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基于16S rRNA测序技术探讨骨松益骨方对去卵巢大鼠肠道菌群的影响

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1752-1759页

作者：郑旭霞柴爽魏立伟张虹秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南郑州450016

目的基于肠道菌群探究骨松益骨方(GusongYigu decoction,GSYG)治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制。方法SPF级SD大鼠60只随机分成假手术组(Control)、模型组(Model)、骨松益骨方低剂量组(GSYG-L,1.25 g·kg^(-1))、骨松益骨方中剂量组(GSYG-M,2.5 g·kg^(-1)),骨松益骨方高剂量组(GSYG-H,5 g·kg^(-1))和阿仑膦酸钠组(Al,0.89 mg·kg^(-1)),每组10只。HE染色观察骨组织形态变化,micro CT观察大鼠的股骨组织结构变化;取Control组、Model组、GSYG-H组大鼠结肠粪便样本,提取DNA,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与Control组比较,Model组大鼠骨小梁稀疏;BV/TV、***、Tb.N及BMD均明显降低(P<0.01),SMI、***明显升高(P<0.01);与Model组比较,GSYG-L、GSYG-M、GSYG-H组和Al组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,且BV/TV、***、Tb.N及BMD明显增加(P<0.05),SMI、***明显降低(P<0.05)。肠道菌群测序结果显示,与Control组比较,Model组大鼠肠道菌群多样性降低,厚壁菌门丰度降低,而拟杆菌门丰度增加;与Model组比较,GSYG-H组厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度减少。结论GSYG能够改善PMOP患者的骨微结构,增加骨密度,其作用机制可能与增加肠道菌群的多样性、调节肠道菌群结构有关。

关键词：骨松益骨方绝经后骨质疏松症肠-骨轴肠道菌群 16S rRNA 骨密度

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及促进胫骨的生长

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3216-3222页

作者：宁桃丽谢艳王娜王庆丰吉建张冬纳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471000

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的... 详细信息

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的影响。方法:①体外实验:取对数生长期的大鼠胫骨及股骨生长板软骨细胞,分组培养:正常对照组、模型对照组(加入17β雌二醇诱导细胞凋亡)、阳性对照组(加入来曲唑与17β雌二醇)、葡萄籽提取物组(加入17β雌二醇和10μg/mL葡萄籽提取物)、Caspase-9抑制剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9抑制剂)、Caspase-9激动剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9激动剂),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。②体内实验:将30只3月龄SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组及药物低、中、高剂量组,每组5只,均皮下注射17β雌二醇(3次/周)建立骨骺闭合模型,阳性对照组灌胃给予来曲唑,药物低、中、高剂量组分别灌胃给予0.05,0.2,0.8 g/kg的葡萄籽提取物,1次/d,直至模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上停药,观察各组大鼠胫骨长度。将18只SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、药物中剂量组,每组6只,按照如上方法处理,连续给药1.5个月后,Western blot检测大鼠胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达。结果与结论:①体外实验:17β雌二醇可诱发生长板软骨细胞的凋亡,而来曲唑、葡萄籽提取物与Caspase-9抑制剂均可抑制生长板软骨细胞的凋亡;②体内实验:当模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上时,阳性对照组、药物中剂量组骨骺闭合数量少于模型对照组(P<0.05),且胫骨长度大于模型对照组(P<0.05),胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达低于模型对照组(P<0.05);③结果表明:适宜浓度的葡萄籽提取物可有效抑制生长板软骨细胞的凋亡并延迟骨骺闭合,具有促进骨骼生长的潜能。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞细胞凋亡骨骺闭合 Casepase-9

旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的应用

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中华骨科杂志 2024年第10期44卷 669-675页

作者：周英杰王彦金禚汉杰柴旭斌徐铖菡郝宇鹏河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)脊柱外科洛阳471002

目的探讨旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的有效性和安全性。方法回顾性分析2017年4月至2022年10月于河南省洛阳正骨医院接受旋转椎弓法显露椎管并回植联合肿瘤切除的胸腰椎椎管内良性肿瘤患者17例,男9例、女8例,年龄... 详细信息

