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基于Nrf2/ROS信号通路探讨岩藻多糖对食管癌细胞增殖的抑制作用

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食品工业科技 2024年第11期45卷 316-322页

作者：马永超程琦吴华陆琼金少举漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻... 详细信息

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻多糖对细胞增殖以及Nrf2/ROS信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对瘤体的瘤重、瘤体积及Nrf2、HO-1、NQO-1水平的影响。结果:1~16µg/mL岩藻多糖极显著抑制ECA109细胞增殖,48 h IC50为3.26µg/mL。与对照组(0.1%DMSO)相比,1、2、4µg/mL岩藻多糖处理后的ECA109细胞出现核凝聚、染色质不规则收缩、凋亡小体等明显的凋亡特征,(极)显著促进ECA109细胞凋亡,极显著下调Bcl-2表达水平,极显著上调Bax、Cleaved-caspase-3表达水平,极显著增加ROS水平,极显著降低Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05,P<0.01);Nrf2过表达能显著下调岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖效果,显著下调ROS水平,显著上调Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05)。体内实验显示,50、100 mg/kg岩藻多糖极显著抑制瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体Nrf2、HO-1、NQO-1水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控Nrf2/ROS信号通路有关。

关键词：岩藻多糖 Nrf2/ROS 信号通路食管癌细胞增殖移植瘤

PIM1基因对急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡及JAK2/STAT3信号通路的影响

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 663-669页

作者：高鑫储李婧颜宗海安徽医学高等专科学校临床医学院安徽合肥230031 安徽医科大学附属巢湖医院血液科安徽合肥238000

目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 mRNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(... 详细信息

目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 mRNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(U937细胞正常培养)、Si-PIM1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、Si-NC组(U937细胞转染不含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、CoA1组(U937细胞中加入浓度为20μmol/L的JAK2激活剂CoA1)、Si-PIM1+CoA1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA低表达的腺病毒载体并加入浓度为20μmol/L的CoA1)。培养24 h。荧光定量PCR和蛋白印迹法检测U937细胞PIM1 mRNA和蛋白、JAK2/STAT3通路、细胞周期、凋亡相关蛋白表达;噻唑蓝法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果:AML患者骨髓单个核细胞中PIM1 mRNA表达水平高于单纯缺铁性贫血患者(P0.05)。结论:敲低PIM1基因表达可抑制U937细胞增殖、促进凋亡,缓解ALM进程,且上述作用可能与抑制JAK2/STAT3通路活化有关。

关键词：丝/苏氨酸激酶家族成员1 急性髓系白血病U937细胞增殖凋亡 Janus酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活因子3通路

雷公藤甲素对肺动脉高压大鼠免疫炎症的影响及其作用机制

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中国免疫学杂志 2024年第2期40卷 343-347,354页

作者：王梅爱黄秋虹陈慧勤黄倩郑丹丹泉州医学高等专科学校基础医学部泉州362000

目的:分析雷公藤甲素对肺动脉高压大鼠免疫炎症的影响及其作用机制,为临床上肺动脉高压患者的治疗提供参考。方法:选取90只雄性大鼠,15只作为正常组,其余作为肺动脉高压组,皮下注射野百合碱(MCT)建立肺动脉高压模型,建模成功后肺动脉高... 详细信息

