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竹节参总皂苷调控AMPK/mTOR/ULK1通路介导的铁自噬对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞铁死亡的抑制作用

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中华内分泌代谢杂志 2024年第1期40卷 53-63页

作者：任晓静张海龙程远马媛驻马店市中心医院内分泌科 463000 驻马店市中心医院临床药学室 463000

目的探究竹节参总皂苷(TSPJ)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞铁死亡的作用及调控机制。方法实验1:将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ低剂量组、TSPJ高剂量组、二甲双胍组(Met),每组各10只。实验2:将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ组、... 详细信息

目的探究竹节参总皂苷(TSPJ)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞铁死亡的作用及调控机制。方法实验1:将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ低剂量组、TSPJ高剂量组、二甲双胍组(Met),每组各10只。实验2:将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ组、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C组、TSPJ+AMPK激动剂AICAR组,每组各10只。除对照组外,其余各组大鼠均采取腹腔注射链脲佐菌素构建DCM模型。各组大鼠给予对应药物干预8周后,检测各组大鼠体重及糖脂代谢水平;超声心动图检测大鼠心功能指标;酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平;苏木精-伊红(HE)染色和电镜观察心肌组织病理变化;试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、丙二醛、活性氧簇(ROS)及Fe2+水平;Western印迹法检测心肌组织铁死亡、铁自噬以及AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/UNC-51样激酶1(mTOR/ULK1)信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,DCM组大鼠左心室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、舒张早期与晚期血流速度峰值比值(E/A)均显著降低,舒张末期左心室内径(LVEDd)增加,血清LDH、cTnI、CK-MB升高,心肌组织SOD、GSH降低,丙二醛、ROS和Fe2+增加,转铁蛋白受体1(TFR1)、核受体共激活因子4(NCOA4)、LC3-II/LC3-I、Beclin-1、磷酸化AMPK及磷酸化ULK1表达水平升高,谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化mTOR表达水平降低。与DCM组相比,各治疗组大鼠上述指标均得到显著改善。与TSPJ组相比,AMPK激动剂AICAR能够逆转TSPJ对DCM大鼠心肌细胞铁死亡及AMPK/mTOR/ULK1通路介导的铁自噬作用。结论 TSPJ能够通过调控AMPK/mTOR/ULK1介导的铁自噬抑制DCM大鼠心肌细胞铁死亡,改善心肌损伤。

关键词：糖尿病心肌病竹节参总皂苷铁死亡铁自噬 AMPK/mTOR/ULK1通路

茶多酚激活Nrf2/HO-1通路减轻阿司匹林诱导的GES-1细胞损伤的机制研究

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中国药学杂志 2024年第1期59卷 45-51页

作者：付凯王永辉贠洁郑栓孔永红驻马店市中心医院药学部河南驻马店463000 驻马店市中心医院肾脏内科河南驻马店463000 西安培华学院医学院基础医学系西安710000

目的探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)对阿司匹林诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及分子机制。方法采用阿司匹林(19.27 mmol·L^(-1))和不同浓度的茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))处理GES-1细胞24 h,将GES-1细胞随机分为对照... 详细信息

目的探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)对阿司匹林诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及分子机制。方法采用阿司匹林(19.27 mmol·L^(-1))和不同浓度的茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))处理GES-1细胞24 h,将GES-1细胞随机分为对照组、阿司匹林组(19.27 mmol·L^(-1))、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚50μmol·L^(-1)组、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚100μmol·L^(-1)组、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚200μmol·L^(-1)组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测GES-1细胞增殖水平,采用流式细胞术和TUNEL实验检测GES-1细胞凋亡水平。采用二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测GES-1细胞活性氧(ROS)水平。采用试剂盒检测GES-1细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测GES-1细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素单加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果与对照组比较,阿司匹林组GES-1细胞凋亡率、凋亡指数、ROS、MDA水平、细胞核Nrf2/细胞质Nrf2比值、Bax、HO-1蛋白表达水平显著增加,细胞存活率、Bcl-2蛋白表达水平、SOD、CAT水平显著降低(P<0.05);与阿司匹林组比较,阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))组GES-1细胞亡率、凋亡指数、ROS、MDA水平、Bax蛋白表达水平显著降低,细胞存活率、细胞核Nrf2/细胞质Nrf2比值、Bcl-2、HO-1蛋白表达水平、SOD、CAT水平显著增加(P<0.05)。结论茶多酚可减轻阿司匹林诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与茶多酚激活Nrf2/HO-1抗氧化通路、抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。

关键词：茶多酚核因子E2相关因子2/血红素单加氧酶1通路阿司匹林 GES-1细胞氧化应激

地榆皂苷Ⅰ调控IGFL2-AS1/miR-138-5p抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移

