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基于荧光定量PCR检测和原位杂交技术分析湖北省蛋鸡滑液支原体的感染情况

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畜牧兽医学报 2025年

作者：王纯王晴吴晓倩胡婷崔卫涛裴洁宋铁平胡思顺张万坡李自力周祖涛华中农业大学动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室湖北省动物疫病预防控制中心宜昌天佑华牧科技有限公司

近年来，滑液支原体（Mycoplasma synoviae， MS）在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大，各蛋鸡品种均有饲养，目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此，本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS... 详细信息

近年来，滑液支原体（Mycoplasma synoviae， MS）在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大，各蛋鸡品种均有饲养，目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此，本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳顶端异常（eggshell apex abnormality，EAA）蛋鸡输卵管中的分布。采集湖北省36个规模蛋鸡养殖场82个鸡群血清和气管棉拭子各1637份，利用建立的荧光定量PCR（real-time qPCR）方法检测MS载量，ELISA试剂盒检测免疫鸡群和非免疫鸡群血清抗体，并对产EAA蛋的蛋鸡输卵管进行MS载量、病理切片和MS定位分析。结果显示，临床样本中，喉气管拭子MS阳性率9.41%；血清抗体阳性率92.24%，其中非免疫鸡群抗体阳性率89.04%且6月龄抗体达100%阳性，免疫鸡群抗体阳性率95%；36个规模场中有26个（72.22%）MS感染阳性场，82个鸡群中有61个（74.39%）感染阳性群；10个蛋鸡品种均有MS感染。产EAA蛋的鸡输卵管部位检出MS且膨大部的载量极显著高于子宫部、峡部和漏斗部（P＜0.01），子宫部显著高于峡部和漏斗部（P＜0.05）；在产EAA蛋的蛋鸡输卵管中，峡部和子宫部出现黏膜上皮细胞变性和腺体肿大以及膨大部出现腺体上皮细胞脱落和坏死，子宫部和峡部的黏膜上皮以及膨大部的黏膜上皮和管状腺周围都有MS阳性信号检出，其中膨大部和子宫部阳性信号最强。综上，湖北省蛋鸡场MS感染严重，不同品种均有感染，MS主要定植在蛋鸡输卵管子宫部和膨大部中并造成病理损伤。本研究为湖北省蛋鸡MS感染情况的认识和MS引起EAA蛋的研究提供了数据支撑。

关键词：滑液支原体蛋壳顶端异常荧光定量PCR 原位杂交组织分布

云南部分地区猪流行性腹泻病毒M和ORF3基因的遗传进化分析

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云南农业大学学报(自然科学) 2025年

作者：冉李燕赵筱张梅张文朱培英罗林宝李文贵彭洁云南农业职业技术学院畜牧兽医学院鹤庆县动物疫病预防控制中心云南农业大学动物医学院

【目的】了解2022—2023年云南部分地区猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株变异及遗传进化情况。【方法】从云南多个地区的9家猪场采集125份疑似感染PEDV的猪小肠组织、粪便和肛拭子，提取病毒核酸后，采用RT-... 详细信息

