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葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及促进胫骨的生长

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3216-3222页

作者：宁桃丽谢艳王娜王庆丰吉建张冬纳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471000

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的... 详细信息

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的影响。方法:①体外实验:取对数生长期的大鼠胫骨及股骨生长板软骨细胞,分组培养:正常对照组、模型对照组(加入17β雌二醇诱导细胞凋亡)、阳性对照组(加入来曲唑与17β雌二醇)、葡萄籽提取物组(加入17β雌二醇和10μg/mL葡萄籽提取物)、Caspase-9抑制剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9抑制剂)、Caspase-9激动剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9激动剂),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。②体内实验:将30只3月龄SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组及药物低、中、高剂量组,每组5只,均皮下注射17β雌二醇(3次/周)建立骨骺闭合模型,阳性对照组灌胃给予来曲唑,药物低、中、高剂量组分别灌胃给予0.05,0.2,0.8 g/kg的葡萄籽提取物,1次/d,直至模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上停药,观察各组大鼠胫骨长度。将18只SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、药物中剂量组,每组6只,按照如上方法处理,连续给药1.5个月后,Western blot检测大鼠胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达。结果与结论:①体外实验:17β雌二醇可诱发生长板软骨细胞的凋亡,而来曲唑、葡萄籽提取物与Caspase-9抑制剂均可抑制生长板软骨细胞的凋亡;②体内实验:当模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上时,阳性对照组、药物中剂量组骨骺闭合数量少于模型对照组(P<0.05),且胫骨长度大于模型对照组(P<0.05),胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达低于模型对照组(P<0.05);③结果表明:适宜浓度的葡萄籽提取物可有效抑制生长板软骨细胞的凋亡并延迟骨骺闭合,具有促进骨骼生长的潜能。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞细胞凋亡骨骺闭合 Casepase-9

旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的应用

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中华骨科杂志 2024年第10期44卷 669-675页

作者：周英杰王彦金禚汉杰柴旭斌徐铖菡郝宇鹏河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)脊柱外科洛阳471002

目的探讨旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的有效性和安全性。方法回顾性分析2017年4月至2022年10月于河南省洛阳正骨医院接受旋转椎弓法显露椎管并回植联合肿瘤切除的胸腰椎椎管内良性肿瘤患者17例,男9例、女8例,年龄... 详细信息

目的探讨旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的有效性和安全性。方法回顾性分析2017年4月至2022年10月于河南省洛阳正骨医院接受旋转椎弓法显露椎管并回植联合肿瘤切除的胸腰椎椎管内良性肿瘤患者17例,男9例、女8例,年龄(58.59±13.57)岁(范围29~75岁)。胸椎椎管内肿瘤7例、胸腰段椎管内肿瘤2例、腰椎椎管内肿瘤8例;手术节段为单节段6例、双节段8例、三节段3例。病程(20.35±16.58)个月(范围3~60个月)。组织病理学:神经鞘瘤9例、脊膜瘤5例、畸胎瘤2例、皮样囊肿1例。记录手术时间、术中出血量,观察术后椎管容积、内固定稳定性及椎板愈合情况。比较手术前后Cobb角、美国脊柱损伤协会(American spinal injury association,ASIA)分级和Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)的改善情况。结果17例患者均顺利完成手术并获得随访,随访时间为(10.5±2.4)个月(范围6~20个月)。手术时间(156.76±26.81)min(范围120~210 min),术中出血量(338.24±97.68)ml(范围200~600 ml)。术中无一例出现神经及血管损伤,1例因用力过度造成棘突不完全骨折,未特殊处理,术后随访愈合良好。术后引流量(147.06±31.58)ml(范围100~210 ml)。患者术前局部Cobb角为14.15°±6.58°,术后为14.73°±6.34°,差异无统计学意义(t=1.810,P=0.089)。患者术前ODI为63.65%±6.57%,末次随访降低至23.88%±4.21%,差异有统计学意义(t=53.359,P疗椎管内良性肿瘤术后神经功能恢复良好,并发症发生率低,是治疗椎管内良性肿瘤安全、有效的手术方式。

关键词：椎管肿瘤椎板成形术

雌激素受体在骨疏康治疗绝经后骨质疏松症中的作用与机制

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2574-2578页

作者：柴爽马江涛杨岩冰苏晓川谢艳滕军燕秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省郑州市450016

