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茯苓酸通过Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路调控铁死亡改善阿尔茨海默病大鼠认知障碍的研究

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中国全科医学 2024年第2期27卷 177-183页

作者：樊赟窦润鹏胡久略侯紫君周春祥南京中医药大学江苏省南京市210046 河南省南阳市中心医院 473000 南阳理工学院张仲景国医国药学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南省南阳市473000

背景阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展。中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力。目的探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核... 详细信息

背景阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展。中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力。目的探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7A11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路的影响。方法2022年1—9月将75只6~8周龄雄性SPF级SD大鼠依据随机数字表法分为对照组(Control组)、AD模型组(Model组)、PA治疗组(PA组),PA+Nrf2抑制剂组(PA+ML385组),除Control组外制备AD大鼠模型。造模成功后,PA组腹腔注射50 mg/kg PA,PA+ML385组腹腔注射50 mg/kg PA+30 mg/kg Nrf2抑制剂ML385,Control组与Model组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。末次给药24 h后进行Morris水迷宫实验,第2、4、6天进行定位航行实验,记录大鼠到达平台的时间(逃避潜伏期),第7天移走平台,记录大鼠在120 s内滞留平台时间和穿越平台次数。Nissl染色后观察各组大鼠海马神经元病理变化,普鲁士蓝染色检测海马组织铁沉积,免疫荧光染色检测海马神经元GPX4表达,检测海马组织谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe2+含量,蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠海马组织Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果末次给药第2、4、6天Model组逃避潜伏期高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组平台停留时间、穿越平台次数低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。Nissl染色结果示Model组神经元坏死严重,细胞核皱缩,尼氏体数目减少;PA组神经元坏死减少,排列紧密且尼氏体增多;PA+ML385组神经元损伤明显加重,尼氏体数目减少。普鲁士蓝染色结果示Model组铁沉积较Control组增加,与Model组比较,PA组铁沉积减少,PA+ML385组较PA组铁沉积增多。免疫荧光染色结果示Model组绿色荧光减弱,GPX4阳性细胞减少,PA组细胞绿色荧光较Model组增强,GPX4阳性细胞增多,PA+ML385组较PA组GPX4阳性细胞减少。Model组GSH低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组MDA、Fe2+高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Model组Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白相对表达量低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PA可改善AD大鼠认知障碍,其机制可能与通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡有关。

关键词：阿尔茨海默病茯苓酸核因子E2相关因子2/溶质载体家族7A11/GPX4信号通路铁死亡大鼠

基于硬皮病线粒体相关基因的人工神经网络模型的构建

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 920-929页

作者：左志威孟庆良崔家康郭克磊卞华河南中医药大学骨伤学院//河南省中医院风湿病科河南郑州450008 南阳理工学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南南阳473004

目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归... 详细信息

目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归和SVM算法筛选硬皮病线粒体相关特征基因,并用特征基因构建人工神经网络模型,用10折交叉验证模型准确性。来用验证数据集GSE76807对模型进一步验证,利用ROC曲线下面积值评估模型准确性。用RT-qPCR实验验证关键基因mRNA相对表达量。最后用CIBERSORT算法预估硬皮病与筛选出的潜在生物标志物的生物信息学关联。结果共获取差异基因24个,其中上调基因11个,下调基因13个。通过3种机器学习算法筛选到最相关的7个线粒体相关特征基因(POLB、GSR、KRAS、NT5DC2、NOX4、IGF1、TGM2),并构建人工神经网络诊断模型。使用该模型绘制了实验组和验证组诊断的ROC曲线,AUC值为0.984。验证组AUC为0.740。10折交叉验证AUC平均值大于0.980。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,硬皮病中POLB(P=0.004)、GSR(P=0.029)、KRAS(P=0.007)、NOX4(P=0.019)、IGF1(P=0.008)、TGM2(P<0.0001)表达量明显上调,而NT5DC2(P=0.001)表达量在硬皮病组中明显下调。免疫细胞浸润显示,特征基因与滤泡辅助T细胞、幼稚B细胞、静息树突状细胞、记忆激活CD4+T细胞、巨噬细胞M0、单核细胞、记忆静息CD4+T细胞和肥大细胞激活等相关。结论构建了硬皮病特征基因的人工神经网络诊断模型,为探索硬皮病发病机制提供了一个新视角。

关键词：硬皮病线粒体人工神经网络免疫细胞浸润机器学习

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南阳艾内生菌与关键次生代谢产物的相关性探究

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：李孟芝李超崔占虎韦艳朱琳黄显章南阳理工学院张仲景国医国药学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南大学附属南阳市第一人民医院

