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异甘草素通过激活自噬抑制巨噬细胞中结核杆菌生存的实验研究

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辽宁中医杂志 2024年第4期51卷 200-204,I0004页

作者：李彬河南省中医院肺病科河南郑州450002

目的探究异甘草素对H37Ra感染的巨噬细胞中结核杆菌的抑制作用及其涉及的机制。方法以5、10、25、50、75、100μmol/L异甘草素处理RAW264.7细胞24、48、72 h,MTT检测细胞活力。细胞被H37Ra感染6 h后:(1)利用10、25或50μM异甘草素处理细... 详细信息

目的探究异甘草素对H37Ra感染的巨噬细胞中结核杆菌的抑制作用及其涉及的机制。方法以5、10、25、50、75、100μmol/L异甘草素处理RAW264.7细胞24、48、72 h,MTT检测细胞活力。细胞被H37Ra感染6 h后:(1)利用10、25或50μM异甘草素处理细胞24 h;(2)利用50μg/mL雷帕霉素处理细胞2 h;(3)利用50μmol/L异甘草素和30 pg/mL EGF[epidermal growth factor,一种PI3K(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase)/AKT激活剂]或5mM 3MA(一种自噬抑制剂)共处理细胞24 h。利用计数法测量细菌菌落总数;利用Western blotting检测PI3K/AKT/mTOR通路蛋白和自噬标志蛋白表达;利用免疫荧光检测LC3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3)蛋白表达。结果不同浓度异甘草素处理不影响细胞活力。异甘草素或雷帕霉素处理感染后细胞显著减少细菌菌落总数,激活PI3K/AKT/mTOR通路,促进LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白相对表达量,增强LC3荧光强度,并抑制P62蛋白相对表达量。EGF处理逆转异甘草素诱导的自噬激活。3MA处理逆转异甘草素诱导的细菌菌落数下降。结论异甘草素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路,激活自噬,抑制感染H37Ra的巨噬细胞中结核杆菌生长。

关键词：异甘草素 PI3K/AKT/mTOR通路自噬 H37Ra 巨噬细胞

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山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响

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中国老年学杂志 2024年第18期 4475-4480页

作者：苗喜云王慧莲孟庆良左瑞庭马俊福范围展俊平河南省中医院风湿病科

目的探讨山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症应答的影响及潜在分子机制。方法采用肿瘤坏死因子(TNF)-α(10 ng/ml)刺激成纤维细胞样滑膜细胞系MH7A细胞24 h,建立体外炎症模型。将细胞分为对照组(无处理)、T... 详细信息

目的探讨山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症应答的影响及潜在分子机制。方法采用肿瘤坏死因子(TNF)-α(10 ng/ml)刺激成纤维细胞样滑膜细胞系MH7A细胞24 h,建立体外炎症模型。将细胞分为对照组(无处理)、TNF-α组(加入10 ng/ml的TNF-α)和TNF-α+山姜素低、中、高剂量组(加入10 ng/ml的TNF-α培养12 h,再加入5、10或20μmol/L的山姜素培养24 h)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和RT-q聚合酶链反应(PCR)分别检测细胞培养液上清液和细胞中白介素(IL)-6和IL-1β水平，噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖能力，TUNEL染色法和流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、p-p65、磷酸化核因子(NF)-κB抑制蛋白(p-IκBα)、p65、IκBα和Toll样受体(TLR)4蛋白表达。结果与对照组比较，TNF-α组MH7A培养液上清液中IL-6和IL-1β含量及细胞中IL-6和IL-1β mRNA水平、细胞增殖率、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα和TLR4蛋白表达明显升高(P<0.05);采用山姜素干预后，IL-6和IL-1β mRNA及含量、Bcl-2、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα及TLR4蛋白表达、细胞增殖率明显降低，细胞凋亡率、Bax蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论山姜素可降低TNF-α诱导的MH7A细胞增殖能力，并促进其凋亡，同时抑制炎症应答反应，其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路活化有关。

关键词：山姜素类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 MH7A细胞 Toll样受体(TLR)4/NF-κB通路

补充胍基乙酸和α-硫辛酸对绵羊瘤胃微生物和代谢物的影响

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2375-2387页

作者：姜露梁本聪徐泽君杨改青杨斯涵陈其新王献伟胡业勇王林枫高腾云河南省畜牧技术推广总站郑州450008 河南农业大学实验室与设备管理办公室郑州450046 河南农业大学动物科技学院郑州450046 河南省商丘市宁陵县豫东牧业开发有限公司宁陵476700