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后... 详细信息

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后骨质疏松症的靶点,利用Cytoscape构建骨疏康有效成分-靶点网络,利用STRING数据库和Cytoscape进行蛋白互作分析(PPI)及核心靶点的筛选,利用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。然后建立去卵巢SD大鼠动物模型,骨疏康灌胃3个月,ELISA检测血清雌激素水平,microCT检测骨微结构,Western blot检测骨组织雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达。结果与结论:①网络药理学分析显示,骨疏康中共有132个有效成分,150个作用靶点,与1155个绝经后骨质疏松症靶点取交集,获得87个骨疏康治疗绝经后骨质疏松症的作用靶点。②构建骨疏康有效成分-靶点网络图发现处于核心位置的有效成分有槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素和异鼠李素,处于核心位置的靶点有NCOA2,ESR2,AR,F2,ESR1,PTGS1。③PPI分析及筛选后最终获得的靶点有MAPK8,ESR1,JUN,R3C1,RELA和FOS,其中ESR1为两次分析获得的共同核心靶点。④随后的KEGG富集分析显示雌激素、TNF、凋亡等信号通路,因此动物实验重点关注骨疏康对雌激素信号通路中不同亚型的雌激素受体的影响。⑤动物实结果显示,骨疏康组骨微结构明显改善,血清雌激素无明显变化,但骨组织中ERα和ERβ蛋白量明显升高,说明骨疏康治疗绝经后骨质疏松症可能与其雌激素样作用和提高雌激素受体蛋白的表达有关。

关键词：骨疏康绝经后骨质疏松症雌激素受体α 雌激素受体β 雌激素信号通路网络药理学中医药

骨松益骨方调控Beclin 1/Bcl-2对去卵巢大鼠骨细胞凋亡和自噬的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 655-661页

作者：有曼魏立伟柴爽郑旭霞孟璐张虹何广宏秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南洛阳471000

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大... 详细信息

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大鼠血清中P1NP和β-CTX的水平;Micro-CT测定股骨骨密度以及微结构的变化;HE染色检查骨组织的形态学变化;TUNEL染色观察骨细胞凋亡;免疫组化观察骨组织中LC3的变化;Western blot法检测大鼠胫骨近端Bcl2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP、LC3、Beclin1的表达变化;免疫共沉淀法检测Beclin1和Bcl-2的相互作用。结果与模型组相比,GSYG中、高剂量组的P1NP和β-CTX水平显著降低(P<0.01);GSYG各剂量组骨的微结构明显改善(P<0.01);骨小梁明显增多;骨细胞凋亡明显减少(P<0.01);Bcl-2的表达显著升高(P<0.01),Bax表达显著降低(P<0.05或P<0.01),GSYG高剂量组中的cleaved caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达显著降低(P<0.01),GSYG中、高剂量组的LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值与Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01);免疫组化染色显示,与模型组相比GSYG各剂量组LC3蛋白显著增加(P<0.05或P<0.01);免疫共沉淀的结果提示,模型组Beclin1和Bcl-2相互作用较强,而GSYG高剂量组中两者结合均减少。结论GSYG对OVX大鼠的骨质疏松发展有抑制作用,其机制与其调控Beclin 1/Bcl-2介导的凋亡与自噬有关。

关键词：骨松益骨方 Beclin 1 Bcl-2 凋亡自噬

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡促进胫骨生长

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2494-2499页

作者：张莎莎王娜李勇军河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)检验科河南省郑州市450000

背景:葡萄籽提取物具有抑制软骨细胞凋亡和衰老、改善骨关节炎作用,但是有关葡萄籽提取物对生长板软骨细胞凋亡及胫骨生长的影响尚不清楚。目的:探讨葡萄籽提取物对白细胞介素1β诱导大鼠生长板软细胞凋亡的作用及对胫骨生长的影响。方... 详细信息