目的通过分析南阳艾不同部位内生菌菌群结构多样性及其与关键次生代谢产物含量之间的关系，探究南阳艾内生菌对其药材品质的影响。方法本研究采用高通量测序技术分析南阳艾不同组织内生菌群落的多样性和组成；利用高效液相色谱技术检... 详细信息

目的通过分析南阳艾不同部位内生菌菌群结构多样性及其与关键次生代谢产物含量之间的关系，探究南阳艾内生菌对其药材品质的影响。方法本研究采用高通量测序技术分析南阳艾不同组织内生菌群落的多样性和组成；利用高效液相色谱技术检测南阳艾不同组织中关键代谢产物的含量；进而通过皮尔逊相关性分析，筛选与南阳艾关键次生代谢产物显著相关的内生菌群落。结果南阳艾内生细菌和真菌多样性和组成具有显著组织差异，根中细菌和真菌多样性指数（Chao和Ace）均显著高于茎和叶。通过LEfSe分析，确定根瘤菌属、链霉菌属、黄单胞菌科、子囊菌纲等为南阳艾生物标记物。相关性分析的结果表明，根瘤菌属、假单胞菌属、黄杆菌属、链霉菌属、曲霉属、油壶菌属等属的丰度与部分苯丙素类和黄酮类代谢物的含量呈现显著正相关（P南阳艾次生代谢物显著相关的内生菌群落，为进一步分离南阳艾关键次生代谢产物相关的内生菌株，提升南阳艾的品质提供了科学依据。

关键词：南阳艾内生菌多样性组成次生代谢产物

MSCT对食管癌患者术前临床分期诊断及复发预测的价值分析

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实用癌症杂志 2024年第5期39卷 800-802,808页

作者：刘庆轲蒋烈夫任统伟杨贤增河南省南阳张仲景医院 473000

目的探讨MSCT对食管癌患者术前临床分期诊断及复发预测的价值。方法回顾性选取108例食管癌患者,术前均进行MSCT检查,以手术病理检查为金标准,分析MSCT对食管癌者T、N分期的诊断价值及复发预测价值。结果MSCT检查诊断食管癌T分期:T17例、... 详细信息

目的探讨MSCT对食管癌患者术前临床分期诊断及复发预测的价值。方法回顾性选取108例食管癌患者,术前均进行MSCT检查,以手术病理检查为金标准,分析MSCT对食管癌者T、N分期的诊断价值及复发预测价值。结果MSCT检查诊断食管癌T分期:T17例、T221例、T347例、T423例,诊断准确率为90.7%,与病理检查诊断结果的一致性较好(Kappa=0.88);MSCT检查诊断食管癌N分期:N085例、N114例,诊断准确率为91.7%,与病理检查诊断结果的一致性较好(Kappa=0.82)。患者的性别、年龄、T分期及化疗和GTV-L与患者有无复发均无相关性,而在复发的患者中N1分期、GTV-D≥3.5 cm、GTV-V≥23.8 cm^(3)和GTV-V/L≥3.5 cm^(2)的患者占比较高(P均<0.05);Logistic回归分析结果显示,GTV-D、GTV-V和N分期均是食管癌患者复发的独立影响因素(P<0.05)。结论MSCT对食管癌术前分期及复发风险预测有着非常高的临床价值,且发现GTV-D、GTV-V和淋巴结转移是食管癌复发的独立危险因素,因此MSCT可作为食管癌术前评估的主要检查方式。

关键词：多层螺旋CT 食管癌诊断复发预测价值

基于网络药理学探讨黄芪-丹参药对治疗慢性肾小球肾炎的作用机制(英文)

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2024年

作者：齐年景杨明勋毛姗南阳张仲景医院南阳医学高等专科学校

本研究基于网络药理学方法探讨黄芪-丹参药对治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的作用机制。通过TCMSP数据库搜集黄芪、丹参的化学成分、靶点，在Genecards数据库搜集CGN的疾病靶点，将两者进行交集取交集基因即为黄芪-丹参药对治疗CGN的潜在... 详细信息