目的:分析雷公藤甲素对肺动脉高压大鼠免疫炎症的影响及其作用机制,为临床上肺动脉高压患者的治疗提供参考。方法:选取90只雄性大鼠,15只作为正常组,其余作为肺动脉高压组,皮下注射野百合碱(MCT)建立肺动脉高压模型,建模成功后肺动脉高压组分为模型组、阳性对照组、雷公藤甲素A组、雷公藤甲素B组、雷公藤甲素C组5个亚组。阳性对照组使用30 mg/kg泼生坦灌胃,雷公藤甲素A、B、C组分别腹腔注射0.1、0.2、0.4 mg/kg雷公藤甲素,正常组、模型组注射等体积生理盐水。连续干预28 d后,对比各组mPAP、RVSP,右心室肥厚指数(RVHI)、肺小动脉形态、肺小动脉重塑、免疫炎症相关指标及Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路蛋白表达量。结果:①模型组、阳性对照组、雷公藤甲素A、B、C组mPAP、RVSP、RVHI、MT%、MA%、Th17细胞比例、IL-6、IL-17水平、TLR4、NF-κB表达量均高于正常组,Treg细胞比例、IL-10水平低于正常组(P<0.05)。②阳性对照组、雷公藤甲素A、B、C组mPAP、RVSP、RVHI、MT%、MA%、Th17细胞比例、IL-6、IL-17水平、TLR4、NF-κB表达量低于模型组,Treg细胞比例、IL-10水平高于模型组(P<0.05)。③雷公藤甲素A、B、C组mPAP、RVSP、RVHI、MT%、MA%、Th17细胞比例、IL-6、IL-17水平、TLR4、NF-κB表达量均低于阳性对照组,Treg细胞比例、IL-10水平高于阳性对照组(P<0.05)。④随着雷公藤甲素干预剂量增加,mPAP、RVSP、RVHI、MT%、MA%、Th17细胞比例、IL-6、IL-17水平、TLR4、NF-κB表达量逐渐降低,Treg细胞比例、IL-10水平逐渐升高(P<0.05)。结论:雷公藤甲素可修复肺动脉高压累及的心脏损伤,抑制肺小动脉重塑,分析其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路所介导的免疫反应有关,且上述作用呈剂量依赖性,高剂量雷公藤甲素作用更为明显。

关键词：雷公藤甲素肺动脉高压免疫炎症肺小动脉重塑

地塞米松对臭氧化黑碳致肺上皮细胞的氧化损伤和凋亡的保护作用

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中国临床药理学杂志 2024年第8期40卷 1145-1149页

作者：许险艳李琴王丽许昭俊泉州医学高等专科学校基础医学部福建泉州362000

目的研究臭氧化黑碳(OBC)暴露致肺上皮细胞凋亡及其机制,并探索地塞米松的治疗作用。方法将A549细胞分为对照组、地塞米松组和0、6.5、12.5、25.0、50.0μg·mL^(-1)OBC处理组。7组细胞均培养24 h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测... 详细信息

目的研究臭氧化黑碳(OBC)暴露致肺上皮细胞凋亡及其机制,并探索地塞米松的治疗作用。方法将A549细胞分为对照组、地塞米松组和0、6.5、12.5、25.0、50.0μg·mL^(-1)OBC处理组。7组细胞均培养24 h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的存活率,用免疫荧光法检测活性氧的活性,用Annexin V-FITC/PI双色荧光染料标记法检测凋亡细胞,用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测P53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(caspase-3) mRNA的表达水平,用蛋白质印迹法检测P53、Bcl-2、caspase-3蛋白的表达水平。结果 50.0μg·mL^(-1)OBC处理组、对照组和地塞米松组的细胞存活率分别为(12.64±2.45)%、(100.00±0.00)%和(42.39±2.50)%;活性氧分别为(147.00±5.65)、(42.82±2.50)和(94.40±4.30)MFI;上皮细胞凋亡率分别为(40.50±3.52)%、(5.02±1.15)%和(21.58±2.35)%;P53 mRNA的表达分别为3.81±0.22、1.04±0.02和2.03±0.08;P53蛋白的相对表达水平分别为0.54±0.06、0.14±0.02和0.33±0.03。OBC处理组的上述指标与对照组和地塞米松组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 OBC暴露导致肺上皮细胞的氧化损伤,并激活其凋亡相关通路,而地塞米松在体外实验中表现出良好的治疗效果。

关键词：地塞米松臭氧化黑碳肺上皮细胞凋亡

牛蒡子苷元调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第4期31卷 351-358页

作者：任丽洁刘孟媛史冠忠唐亮沧州医学高等专科学校口腔系河北沧州061000

目的:探究牛蒡子苷元(ARC)通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌(OSCC)HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法:使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HS... 详细信息