【目的】探究饲粮中添加胍基乙酸(guanidine acetic acid, GAA)和α-硫辛酸(alpha-lipoic acid, LA)对绵羊瘤胃微生物和代谢物的影响。【方法】选取24只体重相近、体质良好的健康杜湖杂交公羊,随机分为4组,分别为对照组(CTL,饲喂基础饲... 详细信息

【目的】探究饲粮中添加胍基乙酸(guanidine acetic acid, GAA)和α-硫辛酸(alpha-lipoic acid, LA)对绵羊瘤胃微生物和代谢物的影响。【方法】选取24只体重相近、体质良好的健康杜湖杂交公羊,随机分为4组,分别为对照组(CTL,饲喂基础饲粮)、GAA组(基础饲粮中添加1 500 mg/kg GAA)、LA组(基础饲粮中添加600 mg/kg LA)和MIX组(基础饲粮中添加1 500 mg/kg GAA和600 mg/kg LA),正试期60 d。试验结束后采集瘤胃液,利用16S rRNA基因测序和非靶向代谢组学检测瘤胃菌群及其代谢物。【结果】在绵羊瘤胃液菌群门水平上,与对照组相比,GAA和MIX组帕特斯菌门(Patescibacteria)的丰度显著上调(P<0.05);LA和MIX组疣微菌门(Verrucomicrobiota)的丰度显著下调(P<0.05)。在绵羊瘤胃液菌群属水平上,与对照组相比,LA组奎因氏菌属(Quinella)的丰度显著降低(P<0.05);各试验组糖单胞菌属(Candidatus_Saccharimonas)的丰度显著升高(P<0.05),图氏杆菌属(Turicibacter)的丰度显著降低(P<0.05);GAA组隆氏菌科UCG-001属(Veillonellaceae_UCG-001)的丰度显著降低(P<0.05);MIX组瘤胃艾氏梭菌属(Eubacterium_Ruminantium_group)的丰度显著降低(P<0.05)。绵羊瘤胃菌群代谢途径分析显示,GAA组的差异代谢物11-羟基过氧十八碳二烯酸、8-甲氧基犬尿氨酸等主要参与色氨酸代谢通路;LA组的差异代谢物1-磷酸鞘氨醇、二氢神经酰胺等主要参与鞘脂信号通路和鞘脂类代谢通路;MIX组的差异代谢物8-甲氧基犬尿氨酸、单磷酸鸟苷、3-甲基吲哚等主要参与色氨酸代谢通路。【结论】饲粮中单独添加GAA或LA以及组合添加均能够调节绵羊瘤胃微生物群落组成和代谢功能。该结果有助于揭示GAA和LA作为添加剂的深层次原理。

关键词：绵羊胍基乙酸(GAA) α-硫辛酸(LA) 瘤胃微生物代谢物

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依托语篇开展高中英语词汇教学的策略探讨

中文科技期刊数据库（文摘版）教育 2024年第8期 0084-0086页

作者：杨雪洁宁陵县高级中学河南商丘476700

伴随着新课改教学进程的不断推进,高中英语教师在开展实际教学工作时,应当注重培养学生良好的学习能力以及思维品质,使其可以更好地完成学习任务,获得身心的健康发展。在高中英语知识结构中,词汇内容占据着重要的地位。为此,教师应当强... 详细信息

伴随着新课改教学进程的不断推进,高中英语教师在开展实际教学工作时,应当注重培养学生良好的学习能力以及思维品质,使其可以更好地完成学习任务,获得身心的健康发展。在高中英语知识结构中,词汇内容占据着重要的地位。为此,教师应当强化学生的词汇掌握与应用能力。使其可以更好地进入到学习状态,获得英语核心素养的显著提升。在具体实施过程中,教师可以利用语篇,实施高中英语词汇教学,帮助学生夯实英语基础。

关键词：高中英语词汇教学语篇内容教学策略

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平菇栽培技术

河南农业 2024年第11期 22-24页

作者：石艳丽宁陵县农业农村局

平菇为侧耳属食用菌的统称,俗名有冻菌、蚝菌、鲍鱼菇等,在我国南北各地广泛种植,成为国家出口的主要食用菌。平菇肉肥质嫩,味道鲜美,营养丰富,是一种能增强体质,减少胆固醇、降低血压,对女性更年期综合征及神经功能紊乱有显著疗效的保... 详细信息

平菇为侧耳属食用菌的统称,俗名有冻菌、蚝菌、鲍鱼菇等,在我国南北各地广泛种植,成为国家出口的主要食用菌。平菇肉肥质嫩,味道鲜美,营养丰富,是一种能增强体质,减少胆固醇、降低血压,对女性更年期综合征及神经功能紊乱有显著疗效的保健食品。平菇栽培由于具有周期短、方法简单、生料种植、不择地方和培养料下脚料可作为饲料等优点,越来越受到种植户的重视,平菇栽培在河南省的优势很大。