本研究基于网络药理学方法探讨黄芪-丹参药对治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的作用机制。通过TCMSP数据库搜集黄芪、丹参的化学成分、靶点，在Genecards数据库搜集CGN的疾病靶点，将两者进行交集取交集基因即为黄芪-丹参药对治疗CGN的潜在靶点。构建蛋白互作网络及“化学成分-靶点”网络，对核心靶点进行GO及KEGG 信号通路富集分析。结果发现，黄芪、丹参化学成分分别为20、65个，两者对应靶点共240个，筛选出治疗CGN的潜在靶点86个，其核心靶点29个，包括TNF、JUN、TP53、IL1B、RELA、MMP9、CASP3、IL10、MAPK14、MYC、TGFB1等。KEGG富集分析得到与CGN相关的信号通路包括IL-17 信号通路、TNF信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等。结果可得，黄芪-丹参药对可能通过TNF、JUN、TP53、IL1B、MAPK14等对IL-17 信号通路、TNF信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等来改善炎症反应及血管钙化发挥抗炎、改善肾损伤的作用。

关键词：黄芪丹参慢性肾炎药对信号通路

温阳化浊通络方对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第9期40卷 1301-1305页

作者：陈爽李凯卞博郭克磊卞华刘畅徐经纬河南中医药大学骨伤学院河南郑州450000 南阳理工学院张仲景国医国药学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南南阳473004

目的研究温阳化浊通络方基于线粒体自噬对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响。方法将50只小鼠随机分为空白对照组(0.9%NaCl,灌胃)、对照组(0.9%NaCl,灌胃)、模型组(0.9%NaCl,灌胃)、温阳化浊通络方组(47 mg·kg^(-1)·d^(-1)温阳化浊通络方... 详细信息

目的研究温阳化浊通络方基于线粒体自噬对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响。方法将50只小鼠随机分为空白对照组(0.9%NaCl,灌胃)、对照组(0.9%NaCl,灌胃)、模型组(0.9%NaCl,灌胃)、温阳化浊通络方组(47 mg·kg^(-1)·d^(-1)温阳化浊通络方,灌胃)、阳性对照组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)KC7F2溶解于磷酸盐缓冲液,腹腔注射),持续给药4周。以免疫组化法检测肺组织线粒体外膜易位酶20(TOMM20)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、B细胞淋巴瘤-2/腺病毒E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)、PTEN诱导性肌酶蛋白1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)的表达水平;以蛋白质印迹(Western blot,WB)法检测肺组织微血管内皮细胞线粒体自噬相关蛋白TOMM20、LC3B及HIF-1α/BNIP3/PINK1/Parkin通路蛋白表达水平。结果对照组、模型组、温阳化浊通络方组和阳性对照组小鼠肺组织微血管内皮细胞HIF-1α相对含量分别为0.17±0.02、0.98±0.01、0.66±0.03和0.48±0.01,BNIP3相对含量分别为0.40±0.02、0.74±0.01、0.56±0.01和0.60±0.02,PINK1相对含量分别为0.26±0.04、0.88±0.01、0.65±0.02和0.67±0.02,Parkin相对含量为分别为0.33±0.02、0.89±0.01、0.65±0.02和0.77±0.02,TOMM20相对含量分别为1.10±0.02、0.58±0.01、1.02±0.01和0.98±0.03,LC3B-Ⅰ/LC3B-Ⅱ相对含量分别为0.24±0.01、0.80±0.01、0.53±0.02和0.70±0.02。模型组中HIF-1α、BNIP3、PINK1、Parkin、LC3B-Ⅰ/LC3B-Ⅱ蛋白含量高于对照组,温阳化浊通络方可有效降低其含量;模型组中TOMM20含量低于对照组,温阳化浊通络方可有效提高其含量。结论温阳化浊通络方可能通过增加TOMM20和抑制LC3B及HIF-1α/BNIP3/PINK1/Parkin信号通路的蛋白表达,进而抑制线粒体自噬,改善SSc肺微血管损伤。

关键词：温阳化浊通络方硬皮病线粒体自噬缺氧诱导因子-1α B细胞淋巴瘤-2/腺病毒E1B-19 kDa相互作用蛋白3 PTEN诱导性肌酶蛋白1 E3泛素连接酶

哈茨木霉对半夏根际微生物群落及茎腐病发生的影响

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江苏农业科学 2024年第9期52卷 165-172页

作者：李超杨宽李孟芝李丹霞黄显章南阳理工学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南南阳473000

研究哈茨木霉对半夏茎腐病的防治效果,进一步运用高通量测序的方法检测了哈茨木霉对半夏根际微生物群落的影响,以期揭示哈茨木霉防治半夏茎腐病的微生态机制。设置2个浓度的哈茨木霉菌液对半夏进行灌根,处理3个月后检测不同处理下半夏... 详细信息

