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基于转录组测序探讨柚皮素对脂多糖作用下人牙周膜干细胞的抗炎作用及相关机制

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华西口腔医学杂志 2024年

作者：李俊玉徐晓梅刘兴玉曾婷张丽郑茜西南医科大学附属口腔医院正畸科口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室

目的联合使用转录组测序（RNA-seq）和生信分析，探究柚皮素（Nar）对脂多糖（LPS）刺激下的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）的抗炎作用及机制。方法采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、酶联免疫吸... 详细信息

目的联合使用转录组测序（RNA-seq）和生信分析，探究柚皮素（Nar）对脂多糖（LPS）刺激下的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）的抗炎作用及机制。方法采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测Nar对LPS刺激下hPDLSCs增殖及炎性因子表达情况，筛选出Nar的最佳抗炎浓度。采用RNA-seq，以|log2FC|≥1且P≤0.05为标准筛选出显著差异基因（DEGs）。采用火山图分析、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析、String数据库及Cytoscape的MCODE模块筛选核心基因。ELISA、qRT-PCR和蛋白印迹实验（Western blot）检测对核因子κB (NF-κB)信号通路的影响。结果适宜浓度的Nar可减轻LPS刺激下hPDLSCs的炎症因子表达，促进其增殖，20μmol/L Nar抗炎效果最佳。RNA-seq提示炎症相关信号通路显著富集。Nar通过抑制NF-κB信号通路产生抗炎作用，Nar与NF-κB抑制剂BAY 11-7802效果相似。结论 Nar可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用。Nar可能是辅助治疗牙周炎的一种潜在的药效成分。

关键词：柚皮素人牙周膜干细胞抗炎核因子κB 转录组测序

可溶性环氧化物水解酶抑制剂对暴露于HEMA的人牙髓干细胞细胞迁移及成牙分化的影响

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口腔医学研究 2024年第2期40卷 166-171页

作者：罗加欣黄旌王渝灵冯燕党海霞西南医科大学附属口腔医院口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川泸州646000

目的:探讨在树脂单体甲基丙烯酸羟乙酯(2-hydroxyethyl methacrylate, HEMA)暴露环境下,可溶性环氧化物水解酶抑制剂(TPPU)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)迁移及成牙分化的影响。方法:分离提取hDPSCs,并利用茜... 详细信息

目的:探讨在树脂单体甲基丙烯酸羟乙酯(2-hydroxyethyl methacrylate, HEMA)暴露环境下,可溶性环氧化物水解酶抑制剂(TPPU)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)迁移及成牙分化的影响。方法:分离提取hDPSCs,并利用茜素红染色和流式细胞仪鉴定其干性。以无添加药物的诱导培养基为对照组,以HEMA、HEMA+TPPU为实验组,利用CCK-8检测细胞活性;利用细胞划痕实验检测细胞迁移;利用碱性磷酸酶染色法进行染色,并检测碱性磷酸酶(ALP)活性;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成牙分化相关基因Runt相关转录因子2(Runx2)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)的相对表达;利用茜素红染色检测矿化结节形成情况。结果:HEMA组细胞活性较对照组显著降低(P<0.05),HEMA+TPPU组较HEMA组增加(P<0.05)。HEMA组细胞迁移率较对照组显著降低(P<0.05),HEMA+TPPU组较HEMA组增加(P<0.05)。在成牙诱导分化过程中,用2 mmol/L的HEMA处理细胞后,ALP活性较对照组降低(P<0.05),相关成牙分化基因表达也显著降低(P<0.05)。而HEMA+TPPU组ALP活性较HEMA组显著升高(P<0.05),且基因Runx2、DMP-1、DSPP表达也显著增加(P<0.05)。此外茜素红染色结果也显示HEMA+TPPU组和对照组的相对钙含量均较HEMA组显著升高(P<0.05)。结论:HEMA可在一定程度上抑制hDPSCs的细胞迁移和成牙分化能力,而TPPU可部分逆转HEMA对细胞迁移和成牙分化能力的抑制作用。

