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南方医科大学学报 2024年第6期44卷 1159-1165页

作者：杨泽张秀森张旭东柳颖张嘉诚原翔河南科技大学临床医学院//河南科技大学第一附属医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室河南洛阳471003

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染食管癌细胞后对YTHDF2及凋亡相关因子(Fas)的影响,阐明其促进免疫逃逸可能的调控机制。方法运用免疫组织化学法及Western blot法检测Pg感染食管癌与YTHDF2及Fas表达变化;运用免疫共沉淀验证YTHDF2和Fa... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染食管癌细胞后对YTHDF2及凋亡相关因子(Fas)的影响,阐明其促进免疫逃逸可能的调控机制。方法运用免疫组织化学法及Western blot法检测Pg感染食管癌与YTHDF2及Fas表达变化;运用免疫共沉淀验证YTHDF2和Fas蛋白间的相互作用;将体外培养的Pg感染后的KYSE150细胞通过慢病毒转染分为对照组(转染si-NC)和实验组(转染si-YTHDF2),Western blotting检测两组细胞中YTHDF2、组织蛋白酶B(CTSB)及Fas、FasL蛋白的表达水平;对Pg感染的KYSE150细胞用组织蛋白酶抑制剂(E64)进行处理,Western blotting分别检测抑制剂处理前后YTHDF2、CTSB、Fas及FasL蛋白的表达变化情况;Pg感染前后及E64处理的KYSE150细胞与人外周血单个核细胞(PBMC)共培养,运用流式细胞术检测T细胞相关效应分子的表达情况。结果免疫组化法及Western blotting结果显示,Pg感染后的组织或细胞中YTHDF2的表达增强,而Fas表达减弱(P<0.001);免疫共沉淀结果显示,YTHDF2和Fas之间可直接相互作用;Western blotting结果显示,si-YTHDF2组细胞中CTSB表达量减低,而Fas及FasL的表达量高于si-NC组(P<0.001);用E64处理细胞后,CTSB表达减弱,YTHDF2表达无影响,而Fas及FasL的表达增强;流式细胞术结果显示,与PBMC共培养的细胞中,GranzymeB及Ki67表达由强到弱分别为Pg阴性、Pg阳性+E64、Pg阳性,而PD-1表达情况相反(P<0.001)。结论 Pg感染依赖YTHDF2调节Fas的表达,协助食管癌免疫逃逸,从而促进食管癌发生发展,表明YTHDF2可能是一个新的调控食管癌免疫逃逸的关键分子。

关键词：食管鳞状细胞癌牙龈卟啉单胞菌 m6A甲基化阅读蛋白YTHDF2 凋亡相关因子肿瘤免疫

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河南省2020年输入性恶性疟原虫Pfhrp2基因多态性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：李素华纪鹏慧王丹王昊周瑞敏河南省疾病预防控制中心河南省传染病病原学重点实验室河南省寄生虫病原与媒介医学重点实验室

收集河南省疟疾诊断参比实验室2020年确诊的恶性疟原虫病例信息及抗凝血样本，对病例样本进行DNA提取和Pfhrp2基因Exon2区扩增，并对Exon2扩增阳性的样本进行测序比对。收集到的37份恶性疟病例Pfhrp2基因Exon2区片段巢氏PCR扩增阳性35... 详细信息

收集河南省疟疾诊断参比实验室2020年确诊的恶性疟原虫病例信息及抗凝血样本，对病例样本进行DNA提取和Pfhrp2基因Exon2区扩增，并对Exon2扩增阳性的样本进行测序比对。收集到的37份恶性疟病例Pfhrp2基因Exon2区片段巢氏PCR扩增阳性35份，扩增阳性率94.59%(35/37),35份扩增阳性的样本测序成功28份，测序长度为717-914 bp，平均822 bp。28份测序成功的样本，其Pfhrp2基因Exon2区片段氨基酸链共显示12种重复特征，其中重复序列AHHEAA,AHHAHHAAY,AHHAAD占比最高，分别为96.43%(27/28),92.86%(26/28),82.14%(23/28)。

关键词：输入性恶性疟原虫 Pfhrp2基因多态性河南省

RgpB通过抑制自噬小体与溶酶体融合避免Cx43降解参与食管癌化疗耐药

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南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1670-1676页

作者：杜越张秀森周克旭金星原翔高社干河南省微生态与食管癌防治重点实验室//河南省肿瘤表观遗传重点实验室河南洛阳471003 河南科技大学第一附属医院//河南科技大学临床医学院河南洛阳471003