背景:葡萄籽提取物具有抑制软骨细胞凋亡和衰老、改善骨关节炎作用,但是有关葡萄籽提取物对生长板软骨细胞凋亡及胫骨生长的影响尚不清楚。目的:探讨葡萄籽提取物对白细胞介素1β诱导大鼠生长板软细胞凋亡的作用及对胫骨生长的影响。方法:①细胞实验:体外分离、培养及鉴定SD大鼠生长板软骨细胞,实验分为对照组、模型组、葡萄籽提取物组、miR-138-5p NC组、miR-138-5p inhibitor组。对照组细胞常规培养;模型组细胞以20 ng/mL白细胞介素1β诱导生长板软骨细胞凋亡模型;葡萄籽提取物组加入20 ng/mL白细胞介素1β,同时加入10μmol/L葡萄籽提取物溶液共培养48 h;miR-138-5p NC组细胞转染5 nmol/L miR-138-5p NC 12 h后,其余操作同模型组;miR-138-5p inhibitor组细胞转染5 nmol/L miR-138-5p inhibitor 12 h后,其余操作同模型组。qRT-PCR检测miR-138-5p和caspase-3表达;荧光素酶报告实验分析miR-138-5p和caspase-3靶向关系;CCK-8检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测caspase-3、Bcl-2蛋白表达。②动物实验:实验分为正常对照组、葡萄籽提取物组和miR-138-5p inhibitor组,观察葡萄籽提取物对大鼠胫骨平台骨骺闭合及胫骨生长的影响。结果与结论:①miR-138-5p与caspase-3存在靶向关系。②与对照组相比,模型组细胞增殖能力显著降低,凋亡显著增加(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达降低(P<0.01),caspase-3表达增加(P<0.01);与模型组相比,葡萄籽提取物组细胞增殖能力显著增加,凋亡显著降低(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达升高(P<0.01),caspase-3表达降低(P<0.01);与葡萄籽提取物组相比,miR-138-5p inhibitor组细胞增殖能力显著降低,凋亡显著增加(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达降低(P<0.05或P<0.01),caspase-3表达增加(P<0.05)。③大鼠给予葡萄籽提取物灌胃处理后能够延缓胫骨平台骨骺闭合,促进胫骨生长,而给予miR-138-5p inhibitor干预后能够抑制葡萄籽提取物对大鼠胫骨生长的作用。④结果说明,葡萄籽提取物能够通过调控miR-138-5p/caspase-3通路抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡,改善大鼠胫骨平台骨骺闭合,促进胫骨生长。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞 miR-138-5p/caspase-3 胫骨生长凋亡

内质网应激与自噬交互作用在绝经后骨质疏松发病中的研究进展

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中国药理学通报 2024年

作者：陈汝娜魏立伟柴爽张虹秦娜河南中医药大学药学院河南省洛阳正骨医院河南省骨科医院运动医学关节镜科河南省洛阳正骨医院河南省骨科医院骨髓炎科河南省洛阳正骨医院河南省骨科医院科研学科办河南省洛阳正骨医院河南省骨科医院药剂科

内质网负责细胞内蛋白质的合成、折叠和加工,当内质网蛋白质折叠能力受到影响时,其中的未折叠蛋白或错误折叠蛋白堆积,导致内质网结构功能紊乱,造成内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。自噬可以选择性清除细胞内应激内质网... 详细信息

内质网负责细胞内蛋白质的合成、折叠和加工,当内质网蛋白质折叠能力受到影响时,其中的未折叠蛋白或错误折叠蛋白堆积,导致内质网结构功能紊乱,造成内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。自噬可以选择性清除细胞内应激内质网和错误蛋白,在应激状态下,内质网可通过未折叠蛋白反应和自噬来维持正常生理功能。绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)主要由破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成不平衡造成。ERS与自噬能调控骨组织中细胞的状态,对骨稳态造成影响,该文就ERS与自噬交互作用在绝经后骨质疏松发病中的研究进展进行综述。

关键词：内质网应激自噬绝经后骨质疏松未折叠蛋白反应交互作用发病机制

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医疗机构中药制剂调剂使用政策的研究

中国医院药学杂志 2024年

作者：马依林马换换吴晓龙河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)

目的：分析医疗机构中药制剂调剂使用政策现状，对存在的问题提出建议，为中药新制剂的研发和调剂使用政策修订提供参考。方法：运用政策对比、文献调研等方式，梳理分析我国医疗机构中药制剂调剂使用政策的发展历程，对比各省现行中药... 详细信息

