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核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎实现临床治愈的影响因素分析

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中华临床感染病杂志 2024年第2期17卷 126-132页

作者：胡晓宇季佳李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病重症诊治全国重点实验室杭州310003

目的探究核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogues,NAs]联合聚乙二醇干扰素(pegylated interferon,Peg IFN)α-2a治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)实现临床治愈的影响因素。方法收集2013年1月1日至2023年12月1日在浙江大学医学院附属第一医院感染科门诊就诊并接受NAs与Peg IFNα-2a联合治疗≥48周的141例CHB患者临床资料,并进行回顾性分析。根据疗效分为临床治愈组(n=45)和临床未治愈组(n=96),通过多因素Logistic回归分析临床治愈的影响因素。结果多因素分析显示,基线HBsAg1 lg IU/mL(OR=0.114,95%CI 0.027~0.484,P=0.003)、使用经治策略(OR=0.351,95%CI 0.128~0.960,P=0.041)是预测联合治疗疗效的影响因素。结论经治策略疗效优于初治策略,治疗基线HBsAg水平<1500 IU/mL的病例相较基线水平高者更有希望获得临床治愈,基础疗程建议为48周,并可在48周时根据HBsAg下降程度评估是否延长治疗时间。

关键词：慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物聚乙二醇干扰素α-2a 临床治愈

牛呼肠孤病毒3型σ1蛋白多克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立

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中国动物传染病学报 2024年

作者：汪杰许鹏举王杨林罗宇航黄艳华周雨露覃一峰黄伟坚广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室

为了制备牛呼肠孤病毒（MRV）结构蛋白σ1的多克隆抗体及建立血清学检测手段，本研究将σ1基因序列克隆至pET-32a(+)。获得重组质粒pET-32a-MRV3-σ1，并转化至BL21感受态细胞进行诱导表达与纯化，将纯化好的重组蛋白免疫于Balb/c小鼠... 详细信息

为了制备牛呼肠孤病毒（MRV）结构蛋白σ1的多克隆抗体及建立血清学检测手段，本研究将σ1基因序列克隆至pET-32a(+)。获得重组质粒pET-32a-MRV3-σ1，并转化至BL21感受态细胞进行诱导表达与纯化，将纯化好的重组蛋白免疫于Balb/c小鼠制备多克隆抗体，同时以纯化后的σ1重组蛋白作为诊断抗原，建立检测MRV3的间接ELISA方法。结果显示，σ1蛋白的分子质量约为49.8 kDa，以包涵体形式表达，可应用于Western blot法及IFA检测，成功制备出MRV3-σ1多克隆抗体。建立的ELISA检测方法的批间及批内变异系数均小于10%；对MRV3阳性血清具有特异性，与牛冠状病毒、牛肠道病毒等阳性血清无交叉反应。表明该方法敏感性高、特异性强，为MRV3的临床检测和防控提供了技术支持。

关键词：牛呼肠孤病毒多克隆抗体蛋白间接ELISA

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慢性乙型肝炎新型诊断标志物的研发概况

中华临床感染病杂志 2024年第2期17卷 93-98页

作者：马亦林浙江大学医学院附属第一医院感染病科传染病重症诊治全国重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心杭州310003

乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行广泛、危害性严重的传染病之一。据《中国卫生健康统计年鉴(2022)》数据显示,2021年,我国乙型肝炎发病率为69.25人/10万人。为了使感染科临床工作者获得乙型肝炎研究的前... 详细信息

乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行广泛、危害性严重的传染病之一。据《中国卫生健康统计年鉴(2022)》数据显示,2021年,我国乙型肝炎发病率为69.25人/10万人。为了使感染科临床工作者获得乙型肝炎研究的前沿信息,本文对乙型肝炎的靶点和新型诊断标志物与病毒复制的相关性、临床意义及检测技术改进等作了重点介绍,建议有条件单位逐步扩大检测,这将对临床诊断率及抗病毒药物评估有帮助,并有助于实现世界卫生组织提出“到2030年乙型肝炎诊断率要提升至90%”的目标。