目的探讨旋转椎弓法显露椎管并回植在椎管内良性肿瘤切除术中的有效性和安全性。方法回顾性分析2017年4月至2022年10月于河南省洛阳正骨医院接受旋转椎弓法显露椎管并回植联合肿瘤切除的胸腰椎椎管内良性肿瘤患者17例,男9例、女8例,年龄(58.59±13.57)岁(范围29~75岁)。胸椎椎管内肿瘤7例、胸腰段椎管内肿瘤2例、腰椎椎管内肿瘤8例;手术节段为单节段6例、双节段8例、三节段3例。病程(20.35±16.58)个月(范围3~60个月)。组织病理学:神经鞘瘤9例、脊膜瘤5例、畸胎瘤2例、皮样囊肿1例。记录手术时间、术中出血量,观察术后椎管容积、内固定稳定性及椎板愈合情况。比较手术前后Cobb角、美国脊柱损伤协会(American spinal injury association,ASIA)分级和Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)的改善情况。结果17例患者均顺利完成手术并获得随访,随访时间为(10.5±2.4)个月(范围6~20个月)。手术时间(156.76±26.81)min(范围120~210 min),术中出血量(338.24±97.68)ml(范围200~600 ml)。术中无一例出现神经及血管损伤,1例因用力过度造成棘突不完全骨折,未特殊处理,术后随访愈合良好。术后引流量(147.06±31.58)ml(范围100~210 ml)。患者术前局部Cobb角为14.15°±6.58°,术后为14.73°±6.34°,差异无统计学意义(t=1.810,P=0.089)。患者术前ODI为63.65%±6.57%,末次随访降低至23.88%±4.21%,差异有统计学意义(t=53.359,P<0.001)。17例患者术前ASIA分级B级2例、C级9例、D级6例,末次随访时ASIA分级B级1例、C级4例、D级8例、E级4例,较术前明显改善,差异有统计学意义(Z=2.587,P=0.010)。所有患者切口均Ⅰ期愈合,无一例发生脑脊液漏、硬膜外血肿等并发症。术后6个月脊柱三维CT示无一例发生椎板移位、内固定松动、感染及断裂。结论旋转椎弓法显露椎管并回植联合肿瘤切除治疗椎管内良性肿瘤术后神经功能恢复良好,并发症发生率低,是治疗椎管内良性肿瘤安全、有效的手术方式。

关键词：椎管肿瘤椎板成形术

脑靶向寡核苷酸药物策略用于衰老相关脑部疾病治疗

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生物化学与生物物理进展 2024年第2期51卷 253-268页

作者：杨灏颖刘润涵房梦珂刘洋郑蒙河南大学淮河医院转化医学中心开封475004 河南大学生命科学学院河南省脑靶向生物纳米药物重点实验室开封475004

寡核苷酸药物近10年发展迅速,已有多款应用于临床治疗。因其设计便捷、序列灵活、特异性高,有望解决许多靶点难成药的困境,并且其临床转化周期和成本较低,目前已成为新兴生物技术药物研发的前沿领域。脑部疾病包括多种目前无法治愈的疾... 详细信息

寡核苷酸药物近10年发展迅速,已有多款应用于临床治疗。因其设计便捷、序列灵活、特异性高,有望解决许多靶点难成药的困境,并且其临床转化周期和成本较低,目前已成为新兴生物技术药物研发的前沿领域。脑部疾病包括多种目前无法治愈的疾病,如神经退行性疾病、胶质瘤、运动神经元疾病等,其中很多与年龄相关,被认为是衰老相关脑部疾病。因其病因复杂,许多靶点难成以药,同时由于脑部特殊屏障系统“血脑屏障”的存在,导致大部分药物无法实现脑部病灶的有效积累,众多小分子药物遭遇临床转化失败。寡核苷酸类药物的特异性和序列灵活性提供了新的成药可能性,但同样面临脑部递送的挑战。尽管目前已有多款寡核苷酸类药物应用于医疗市场,但脑靶向寡核苷酸药物仍然极为罕见,随着纳米递送和脑靶向基团研究的逐渐成熟,未来5~10年寡核苷酸药物用于脑部疾病治疗将成为可能。本文针对本领域重点话题如寡核苷酸药物临床批准的应用案例、脑靶向寡核苷酸药物的递送瓶颈和当前策略,以及衰老相关脑部疾病的寡核苷酸药物潜在靶点进行了梳理,同时对临床转化中的难点和面临的挑战展开了综述和讨论。

