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过表达NtH202烟草叶片响应烟蚜侵袭转录组分析

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种子 2024年第6期43卷 44-54页

作者：孙计平王亚乐李雪君孙焕平文丽河南省农业科学院烟草研究所/黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南许昌461000

为了筛选烟草受到蚜虫胁迫的差异表达基因,对野生型和过表达NtH202株系烟草幼苗接蚜虫,并在接虫前和接虫6 h采集叶片,提取总RNA后,进行转录组测序,对差异表达基因进行GO和KEGG分析,挖掘相关转录因子,并利用qRT-PCR方法验证。结果表明,... 详细信息

为了筛选烟草受到蚜虫胁迫的差异表达基因,对野生型和过表达NtH202株系烟草幼苗接蚜虫,并在接虫前和接虫6 h采集叶片,提取总RNA后,进行转录组测序,对差异表达基因进行GO和KEGG分析,挖掘相关转录因子,并利用qRT-PCR方法验证。结果表明,受到烟蚜侵袭后,WT共有8694个基因表达量变化,OE共有6795个基因表达量变化,WT上调和下调差异基因数目更多,二者共同变化的差异基因有2663个。GO分类表明,烟蚜侵袭后OE富集到免疫系统进程(GO:0002376)的基因数目明显高于WT。OE和WT富集差异基因数量最多的均是植物-病原体互作途径,其次是植物激素信号转导、淀粉和蔗糖代谢通路和MAPK信号通路-植物通路。与WT相比,NtH202过表达株系共有1342个基因上调在4倍以上;GO分析表明,差异表达基因的功能主要集中在生物学过程、细胞组分和分子功能;KEGG分类显示,与WT相比较,烟蚜侵袭前后,OE均是参与植物病原体互作途径的基因最多。蚜虫侵袭后,WT和OE共同变化的基因中有9个WRKY基因上调表达、5个下调表达,NtWRKY6、NtWRKY11、NtWRKY51、NtWRKY68、NtWRKY70基因RNA测序结果与qRT-PCR结果表现一致,均为上调表达,预测WRKY转录因子在抗蚜反应中起着重要作用。受到蚜虫侵袭后,WT和OE共同变化的基因中有8个MYB上调表达、8个下调表达,MYB转录因子ODO1基因RNA测序结果与qRT-PCR结果表现一致,预测转录因子ODO1在烟草抗蚜反应中起着重要作用。

关键词： NtH202基因转录组蚜虫抗蚜性烟草

棘孢木霉与30%霜霉·嘧菌酯协同防治烟草镰刀菌根腐病

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中国烟草科学 2024年第1期45卷 48-53页

作者：刘畅李小杰张梦丹陈玉国苗淑月邱睿白静科尚颐茹李淑君河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南许昌461000

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽... 详细信息

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽试验评价其对烟草镰刀菌根腐病的防治效果。结果表明,30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111对尖孢镰刀菌均具有较强的毒力,其EC50值分别为0.0643 mL/L、2.36×10^(2)cfu/mL,且两者相容性好。除V30%霜霉·嘧菌酯∶V_(Tr-0111)=4∶6时无增效作用,其他8个混配比例均具有增效作用,其中V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=7∶3时增效比率最高,为1.16,抑菌率为68.37%。盆栽试验结果表明,V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=5∶5时,对烟草镰刀菌根腐病的防效最好,为78.18%,其次为7∶3和1∶9,防效分别为77.27%和72.73%,均显著高于单一使用30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111。因此,可以将0.0643 mL/L 30%霜霉·嘧菌酯和2.36×10^(2)cfu/mL棘孢木霉Tr-0111以5∶5比例混匀复配应用于烟田防治烟草镰刀菌根腐病,减少化学农药使用。

关键词：烟草镰刀菌根腐病尖孢镰刀菌 30%霜霉·嘧菌酯悬浮剂棘孢木霉复配

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7种化学杀菌剂对烟草苗期鸢尾丝囊霉根腐病的毒力测定和防效评价

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烟草科技 2024年第3期57卷 65-70页

作者：苗圃刘畅张梦丹陈玉国苗淑月白静科李淑君刘剑君李小杰河南省烟草公司洛阳市公司河南省洛阳市471000 河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南省许昌市461000 中国烟草总公司河南省公司郑州市450046

为筛选出能够防治烟草苗期鸢尾丝囊霉根腐病(Aphanomyces iridis)的高效低毒化学药剂,采用菌丝生长速率法测定70%甲基硫菌灵可湿性粉剂(WP)、58%甲霜灵·锰锌可湿性粉剂(WP)、50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂(SP)、20%辛菌胺盐酸盐水剂(AS)、... 详细信息