关键词：平菇栽培鲍鱼菇侧耳属种植户培养料营养丰富食用菌保健食品

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基于“阳化气，阴成形—玄府”理论探析慢性肝病微观机制及理药新思

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：许钰颖赵长普李荣枝张雨王菲郝晨源束光杰河南中医药大学河南省中医院郑州大学

《道德经》言：“道法自然”。“道”即规律、法则，是物质世界运动变化的普遍规律和万事万物必须遵循的基本原则。道为肇始，分化阴阳。《黄帝内经》中的“阳化气，阴成形”理论以化、成之用、变、动、衡衍生万物，高度凝练彰显道之含... 详细信息

《道德经》言：“道法自然”。“道”即规律、法则，是物质世界运动变化的普遍规律和万事万物必须遵循的基本原则。道为肇始，分化阴阳。《黄帝内经》中的“阳化气，阴成形”理论以化、成之用、变、动、衡衍生万物，高度凝练彰显道之含义本真，指导自然万物包括疾病的发生变化进展。故万千实体病状的表象皆是阴阳气化的应象。玄府由阴阳气化形成所涵养司调，其为枢纽、通道，佐助气之出入变化，实现与外界物质、能量、信息的交换。以玄府为转枢，基于阳化气，阴成形的宏观调控、整体思想下探析慢性肝病的微观机制，结合线粒体、外泌体、超微肝筛结构在慢性肝病形成进展中的作用机制，阐释在该理论指导下慢性肝病的本始之质、症状标象与其生理病理功能的密切内在关联性。现代研究表明，细胞自噬、肠道菌群失调、糖脂代谢紊乱、炎症因子激活、铁死亡等相关微观病理机制参与慢性肝病的发生发展，深刻剖析祖国医学的阴阳理念与现代医学的病理机制的共同内涵，总结出相关微观病理机制与“阳化气，阴成形—玄府”理论对慢性肝病发挥的指导统调作用的对应性。风药升生，透转玄府；辛甘合化，振阳散阴，具风药之性和辛甘合化之义的方药契合“阳化气，阴成形—玄府”理法之机。本文将辨宏观—辨微观相结合，旨在基于“阳化气，阴成形—玄府”理论解释慢性肝病的科学内涵和微观病理机制，并探索出辛甘合化、振阳启玄散阴之理法方药对慢性肝病的防治作用，为慢性肝病的临床治疗提供新思路与借鉴参考。

关键词：阳化气,阴成形玄府慢性肝病微观机制理法方药

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以深度学习为导向的初中化学任务驱动教学

天津教育 2024年第10期 186-188页

作者：吴新敬河南省商丘市宁陵县孔集乡第二初级中学

以任务驱动教学法为抓手,以促进学生在化学课程中实现深度学习,形成化学核心素养为主旨,本文在简要概括任务驱动教学法特征及初中生深度学习表现的基础上,立足初中化学课程教学实际,对在初中化学课程教学中应用任务驱动教学法,促进学生... 详细信息

以任务驱动教学法为抓手,以促进学生在化学课程中实现深度学习,形成化学核心素养为主旨,本文在简要概括任务驱动教学法特征及初中生深度学习表现的基础上,立足初中化学课程教学实际,对在初中化学课程教学中应用任务驱动教学法,促进学生深度学习发生的策略进行思考,主要体现在布置前置任务、创设任务情境、组建任务小组三个方面,旨在推动初中生化学学习方式由“理解认识”到“探究实践”的转变,使其化学核心素养实现有机形成与协调发展。

关键词：深度学习初中化学任务驱动教学法化学核心素养探究实践化学课程任务情境教学中应用

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基于p38 MAPK/MLCK信号通路探讨通腑泻肺灌肠液对急性肺损伤大鼠肠道屏障及肠道菌群的影响

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中国中药杂志 2024年

作者：马鸣汪坤杨艳华岳孟茹任权娜陈雨晗宋永真徐子福赵旭河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院周口市中医院河南中医药大学

该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液（TFXF）通过p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/肌球蛋白轻链激酶（MLCK）信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照（CON）组、脂多糖(LP... 详细信息