【目的】了解2022—2023年云南部分地区猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株变异及遗传进化情况。【方法】从云南多个地区的9家猪场采集125份疑似感染PEDV的猪小肠组织、粪便和肛拭子，提取病毒核酸后，采用RT-PCR方法进行病原检测，扩增PEDV阳性样品M和ORF3基因并测序，与GenBank中PEDV参考毒株进行比对分析，利用生物信息学软件构建遗传进化树，分析核苷酸序列和氨基酸序列的同源性。【结果】来自5家猪场的49份样品呈PEDV阳性，阳性率为39.2%(49/125)；猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)阳性率为11.2%(14/125);PoRV与PEDV混合感染率为10.4%(13/125)；未检测出猪传染性胃肠炎病毒(porcine infectious gastroenteritis virus,TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(porcine delta coronavirus,PDCoV)。与经典疫苗株CV777相比，10株PEDV毒株的M基因和ORF3基因均出现核苷酸和氨基酸突变。M基因同源性分析结果显示：10株毒株均为GⅡ型，其中YNQJF4-6和YNQJF4-7与中国的AJ1102、GD-A、LC株亲缘关系较近，其余8株与GD S07亲缘关系较近；M基因株间核苷酸同源性为96.9%～100.0%，存在多处碱基突变。ORF3基因同源性分析结果显示：株间核苷酸同源性为95.6%～100.0%，氨基酸序列主要有5个氨基酸突变位点，无氨基酸插入或缺失现象。与DR13和JS2008的ORF3蛋白氨基酸序列进行比对发现：10株毒株未出现氨基酸连续大片段缺失的现象，流行的PEDV多为强毒株，M基因和ORF3基因均出现不同程度的突变，提示这些毒株在流行过程中不断出现变异。【结论】云南猪群出现GⅡ型为主的强毒株，急需研制针对变异株的疫苗，降低其带来的经济损失。

关键词：猪流行性腹泻病毒(PEDV) M基因 ORF3基因遗传进化分析

鸽圆环病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2025年第1期46卷 68-73页

作者：刘存刘砚涵祝夕超李法凯张栋邵新宇田野孙圣福陈静山东省动物疫病预防与控制中心(山东省人畜共患病流调监测中心) 山东济南250100 莱州市程郭畜牧兽医站山东烟台261437 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具... 详细信息

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9866;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为14.4拷贝/μL;该方法特异性良好,与鸽新城疫病毒、鸽疱疹病毒、鸽腺病毒等病毒及鸽组织DNA不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内重复试验变异系数均介于0.454%~0.473%,批间重复试验变异系数均介于0.367%~0.869%。与传统普通PCR方法相比,所建立的PiCV荧光定量PCR方法敏感性更高,临床样品PiCV检出率更高,两者检测符合率为93.75%。结果表明,所建立的PiCV荧光定量PCR方法为临床检测鸽圆环病毒提供了一种快速、灵敏的检测方法,为PiCV的流行病学调查和主动监测提供了技术支撑。

关键词：鸽圆环病毒荧光定量PCR Rep基因检测

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饲粮中添加葡萄梗对绵羊生长性能及血清指标的影响

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饲料研究 2025年 16-20页

作者：高丽张俊瑜米日扎提·艾热提张国新马春江杨虎新疆畜牧科学院饲料研究所新疆饲料生物技术重点实验室哈密市动物疫病预防控制中心新疆锝汇塬现代农牧业科技有限公司

试验旨在研究饲粮中添加葡萄梗对绵羊生长性能及血清指标的影响。选取体重相近的4～6月龄哈萨克公羔羊30只，随机分为3组，每组10个重复，每个重复1只羊。对照组（CK组）饲喂基础饲粮，A组、B组分别使用葡萄梗替代基础饲粮中10%玉米秸秆... 详细信息

试验旨在研究饲粮中添加葡萄梗对绵羊生长性能及血清指标的影响。选取体重相近的4～6月龄哈萨克公羔羊30只，随机分为3组，每组10个重复，每个重复1只羊。对照组（CK组）饲喂基础饲粮，A组、B组分别使用葡萄梗替代基础饲粮中10%玉米秸秆、8%苜蓿。预试期7 d，正式试验期42 d。结果显示，A组平均日干物质采食量、1～20 d平均日增重和1～42 d平均日增重均最高，A组的料重比最低。与CK组相比，A组、B组血清免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白G (IgG)、免疫球蛋白M (IgM)含量均显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01），核因子-κB (NF-κB)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)含量均极显著降低（P<0.01）;A组、B组血清总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性极显著升高（P<0.01），丙二醛（MDA）含量极显著降低（P<0.01）。研究表明，饲粮中添加葡萄梗可提高绵羊免疫力和抗氧化能力，其中葡萄梗替代玉米秸秆的效果较好。