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中草药 2024年第4期55卷 1248-1254页

作者：许运巧刚小清李金锋驻马店市中心医院妇产科河南驻马店463000 河南省人民医院妇产科河南郑州450000

目的探讨地榆皂苷Ⅰ对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制。方法人卵巢癌A2780细胞分别用7.5、15.0、30.0μmol/L的地榆皂苷Ⅰ处理,同时设置si-NC组、si-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pc DNA-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pcDNA组;MT... 详细信息

目的探讨地榆皂苷Ⅰ对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制。方法人卵巢癌A2780细胞分别用7.5、15.0、30.0μmol/L的地榆皂苷Ⅰ处理,同时设置si-NC组、si-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pc DNA-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pcDNA组;MTT检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell法检测迁移和侵袭细胞数;Western blotting法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达;双荧光素酶报告实验检测IGFL2-AS1和miR-138-5p的靶向关系。结果不同浓度的地榆皂苷Ⅰ处理A2780细胞后,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著减弱(P<0.05),Ecadherin和miR-138-5p表达上调(P<0.05),N-cadherin和IGFL2-AS1表达下调(P<0.05),呈剂量相关性。下调IGFL2-AS1抑制A2780增殖、迁移及侵袭(P<0.05)。IGFL2-AS1靶向调控miR-138-5p,过表达IGFL2-AS1可减弱地榆皂苷Ⅰ对A2780细胞增殖、迁移和侵袭的作用(P<0.05)。结论地榆皂苷Ⅰ通过调控IGFL2-AS1/miR-138-5p抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移。

关键词：地榆皂苷Ⅰ IGFL2-AS1 miR-138-5p 卵巢癌增殖侵袭迁移

重组人Siglec-1蛋白的制备及基于超滤亲和-液质联用技术天然配体的筛选

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药物评价研究 2024年第7期47卷 1556-1562页

作者：曹娟杨忠杰郑奕杨雷李森森黄淮学院医学院河南驻马店463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院河南驻马店463000 漯河市中心医院药学部河南漯河462000

目的构建唾液酸免疫球蛋白凝集素1(Siglec-1)原核表达载体,表达纯化Siglec-1重组蛋白,构建超滤亲和-液质联用技术(UF-LC-MS)筛选Siglec-1蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建Siglec-1重组蛋白原核表达载体,转化到BL21(DE3)感受态细... 详细信息

目的构建唾液酸免疫球蛋白凝集素1(Siglec-1)原核表达载体,表达纯化Siglec-1重组蛋白,构建超滤亲和-液质联用技术(UF-LC-MS)筛选Siglec-1蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建Siglec-1重组蛋白原核表达载体,转化到BL21(DE3)感受态细胞中表达Siglec-1重组蛋白,通过Ni柱亲和色谱柱进行蛋白纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析Siglec-1重组蛋白纯度。建立UF-LC-MS技术研究金银花、甘草、迷迭香、菊苣中6个主要组分绿原酸、迷迭香酸、阿魏酸、甘草酸、甘草次酸、菊苣酸对Siglec-1蛋白的亲和力,通过比较样品组和蛋白变性组超滤液中待测物的峰面积,计算各待测物特异结合率。结果经双酶切及测序鉴定证明,重组表达质粒pET-22b-Siglec-1-His构建正确;纯化的人Siglec-1重组蛋白质量分数达90%以上;建立了UF-LC-MS筛选体系,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合。结论成功表达了高纯度、高产量的人Siglec-1重组蛋白,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合。

关键词：唾液酸免疫球蛋白凝集素1 重组蛋白超滤亲和-液质联用甘草次酸天然配体

非奈利酮联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病的临床研究

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现代药物与临床 2024年第8期39卷 2062-2066页

作者：刘成功马海丽李巍陈书培驻马店市中心医院老年医学科河南驻马店463000

目的探讨非奈利酮联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾脏病的临床疗效。方法选取2021年6月—2023年8月驻马店市中心医院收治的150例糖尿病肾病患者,依据用药差异情况分为对照组和治疗组,每组各75例。对照组患者口服厄贝沙坦片,150 mg/次,1次/d。... 详细信息

目的探讨非奈利酮联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾脏病的临床疗效。方法选取2021年6月—2023年8月驻马店市中心医院收治的150例糖尿病肾病患者,依据用药差异情况分为对照组和治疗组,每组各75例。对照组患者口服厄贝沙坦片,150 mg/次,1次/d。在对照组的基础上,治疗组患者口服非奈利酮片,20 mg/次,1次/d。两组均用药30 d。观察两组患者的临床疗效,比较治疗前后两组患者临床症状改善情况,血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血清糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、分泌型卷曲蛋白-4(SFRP-4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床总有效率分别为86.67%、96.00%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组的肢体水肿、蛋白尿、乏力、面色苍白等症状好转时间均短于对照组(P<0.05)。治疗后,两组肾功能指标SCr、BUN和血清TGF-β1、SFRP-4、GSK-3β、ICAM-1水平均明显降低(P<0.05),且治疗后治疗组SCr、BUN、TGF-β1、SFRP-4、GSK-3β、ICAM-1水平均明显低于对照组(P<0.05)。结论非奈利酮联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾脏病对糖尿病肾病患者临床症状有效改善,并能缓解肾功能状态,促进机体炎性反应减弱。