关键词：可溶性环氧化物水解酶抑制剂 HEMA 牙髓干细胞细胞迁移成牙分化

抑制连接蛋白43介导半通道活性促进脂多糖诱导的人牙髓细胞成牙本质分化

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上海口腔医学 2024年第1期33卷 22-29页

作者：张安妮丁灿灿黄丽苹李适廷西南医科大学附属口腔医院牙体牙髓病科西南医科大学口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川泸州646000

目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成牙本质分化过程中的作用和机制。方法:建立SD大鼠上颌第一磨牙损伤模型,免疫荧光(im munofluorescence,IF)染色检测Cx43在牙髓组织损伤后修复中的表达模式变化。分别采用0、1、10、100和1 000 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,筛选最适浓度,随后抑制和过表达hDPCs中Cx43的表达。实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹法检测Cx43和成牙本质分化相关因子牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dental matrix protein-1,DMP-1)、成骨相关转录因子(osterix,Osx)表达及细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)活性变化。进一步对hDPCs施以特异性Cx43通道抑制剂,检测Cx43介导的通道活性在hDPCs成牙本质分化中的作用,初步探讨Cx43调节LPS诱导的hDPCs成牙本质分化的作用和机制。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学处理。结果:IF结果显示,在健康牙髓组织中,Cx43主要表达于成牙本质细胞层,牙损伤3~24 h,Cx43表达减弱,随后逐渐上调,直至正常水平;损伤后3天~2周,表达呈下调趋势,并且表达于成牙本质细胞层和固有牙髓中。以10 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,可显著上调DSPP的mRNA表达(P修复,并且其表达整体呈下调趋势;抑制Cx43或阻断HC,可促进LPS诱导的ERK信号活性和hDPCs成牙本质分化。

关键词：人牙髓细胞脂多糖连接蛋白43 缝隙连接通道半通道

人参皂苷Rg1抑制H_(2)O_(2)诱导人牙周膜细胞的凋亡及自噬

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中国组织工程研究 2024年第13期28卷 2061-2067页

作者：杨婉蓉储艺徐瑶李思慧郭玲西南医科大学口腔医学院四川省泸州市646000 西南医科大学附属口腔医院修复科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000

背景:课题组前期研究发现H_(2)O_(2)和人参皂苷Rg1能引起人牙周膜细胞活性氧水平发生变化,但活性氧和细胞凋亡、自噬的关系尚不清楚。目的:探索人参皂苷Rg1对H_(2)O_(2)诱导人牙周膜细胞凋亡和自噬的作用及机制。方法:将人牙周膜细胞分... 详细信息

背景:课题组前期研究发现H_(2)O_(2)和人参皂苷Rg1能引起人牙周膜细胞活性氧水平发生变化,但活性氧和细胞凋亡、自噬的关系尚不清楚。目的:探索人参皂苷Rg1对H_(2)O_(2)诱导人牙周膜细胞凋亡和自噬的作用及机制。方法:将人牙周膜细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+Rg1组,其中人参皂苷Rg1(50μmol/L)预孵育24 h,H_(2)O_(2)处理2 h(500μmol/L)。CCK-8法检测细胞的增殖能力;荧光探针DCFH-DA检测细胞的活性氧水平;qRT-PCR、Western blot法检测血红素加氧酶1、凋亡相关因子Caspase-3、Bax、抗凋亡因子Bcl-2、自噬相关因子Beclin-1、P62、LC3、通路相关因子PI3K、AKT、mTOR mRNA及蛋白表达。结果与结论:①与对照组比较,H_(2)O_(2)组人牙周膜细胞的增殖活力下降;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Rg1组人牙周膜细胞的增殖活力升高;②与对照组比较,H_(2)O_(2)组人牙周膜细胞内活性氧和血红素加氧酶1表达增加;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Rg1组人牙周膜细胞内活性氧和血红素加氧酶1表达降低;③与对照组比较,H_(2)O_(2)组人牙周膜细胞内Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3表达升高,Bcl-2、P62表达降低;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Rg1组人牙周膜细胞内Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3表达降低,Bcl-2、P62表达升高;④与对照组比较,H_(2)O_(2)组人牙周膜细胞内PI3K、AKT、mTOR表达降低;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Rg1组人牙周膜细胞内PI3K、AKT、mTOR表达升高;⑤结果提示:人参皂苷Rg1能够通过清除细胞内过量活性氧,上调PI3K/AKT/mTOR通路相关因子的表达,从而抑制H_(2)O_(2)诱导的人牙周膜细胞凋亡和自噬。