关键词：寡核苷酸药物血脑屏障脑部疾病老龄化疾病

雌激素受体在骨疏康治疗绝经后骨质疏松症中的作用与机制

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2574-2578页

作者：柴爽马江涛杨岩冰苏晓川谢艳滕军燕秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省郑州市450016

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后... 详细信息

背景:骨疏康作为治疗绝经后骨质疏松症肾虚血瘀证的中成药,其具体作用机制需深入研究。目的:研究骨疏康对去卵巢大鼠血清雌激素、骨微结构和雌激素受体的影响。方法:首先进行网络药理学分析,分别获取骨疏康有效成分、作用靶点和绝经后骨质疏松症的靶点,利用Cytoscape构建骨疏康有效成分-靶点网络,利用STRING数据库和Cytoscape进行蛋白互作分析(PPI)及核心靶点的筛选,利用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。然后建立去卵巢SD大鼠动物模型,骨疏康灌胃3个月,ELISA检测血清雌激素水平,microCT检测骨微结构,Western blot检测骨组织雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达。结果与结论:①网络药理学分析显示,骨疏康中共有132个有效成分,150个作用靶点,与1155个绝经后骨质疏松症靶点取交集,获得87个骨疏康治疗绝经后骨质疏松症的作用靶点。②构建骨疏康有效成分-靶点网络图发现处于核心位置的有效成分有槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素和异鼠李素,处于核心位置的靶点有NCOA2,ESR2,AR,F2,ESR1,PTGS1。③PPI分析及筛选后最终获得的靶点有MAPK8,ESR1,JUN,R3C1,RELA和FOS,其中ESR1为两次分析获得的共同核心靶点。④随后的KEGG富集分析显示雌激素、TNF、凋亡等信号通路,因此动物实验重点关注骨疏康对雌激素信号通路中不同亚型的雌激素受体的影响。⑤动物实结果显示,骨疏康组骨微结构明显改善,血清雌激素无明显变化,但骨组织中ERα和ERβ蛋白量明显升高,说明骨疏康治疗绝经后骨质疏松症可能与其雌激素样作用和提高雌激素受体蛋白的表达有关。

关键词：骨疏康绝经后骨质疏松症雌激素受体α 雌激素受体β 雌激素信号通路网络药理学中医药

骨松益骨方调控Beclin 1/Bcl-2对去卵巢大鼠骨细胞凋亡和自噬的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 655-661页

作者：有曼魏立伟柴爽郑旭霞孟璐张虹何广宏秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南洛阳471000

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大... 详细信息

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大鼠血清中P1NP和β-CTX的水平;Micro-CT测定股骨骨密度以及微结构的变化;HE染色检查骨组织的形态学变化;TUNEL染色观察骨细胞凋亡;免疫组化观察骨组织中LC3的变化;Western blot法检测大鼠胫骨近端Bcl2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP、LC3、Beclin1的表达变化;免疫共沉淀法检测Beclin1和Bcl-2的相互作用。结果与模型组相比,GSYG中、高剂量组的P1NP和β-CTX水平显著降低(P<0.01);GSYG各剂量组骨的微结构明显改善(P<0.01);骨小梁明显增多;骨细胞凋亡明显减少(P<0.01);Bcl-2的表达显著升高(P<0.01),Bax表达显著降低(P<0.05或P<0.01),GSYG高剂量组中的cleaved caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达显著降低(P<0.01),GSYG中、高剂量组的LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值与Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01);免疫组化染色显示,与模型组相比GSYG各剂量组LC3蛋白显著增加(P<0.05或P<0.01);免疫共沉淀的结果提示,模型组Beclin1和Bcl-2相互作用较强,而GSYG高剂量组中两者结合均减少。结论GSYG对OVX大鼠的骨质疏松发展有抑制作用,其机制与其调控Beclin 1/Bcl-2介导的凋亡与自噬有关。