目的：分析医疗机构中药制剂调剂使用政策现状，对存在的问题提出建议，为中药新制剂的研发和调剂使用政策修订提供参考。方法：运用政策对比、文献调研等方式，梳理分析我国医疗机构中药制剂调剂使用政策的发展历程，对比各省现行中药调剂使用政策，提出改革措施及建议。结论：医疗机构中药制剂调剂使用政策给予中药制剂发展极大的鼓励与支持；各省份在调剂品种、范围和程序上存在各种差异等问题，给调剂行为和跨省调剂造成了阻碍。建议搭建医疗机构中药制剂调剂使用信息平台；统一医疗机构中药制剂调剂使用审批流程；医疗机构自身也应抓住机遇，加强新药转化力度，鼓励各方积极沟通，共同为振兴中医药事业做出应有的贡献。

关键词：中药制剂医疗机构调剂政策

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平乐郭氏正骨流派退行性骨关节病防治平衡观

中华中医药杂志 2024年第9期39卷 4699-4702页

作者：李峰郭珈宜郭艳幸河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 洛阳471002

退行性骨关节病是临床常见病和多发病,具有较高的发病率与致残率,给患者、家庭和社会造成了沉重的负担。平乐正骨以平衡理论为指导,科学认识退行性骨关节病的动态失衡过程,形成了学术特色鲜明的“辨失衡的诊病观,调失衡的治病观和守平... 详细信息

退行性骨关节病是临床常见病和多发病,具有较高的发病率与致残率,给患者、家庭和社会造成了沉重的负担。平乐正骨以平衡理论为指导,科学认识退行性骨关节病的动态失衡过程,形成了学术特色鲜明的“辨失衡的诊病观,调失衡的治病观和守平衡的养护观”,并在平衡观的基础上构建了对退变性骨关节病“科学性预防、全程性管理、阶段性治疗和主动性养护”相结合的新型防治模式。

关键词：平乐正骨退行性骨关节病养骨平衡理论学术流派

酸枣仁提取物调控miR-7b-3p/5-羟色胺1A受体表达促进骨生长

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2450-2457页

作者：罗石任吴晓龙谢艳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省郑州市450000

背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者... 详细信息

背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者推测酸枣仁提取物可能通过miRNA调控5-HT1AR的表达从而发挥药物作用。目的:观察酸枣仁提取物通过干预小鼠脑组织中miR-7b-3p/5-HT1AR通路对骨骼生长的影响。方法:①将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg/g),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂甙0.013 mg/g)和酸枣仁提取物+5-HT1AR抑制剂组(灌胃酸枣仁提取物最后3 d同时每天侧脑室注射5-HT1AR选择性抑制剂P-MPPF 8μg),25 d后观察酸枣仁提取物对小鼠骨生长、血清生长激素水平及脑组织5-HT1AR表达的影响;②基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨生长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的miRNAs,并通过PCR验证和双荧光素酶报告基因实验证实筛选的miR-7b-3p与5-HT1AR的调控关系;③体外培养小鼠脑皮质细胞并鉴定,利用Western blot法观察酸枣仁提取物对脑皮质细胞中5-HT1AR表达的影响;④将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组小鼠脑组织5-HT1AR表达及5-羟色胺与5-HT1AR结合活性;⑤将SD大鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组大鼠慢波睡眠的变化。结果与结论:①酸枣仁提取物可以促进小鼠体长、胫骨增长,促进生长激素分泌,提高脑组织5-HT1AR含量;②基因芯片筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个;生物信息学预测下调miR-7b-3p可以调控5-HT1AR表达,且双荧光素酶报告基因实验证实二者有直接调控关系;③酸枣仁提取物和沉默脑皮质细胞中miR-7b-3p表达可以引起5-HT1AR高表达;沉默miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均升高;过表达miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均降低;大鼠慢波睡眠期也相应延长或缩短。结果表明,酸枣仁提取物能够降低脑组织的miR-7b-3p水平,同时增加5-HT1AR的表达量。这种机制有助于延长慢波睡眠周期,并且促进生长激素的生成,对骨骼生长有积极影响,为使用酸枣仁提取物作为促进骨骼生长的潜在手段提供了科学依据。

关键词：酸枣仁提取物 miR-7b-3p 脑组织 5-羟色胺 5-羟色胺1A受体生长激素