关键词：人参皂苷Rg1 PI3K AKT mTOR 活性氧凋亡自噬

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组织工程化口腔黏膜等效物的血管化特征

中国组织工程研究 2024年

作者：石丽娟韦建张旋何凌霄江小茜聂敏海陈佳娜刘旭倩西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜病科口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室西南医科大学口腔医学研究所

背景：前期研究中三维细胞重建组织工程化口腔黏膜等效物结构类似于正常口腔黏膜，即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构，并已初步实现了等效物的血管化建立，但其血管化特征尚不十分明确。目的：采用血管内皮细胞特异... 详细信息

背景：前期研究中三维细胞重建组织工程化口腔黏膜等效物结构类似于正常口腔黏膜，即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构，并已初步实现了等效物的血管化建立，但其血管化特征尚不十分明确。目的：采用血管内皮细胞特异性标志物表达谱关联激光捕获显微切割系统靶向获取血管化口腔黏膜等效物的血管样结构，评价其成血管能力，揭示其血管化特征。方法：分别从人牙龈上皮组织和固有层组织原代培养人牙龈上皮细胞、人牙龈成纤维细胞、人牙龈间充质干细胞，人牙龈间充质干细胞经单克隆扩增培养后诱导分化形成血管内皮样细胞。将人牙龈上皮细胞、人牙龈成纤维细胞、血管内皮样细胞分层负载于脱细胞血管基质-0.25%类人Ⅰ型胶原支架上，构建血管化口腔黏膜等效物。将血管化口腔黏膜等效物(实验组)与脱细胞血管基质-0.25%类人Ⅰ型胶原支架(对照组)分别植入裸鼠背部皮下，14d后两组切口表面涂布生物胶，实验组生物胶表面接种人牙龈上皮细胞，对照组不接种细胞，继续饲养14 d后取材，利用形态学观察口腔黏膜等效物分层结构；采用较为全面的血管内皮细胞特异性标志物表达谱对口腔黏膜等效物中的新生血管样结构进行免疫组化、免疫荧光标记，进行血管化特征分析；采用激光捕获显微切割系统靶向捕获免疫组化特异性标记的口腔黏膜等效物中新生血管样结构，靶向分析其血管化特征。结果与结论：(1)形态学观察显示口腔黏膜等效物细胞层次清晰，结构类似于正常口腔黏膜，即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构，类血管腔样结构内存在散在红细胞；(2)口腔黏膜等效物组中EdU Apollo示踪种子细胞结果显示：EdU Apollo 488标记的人牙龈上皮细胞呈绿色荧光表达；DAPI标记的人牙龈成纤维细胞呈蓝色荧光表达，体内形成类固有层样结构；EdU Apollo 567标记的血管内皮样细胞呈红色荧光表达，体内形成类血管样结构；(3)血管内皮细胞特异性标志物表达谱免疫荧光标记血管结构显示，与正常口腔黏膜相比，口腔黏膜等效物中CD31、CD51、CD54、CD105、Tie-2、VWF、血管内皮生长因子受体1、血管内皮生长因子受体2表达升高(P 0.05);(4)与特异性标记的口腔黏膜血管结构相比，激光捕获显微切割系统靶向捕获的口腔黏膜等效物血管样结构中CD51、CD54、CD105、Tie-2、VWF、血管内皮生长因子受体1、血管内皮生长因子受体2表达升高(P 0.05);(5)结果表明，通过三维细胞分层重建的口腔黏膜等效物能够实现良好的血管化，其血管化特征符合新生血管生成的免疫学功能及特点；血管化助力三维细胞分层重建的口腔黏膜等效物再生。

关键词：脱细胞血管基质血管内皮样细胞三维细胞重建血管化口腔黏膜等效物激光捕获显微切割系统

意向性牙再植术后根尖及根周骨小梁分形维度化的初步研究

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北京口腔医学 2024年第2期32卷 115-119页

作者：付广丽贺晓萍舒丹黎春晖文才谭丹西南医科大学附属口腔医院口颌面修复重建和再生实验室泸州646000

目的利用分形维度分析评价意向性牙再植治疗畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变根尖及根周区骨小梁微观结构的变化,评价骨愈合情况。方法纳入西南医科大学附属口腔医院就诊的畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变(影像学检查伴有根尖及根周明显暗影... 详细信息