关键词：骨松益骨方 Beclin 1 Bcl-2 凋亡自噬

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡促进胫骨生长

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2494-2499页

作者：张莎莎王娜李勇军河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)检验科河南省郑州市450000

背景:葡萄籽提取物具有抑制软骨细胞凋亡和衰老、改善骨关节炎作用,但是有关葡萄籽提取物对生长板软骨细胞凋亡及胫骨生长的影响尚不清楚。目的:探讨葡萄籽提取物对白细胞介素1β诱导大鼠生长板软细胞凋亡的作用及对胫骨生长的影响。方... 详细信息

背景:葡萄籽提取物具有抑制软骨细胞凋亡和衰老、改善骨关节炎作用,但是有关葡萄籽提取物对生长板软骨细胞凋亡及胫骨生长的影响尚不清楚。目的:探讨葡萄籽提取物对白细胞介素1β诱导大鼠生长板软细胞凋亡的作用及对胫骨生长的影响。方法:①细胞实验:体外分离、培养及鉴定SD大鼠生长板软骨细胞,实验分为对照组、模型组、葡萄籽提取物组、miR-138-5p NC组、miR-138-5p inhibitor组。对照组细胞常规培养;模型组细胞以20 ng/mL白细胞介素1β诱导生长板软骨细胞凋亡模型;葡萄籽提取物组加入20 ng/mL白细胞介素1β,同时加入10μmol/L葡萄籽提取物溶液共培养48 h;miR-138-5p NC组细胞转染5 nmol/L miR-138-5p NC 12 h后,其余操作同模型组;miR-138-5p inhibitor组细胞转染5 nmol/L miR-138-5p inhibitor 12 h后,其余操作同模型组。qRT-PCR检测miR-138-5p和caspase-3表达;荧光素酶报告实验分析miR-138-5p和caspase-3靶向关系;CCK-8检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测caspase-3、Bcl-2蛋白表达。②动物实验:实验分为正常对照组、葡萄籽提取物组和miR-138-5p inhibitor组,观察葡萄籽提取物对大鼠胫骨平台骨骺闭合及胫骨生长的影响。结果与结论:①miR-138-5p与caspase-3存在靶向关系。②与对照组相比,模型组细胞增殖能力显著降低,凋亡显著增加(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达降低(P<0.01),caspase-3表达增加(P<0.01);与模型组相比,葡萄籽提取物组细胞增殖能力显著增加,凋亡显著降低(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达升高(P<0.01),caspase-3表达降低(P<0.01);与葡萄籽提取物组相比,miR-138-5p inhibitor组细胞增殖能力显著降低,凋亡显著增加(P<0.01),miR-138-5p和Bcl-2表达降低(P<0.05或P<0.01),caspase-3表达增加(P<0.05)。③大鼠给予葡萄籽提取物灌胃处理后能够延缓胫骨平台骨骺闭合,促进胫骨生长,而给予miR-138-5p inhibitor干预后能够抑制葡萄籽提取物对大鼠胫骨生长的作用。④结果说明,葡萄籽提取物能够通过调控miR-138-5p/caspase-3通路抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡,改善大鼠胫骨平台骨骺闭合,促进胫骨生长。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞 miR-138-5p/caspase-3 胫骨生长凋亡

银杏二萜内酯葡胺注射液联合丙戊酸钠治疗老年卒中后癫痫的随机对照试验研究

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中国慢性病预防与控制 2024年第5期32卷 370-374页

