任,提高财政资金使用效率的补助政策。为此,以洛阳市“先打后补”实施情况为基础展开分析思考,并就河南省和外省先进经验进行对比,提出了推进工作的几条设想,以为同行提供参考和借鉴。

关键词：强制免疫先打后补设想

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鸡FGL2基因的克隆分析及原核表达

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2024年第3期52卷 11-18,39页

作者：郭亚格刘佳隆齐志颖何雷贾艳艳陈建陈松彪廖成水丁轲余祖华洛阳市活载体生物材料与动物疫病重点实验室河南洛阳471003 河南科技大学动物科技学院功能微生物与畜禽健康实验室河南洛阳471003

【目的】克隆鸡纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,FGL2)基因,并进行生物信息学分析和原核表达,为鸡FGL2蛋白的功能研究奠定基础。【方法】采用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术扩增鸡FGL2基因,克隆至pMD19-... 详细信息

【目的】克隆鸡纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,FGL2)基因,并进行生物信息学分析和原核表达,为鸡FGL2蛋白的功能研究奠定基础。【方法】采用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术扩增鸡FGL2基因,克隆至pMD19-T载体,测序后对鸡FGL2基因及其编码的蛋白进行生物信息学分析。构建原核表达质粒pET-32a-FGL2,将其转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。【结果】成功克隆了鸡FGL2基因的CDS区,序列全长为1320 bp,编码439个氨基酸。生物信息学分析显示,鸡FGL2氨基酸与火鸡、雉鸡、珍珠鸡、鹌鹑等禽类的同源性高,达96%以上;与哺乳类动物的同源性较低,其中与犬的同源性仅有64.8%。FGL2蛋白由439个氨基酸组成,理论分子质量为50.24 ku,分子式为C_(2221)H_(3451)N_(615)O_(673)S_(22),理论等电点(pI)为8.63,为不稳定的亲水性分泌型蛋白,无跨膜区。成功构建了原核表达质粒pET-32a-FGL2,其在大肠杆菌BL21(DE3)可表达以包涵体形式为主的FGL2融合蛋白,分子质量约为70 ku。【结论】成功克隆出了1320 bp的鸡FGL2基因,明确了其编码蛋白的生物学信息,经诱导表达后获得FGL2重组蛋白。

关键词：鸡 FGL2基因生物信息学分析原核表达

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甘草多糖对鸡肉品质及其相关候选基因表达的影响

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江苏农业科学 2024年第9期52卷 219-225页

作者：杨又兵钱凯凤卢小宁娄然刘永建任旭鸽游祥宾李淦徐志谦雷莹白俊艳河南科技大学动物科技学院动物医学院河南洛阳471023

为探究甘草多糖对鸡肉品质的影响,设计不同水平的甘草多糖添加至日粮中,测定爱拔益加肉鸡的肉质性状和相关基因在肉质中的含量,以此来研究日粮中添加不同水平甘草多糖对其肉质的影响情况;并利用转录组测序技术(RNA-SEQ)分析了日粮中添... 详细信息

为探究甘草多糖对鸡肉品质的影响,设计不同水平的甘草多糖添加至日粮中,测定爱拔益加肉鸡的肉质性状和相关基因在肉质中的含量,以此来研究日粮中添加不同水平甘草多糖对其肉质的影响情况;并利用转录组测序技术(RNA-SEQ)分析了日粮中添加不同水平甘草多糖饲喂的肉鸡胸肌组织样品的转录组,从而筛选出能够调控肉质性状的关键基因,并利用实时荧光定量PCR技术进行验证。结果表明,在日粮中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖的试验组鸡的胸肌的肉质指标肉色、pH1、pH24、蒸煮损失和滴定损失与对照组均无显著差异(P>0.05),但发现随着日粮甘草多糖的增加,鸡的肉质指标有着不同程度的改善。在日粮中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了鸡胸肌中LPL基因、PPARγ基因、FABP3基因、CAST基因的相对表达量,在日粮中添加300、600 mg/kg甘草多糖降低了鸡胸肌中CAPN2基因的相对表达量;在日粮中添加900 mg/kg甘草多糖降低了LPL基因、PPARγ基因、FABP3基因、CAST基因的相对表达量。

