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基于16S rRNA测序技术探讨骨松益骨方对去卵巢大鼠肠道菌群的影响

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1752-1759页

作者：郑旭霞柴爽魏立伟张虹秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南郑州450016

目的基于肠道菌群探究骨松益骨方(GusongYigu decoction,GSYG)治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制。方法SPF级SD大鼠60只随机分成假手术组(Control)、模型组(Model)、骨松益骨方低剂量组(GSYG-L,1.25 g·kg^(-1))、骨松益骨方中剂量组(GSYG-M,2.5 g·kg^(-1)),骨松益骨方高剂量组(GSYG-H,5 g·kg^(-1))和阿仑膦酸钠组(Al,0.89 mg·kg^(-1)),每组10只。HE染色观察骨组织形态变化,micro CT观察大鼠的股骨组织结构变化;取Control组、Model组、GSYG-H组大鼠结肠粪便样本,提取DNA,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与Control组比较,Model组大鼠骨小梁稀疏;BV/TV、***、Tb.N及BMD均明显降低(P<0.01),SMI、***明显升高(P<0.01);与Model组比较,GSYG-L、GSYG-M、GSYG-H组和Al组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,且BV/TV、***、Tb.N及BMD明显增加(P<0.05),SMI、***明显降低(P<0.05)。肠道菌群测序结果显示,与Control组比较,Model组大鼠肠道菌群多样性降低,厚壁菌门丰度降低,而拟杆菌门丰度增加;与Model组比较,GSYG-H组厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度减少。结论GSYG能够改善PMOP患者的骨微结构,增加骨密度,其作用机制可能与增加肠道菌群的多样性、调节肠道菌群结构有关。

关键词：骨松益骨方绝经后骨质疏松症肠-骨轴肠道菌群 16S rRNA 骨密度

基于16S rRNA测序技术探讨骨松益骨方对去卵巢大鼠肠道菌群的影响

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中国药理学通报 2024年 1752-1759页

作者：郑旭霞柴爽魏立伟张虹秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)

目的基于肠道菌群探究骨松益骨方（GusongYigu decoction,GSYG）治疗绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）的机制。方法 SPF级SD大鼠60只随机分成假手术组（Control）、模型组（Model）、骨松益骨方低剂量组(GSYG-L,1... 详细信息

目的基于肠道菌群探究骨松益骨方（GusongYigu decoction,GSYG）治疗绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）的机制。方法 SPF级SD大鼠60只随机分成假手术组（Control）、模型组（Model）、骨松益骨方低剂量组(GSYG-L,1.25 g·kg-1)、骨松益骨方中剂量组(GSYG-M,2.5 g·kg-1),骨松益骨方高剂量组(GSYG-H,5 g·kg-1)和阿仑膦酸钠组(Al,0.89 mg·kg-1),每组10只。HE染色观察骨组织形态变化,micro CT观察大鼠的股骨组织结构变化;取C ontrol组、Model组、GSYG-H组大鼠结肠粪便样本,提取DNA,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与C ontrol组比较,Model组大鼠骨小梁稀疏;BV/TV、***、Tb.N及BMD均明显降低（P<0.01）,SMI、***明显升高（P<0.01）;与Model组比较,GSYG-L、GSYG-M、GSYG-H组和A1组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,且BV/TV、***、Tb.N及BMD明显增加（P <0.05）,SMI、***明显降低（P<0.05）。肠道菌群测序结果显示,与Control组比较,Model组大鼠肠道菌群多样性降低,厚壁菌门丰度降低,而拟杆菌门丰度增加;与Model组比较,GSYG-H组厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度减少。结论 GSYG能够改善PMOP患者的骨微结构,增加骨密度,其作用机制可能与增加肠道菌群的多样性、调节肠道菌群结构有关。

关键词：骨松益骨方绝经后骨质疏松症肠-骨轴肠道菌群 16S rRNA 骨密度

骨松益骨方调控Beclin 1/Bcl-2对去卵巢大鼠骨细胞凋亡和自噬的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 655-661页