该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液（TFXF）通过p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/肌球蛋白轻链激酶（MLCK）信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照（CON）组、脂多糖(LPS，7.5 mg·kg-1)组、LPS+地塞米松(DEX，3.5 mg·kg-1)组、LPS+高剂量(HD，14.74 g·kg-1)-TFXF组、LPS+中剂量(MD，7.37 g·kg-1)-TFXF组、LPS+低剂量(LD，3.69 g·kg-1)-TFXF组。腹腔注射LPS建立大鼠急性肺损伤（ALI）模型。测试大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白浓度和乳酸脱氢酶（LDH）活性；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠肺组织和结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）等炎症因子水平；苏木素-伊红（HE）染色法检测大鼠肺组织和结肠组织的病理表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR）检测大鼠肺组织p38 MAPK、TNF-α和IL-1β mRNA表达；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测大鼠结肠组织中p38 MAPK/MLCK信号通路相关蛋白表达；16S rRNA测序检测大鼠肠道菌群组成及含量变化，相关性分析探讨肠道菌群改善ALI大鼠的调节作用。结果显示，与LPS组比较，各给药组大鼠肺及结肠组织病理学评分、BALF中LDH活性和总蛋白浓度均明显降低；除LPS+LD-TFXF组外，其余给药组均能显著降低大鼠肺组织及结肠组织中TNF-α和IL-1β含量显著降低；各给药组大鼠结肠组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）/p38、磷酸化肌球蛋白轻链（p-MLC）/肌球蛋白轻链2（MLC2）和MLCK蛋白表达明显降低；LPS+HD-TFXF组肺组织p38 MAPK、TNF-α和IL-1β mRNA表达水平显著降低。16S rRNA测序结果显示，LPS+HD-TFXF组肠道菌群丰度显著升高，肠道菌群sobs、shannon、npshannon指数均显著升高，肠道微生物β多样性分布趋向于CON组，厚壁菌门显著升高、变形杆菌门显著降低，拟杆菌属丰度显著降低，瘤胃球菌属显著升高，物种差异主要为经黏液真杆菌属Blautia、罗氏菌499（Roseburia＿sp＿499）、丁酸球菌属Butyricicoccus等。大鼠肺组织TNF-α和1L-1β分别与Muri菌属、未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关，与拟杆菌属呈显著正相关；大鼠结肠组织TNF-α和1L-1β分别与未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关，与拟杆菌属呈显著正相关。预测菌群生物功能与次生代谢物的生物合成、氨基酸的生物合成、糖代谢和氧化磷酸化等相关。上述研究表明，通腑泻肺灌肠液可调节ALI大鼠肠道菌群物种的丰度和多样性，修复肺及结肠组织结构，调节炎性因子水平。其治疗急性肺损伤大鼠的作用机制可能与通过p38 MAPK/MLCK信号通路抑制炎症，改善肠黏膜通透性，维持肠道菌群稳态和屏障有关。

关键词：通腑泻肺灌肠液急性肺损伤 16S rRNA测序肠道屏障 p38 MAPK/MLCK信号通路

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及促进胫骨的生长

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3216-3222页

作者：宁桃丽谢艳王娜王庆丰吉建张冬纳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471000

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的... 详细信息

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的影响。方法:①体外实验:取对数生长期的大鼠胫骨及股骨生长板软骨细胞,分组培养:正常对照组、模型对照组(加入17β雌二醇诱导细胞凋亡)、阳性对照组(加入来曲唑与17β雌二醇)、葡萄籽提取物组(加入17β雌二醇和10μg/mL葡萄籽提取物)、Caspase-9抑制剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9抑制剂)、Caspase-9激动剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9激动剂),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。②体内实验:将30只3月龄SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组及药物低、中、高剂量组,每组5只,均皮下注射17β雌二醇(3次/周)建立骨骺闭合模型,阳性对照组灌胃给予来曲唑,药物低、中、高剂量组分别灌胃给予0.05,0.2,0.8 g/kg的葡萄籽提取物,1次/d,直至模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上停药,观察各组大鼠胫骨长度。将18只SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、药物中剂量组,每组6只,按照如上方法处理,连续给药1.5个月后,Western blot检测大鼠胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达。结果与结论:①体外实验:17β雌二醇可诱发生长板软骨细胞的凋亡,而来曲唑、葡萄籽提取物与Caspase-9抑制剂均可抑制生长板软骨细胞的凋亡;②体内实验:当模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上时,阳性对照组、药物中剂量组骨骺闭合数量少于模型对照组(P<0.05),且胫骨长度大于模型对照组(P<0.05),胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达低于模型对照组(P<0.05);③结果表明:适宜浓度的葡萄籽提取物可有效抑制生长板软骨细胞的凋亡并延迟骨骺闭合,具有促进骨骼生长的潜能。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞细胞凋亡骨骺闭合 Casepase-9

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