关键词：甘草多糖肉质性状 LPL基因 PPARγ基因 CAST基因

RNA结合蛋白ELAVL1的功能及其调控病毒复制的研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第5期55卷 1914-1925页

作者：余祖华高梦茹齐志颖张静雨何雷陈建丁轲河南科技大学动物科技学院功能微生物与畜禽健康实验室/动物疫病与公共卫生重点实验室洛阳471003 洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室洛阳471023

胚胎致死异常视觉蛋白1(embryonic lethal abnormal vision like 1, ELAVL1),又被称为人类抗原R(human antigen R, HuR),是一种典型的RNA结合蛋白(RNA binding protein, RBP),通过与3′非翻译区(3′untranslated element, 3′UTR)的AU富含元件(AU-rich element, ARE)结合,在mRNA转录和翻译过程中发挥重要作用。ELAVL1的作用十分广泛,可调控肿瘤的发生发展、凋亡、迁移与侵袭,是许多癌症治疗的关键靶点,还能参与调节编码器官发育和组织稳态的蛋白质和mRNA的水平,也有许多研究表明,ELAVL1通过转录后调控和翻译后修饰来调节病毒复制。本文主要综述了ELAVL1的生物学特点、功能、调控机制及其在病毒复制过程中的调控作用,旨在为进一步研究ELAVL1与畜禽病毒复制之间互作的机制提供理论参考。

关键词： ELAVL1 RNA结合蛋白病毒调控机制

硒代蛋氨酸对黄曲霉毒素B_(1)致兔脾脏损伤的保护作用

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中国畜牧兽医 2024年第9期51卷 3828-3836页

作者：刘世洋张自强王诗诗牛冰玉孔德婧张智凯刘玉梅河南科技大学动物科技学院洛阳471000

【目的】旨在探究硒代蛋氨酸(selenomethionine,SeMet)对黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))致家兔脾脏损伤的保护作用。【方法】选取50只35日龄家兔,随机分为5组,每组10只,分别为对照组(基础饲粮)、模型组(0.3 mg/kg BW AFB_(1)... 详细信息

【目的】旨在探究硒代蛋氨酸(selenomethionine,SeMet)对黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))致家兔脾脏损伤的保护作用。【方法】选取50只35日龄家兔,随机分为5组,每组10只,分别为对照组(基础饲粮)、模型组(0.3 mg/kg BW AFB_(1)+基础饲粮)、Se-1组(0.2 mg/kg SeMet+0.3 mg/kg BW AFB_(1)+基础饲粮)、Se-2组(0.4 mg/kg SeMet+0.3 mg/kg BW AFB_(1)+基础饲粮)、Se-3组(0.6 mg/kg SeMet+0.3 mg/kg BW AFB_(1)+基础饲粮),试验期共21 d。试验结束后取脾脏,通过HE染色观察脾脏组织形态学变化、免疫组化染色观察PCNA蛋白表达量和TUNEL染色观察细胞凋亡率,并检测脾脏组织中氧化应激水平和炎性因子的含量。【结果】与对照组相比,模型组家兔脾脏可见红髓与白髓排列紊乱,淋巴细胞数量明显减少,PCNA蛋白的表达降低并出现大量凋亡细胞。与模型组相比,饲料中添加SeMet可明显改善家兔AFB_(1)中毒引起的脾脏病理损伤;同时提高了脾脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性(P<0.01),降低了丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β含量(P<0.01),有效缓解了AFB_(1)中毒引起的氧化应激和炎症反应。【结论】饲料中添加SeMet可以通过提高抗氧化酶的活性,降低炎性因子的表达,有效改善AFB_(1)引起的家兔脾脏损伤。其中以0.2 mg/kg SeMet的缓解效果最佳。

关键词：硒代蛋氨酸黄曲霉毒素B_(1) 家兔脾损伤

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mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3678-3687页

作者：余祖华高梦茹何雷魏颖陈建陈松彪丁轲河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室/动物疫病与公共卫生重点实验室洛阳471023 洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室洛阳471023 河南科技学院动物科技学院新乡453003

旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5p、TGF-β1、Smad2以及caspase-9、caspase-3、cyt-c、cyclinD1、Bcl-2等增殖和凋亡相关分子的转录;CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果显示:与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p模拟物转染显著上调MDCC-MSB1细胞中mdv1-miR-M4-5p、cyclinD1、Bcl-2的转录水平,下调TGF-β1、Smad2、cyt-c、caspase-9和caspase-3的表达转录,促进细胞的增殖,减少G1期细胞,增加S和G2细胞,降低细胞凋亡率。与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p抑制物转染后MDCC-MSB1细胞的增殖、凋亡及其相关分子转录的结果与mdv1-miR-M4-5p模拟物转染后的结果相反。综上,Mdv1-miR-M4-5p可促进MDCC-MSB1细胞增殖,抑制其凋亡,这可能是通过抑制TGF-β1/Smad2信号通路来实现的。

关键词： mdv1-miR-M4-5p MDV 增殖凋亡 TGF-β1/Smad2

湖羊miR-222前体序列克隆、组织表达及生物信息学分析

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中国草食动物科学 2024年第4期44卷 8-14页

作者：赵路王赛桥张丙雷贾万航孙赛祎杨佳欣王玉琴河南科技大学动物科技学院洛阳471000

为探究miR-222在湖羊生长发育和繁殖功能中的作用,试验通过聚合酶链式反应克隆了湖羊miR-222的前体序列;通过实时荧光定量技术检测了miR-222在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的表达规律;使用DNAStar对miR-222成熟序列进行了保守性分析;使用ME... 详细信息

为探究miR-222在湖羊生长发育和繁殖功能中的作用,试验通过聚合酶链式反应克隆了湖羊miR-222的前体序列;通过实时荧光定量技术检测了miR-222在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的表达规律;使用DNAStar对miR-222成熟序列进行了保守性分析;使用MEGA 11建立了基因进化树,并分析了miRNA-222在各物种间的亲缘关系;通过miRPathD8、TargetScan和StarBase软件预测了湖羊miR-222潜在的靶基因,并对靶基因进行了GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果表明,试验获得了湖羊miR-222的前体序列;湖羊miR-222在卵巢中的相对表达量显著高于在下丘脑和垂体中的相对表达量(P动物繁殖调控中有重要作用。因此,miR-222在湖羊的卵巢发育中可能具有重要的调控作用。

关键词：湖羊 miRNA 前体序列生物信息学分析靶基因

白藜芦醇对黄曲霉毒素B_(1)致兔肾脏损伤的保护作用

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中国畜牧兽医 2024年第1期51卷 153-159页

作者：刘潍萁张伊阳张自强丁轲刘玉梅河南科技大学动物科技学院洛阳471000

【目的】探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))致兔肾脏损伤的保护作用。【方法】将21只40日龄的家兔随机分为3组,每组7只,分别为对照组、AFB_(1)组和AFB_(1)+Res组,其中对照组饲喂基础饲粮,AFB_(1... 详细信息

【目的】探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))致兔肾脏损伤的保护作用。【方法】将21只40日龄的家兔随机分为3组,每组7只,分别为对照组、AFB_(1)组和AFB_(1)+Res组,其中对照组饲喂基础饲粮,AFB_(1)组饲喂含0.3 mg/kg BW AFB_(1)的基础饲粮、AFB_(1)+Res组饲喂含0.3 mg/kg BW AFB_(1)和30 mg/kg BW Res的基础饲粮,试验期21 d。试验结束后观察家兔肾脏组织病理变化,检测血清中肌酐(creatinine,CRE)、尿素氮(urea nitrogen,BUN)和尿酸(uric acid,UA)含量,检测肾脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量/活性。【结果】与对照组相比,AFB_(1)组家兔肾脏可见肾小囊腔扩张、肾小管上皮细胞排列紊乱、细胞核模糊和脱落,且肾脏中糖原沉积增多;血清中CRE、BUN和UA含量均显著升高(P<0.05);肾脏组织中GSH-Px、SOD活性和T-AOC均显著降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05)。与AFB_(1)组相比,AFB_(1)+Res组家兔肾脏组织结构损伤得到缓解,且糖原沉积减少;血清中CRE、BUN和UA含量均显著降低(P<0.05);肾脏组织中GSH-Px、SOD活性和T-AOC均显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。【结论】饲料中添加Res可以通过提高兔肾脏抗氧化能力、调节氧化应激水平而有效缓解AFB_(1)引起的兔肾脏损伤。

关键词：兔白藜芦醇黄曲霉毒素B_(1) 肾脏损伤