作者：有曼魏立伟柴爽郑旭霞孟璐张虹何广宏秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南洛阳471000

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大... 详细信息

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大鼠血清中P1NP和β-CTX的水平;Micro-CT测定股骨骨密度以及微结构的变化;HE染色检查骨组织的形态学变化;TUNEL染色观察骨细胞凋亡;免疫组化观察骨组织中LC3的变化;Western blot法检测大鼠胫骨近端Bcl2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP、LC3、Beclin1的表达变化;免疫共沉淀法检测Beclin1和Bcl-2的相互作用。结果与模型组相比,GSYG中、高剂量组的P1NP和β-CTX水平显著降低(P<0.01);GSYG各剂量组骨的微结构明显改善(P<0.01);骨小梁明显增多;骨细胞凋亡明显减少(P<0.01);Bcl-2的表达显著升高(P<0.01),Bax表达显著降低(P<0.05或P<0.01),GSYG高剂量组中的cleaved caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达显著降低(P<0.01),GSYG中、高剂量组的LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值与Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01);免疫组化染色显示,与模型组相比GSYG各剂量组LC3蛋白显著增加(P<0.05或P<0.01);免疫共沉淀的结果提示,模型组Beclin1和Bcl-2相互作用较强,而GSYG高剂量组中两者结合均减少。结论GSYG对OVX大鼠的骨质疏松发展有抑制作用,其机制与其调控Beclin 1/Bcl-2介导的凋亡与自噬有关。

关键词：骨松益骨方 Beclin 1 Bcl-2 凋亡自噬

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及促进胫骨的生长

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3216-3222页

作者：宁桃丽谢艳王娜王庆丰吉建张冬纳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471000

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的... 详细信息

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的影响。方法:①体外实验:取对数生长期的大鼠胫骨及股骨生长板软骨细胞,分组培养:正常对照组、模型对照组(加入17β雌二醇诱导细胞凋亡)、阳性对照组(加入来曲唑与17β雌二醇)、葡萄籽提取物组(加入17β雌二醇和10μg/mL葡萄籽提取物)、Caspase-9抑制剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9抑制剂)、Caspase-9激动剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9激动剂),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。②体内实验:将30只3月龄SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组及药物低、中、高剂量组,每组5只,均皮下注射17β雌二醇(3次/周)建立骨骺闭合模型,阳性对照组灌胃给予来曲唑,药物低、中、高剂量组分别灌胃给予0.05,0.2,0.8 g/kg的葡萄籽提取物,1次/d,直至模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上停药,观察各组大鼠胫骨长度。将18只SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、药物中剂量组,每组6只,按照如上方法处理,连续给药1.5个月后,Western blot检测大鼠胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达。结果与结论:①体外实验:17β雌二醇可诱发生长板软骨细胞的凋亡,而来曲唑、葡萄籽提取物与Caspase-9抑制剂均可抑制生长板软骨细胞的凋亡;②体内实验:当模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上时,阳性对照组、药物中剂量组骨骺闭合数量少于模型对照组(P<0.05),且胫骨长度大于模型对照组(P<0.05),胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达低于模型对照组(P<0.05);③结果表明:适宜浓度的葡萄籽提取物可有效抑制生长板软骨细胞的凋亡并延迟骨骺闭合,具有促进骨骼生长的潜能。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞细胞凋亡骨骺闭合 Casepase-9

老年髋关节置换患者术中低温风险预测模型的构建

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2024年第2期45卷 160-167页

作者：朱梦真张虹杨萌河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南洛阳471002

目的:构建老年髋关节置换术(THA)术中低体温风险预测模型。方法:纳入2019年1月至2022年5月行髋关节置换手术的252例老年患者的资料,分析发生低温的危险因素,构建列线图预测模型及验证该模型的临床适用性。结果:Logistic回归分析显示,麻... 详细信息