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)的毒力因子RgpB在食管鳞癌化疗耐药中的作用机制。方法采用免疫沉淀-质谱联用技术筛选与Pg的毒力因子RgpB互作的自噬调节因子;运用免疫共沉淀实验探索RgpB和自噬调节因子TBC1D5之间的相互作用;采用蛋白免疫... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)的毒力因子RgpB在食管鳞癌化疗耐药中的作用机制。方法采用免疫沉淀-质谱联用技术筛选与Pg的毒力因子RgpB互作的自噬调节因子;运用免疫共沉淀实验探索RgpB和自噬调节因子TBC1D5之间的相互作用;采用蛋白免疫印迹法测定Pg感染对食管癌细胞膜受体分子Cx43表达的影响;使用细胞免疫荧光检测Lamp1、Cx43与TBC1D5的关系;利用自噬双荧光观察Pg感染对自噬小体与溶酶体融合的影响;使用平板克隆及CCK-8法检测Pg感染及Cx43抑制剂在使用化疗药后对食管癌细胞系增殖作用的影响。结果免疫沉淀-质谱联用技术筛选出与RgpB互作的自噬调节因子TBC1D5;免疫共沉淀结果显示,Pg分泌的毒力因子RgpB可与自噬调节因子TBC1D5直接结合并相互作用;蛋白免疫印迹法结果显示,感染Pg后食管癌细胞膜Cx43表达量高于未感染组(P<0.05);细胞免疫荧光结果显示,在感染Pg后,Cx43在细胞膜表面的表达量增加(P<0.05);stubRFP-sensGFP-LC3自噬双荧光结果显示,在Pg感染时,自噬体与溶酶体融合受到阻断;平板克隆及CCK-8法结果显示,使用化疗药后,Cx43抑制剂能够逆转Pg感染对食管癌细胞系的促进作用。结论Pg入侵食管癌,其毒力因子RgpB阻碍自噬小体与溶酶体融合,从而使膜受体分子Cx43免受溶酶体降解,导致食管癌化疗耐药。

关键词：食管鳞状细胞癌牙龈卟啉单胞菌 RgpB Cx43 化疗耐药

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外源性髓鞘抗原的清除在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 67-73页

作者：郑配国曹雪珍魏旭锋郑州大学第一附属医院检验科河南省检验医学重点实验室郑州450052

目的探讨外源性髓鞘抗原的清除对其诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的作用。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG_(35-55))或FITC标记的MOG_(35-55)免疫C57BL/6J小鼠诱导EAE,通过分析过继转移的CFSE标记的mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞在脾脏内的增殖情况评估免疫系统内外源性髓鞘抗原的含量;免疫组织化学法和流式细胞术分析接种部位外源性髓鞘抗原的释放;组织切片HE染色探讨外源性髓鞘抗原快速清除的原因;通过对比分析背部和足垫免疫诱导的EAE,以及可溶性MOG_(35-55)的治疗效果验证外源性髓鞘抗原的清除在EAE中的作用。结果免疫第2天小鼠脾脏内mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞增殖占比显著高于免疫第7天[(52.6±6.8)%vs(18.5±4.9)%,P<0.01];在发病小鼠(第13天)脾脏内mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞增殖与在初始小鼠脾脏内的增殖差异无统计学意义[(4.4±1.5)%vs(2.5±1.4)%,P=0.11];免疫组织化学法和流式细胞术结果显示,MOG_(35-55)在接种部位释放并被CD11b细胞吞噬,EAE发病时接种部位已无MOG_(35-55)释放;组织病理切片显示,EAE发病时乳化剂周围形成的肉芽肿阻止乳化剂释放抗原,使抗原与外周免疫系统完全隔离;经足垫免疫诱导的小鼠不易发病与MOG_(35-55)持续刺激免疫系统有关,与CD4^(+)调节性T细胞没有直接关系;持续腹腔注射可溶性MOG_(35-55)可预防和治疗EAE。结论EAE小鼠免疫系统内外源性髓鞘抗原已完全清除,EAE的发生依赖外源性髓鞘抗原的完全清除。

关键词：自身抗原实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4^(+)T细胞

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DNA纳米花生物医学研究进展概述

化学学报 2024年第6期82卷 677-689页

作者：王丹钰郭子涵郭梦珂易桦黄梦雨段捷张开翔郑州大学药学院郑州450001 河南省肿瘤重大疾病靶向治疗与诊断重点实验室郑州450001

DNA纳米结构因其可编程性、自主设计性和良好的生物相容性,在生物医学领域显示出巨大的应用潜力. DNA纳米花(DNA nanoflower,DNF)作为一种独特的DNA-有机无机杂化纳米结构,在近几年内引起了相当多的关注.其矿化的无机内核不仅有助于维持... 详细信息