关键词：慢性乙型肝炎新型诊断标志物共价闭合环状DNA HBV核糖核酸 HBV核心相关抗原乙型肝炎核心抗体

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手足口病疫苗的真实世界研究

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第6期44卷 553-559页

作者：廖梦俊邱凌娴陈璐黄悦黄守杰程通吴婷厦门大学公共卫生学院传染病疫苗研发全国重点实验室翔安创新实验室厦门361102

手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种儿童常见传染病,已成为全球范围内特别是亚太地区的重大公共卫生问题之一,严重影响儿童健康,给家庭和社会造成了严重的疾病负担。全球现有3种HFMD疫苗(均为EV71灭活疫苗),于2016年先... 详细信息

手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种儿童常见传染病,已成为全球范围内特别是亚太地区的重大公共卫生问题之一,严重影响儿童健康,给家庭和社会造成了严重的疾病负担。全球现有3种HFMD疫苗(均为EV71灭活疫苗),于2016年先后在中国上市。上市后的真实世界研究显示,EV71相关的HFMD发病率、重症和死亡人数开始下降,表现出良好的保护效果,且数据显示疫苗后时代我国HFMD病原谱发生显著变化。本文旨在对EV71疫苗上市后的真实世界研究进行综述。

关键词：手足口病 EV71疫苗流行病学特征真实世界研究

造血干细胞移植术后合并基因4型慢性戊型肝炎1例

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中华临床感染病杂志 2024年第2期17卷 143-146页

作者：张旋杨美芳孙珂丽李雪洁范骏浙江大学医学院附属第一医院感染病科传染病重症诊治全国重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心杭州310003

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)通常引起自限性疾病,但随着研究不断深入,陆续发现免疫功能低下人群感染HEV后可能迁延为慢性化,甚至进展为肝硬化。本文报道了1例亲缘异基因造血干细胞移植后出现肝功能反复异常10月余,血HEV RNA阳... 详细信息

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)通常引起自限性疾病,但随着研究不断深入,陆续发现免疫功能低下人群感染HEV后可能迁延为慢性化,甚至进展为肝硬化。本文报道了1例亲缘异基因造血干细胞移植后出现肝功能反复异常10月余,血HEV RNA阳性,进一步证实慢性HEV感染的患者。通过降低免疫抑制剂剂量和使用利巴韦林抗病毒治疗后,该患者肝功能恢复。同时,对该患者感染的病毒进行基因型分型结果显示为4型HEV。该病例提醒临床医师对造血干细胞移植人群须警惕慢性HEV感染的可能。

关键词：戊型肝炎造血干细胞移植病毒性肝炎

基于转录组测序探讨柚皮素对脂多糖作用下人牙周膜干细胞的抗炎作用及相关机制

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华西口腔医学杂志 2024年第4期42卷 512-520页

作者：李俊玉徐晓梅刘兴玉曾婷张丽郑茜西南医科大学附属口腔医院正畸科泸州646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室泸州646000

目的联合使用转录组测序(RNA-seq)和生信分析,探究柚皮素(Nar)对脂多糖(LPS)刺激下的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)的抗炎作用及机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检... 详细信息

目的联合使用转录组测序(RNA-seq)和生信分析,探究柚皮素(Nar)对脂多糖(LPS)刺激下的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)的抗炎作用及机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Nar对LPS刺激下hPDLSCs增殖及炎性因子表达情况,筛选出Nar的最佳抗炎浓度。采用RNA-seq,以|log2FC|≥1且P≤0.05为标准筛选出显著差异基因(DEGs)。采用火山图分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析、String数据库及Cytoscape的MCODE模块筛选核心基因。ELISA、qRT-PCR和蛋白印迹实验(Western blot)检测对核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。结果适宜浓度的Nar可减轻LPS刺激下hPDLSCs的炎症因子表达,促进其增殖,20μmol/LNar抗炎效果最佳。RNA-seq提示炎症相关信号通路显著富集。Nar通过抑制NF-κB信号通路产生抗炎作用,Nar与NF-κB抑制剂BAY11-7802效果相似。结论Nar可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用。Nar可能是辅助治疗牙周炎的一种潜在的药效成分。

关键词：柚皮素人牙周膜干细胞抗炎作用核因子κB 转录组测序

乙型肝炎病毒核心颗粒展示新型冠状病毒刺突蛋白B细胞线性表位及其免疫原性分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 234-240页

作者：陈小美袁雯婕王世杰王建荣杭小锋万延民王勇翔复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 海军军医大学长征医院感染科上海200003 复旦大学附属华山医院感染科上海市传染病与生物安全应急响应重点实验室国家传染病医学中心上海200040