目的:构建老年髋关节置换术(THA)术中低体温风险预测模型。方法:纳入2019年1月至2022年5月行髋关节置换手术的252例老年患者的资料,分析发生低温的危险因素,构建列线图预测模型及验证该模型的临床适用性。结果:Logistic回归分析显示,麻醉时间、手术时间、手术室温度、术中输液、手术出血是老年THA术中低体温的独立影响因素(P<0.05)。列线图预测模型的AUC为0.888(95%CI:0.849~0.928),一致性结果与理想的预测能力较为接近,临床决策曲线显示阈值在0.15~0.95时,临床可获益。结论:本研究构建的模型能够准确预测老年髋关节置换患者术中低体温,可为临床决策提供参考。

关键词：老年髋关节置换手术低体温预测模型

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青少年腰椎间盘突出症两种中医疗法的比较

中国矫形外科杂志 2024年第13期32卷 1174-1180页

作者：田江波鲍铁周李道通刘又文刘佳宋卫峰王庆丰河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)骨关节病中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)颈腰痛中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)髋关节病中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)科研与知识产权部河南洛阳471002

[目的]比较两种中医疗法治疗青少年腰椎间盘突出症(adolescent lumbar disc herniation,ALDH)的临床效果。[方法]选取本院2020年2月—2022年3月就诊的ALDH患者104例,采用随机数字表法将其分为两组,52例采用平脊法治疗,包括优值牵引、中... 详细信息

[目的]比较两种中医疗法治疗青少年腰椎间盘突出症(adolescent lumbar disc herniation,ALDH)的临床效果。[方法]选取本院2020年2月—2022年3月就诊的ALDH患者104例,采用随机数字表法将其分为两组,52例采用平脊法治疗,包括优值牵引、中药熏洗、手法松解和脊柱整体手法治疗;另外52例采用常规治疗,包括优值牵引、中药熏洗、常规手法治疗。比较两组临床和影像资料。[结果]平脊组临床愈合时间显著早于常规组[(253.2±26.8)d vs(272.6±29.5)d,P<0.001]。随访时间平均(15.3±3.7)个月。与治疗前相比,末次随访时,两组腰痛VAS、腿痛VAS评分、ODI均显著降低(P<0.05),末次随访时,平脊组腰痛VAS[(1.5±0.3)vs(2.6±0.5),P<0.001]、腿痛VAS评分[(1.8±0.4)vs(2.9±0.6),P<0.001]、ODI[(8.2±1.7)vs(13.6±2.5),P<0.001]均显著优于常规组。影像方面,与治疗前相比,末次随访时,两组椎管占位率、T1骨盆角(thoracic pelvic angle,TPA)、骨盆倾斜角(pelvic tilt,PT)、骶骨倾斜角(sacral slope,SS)、腰椎前凸角(lumbar lordosis,LL)、胸椎后凸角(thoracic kyphosis,TK)均显著改善,末次随访时,平脊组椎管占位率[(2.0±0.3)%vs(3.5±0.6)%,P<0.001]、TPA[(15.3±2.4)°vs(18.6±3.5)°,P<0.001]、PT[(14.2±1.8)°vs(16.7±2.5)°,P<0.001]、SS[(29.4±6.1)°vs (25.8±4.9)°,P<0.001]、LL[(37.6±6.7)°vs(30.5±5.3)°,P<0.001]、TK[(25.9±5.8)°vs(20.3±4.6)°,P<0.001]均显著优于常规组。[结论]平脊疗法治疗ALDH疗效确切,可改善功能障碍程度,减轻腰痛、腿痛,改善脊柱-骨盆矢状位参数。

关键词：青少年型腰椎间盘突出症非手术治疗平脊疗法临床疗效脊柱-骨盆矢状位参数

三维平衡正脊手法辅助治疗强直性脊柱炎近期疗效

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中国矫形外科杂志 2024年第15期32卷 1366-1372页

作者：田江波鲍铁周刘又文刘佳宋卫峰李道通王庆丰河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)骨关节病中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)髋关节病中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)颈腰痛中心河南洛阳471002 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)科研与知识产权部河南洛阳471002