目的利用分形维度分析评价意向性牙再植治疗畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变根尖及根周区骨小梁微观结构的变化,评价骨愈合情况。方法纳入西南医科大学附属口腔医院就诊的畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变(影像学检查伴有根尖及根周明显暗影)并且在我院完成显微根管治疗及意向性牙再植的患者,分别记录牙再植术后即刻(T0)和术后1年(T1)的根尖片进行分形分析研究,在根尖片上裁剪患牙根尖暗影区及根周暗影区这两个区域的影像作为目标区域(ROI),通过ImageJ软件获得骨小梁的二维数据,通过计盒法获得ROI内的分形指数(FD)。使用SPSS17.0统计分析在T0和T1时间点上,患牙根尖区的分形维度指数(FDa)及根周区分形维度指数(FDp)是否有统计学差异。结果共有10名患者纳入了本研究,其中男6例,女4例,年龄组:修复速度较年长者快,而FDp的升高不受患者年龄因素的影响,且差异不具有统计学意义(P>0.05)。在根尖区及根周骨愈合过程中,患牙根尖区及根周区域的FD值升高不受患者性别因素影响。结论意向性牙再植术可能是畸形根面沟致牙周牙髓联合病变的一种可行治疗方法。分形分析可以作为一种无创的、经济的,可定量评价其骨愈合的分析工具。

关键词：分形维度分析畸形舌面沟牙周牙髓联合病变意向性牙再植

黄连素在高糖环境下促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 2974-2980页

作者：苟秋童罗文豪王频兰玉燕刘敏黄海霞西南医科大学附属口腔医院修复科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学研究所四川省泸州市646000

背景:糖尿病患者的口腔种植体骨结合率低下,失败率高,严重影响了生活质量,亟需有效手段改善糖尿病患者种植体骨结合以提高成功率。探究黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及具体机制,将能为解决上述问题提供有效的理... 详细信息

背景:糖尿病患者的口腔种植体骨结合率低下,失败率高,严重影响了生活质量,亟需有效手段改善糖尿病患者种植体骨结合以提高成功率。探究黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及具体机制,将能为解决上述问题提供有效的理论支撑。目的:探讨天然提取物黄连素在高糖微环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:通过全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。CCK-8法检测在高糖生理环境下添加不同浓度黄连素对骨髓间充质干细胞增殖的影响并筛选出最适黄连素浓度。通过碱性磷酸酶活性、茜素红染色以及PCR检测Runx2、Osx表达,判断黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。为进一步探索作用机制,添加AMPK特异性抑制剂Dorsomorphin,使用DCFH-DA活性氧荧光探针检测活性氧水平,Western blot检测p-AMPK的表达。结果与结论:①10μmol/L为黄连素促进骨髓间充质干细胞增殖的最适浓度;②黄连素在高糖微环境下促进骨髓间充质干细胞矿化结节形成并提高碱性磷酸酶活性;③黄连素在高糖微环境下促进Runx2和OSx基因表达;④黄连素可有效抑制高糖环境下骨髓间充质干细胞的活性氧水平;⑤黄连素促进骨髓间充质干细胞成骨及抑制活性氧的作用被AMPK抑制剂逆转;⑥黄连素可激活AMPK,促进p-AMPK表达;⑦上述结果表明,黄连素(10μmol/L)能够通过激活AMPK并降低细胞内活性氧水平,从而促进高糖环境下骨髓间充质干细胞的成骨分化。

关键词：黄连素骨髓间充质干细胞高糖微环境细胞增殖成骨分化 AMPK 活性氧

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熊果酸干预人牙周膜干细胞成骨分化的效应

中国组织工程研究 2024年

作者：郑茜刘萍萍顾煜婕谢蕾西南医科大学附属口腔医院城北门诊部口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室南充市中心医院口腔科西南医科大学附属口腔医院正畸科

背景：熊果酸可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化，但其对人牙周膜干细胞是否具有促成骨作用目前相关报道少见。目的：探讨熊果酸对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化能力的影响。方法：分离、培养人牙周膜干细胞，取第3代细胞，分... 详细信息