为筛选出能够防治烟草苗期鸢尾丝囊霉根腐病(Aphanomyces iridis)的高效低毒化学药剂,采用菌丝生长速率法测定70%甲基硫菌灵可湿性粉剂(WP)、58%甲霜灵·锰锌可湿性粉剂(WP)、50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂(SP)、20%辛菌胺盐酸盐水剂(AS)、30%霜霉·嘧菌酯悬浮剂(SC)、80%烯酰吗啉水分散粒剂(WG)和48%霜霉·络氨酮水剂(AS)等7种化学杀菌剂对鸢尾丝囊霉的室内毒力,并通过室内漂浮苗接种试验评价其防治效果(防效)及安全性。毒力测定结果表明,48%霜霉·络氨酮和30%霜霉·嘧菌酯对鸢尾丝囊霉的抑制作用最强,EC_(50)值分别为0.255μg/mL和0.367μg/mL;其次为20%辛菌胺盐酸盐和58%甲霜灵·锰锌,EC_(50)值分别为14.107μg/mL和37.495μg/mL;70%甲基硫菌灵抑菌效果最差。接种试验结果表明,48%霜霉·络氨酮和30%霜霉·嘧菌酯对鸢尾丝囊霉引起的烟苗根腐病具有较好防效,防效在86.88%~94.61%,且30%霜霉·嘧菌酯处理对烟苗安全性较好,58%甲霜灵·锰锌的防效较差,防效在30%以下。

关键词：烟草鸢尾丝囊霉杀菌剂抑菌率毒力测定相对防效

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烤烟新品种豫浓香201的选育及特征特性

中国烟草科学 2024年第4期45卷 1-6页

作者：李雪君孙计平孙焕平文丽崔红郭敬俎焕新李旭辉侯咏河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南许昌461000 河南农业大学烟草学院郑州450046

为提高烤烟品种中烟100对根部病害的抗性和烟叶品质,以中烟100为供体,经EMS诱变、腺毛密度类型检测、黑胫病病圃鉴定等手段培育出烤烟新品种豫浓香201,于2023年4月通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种遗传性状稳定,群体整齐一致,田... 详细信息

为提高烤烟品种中烟100对根部病害的抗性和烟叶品质,以中烟100为供体,经EMS诱变、腺毛密度类型检测、黑胫病病圃鉴定等手段培育出烤烟新品种豫浓香201,于2023年4月通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种遗传性状稳定,群体整齐一致,田间生长势较强,易烘烤。抗黑胫病(1号小种)和镰刀菌根腐病,中抗赤星病,中感黑胫病(0号小种)、根结线虫病和PVY,感青枯病、TMV和CMV。综合抗病力与对照品种NC89相当,根茎类病害抗性优于中烟100。产量、产值较高,主要经济性状和感官评吸质量优于对照品种NC89和中烟100。烤后原烟外观质量较好,化学成分协调,感官评吸甜感突出,符合目前卷烟原料的质量需要;烟叶成熟集中,适宜粮烟融合和机械化采收。豫浓香201适合在我国黄淮烟区有灌溉条件的烟区种植。

关键词：烤烟品种豫浓香201 选育特征特性

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烤烟抗TMV改良株系YT01的创制和分析

种子 2024年第9期43卷 31-39页

作者：李雪君郭敬孙计平孙焕平文丽李建华俎焕新李旭辉侯咏河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南许昌461000 河南省烟草公司许昌市公司河南许昌461000

为定向提高烤烟品种豫浓香201对TMV的抗性,以豫浓香201为改良材料,TMV免疫品种Va770为供体亲本,通过杂交、回交,利用分子标记结合表型筛选得到TMV免疫的纯合株系YT01,YT01农艺性状和大田生育期与豫浓香201基本保持一致。结果表明,YT01对... 详细信息

为定向提高烤烟品种豫浓香201对TMV的抗性,以豫浓香201为改良材料,TMV免疫品种Va770为供体亲本,通过杂交、回交,利用分子标记结合表型筛选得到TMV免疫的纯合株系YT01,YT01农艺性状和大田生育期与豫浓香201基本保持一致。结果表明,YT01对TMV的抗性表现为免疫,TMV处理后活性氧积累低于豫浓香201,叶片中TMV正调控基因NtRAR1、NtNTF4、NtPR1a、NtHAK1、NtSGT1相对表达量均显著高于豫浓香201,负调控基因TMV CP相对表达量显著低于豫浓香201;主要化学成分与豫浓香201基本一致;外观质量、感官质量略优于豫浓香201。研究表明,豫浓香201定向改良品系YT01对TMV免疫,其他性状基本保持一致,质量有所提高,为豫浓香201病毒病抗性定向改良提供了材料基础。

关键词：烤烟 YT01 豫浓香201 TMV

五种烟草根茎病害病原菌多重PCR检测方法的建立与应用

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中国烟草科学 2024年第3期45卷 60-67页

作者：李小杰张梦丹刘畅苗圃白静科邱睿陈玉国刘剑君李淑君河南省农业科学院烟草研究所/烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室河南许昌461000 河南省烟草公司洛阳市公司河南洛阳471000 中国烟草总公司河南省公司郑州450046