[目的]探讨三维平衡正脊手法辅助治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的近期疗效。[方法]选择2021年1月—2023年6月收治的AS患者102例,随机数字表法分为正脊组51例,采用常规西医治疗+三维平衡正脊手法干预;常规组51例,采用常... 详细信息

[目的]探讨三维平衡正脊手法辅助治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的近期疗效。[方法]选择2021年1月—2023年6月收治的AS患者102例,随机数字表法分为正脊组51例,采用常规西医治疗+三维平衡正脊手法干预;常规组51例,采用常规西医治疗。对比两组临床、检验及影像学资料。[结果]与治疗前相比,两组治疗后3个月疼痛VAS、巴氏AS疾病活动指数(Bath ankylosing spondylitis disease activity index,BASDAI)、巴氏AS功能指数(Bath ankylosing spondylitis functional index,BASFI)、指地距、墙枕距均显著减少(P<0.05),胸廓活动度与Schober试验均显著增加(P<0.05)。治疗后3个月,正脊组疼痛VAS[(2.6±0.8)vs(3.8±1.0),P<0.001]、BASDAI指数[(1.7±0.5)vs(2.8±0.6),P<0.001]、BASFI评分[(14.8±5.5)vs(35.4±8.6),P<0.001]、指地距[(15.4±5.0)cm vs(19.3±6.2)cm,P<0.001]、墙枕距[(1.7±0.5)cm vs(2.5±0.6)cm,P<0.001]、胸廓活动度[(3.6±0.9)cm vs(2.9±0.7)cm,P<0.001]及Schober试验[(4.9±1.0)cm vs(3.4±0.8)cm,P<0.001]均显著优于常规组。检验方面,治疗后3个月,正脊组在ESR、CRP、IL-6、IL-17、IL-23水平均显著优于常规组(P<0.05)。影像方面,治疗后3个月,正脊组矢状面偏移(sagittal vertical axis,SVA)、腰椎后凸角(thoracic kyphosis,TK)、腰椎前凸角(lumbar lordosis,LL)、骨盆入射角(pelvic incidence,PI)、骨盆倾斜角(pelvic tilt,PT)、骶骨倾斜角(sacral slope,SS)显著优于常规组(P<0.05)。[结论]三维平衡正脊手法治疗AS安全有效,能明显缓解其疼痛,改善脊柱功能及检验和影像参数。

关键词：强直性脊柱炎三维平衡正脊手法疼痛矢状面脊柱骨盆参数

雌激素受体在骨疏康治疗绝经后骨质疏松症中的作用与机制

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2574-2578页

作者：柴爽马江涛杨岩冰苏晓川谢艳滕军燕秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省郑州市450016

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后... 详细信息

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后骨质疏松症的靶点,利用Cytoscape构建骨疏康有效成分-靶点网络,利用STRING数据库和Cytoscape进行蛋白互作分析(PPI)及核心靶点的筛选,利用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。然后建立去卵巢SD大鼠动物模型,骨疏康灌胃3个月,ELISA检测血清雌激素水平,microCT检测骨微结构,Western blot检测骨组织雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达。结果与结论:①网络药理学分析显示,骨疏康中共有132个有效成分,150个作用靶点,与1155个绝经后骨质疏松症靶点取交集,获得87个骨疏康治疗绝经后骨质疏松症的作用靶点。②构建骨疏康有效成分-靶点网络图发现处于核心位置的有效成分有槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素和异鼠李素,处于核心位置的靶点有NCOA2,ESR2,AR,F2,ESR1,PTGS1。③PPI分析及筛选后最终获得的靶点有MAPK8,ESR1,JUN,R3C1,RELA和FOS,其中ESR1为两次分析获得的共同核心靶点。④随后的KEGG富集分析显示雌激素、TNF、凋亡等信号通路,因此动物实验重点关注骨疏康对雌激素信号通路中不同亚型的雌激素受体的影响。⑤动物实结果显示,骨疏康组骨微结构明显改善,血清雌激素无明显变化,但骨组织中ERα和ERβ蛋白量明显升高,说明骨疏康治疗绝经后骨质疏松症可能与其雌激素样作用和提高雌激素受体蛋白的表达有关。