DNA纳米结构因其可编程性、自主设计性和良好的生物相容性,在生物医学领域显示出巨大的应用潜力. DNA纳米花(DNA nanoflower,DNF)作为一种独特的DNA-有机无机杂化纳米结构,在近几年内引起了相当多的关注.其矿化的无机内核不仅有助于维持DNA的稳定性,还提供了金属离子的辅助矿化功能.其中DNF凭借其高密度的核酸序列和良好的载荷能力,可高效装载药物、荧光探针、酶及核酸适配体等功能性分子.此外,还可通过控制反应条件调节纳米颗粒的尺寸,实现在不同生理环境下的高渗透、长滞留效应,进而应用于生物医学的多个领域.综述了DNF的合成及其生物医学应用.首先简要介绍了DNF的合成方法以及合成条件的控制;其次总结了工程化的DNF在生物检测、生物成像和药物治疗方面的应用;最后,讨论了DNF在生物医学应用中的挑战并对其在实际临床的应用进行展望.未来基于DNF更广泛的生物医学发展有待研究人员们的探索.

关键词： DNA纳米花生物检测生物成像药物治疗

一种体外膜肺氧合患者专用防护裙的设计与运用

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中华危重病急救医学 2024年第8期36卷 874-876页

作者：刘亚楠任莹陈参参臧舒婷河南省人民医院急诊医学科郑州451000 河南省护理医学重点实验室郑州451000

体外膜肺氧合(ECMO)主要为心和(或)肺功能衰竭的急危重症患者提供持续的体外呼吸与循环,以维持患者生命,目前其作为一项高级器官支持技术在危重症领域中的应用越来越普遍。若选择双侧腹股沟处动、静脉进行穿刺实施ECMO时,患者无法使用... 详细信息

体外膜肺氧合(ECMO)主要为心和(或)肺功能衰竭的急危重症患者提供持续的体外呼吸与循环,以维持患者生命,目前其作为一项高级器官支持技术在危重症领域中的应用越来越普遍。若选择双侧腹股沟处动、静脉进行穿刺实施ECMO时,患者无法使用传统的病服裤,导致患者隐私部位暴露、容易着凉,排便时容易污染床单被服,使患者不舒适的同时也增加了感染的概率;更换床单被服不仅增加了护士的工作量,而且容易造成管道移位或滑脱;使用病服裤也无法随时观察患者管道渗血、移位或脱出的情况。为此,河南省人民医院急诊重症监护室护理人员设计了一种ECMO患者专用防护裙,并获得了国家实用新型专利(专利号:ZL 2020208120022.9)。该ECMO患者专用防护裙主要由裙体、透明观察窗、臀部支撑气囊及便液收集袋等组成。透明观察窗方便进行穿刺部位及管路的观察;臀部支撑气囊充气后可以使患者肛周皮肤与二便隔开,避免失禁性皮炎发生;便液收集袋可以收集二便,保持床单的清洁。该防护裙结构简单,穿脱方便,在保护患者隐私、保证患者舒适的情况下,还能随时观察管道情况,适用于下肢置有管路或二便失禁的患者,有一定的临床应用和推广价值。

关键词：体外膜肺氧合防护裙失禁性皮炎管道移位

组蛋白去乙酰化酶在孕鼠孕期免疫激活所致子代青春期感觉门控损伤中的作用

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新乡医学院学报 2024年第2期41卷 101-108页

作者：王冠玉刘森淇杨勇锋李文强吕路线苏玺新乡医学院第二附属医院重点实验室河南新乡453002 河南省生物精神病学重点实验室河南新乡453002

目的探讨各亚型组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在母孕期免疫激活子代大鼠额叶、海马及肝脏组织中的表达及其与前脉冲抑制效率(PPI%)的相关性。方法将受孕成功的10只Sprague-Dawley雌鼠随机分为模型组(n=5)和对照组(n=5)。于妊娠期第9天,模型组... 详细信息