研究哈茨木霉对半夏茎腐病的防治效果,进一步运用高通量测序的方法检测了哈茨木霉对半夏根际微生物群落的影响,以期揭示哈茨木霉防治半夏茎腐病的微生态机制。设置2个浓度的哈茨木霉菌液对半夏进行灌根,处理3个月后检测不同处理下半夏茎腐病的发病率,利用高通量测序技术研究不同处理下半夏根际微生物的群落多样性、结构和组成差异。经哈茨木霉处理后的半夏茎腐病发病率明显降低,其中HC-200处理的半夏茎腐病发病率较CK显著降低54.55%(P<0.05)。成功分离并通过形态学和序列比对鉴定半夏茎腐病的病原菌为腐皮镰刀菌(Fusarium solani)。施加哈茨木霉后极显著降低了细菌ACE、Chao1、Shannon和Simpson指数(P<0.01),说明半夏根际细菌群落的多样性极显著降低。同时,施加哈茨木霉也降低了镰刀菌属(Fusarium)、被孢霉属(Mortierella)、小不整球壳菌属(Plectosphaerella)和锥盖伞菌属(Conocybe)的相对丰度。镰刀菌属和木霉菌属(Trichoderma)的相对丰度呈显著负相关关系。以上结果在一定程度上揭示了哈茨木霉防治半夏茎腐病的机制是通过抑制半夏根际土壤中镰刀菌属真菌的增殖来实现的。结果可为哈茨木霉运用到半夏茎腐病的田间防治上提供重要参考依据。

关键词：哈茨木霉半夏茎腐病生防菌根际微生物

正念减压疗法联合中医情志护理对胃肠道癌术后患者知觉压力及遵医行为的影响

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中医药临床杂志 2024年第5期36卷 978-982页

作者：张永杰王东阳王雪燕河南南阳张仲景医院河南南阳473400

目的:探讨正念减压疗法联合中医情志护理在胃肠道癌术后的应用价值。方法:选取2021年2月—2023年2月384例胃肠道癌术后患者,按入院顺序分为常规组(n=192)、正念减压组(n=192),2组均行常规护理,常规组在常规护理基础上行中医情志护理,正... 详细信息

目的:探讨正念减压疗法联合中医情志护理在胃肠道癌术后的应用价值。方法:选取2021年2月—2023年2月384例胃肠道癌术后患者,按入院顺序分为常规组(n=192)、正念减压组(n=192),2组均行常规护理,常规组在常规护理基础上行中医情志护理,正念减压组在常规组基础上行正念减压疗法,2组均干预3个月。比较2组胃肠道功能、知觉压力[中文版知觉压力量表(CPSS)]、遵医行为、生活质量[生活质量量表(GQOL-74)]。结果:正念减压组肛门排气、肠鸣音恢复、排便、进食时间均短于常规组(P常规组(P<0.05);与干预前比较,各组GQOL-74评分明显升高,且正念减压组改善更为显著(P<0.05)。结论:对胃肠道癌术后患者实施正念减压疗法联合中医情志护理,能减轻知觉压力、提高遵医行为、改善胃肠道功能、提高生活质量。

关键词：正念减压疗法中医情志护理胃肠道癌知觉压力遵医行为

无机元素与计量学模型结合的半夏产地溯源研究

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中国无机分析化学 2024年第5期14卷 652-661页

作者：李超申国玺徐铮锐宗子怡张超云黄显章南阳理工学院/河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南南阳473000 河南金方源药业有限公司河南南阳473000

为建立不同产地半夏无机元素的分析方法和溯源体系,为半夏药材的质量控制和道地性评价提供技术支持。采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)对我国6个主产区72份半夏样品中K、Ca、Na、Mg、Al等3... 详细信息

为建立不同产地半夏无机元素的分析方法和溯源体系,为半夏药材的质量控制和道地性评价提供技术支持。采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)对我国6个主产区72份半夏样品中K、Ca、Na、Mg、Al等37种无机元素的含量进行测定,并采用方差分析、主成分分析、因子分析等计量学方法进行统计与评价。通过对比BP-神经网络算法、K-最近邻算法、最小二乘支持向量机等多种模式识别方法,探索适合半夏产地溯源的最佳模型。结果表明:不同产地半夏中无机元素的构成各具特征,各无机元素含量在产地间差异显著(P<0.05),其中La、Pb、As、Na、Bi、Hg、Sn、Cd、Ag 9种元素在不同产区间的差异最为明显;3D-plots图显示不同产地半夏样品分布相对集中,具备产地分类的可行性;KNN分类模型(曼哈顿距离)是半夏产地溯源的最佳方法,测试集的正确率达到100%。无机元素分析技术结合适当的计量学模型可以实现半夏的产地溯源。

关键词：半夏无机元素模式识别产地溯源计量学模型