关键词：厄贝沙坦片非奈利酮片糖尿病肾脏病肌酐尿素氮糖原合酶激酶-3β 分泌型卷曲蛋白-4 转化生长因子-β1 细胞间黏附分子-1

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化脓性脑膜炎患儿并发脑积水的危险因素分析

新乡医学院学报 2024年第1期41卷 49-52页

作者：雷玉娇驻马店市中心医院小儿内三科河南驻马店463000

目的探讨化脓性脑膜炎(PM)患儿并发脑积水的危险因素。方法选择2018年1月至2022年6月驻马店市中心医院收治的300例PM患儿为研究对象,根据是否并发脑积水将患儿分为并发脑积水组(n=30)和非脑积水组(n=270)。采用单因素和多因素logistic... 详细信息

目的探讨化脓性脑膜炎(PM)患儿并发脑积水的危险因素。方法选择2018年1月至2022年6月驻马店市中心医院收治的300例PM患儿为研究对象,根据是否并发脑积水将患儿分为并发脑积水组(n=30)和非脑积水组(n=270)。采用单因素和多因素logistic回归分析PM患儿并发脑积水的危险因素。结果单因素分析结果显示,PM患儿的居住环境、确诊前是否使用抗生素、初始治疗使用抗生素数量、是否使用地塞米松、入院前惊厥发作、意识障碍、细菌培养结果、首次脑脊液(CSF)中白细胞计数、首次CSF中葡萄糖水平、首次CSF中蛋白质水平、血清CRP水平与PM患儿并发脑积水有关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,居住在农村、确诊前使用抗生素、使用地塞米松、意识障碍、首次CSF中蛋白质水平高、血清CRP水平高是PM患儿并发脑积水的独立危险因素(P<0.05);初始治疗采用2种抗生素是PM患儿并发脑积水的保护因素(P<0.05)。结论居住在农村、确诊前使用抗生素、使用地塞米松、意识障碍和首次CSF中蛋白质水平高、血清CRP水平高的PM患儿并发脑积水的风险较高,初始治疗采用2种抗生素可降低PM患儿并发脑积水的风险。

关键词：化脓性脑膜炎儿童脑积水危险因素预防措施

脓毒性休克机械通气患者并发呼吸机相关性肺炎的影响因素分析及预测模型构建

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中国医科大学学报 2024年第5期53卷 473-477页

作者：刘永萍单艳华李云驻马店市中心医院重症监护室河南驻马店463000

收集2020年5月至2022年1月我院165例脓毒性休克机械通气患者的临床资料,依据是否发生呼吸机相关性肺炎(VAP)分为发生VAP组(n=62)和未发生VAP组(n=103),采用单因素和多因素分析发生VAP的影响因素,并构建预测方程。采用受试者操作特征(ROC... 详细信息

收集2020年5月至2022年1月我院165例脓毒性休克机械通气患者的临床资料,依据是否发生呼吸机相关性肺炎(VAP)分为发生VAP组(n=62)和未发生VAP组(n=103),采用单因素和多因素分析发生VAP的影响因素,并构建预测方程。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析相关影响因素的预测价值。结果显示,VAP发生率为37.58%(62/165)。年龄、机械通气时间、入住ICU时间、应用抗生素种类、APACHEⅡ评分、低蛋白血症、糖尿病均为脓毒性休克机械通气患者并发VAP的影响因素(均P<0.05)。成功构建VAP发生的预测方程:Logit(P)=-4.716+1.651x 1+2.106x 2+2.075x 3+1.263x 4+1.100x 5+0.696x 6+0.936x 7。ROC曲线分析结果显示,预测因子(P)的曲线下面积(AUC)为0.911,截断值为0.221,灵敏度、特异度及准确度分别为91.94%、72.82%、82.38%。回代检验结果显示,预测脓毒性休克机械通气患者发生VAP的灵敏度、特异度及准确度分别为90.56%、71.35%、80.96%。因此认为年龄、机械通气时间、入住ICU时间、应用抗生素种类、APACHEⅡ评分、低蛋白血症和糖尿病是脓毒性休克机械通气患者发生VAP的影响因素;这些因素构建的预测模型对脓毒性休克机械通气患者发生VAP具有较好的预测效能。