目的探讨各亚型组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在母孕期免疫激活子代大鼠额叶、海马及肝脏组织中的表达及其与前脉冲抑制效率(PPI%)的相关性。方法将受孕成功的10只Sprague-Dawley雌鼠随机分为模型组(n=5)和对照组(n=5)。于妊娠期第9天,模型组孕鼠经尾静脉注射10 mg·kg^(-1)聚肌胞苷酸(Poly I:C),对照组孕鼠给予等体积无菌生理盐水。3 h后,尾静脉取血,采用酶联免疫吸附法检测2组孕鼠血浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平来评估孕鼠免疫激活状态。将2组孕鼠饲养至自然生产,子鼠在出生后第21天断乳,选取雄性后代继续饲养。在子代大鼠青春期(即出生后第40天)时进行前脉冲抑制测试,评估其空间识别记忆和感觉门控功能。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测2组子代大鼠海马、额叶及肝脏组织中HDAC家族的基因表达水平。结果模型组孕鼠血浆中IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平显著高于对照组(P0.05)。在额叶组织中,模型组子代大鼠HDAC3、HDAC4、HDAC8、HDAC9、HDAC10、Sirt mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P0.05)。在海马组织中,模型组子代大鼠HDAC1、HDAC8、HDAC10 mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P0.05)。在肝脏组织中,模型组子代大鼠HDAC6、HDAC10 mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P0.05)。2组子代大鼠海马组织中HDAC2 mRNA表达水平与75 dB时的PPI%呈负相关(r=-0.965、P<0.05);额叶组织中HDAC10、Sirt mRNA表达水平与75 dB时的PPI%呈正相关(r=0.946、0.925,P<0.05)。结论孕鼠孕期感染poly I:C对子代大鼠HDAC家族的多种蛋白质表达具有显著影响,且与子代大鼠早期感觉门控受损相关,这可为精神分裂症的发病机制及药物治疗研究提供新的线索。

关键词：孕期感染精神分裂症感觉门控损伤组蛋白去乙酰化酶

PSME2和STAT3双重抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第4期40卷 534-543页

作者：孙魁陈攀刘永萱康永安吴晓爽程月月程浩东刘其伟高社干齐义军河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室河南洛阳471003 许昌学院医学院细胞行为学重点实验室河南许昌461000

蛋白酶体激活物复合物亚基2(proteasome activator complex subunit 2,PSME2)表达异常与多种肿瘤发生发展密切相关,但在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中功能及临床意义尚不明确。本研究分析了TCGA-ESCC和GSE53625数据库中ESCC转录物组数据,发现PSME2高表达组ESCC患者预后不良,且ESCC组织中PSME2蛋白表达水平高于癌旁组织。沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞中PSME2表达,ESCC细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆能力均显著下降,同时伴随着LC3-II/LC3-I蛋白表达明显升高、p62蛋白表达降低和自噬激活。GSEA富集分析表明,PSME2低表达组IL-6/STAT3信号通路激活,沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞诱导了IL-6分泌和p-STAT3表达增加。上述PSME2沉默诱导的分子变化,能够被LMT28或WP1066逆转。PSME2沉默联合WP1066,使KYSE30与NE6-T细胞培养上清中LDH含量明显升高,Calcein/PI染色表明,死亡细胞率分别为36.69%和32.55%,显著高于PSME2沉默(6.78%和6.74%)或WP1066单独处理组(18.34%和9.70%)。本研究表明,PSME2促进ESCC恶性进展,PSME2沉默通过IL-6/STAT3信号通路代偿性激活ESCC自噬,联合PSME2沉默和STAT3抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡,表明PSME2是ESCC潜在分子治疗靶点,联合抑制PSME2和STAT3是ESCC治疗的新选择。

关键词：蛋白酶体激活物复合物亚基2 食管鳞癌 STAT3 自噬合成致死

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第二前磨牙先天缺失的病因及临床管理策略

中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 738-744页

作者：袁国华王琰武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079

先天性牙缺失是一类由于牙胚发育障碍导致牙齿数目减少的颌面部发育异常疾病。除第三磨牙外缺牙数目少于6颗称为个别牙缺失,其中第二前磨牙缺失最为常见。第二前磨牙缺失时,第二乳磨牙往往更易出现滞留、低位咬合、龋病甚至牙髓炎、根... 详细信息

先天性牙缺失是一类由于牙胚发育障碍导致牙齿数目减少的颌面部发育异常疾病。除第三磨牙外缺牙数目少于6颗称为个别牙缺失,其中第二前磨牙缺失最为常见。第二前磨牙缺失时,第二乳磨牙往往更易出现滞留、低位咬合、龋病甚至牙髓炎、根尖周炎等问题,若不及时进行恰当治疗,可对患者的牙齿排列、咬合功能、颌面部发育及后续修复治疗产生不利影响。本文总结了第二前磨牙缺失的病因、诊断特征,并以是否完全确诊第二前磨牙先天缺失为界,分别讨论无恒牙胚的第二乳磨牙保留或拔除的临床考量,以期为第二前磨牙牙胚缺失的临床诊疗提供参考。

关键词：生长和发育第二前磨牙基因突变间隙管理临床管理策略