作者：郭夏青李郭飞孙玉华郑东琳河南大学淮河医院神经内科一区河南省开封475000

目的研究银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)联合丙戊酸钠治疗老年卒中后癫痫(PSE)的临床疗效,为临床治疗PSE提供科学依据。方法选取2020年4月—2022年4月河南大学淮河医院收治的82例老年PSE患者随机分为对照组和联合治疗组,各41例。对照组... 详细信息

目的研究银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)联合丙戊酸钠治疗老年卒中后癫痫(PSE)的临床疗效,为临床治疗PSE提供科学依据。方法选取2020年4月—2022年4月河南大学淮河医院收治的82例老年PSE患者随机分为对照组和联合治疗组,各41例。对照组采用丙戊酸钠治疗,联合治疗组采用丙戊酸钠联合DGMI治疗。比较两组临床疗效,不良反应及治疗前、治疗14 d后简易智力状态检查(MMSE)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,白介素-2(IL-2)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)水平,脑电图检查指标。采用SPSS 22.0软件进行配对t检验、独立样本t检验以及χ^(2)检验。结果联合治疗组临床总有效率为(90.24%)高于对照组(73.17%),差异有统计学意义(P0.05)。结论DGMI联合丙戊酸钠治疗老年PSE效果显著,能有效调节患者机体血清炎性因子与氧化抗氧化因子水平,改善患者症状体征,且安全性较高。

关键词：卒中后癫痫银杏二萜内酯葡胺丙戊酸钠脑电图神经功能炎性因子

XEN引流管植入联合丝裂霉素C治疗开角型青光眼

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国际眼科杂志 2024年第6期24卷 965-969页

作者：赵茹梦崔慧玲任静王迪李海军郑州大学人民医院眼科河南省郑州市450003 中国河南省开封市中心医院&开封市眼病医院 475000 河南省人民医院河南省眼科研究所河南省郑州市450003 河南大学人民医院眼科河南省郑州市450003

目的:探讨XEN引流管植入联合丝裂霉素C(MMC)治疗开角型青光眼(OAG)的临床疗效和安全性。方法:回顾性纳入OAG患者37例37眼,按初始接受抗青光眼手术治疗与否分为初次青光眼手术组17例17眼,多次青光眼手术组20例20眼,记录各随访时间点眼压... 详细信息

目的:探讨XEN引流管植入联合丝裂霉素C(MMC)治疗开角型青光眼(OAG)的临床疗效和安全性。方法:回顾性纳入OAG患者37例37眼,按初始接受抗青光眼手术治疗与否分为初次青光眼手术组17例17眼,多次青光眼手术组20例20眼,记录各随访时间点眼压、降眼压药物种类及并发症,术后随访时间大于1 a。结果:术后1 a,初次与多次青光眼手术组眼压分别从术前27.56±9.94、28.43±14.18 mmHg降至15.16±3.65、17.18±5.83 mmHg,分别下降55.01%和60.43%(t=4.863,P<0.001;t=3.255,P=0.004)。术后不同时间点两组眼压均较术前降低,时间有差异(F_(时间)=6.876,P_(时间)<0.001),组间及交互均无差异(F_(组间)=0.242,P_(组间)=0.626;F_(时间×组间)=0.959,P_(时间×组间)=0.458)。两组手术完全成功率分别为47%、45%,条件成功率为76%、75%(Z=-0.115,P=0.909),完全成功与条件成功累积生存率分析均无差异(χ^(2)=0.042,P=0.838;χ^(2)=0.004,P=0.949)。术后1 a随访时两组降眼压药物均由术前的3(2,3)种减少为1(0,2)种(Z=-3.289、-3.796,均P<0.001),组间无差异(Z=-0.581,P=0.561)。术后短期并发症以低眼压为主,前房出血次之,远期并发症以滤过泡包裹为主,除外引流管暴露及脱落各1眼,无其他严重并发症发生。结论:XEN引流管植入联合MMC治疗初次与多次青光眼手术OAG患眼均安全有效,但多次青光眼手术组滤过泡包裹发生率高。

关键词： XEN引流管植入术开角型青光眼微创青光眼手术丝裂霉素C