关键词：脓毒性休克机械通气呼吸机相关性肺炎影响因素预测

基于NLRP3炎症小体介导的铁死亡探究七氟烷诱导的大鼠术后认知功能障碍的作用机制

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中国药学杂志 2024年第19期 1825-1833页

作者：李磊王鹏程张国庆王震驻马店市中心医院麻醉科

目的探究NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）炎症小体介导的铁死亡机制在七氟烷（Sev）诱导大鼠术后认知功能障碍（POCD）中的作用。方法采取体积分数4%Sev吸入麻醉及腹腔探查术构建POCD大鼠模型。首先，将18～20月... 详细信息

目的探究NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）炎症小体介导的铁死亡机制在七氟烷（Sev）诱导大鼠术后认知功能障碍（POCD）中的作用。方法采取体积分数4%Sev吸入麻醉及腹腔探查术构建POCD大鼠模型。首先，将18～20月龄SD大鼠随机分为对照组（Control）和Sev麻醉组，每组各10只。其次，将SD大鼠随机分为Control组、NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体抑制剂组（MCC950）、Sev组、Sev+MCC950组，每组各10只。MCC950组和Sev+MCC950组大鼠麻醉前1 h腹腔注射3 mg·kg-1MCC950;Control组和Sev组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能，HE染色观察海马组织病理学变化，TUNEL检测海马神经元细胞凋亡情况，普鲁士蓝染色检测海马组织铁离子沉积情况，Western blot检测海马组织NLRP3炎症小体相关蛋白及细胞铁死亡相关蛋白表达，ELISA检测海马组织氧化应激水平，比色法检测Fe2+含量，二氢乙锭（DHE）染色法检测活性氧（ROS）水平。结果与Control组相比，MCC950组大鼠学习记忆功能、海马组织结构形态、海马组织氧化应激、ROS及Fe2+水平、NLRP3炎症小体相关蛋白及细胞铁死亡相关蛋白表达均无明显差异（P>0.05）,Sev和Sev+MCC950组大鼠出现明显的学习记忆功能障碍和海马组织病理损伤，海马组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）活性显著降低，丙二醛（MDA）、ROS、Fe2+水平显著升高，NLRP3炎症小体相关蛋白和ACSL4蛋白表达显著升高，SLC7A11、GPX4蛋白表达显著降低（P<0.05）。与Sev组相比，Sev+MCC950组大鼠学习记忆功能，海马组织病理损伤程度明显减轻，海马组织SOD、GSH活性显著增强，MDA、ROS、Fe2+水平显著降低，NLRP3炎症小体相关蛋白和ACSL4蛋白表达显著降低，SLC7A11、GPX4蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论 Sev诱导大鼠POCD,其机制可能与激活NLRP3炎症小体诱导的海马神经元细胞铁死亡有关。

关键词：术后认知功能障碍七氟烷 NOD样受体蛋白3炎症小体铁死亡

外泌体circ-ZNF451对非小细胞肺癌铁死亡进程及生存情况的影响研究

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实用中西医结合临床 2024年第6期24卷 85-88页

作者：杨喜永张爱荣刘雅文河南省驻马店市中心医院驻马店463000

目的观察外泌体circ-ZNF451基因表达水平对非小细胞肺癌(NSCLC)铁死亡进程及生存情况的影响。方法选择2020年6月至2022年2月接受放疗的90例NSCLC患者为研究对象,依据外泌体circ-ZNF451基因表达水平不同将入组患者分为高表达组(30例)与... 详细信息

目的观察外泌体circ-ZNF451基因表达水平对非小细胞肺癌(NSCLC)铁死亡进程及生存情况的影响。方法选择2020年6月至2022年2月接受放疗的90例NSCLC患者为研究对象,依据外泌体circ-ZNF451基因表达水平不同将入组患者分为高表达组(30例)与低表达组(60例)。比较两组治疗前后的铁死亡调控因子、近期疗效及远期预后,通过Spearman相关性系数检验ZNF451 m RNA表达水平与铁死亡进程及生存情况的关联。结果经实施直线加速器适形调强放疗后,低表达组P53、活性氧(ROS)均低于高表达组,酯酰辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)高于高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);低表达组客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、功能状态评分(KPS)、生活质量评分(QOL)评分均高于高表达组,体力状态评分(ZPS)低于高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性系数检验,circ-ZNF451 m RNA相对表达量与NSCLC患者的ACSL4、KPS、QOL评分负相关,与P53、ROS、ZPS评分正相关。结论circ-ZNF451 m RNA与NSCLC患者的铁死亡进程有密切关联,抑制ZNF451 m RNA表达可促进肿瘤细胞的铁死亡进程,对增强放疗敏感性并改善患者预后均有积极意义。

关键词：非小细胞肺癌外泌体circ-ZNF451 铁死亡进程