关键词：绵羊葡萄梗玉米秸秆苜蓿生长性能血清指标

酒石酸泰万菌素纳米乳在肉鸡体内药代动力学研究

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动物医学进展 2025年第1期46卷 87-90页

作者：杨一妍刘畅冯莉李新国王宏军赵阳阳孙晶鸣鲍品桦锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121001 锦州市检验检测认证中心辽宁锦州121000 灯塔市动物疫病预防控制中心辽宁灯塔111300 中牧实业股份有限公司北京100070

为了提高酒石酸泰万菌素(TAT)的生物利用度,制备了酒石酸泰万菌素纳米乳(TAT-NE)并进行其药代动力学研究。50日龄白羽肉鸡12只,设TAT可溶性粉(TAT-SP)和TAT-NE组,给2组每只鸡均单次灌服含TAT 20 mg/kg,于不同时间点翅下静脉采血,血浆经... 详细信息

为了提高酒石酸泰万菌素(TAT)的生物利用度,制备了酒石酸泰万菌素纳米乳(TAT-NE)并进行其药代动力学研究。50日龄白羽肉鸡12只,设TAT可溶性粉(TAT-SP)和TAT-NE组,给2组每只鸡均单次灌服含TAT 20 mg/kg,于不同时间点翅下静脉采血,血浆经乙腈脱蛋白,HPLC检测血药浓度,DAS2.0版软件分析药代动力学参数。结果显示,鸡单次口服TAT-NE的AUC(0-t)为(672.329±3.634)(mg·h)/L显著高于TAT-SP(P<0.01),达峰时间T max分别为0.25 h、8 h,峰浓度C max分别为(125.601±2.056)mg/L、(48.398±4.387)mg/L,TAT-NE相对生物利用度为279.48%。由此表明,TAT-NE能够显著提高TAT的生物利用度。

关键词：酒石酸泰万菌素纳米乳肉鸡生物利用度药代动力学

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青海省高原鼠兔源囊尾蚴的分子鉴定与进化分析

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中国农业大学学报 2025年第2期 107-114页

作者：陈澳张海宁李志孟茹张学勇付永青海大学畜牧兽医科学院/青海省动物疾病病原诊断与绿色防技术研究重点实验室西宁市动物疫病预防控制中心

为鉴定青海省高原鼠兔源绦虫囊尾蚴种类，本研究对囊尾蚴样本进行体式显微镜观察，对其线粒体COI基因进行扩增并测序比对分析，同时利用Iqtree和BEAST v2.6. 2等软件对测序所得的COI基因进行系统发育及分化时间分析。结果表明：1）体式... 详细信息

为鉴定青海省高原鼠兔源绦虫囊尾蚴种类，本研究对囊尾蚴样本进行体式显微镜观察，对其线粒体COI基因进行扩增并测序比对分析，同时利用Iqtree和BEAST v2.6. 2等软件对测序所得的COI基因进行系统发育及分化时间分析。结果表明：1）体式显微镜下该囊尾蚴的形态特征与带科囊尾蚴相似。2）测序结果发现该序列与GenBank中的才氏绦虫（Taenia caixuepengi）基因序列（MT882036）同源，序列相似性达到98.52%，表明该囊尾蚴属于Taenia caixuepengi囊尾蚴。3）系统发育树显示，才氏囊尾蚴与和豆状带绦虫（T. pisiformis）亲缘关系最近，两者形成微小分支。4）分化时间分析表明才氏囊尾蚴与豆状带绦虫在5.79 Mya(95%置信区间，3.15～6.87 Mya)左右分化形成，自展值为100%。综上，经鉴定青海省高原鼠兔源囊尾蚴为才氏囊尾蚴；利用该囊尾蚴线粒体COI基因进行的系统发育及分化时间分析表明该囊尾蚴与豆状带绦虫亲缘关系更近。本研究对青海省高原鼠兔源才氏囊尾蚴进行了鉴定与遗传进化分析，为才氏绦虫的分类、鉴定及分子流行病学调查提供理论依据。