目的:探究牛蒡子苷元(ARC)通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌(OSCC)HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法:使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HSC-3细胞分为对照组、ARC-L组(10 mg/L ARC)、ARC-M组(20 mg/L ARC)、ARC-H组(40 mg/L ARC)和ARC-H+Jagged1/FC组(40 mg/L ARC+1.2μg/mL Jagged1/FC)。采用EdU法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的迁移、侵袭能力及细胞周期和细胞凋亡率,WB法检测增殖(c-Myc、cyclin D1)、凋亡(BAX、Bcl-2、survivin)、EMT(E-cadherin、vimentin、Snail)及Notch/Hes-1通路(Notch 1、Hes-1、NICD)相关蛋白的表达水平。结果:与0 mg/L相比,10~80 mg/L的ARC均能显著降低HSC-3细胞增殖活力(均P<0.05)。与对照组相比,ARC-L组、ARC-M组和ARC-H组HSC-3细胞EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、S期和G2/M期细胞占比及c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、survivin、vimentin、Snail、Notch 1、Hes-1和NICD蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞占比及BAX、E-cadherin的蛋白表达均显著升高(均P<0.05),且呈浓度梯度依赖性。同时使用Notch激动剂Jagged1/FC,则可部分逆转ARC对HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及相关蛋白表达的作用(均P<0.05)。结论:ARC可能通过抑制Notch/Hes-1信号通路抑制OSCC细胞HSC-3增殖和侵袭并促进细胞凋亡。

关键词：牛蒡子苷元口腔鳞状细胞癌 HSC-3细胞增殖凋亡侵袭 Notch/Hes-1信号通路

灰树花多糖通过LncRNA HULC/miR-186-5p轴调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭

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食品工业科技 2024年第14期45卷 335-343页

作者：于静段子朋徐松涛漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:分析灰树花多糖(Grifola frondose polysaccharide,GFP)对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:将对数期GBC-SD细胞随机分组:对照组、GFP组(0.5、1、2µg/mL GFP)、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率;Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭;Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平;qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平;Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果:0.25~8µg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用;与对照组比较,0.5、1、2µg/mL的GFP(极)显著(P0.05);与shNC组比较,shHULC组HULC相对表达水平极显著(P<0.01)降低,miR-186-5p相对表达水平极显著(P<0.01)增加,细胞存活率、迁移数目、侵袭数目极显著(P<0.01)降低,Cylin D1、MMP-2和MM-9水平极显著下调(P<0.01);与GFP+pcDNA组比较,GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低(P<0.05),迁移数目、侵袭数目极显著增加(P<0.01),Cylin D1、MMP-2和MM-9水平显著上调(P<0.05);与GFP+pcDNA给药组比较,GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加(P<0.01),miR-186-5p水平极显著下调(P<0.01)。结论:GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。

关键词：灰树花多糖 LncRNA HULC miR-186-5p 胆囊癌增殖迁移侵袭

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血管化类器官的构建策略

中国组织工程研究 2024年

作者：刘明昱范文娟海南医学院漯河医学高等专科学校

背景：有效促进类器官内部血管发生是目前类器官培养中的焦点问题，作为一种新近发展的生物培养技术，血管化的类器官在研究活体组织的发育、疾病形成的机制、组织替代疗法以及药物筛选等方面，都有很大的研究和应用价值。目的：对近年... 详细信息