关键词：骨疏康绝经后骨质疏松症雌激素受体α 雌激素受体β 雌激素信号通路网络药理学中医药

颈椎前路V形截骨Y形减压融合术治疗后纵韧带骨化症的临床疗效观察

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中国脊柱脊髓杂志 2024年第5期34卷 449-457页

作者：宋仁谦周英杰郑怀亮禚汉杰闫飞鸿王彦金河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)脊柱外科洛阳市471002

目的:观察颈椎前路V形截骨Y形减压融合术(anterior cervical V-osteotomy Y-decompression and fusion,ACVYF)治疗颈椎后纵韧带骨化症的临床疗效。方法:回顾性分析2018年6月~2022年10月在河南省洛阳正骨医院行手术治疗的60例单节段椎体... 详细信息

目的:观察颈椎前路V形截骨Y形减压融合术(anterior cervical V-osteotomy Y-decompression and fusion,ACVYF)治疗颈椎后纵韧带骨化症的临床疗效。方法:回顾性分析2018年6月~2022年10月在河南省洛阳正骨医院行手术治疗的60例单节段椎体层面后纵韧带骨化症患者的临床资料,其中30例采用ACVYF治疗(ACVYF组),男18例,女12例;年龄47~65岁(61.0±6.4岁),体质指数16.8~28.1kg/m^(2)(23.67±2.86kg/m^(2));病程10~80个月(37.5±20.1个月);手术节段:C32例、C45例、C513例、C610例。30例采用颈前路椎体次全切除减压融合术(anterior cervical corpectomy decompression and fusion,ACCF)治疗(ACCF组),男19例,女11例;年龄44~68岁(59.5±6.8岁);体质指数16.6~26.4kg/m^(2)(23.30±2.56kg/m^(2));病程13~72个月(35.8±18.8个月);手术节段:C33例、C46例、C512例、C69例。两组性别、年龄、体质指数、病程、手术节段等一般资料比较无统计学差异(P>0.05),具有可比性。比较两组手术时间、术中出血量、并发症;术前和术后1周、3个月、6个月、12个月进行颈椎日本骨科协会(Japanese Orthopaedic Association,JOA)评分,计算术后12个月时的JOA评分改善率;术前和术后1周、3个月、6个月和12个月在X线片上测量融合区高度、C2~7 Cobb角;术后3个月、6个月和12个月时在X线片或CT片上观察植骨融合情况。结果:两组患者均顺利完成手术,ACVYF组手术时间为88.2±19.7min,术中出血量为133.3±24.4mL;ACCF组手术时间为91.5+24.1min,术中出血量为137.7±29.4mL,两组手术时间和术中出血量比较均无统计学差异(P>0.05)。ACVYF组与ACCF组术后各有3例患者发生吞咽困难,1~2周后均自行缓解,随访期间无其他并发症发生,两组并发症发生率无统计学差异(P>0.05)。两组术后各时间点颈椎JOA评分与术前比较均有显著性改善(P0.05);两组术后各时间点融合区高度和C2~7 Cobb角与术前比较均有统计学差异(P0.05),术后6个月和术后12个月ACVYF组均大于ACCF组(P0.05)。ACVYF组术后3个月与6个月随访时植骨融合率(70.0%和93.3%)优于ACCF组(40.0%和73.3%)(P0.05)。结论:ACVYF能有效解除椎体层面后纵韧带对脊髓的压迫,改善患者神经功能;相较于ACCF,ACVYF能够更好地维持颈椎生理曲度,加快植骨融合。

关键词：后纵韧带骨化症颈椎前路V形截骨Y形减压融合术颈椎前路椎体次全切除减压融合术置入物沉降临床疗效