关键词：高原鼠兔才氏囊尾蚴分子鉴定系统发育

饮用水中添加褐藻寡糖对肉鸡规模养殖场效益的影响

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畜牧兽医杂志 2025年第1期 14-16页

作者：程晓峰黄晓慧合肥市动物疫病预防控制中心

本研究旨在探讨褐藻寡糖作为饲料添加剂在规模肉鸡养殖中的潜在效益。尽管褐藻寡糖已被证实具有免疫调节功能，但目前尚缺乏将其直接应用于规模场肉鸡饮水中的研究。为填补空白，本试验从2023年4月起，在肉鸡养殖场的饮水系统中添加褐... 详细信息

本研究旨在探讨褐藻寡糖作为饲料添加剂在规模肉鸡养殖中的潜在效益。尽管褐藻寡糖已被证实具有免疫调节功能，但目前尚缺乏将其直接应用于规模场肉鸡饮水中的研究。为填补空白，本试验从2023年4月起，在肉鸡养殖场的饮水系统中添加褐藻寡糖粉，记录肉鸡的体重增长、死淘情况。结果表明：褐藻寡糖组比对照组肉鸡上市均重高0.22 kg,死淘差异极其显著(P<0.001)。此外，通过成本核算进一步证实褐藻寡糖作为一种饲料添加剂的经济效益。这些发现不仅为褐藻寡糖在肉鸡养殖中的应用提供了科学依据，也为养殖业者在选择饲料添加剂时提供了新的参考。

关键词：褐藻寡糖肉鸡生长性能

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中兽医在畜禽疫病防治中的应用

畜牧兽医杂志 2025年第1期 90-95页

作者：黎春秀冯杰陈传荣朱坤华敖元富曹乾大邹波富顺县动物疫病预防控制中心富顺县畜牧兽医技术推广中心资阳市雁江区动物疫病预防控制中心

在国家逐步实施养殖业减抗、替抗、无抗战略的大时代背景下，提高了对中兽医防治畜禽疫病的重视，不断有新的研究与成果实践应用到畜禽疫病的防治中。本文就中兽医在畜禽疫病预防(消毒、免疫、添加剂)及疫病治疗中的应用进行了探讨，希... 详细信息

在国家逐步实施养殖业减抗、替抗、无抗战略的大时代背景下，提高了对中兽医防治畜禽疫病的重视，不断有新的研究与成果实践应用到畜禽疫病的防治中。本文就中兽医在畜禽疫病预防(消毒、免疫、添加剂)及疫病治疗中的应用进行了探讨，希望为研究中兽医在畜禽疫病防治中提供理论参考。

关键词：中兽医穴位免疫中药消毒剂针灸

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秦州区基层动物防疫员的现状调查

畜牧兽医杂志 2025年第1期 123-125页

作者：程奎秦州区动物疫病预防控制中心

秦州区作为天水市畜牧业发展的重要地区，随着动物养殖业的快速发展，基层动物防疫员作为守护畜牧业安全的重要力量，直接参与到对养殖场(户)的日常监管、疫病监测、免疫接种、动物各类样品的采集、防疫政策的宣传等工作中，对于及时发... 详细信息

秦州区作为天水市畜牧业发展的重要地区，随着动物养殖业的快速发展，基层动物防疫员作为守护畜牧业安全的重要力量，直接参与到对养殖场(户)的日常监管、疫病监测、免疫接种、动物各类样品的采集、防疫政策的宣传等工作中，对于及时发现和控制疫情的发生具有至关重要的作用。本人就秦州区基层动物防疫员的现状进行了深入调查，以期引起社会各界对这一群体的关注和支持，旨在为动物防疫工作提供更好的保障。

关键词：秦州区动物防疫员现状调查