背景：有效促进类器官内部血管发生是目前类器官培养中的焦点问题，作为一种新近发展的生物培养技术，血管化的类器官在研究活体组织的发育、疾病形成的机制、组织替代疗法以及药物筛选等方面，都有很大的研究和应用价值。目的：对近年来类器官血管化的方法或策略进行归纳总结，分析类器官血管化形成机制以及构建策略，以期为更加深入地研究类器官的发生机制和为临床转化提供可靠的思路。方法：检索PubMed数据库及中国知网数据库收录的相关文献。英文检索词为“organoids,Vascularization,Vascular,Vascular development,vessel”，中文检索词为“血管发生，血管生成，类器官，干细胞，血管化，预血管化”，最终纳入77篇文献进行归纳总结。结果与结论：(1)类器官血管化形成机制涉及3个关键因素，即种子细胞、细胞因子与细胞外基质。种子细胞为血管化类器官提供了关键的细胞来源，细胞因子为类器官内部的血管发生起了重要的信号引导作用，细胞外基质为血管细胞提供了外在的生长环境，促进类器官血管化的发生。(2)血管化类器官的构建策略包括细胞自我重组、微血管碎片渗入、宿主体内移植以及微流控芯片等。体外诱导多能干细胞向血管内皮祖细胞分化能顺利与邻近组织整合并具有血管生成的潜力，故可利用多能干细胞的自我重组功能构建血管化类器官。微血管碎片保留了其细胞复杂性、天然结构和表型可塑性，更利于模拟天然微血管从而促进类器官的血管化。宿主体内移植是目前类器官实现完整血液灌流的最佳方法，而微流控芯片则为实现类器官体外血液供应提供了解决方案。(3)类器官的多种构建策略如多类干细胞共分化、信号分子的精准调控、微血管渗入和活体宿主移植等，一定程度上在类器官中引入血管成分，使得类器官在功能和成熟度上更接近相应组织。然而缺乏血流灌注仍然是一个难题，迄今为止，仅宿主体内移植才能在类器官中实现有效的血流灌注，因此类器官在血管化方面仍面临许多挑战。

关键词：类器官血管化血管发生自我重组共培养种子细胞体内移植内皮细胞干细胞综述

不同HDAC水平的外周T细胞淋巴瘤患者预后复发的影响因素分析

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 733-741页

作者：李英新李一丹王佩焦会杰李英张静原现华邢台医学高等专科学校第一附属医院血液科河北邢台054000

目的:基于潜在类别分析不同组蛋白去乙酰化酶(HDAC)水平的外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者预后复发的影响因素分布特征。方法:选取2012年9月至2019年9月在本院就诊的PTCL患者112例,将患者分为复发组和未复发组,比较两组患者的临床资料。通过... 详细信息

目的:基于潜在类别分析不同组蛋白去乙酰化酶(HDAC)水平的外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者预后复发的影响因素分布特征。方法:选取2012年9月至2019年9月在本院就诊的PTCL患者112例,将患者分为复发组和未复发组,比较两组患者的临床资料。通过多因素Logistic回归分析影响患者预后复发的危险因素。采用潜在类别分析法比较复发高风险组与复发低风险组间预后复发影响因素的分布特征差异。结果:复发组患者87例(77.68%),未复发组患者25例(22.32%)。多因素Logistic回归分析结果显示,ECOG评分≥2分、Ann Arbor分期为III-IV期、IPI评分>2分、骨髓受累、血清β2-微球蛋白(β2-MG)水平升高、近期疗效未达到完全缓解(CR)和部分缓解(PR)、HDAC高表达为患者复发的独立危险因素(P5分)和低风险组(HDAC≤5分)。潜在类别分析结果显示,与预后复发低风险组相比,预后复发高风险组中“危险因素分布较多型”占比较高(P<0.05)。结论:不同HDAC水平的PTCL患者的预后复发情况以及预后复发高风险与低风险人群中危险因素分布特征均有差异。

关键词：组蛋白去乙酰化酶外周T细胞淋巴瘤复发危险因素分布特征

茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

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食品工业科技 2024年

作者：陈永芳李艳珂张淑静漯河医学高等专科学校

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰... 详细信息

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2 μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30 μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11 组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11+30 μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率，Western blot检测Beclin-1、LC3 I和LC3 II水平，实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR，qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系，裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果：4-128 μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖，7.5、15、30 μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3II的水平，下调HCG11水平，增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01)；与对照组比较，HCG11 siRNA 组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC50(顺铂)、Beclin-1、LC3 II/ LC3 I比值显著降低，miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I比值显著增加(P<0.01)；在不同浓度的顺铂处理下，与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1+ HCG11 组抑制率显著降低(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+ HCG11 shRNA 组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I水平显著下调(P<0.05)。结论：PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬，并影响肝癌细胞的增殖。

关键词：茯苓多糖 LncRNA HCG11 miR-539-3p 化疗耐药性自噬