背景：熊果酸可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化，但其对人牙周膜干细胞是否具有促成骨作用目前相关报道少见。目的：探讨熊果酸对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化能力的影响。方法：分离、培养人牙周膜干细胞，取第3代细胞，分别采用含不同浓度(0,1,2,4,6,8μmol/L)熊果酸的普通培养基干预，干预1,3,5,7 d后，采用CCK-8法检测细胞增殖，筛选适宜干预浓度。取第3代人牙周膜干细胞，分别用含0,1,2,4μmol/L熊果酸的成骨诱导液干预，干预7 d后，采用qRT-PCR法检测碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素m RNA的表达，干预14 d后，茜素红染色观察矿化结节形成。取第3代人牙周膜干细胞，对照组加入成骨诱导液，熊果酸组、拮抗剂组分别加入含熊果酸(2μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路拮抗剂Noggin的成骨诱导液，熊果酸+拮抗剂组加入含熊果酸(2μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路抑制剂Noggin的成骨诱导液，培养7 d后，采用qRT-PCR和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的m RNA及蛋白表达。结果与结论：(1)1,2,4μmol/L熊果酸可促进人牙周膜干细胞的增殖，6,8μmol/L熊果酸可抑制人牙周膜干细胞的增殖，后续实验选择1,2,4μmol/L熊果酸进行干预；(2)与0μmol/L相比，1,2,4μmol/L熊果酸可促进碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素m RNA的表达以及矿化结节的形成(P <0.05)，其中以2μmol/L熊果酸效果最显著；(3)与对照组比较，熊果酸组骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达均升高(P <0.05)，拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05)；与熊果酸组比较，熊果酸+拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05)；(4)结果表明，熊果酸可通过激活骨形态发生蛋白信号通路促进人牙周膜干细胞的成骨分化。

关键词：人牙周膜干细胞熊果酸成骨骨形态发生蛋白信号通路碱性磷酸酶骨钙素骨形态发生蛋白2 Smad1蛋白

乳酸干预破骨细胞条件培养基促进内皮细胞血管的生成

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中国组织工程研究 2024年

作者：黄宏莉聂闻麦昱颖覃媛廖红兵 1.广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科 2.广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室

背景：聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究，在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的：观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用，以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞... 详细信息

背景：聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究，在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的：观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用，以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖、迁移和小管形成功能的影响。方法：(1)取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7，贴壁后分别加入含0,5,10,20 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基(含核因子κB受体活化因子配体、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基)，培养5 d后分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶与细胞骨架纤维状肌动蛋白染色，培养24 h后采用RT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶5 mRNA表达。(2)取对数生长期的RAW264.7细胞，贴壁后分2组培养：对照组加入破骨诱导培养基，实验组加入含10 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基，培养5 d后更换为无血清DMEM培养基继续培养24 h，离心取上清液，分别与等体积含体积分数10%胎牛血清DMEM培养基混合后作用条件培养基备用。取对数生长期的人脐静脉内皮细胞，分别与对照组、实验组条件培养基共培养，通过CCK-8、Transwell、划痕、成管实验观察细胞的增殖、迁移和成管能力，通过RT-PCR和Western Blot检测血管生成相关基因和蛋白的表达。结果与结论：(1)抗酒石酸酸性磷酸酶与肌动蛋白染色结果显示，5,10 mmol/L乳酸可促进RAW264.7细胞破骨向分化，其中以10 mmol/L乳酸的促进作用更显著；RT-PCR检测结果显示，5,10,20 mmol/L乳酸均可提高酒石酸酸性磷酸酶5 mRNA的表达，其中以10 mmol/L乳酸的提高作用最显著；(2)与对照组条件培养基相比，实验组条件培养基可促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移与成管能力(P <0.05)，提高血管内皮生长因子、血管生成素1的mRNA和蛋白表达(P <0.05);(3)结果表明，乳酸诱导分化的破骨细胞条件培养基可促进内皮细胞的血管生成，机制可能与提高血管内皮生长因子、血管生成素1表达相关。

关键词：破骨细胞条件培养基乳酸人脐静脉内皮细胞血管生成内皮细胞