目的获得展示新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)刺突蛋白B细胞线性表位的乙型肝炎病毒衣壳样颗粒(capsid-like particles,CLPs)并评价其免疫原性。方法将SARS-CoV-2的4条B细胞线性表位(M1、S1-57、S14P5和S21P2)置换乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)第80位丙氨酸。在大肠埃希菌BL21 Star(DE3)中诱导表达这4种线性表位和HBc的重组融合蛋白(M1-HBc、S1-57-HBc、S14P5-HBc和S21P2-HBc)。SDS-PAGE、Western blot和非变性琼脂糖凝胶电泳(native agarose gel electrophoresis,NAGE)鉴定表达产物。蔗糖密度梯度超速离心纯化CLPs并经Western blot验证其抗原性。用纯化的CLPs免疫BALB/c小鼠,通过ELISA测定血清中的抗体滴度。结果重组融合蛋白M1-HBc和S1-57-HBc自组装成M1-CLP和S1-57-CLP,S1-57-CLP免疫小鼠后靶向S1-57多肽的抗体滴度高达1∶1000000。结论在原核系统中成功表达了展示SARS-CoV-2 M1或S1-57线性表位的乙型肝炎病毒CLPs,S1-57-CLP具有良好的免疫原性,为研制SARS-CoV-2新型诊断试剂和疫苗提供了新思路。

关键词：免疫原性新型冠状病毒 B细胞线性表位衣壳样颗粒抗体

刚地弓形虫致密颗粒蛋白24多克隆抗体的制备与初步应用

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期36卷 279-285页

作者：付胜男杨云王聪罗庆礼余莉安徽医科大学基础医学院微生物学教研室、动物源性传染病安徽省重点实验室、人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽... 详细信息

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽段的碱基序列,并连接至p ET-28a载体中。将获得的GRA24截短蛋白原核表达质粒转化于大肠埃希菌BL21感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测蛋白表达与纯化。使用纯化的GRA24截短蛋白皮下注射免疫BALB/c小鼠获得GRA24截短蛋白多克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体效价,采用Western blotting检测抗体特异性,并将该抗体应用于免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)。结果SDS-PAGE结果表明成功构建重组质粒,考马斯亮蓝染色结果显示获得高纯度重组GRA24截短蛋白。ELISA结果显示,GRA24截短蛋白多克隆抗体效价在1∶208400以上;Western blotting检测发现,该抗体可识别弓形虫不同虫株内源性GRA24蛋白,特异性识别重组GRA24截短蛋白;间接IFA检测发现,弓形虫入侵宿主细胞16 h后分泌的GRA24蛋白定位于宿主细胞核中。结论成功制备广适性、高效价、强特异性的抗弓形虫GRA24多克隆抗体,可应用于Western blotting与IFA,为进一步研究GRA24功能奠定了基础。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白24 多克隆抗体免疫荧光

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呼吸感染性疾病诊治年度进展2023

中华结核和呼吸杂志 2024年第2期47卷 141-146页

作者：张国良瞿介明上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸与危重症医学科、上海市呼吸传染病应急防控与诊治重点实验室、上海交通大学医学院呼吸病研究所上海200025

2023年,各类肺部感染性疾病仍在危害人群生命健康。呼吸感染性疾病的诊治面临诸多挑战,包括肺炎常见病原菌的耐药性持续增加、结核病的发病率上升且防治进程放缓、病毒流行导致真菌感染性疾病增加等。过去一年,在致病机制认识、检测技... 详细信息

2023年,各类肺部感染性疾病仍在危害人群生命健康。呼吸感染性疾病的诊治面临诸多挑战,包括肺炎常见病原菌的耐药性持续增加、结核病的发病率上升且防治进程放缓、病毒流行导致真菌感染性疾病增加等。过去一年,在致病机制认识、检测技术革新、新型抗菌与抗病毒药物的开发、疫苗的基础与临床研究、预防和康复手段等领域有众多重磅研究成果发表。本文详细回顾和总结了呼吸感染性疾病领域在2023年度发表的重要研究成果,为未来的研究和实践提供参考。

关键词：感染性疾病抗病毒药物致病机制重要研究成果康复手段常见病原菌病毒流行技术革新