为了快速准确鉴别烟草根腐病菌(Fusarium oxysporum)、黑胫病菌(Phytophthora nicotianae)、立枯病菌(Rhizoctonia solani)、根黑腐病菌(Thielaviopsis basicola)和鸢尾丝囊霉菌(Aphanomyces iridis)等5种烟草根茎病害病原菌,利用RAPD分子标记等方法筛选和设计特异性扩增引物,优化多重PCR扩增体系中各引物添加量、退火温度、循环数等条件,建立多重PCR检测体系,并对其检测的可行性进行验证。本研究筛选并设计出***、***、***、***和***的特异性引物对LD141 F/R、YM1002 F/R、LK111 F/R、GHFT F/R、AiT7 F/R,PCR反应体系中最佳引物组合浓度分别为1.0、1.0、0.2、0.5、0.5μmol/L,最适退火温度为54℃,最佳循环数为28,可同时扩增出大小分别为370、240、536、783、138 bp的特异性片段,能同时检出5种病原菌DNA的最低限值为0.5 ng/μL,可实现对烟草育苗基质和烟株中5种病原菌的快速检测,对烟草苗期根茎病害的早期预防具有重要意义。

关键词：烟草根茎病害多重PCR 灵敏性病害检测

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填闲作物对烤烟生长和温室气体排放的影响

中国烟草科学 2024年第1期45卷 24-30页

作者：韩会阁李俊营王孟孟常栋郭芳阳吴照辉宋艳丹阎海涛河南省农业科学院烟草研究所黄淮种植区烟草病虫害绿色保护与防治重点实验室河南许昌461100 河南省烟草公司平顶山市公司河南平顶山467000

为了解填闲作物对烤烟生长和温室气体排放的影响,本研究以潮土烟田为研究对象,在冬季休闲期分别种植光叶紫花苕(Vicia villosa ***)、小黑麦(×Triticale Wittmack)和油菜(Brassica napus),地上部分饲用,残茬还田,分析各处理间填闲作物... 详细信息

为了解填闲作物对烤烟生长和温室气体排放的影响,本研究以潮土烟田为研究对象,在冬季休闲期分别种植光叶紫花苕(Vicia villosa ***)、小黑麦(×Triticale Wittmack)和油菜(Brassica napus),地上部分饲用,残茬还田,分析各处理间填闲作物及烤烟生物学产量、土壤CO_(2)和N_(2)O排放的差异。结果表明:(1)3种填闲作物处理烤烟总生物量和烟叶产量均显著高于对照,其中光叶紫花苕最高、油菜次之;(2)光叶紫花苕-烤烟、小黑麦-烤烟和油菜-烤烟土壤CO_(2)排放量分别略高于、显著高于和显著低于对照,土壤N_(2)O排放量均显著低于对照,其中油菜-烤烟差异最大;(3)烟田土壤CO_(2)的全球增温潜势远大于N_(2)O,光叶紫花苕、小黑麦和油菜处理土壤的全球增温潜势分别是对照的106.1%、116.2%和78.1%。综上所述,黄淮烟区潮土烟田油菜-烤烟种植模式既能提高烤烟收益又可降低烟田土壤的全球增温潜势,光叶紫花苕-烤烟在不显著提高烟田土壤全球增温潜势的同时可更大幅度提高烤烟收益,因此,可因地制宜发展油菜-烤烟或光叶紫花苕-烤烟等种植模式。

关键词：冬闲烟田温室气体 CO_(2)排放 N_(2)O排放全球增温潜势

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烟草粉螟卵黄原蛋白基因鉴定及其对X射线胁迫的响应

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中国烟草学报 2024年第3期30卷 132-138页

作者：赵钧徐鹿苗圃李成军吴孔明李淑君河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室许昌461000 江苏省农业科学院植物保护研究所省部共建国家重点实验室培育基地-江苏省食品质量安全重点实验室南京210014 河南省烟草公司洛阳市公司洛阳471000 中国农业科学院植物保护研究所北京100193

【背景和目的】卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)是昆虫卵黄发生的关键物质,为探索X射线辐照胁迫对烟草粉螟Vg基因转录表达和雌成虫繁殖力的影响。【方法】采用RT-PCR技术克隆烟草粉螟Vg基因的全长并进行生物信息学分析,利用qPCR技术检测在... 详细信息

【背景和目的】卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)是昆虫卵黄发生的关键物质,为探索X射线辐照胁迫对烟草粉螟Vg基因转录表达和雌成虫繁殖力的影响。【方法】采用RT-PCR技术克隆烟草粉螟Vg基因的全长并进行生物信息学分析,利用qPCR技术检测在烟草粉螟雌成虫不同组织(足、头、中肠、脂肪体、卵巢和表皮)的表达量和雌成虫在不同X射线辐照剂量(50,100和150 Gy)胁迫下该基因的相对表达量以及对其蛹羽化率、成虫寿命、产卵量、卵孵化率的影响。【结果】(1)克隆获得烟草粉螟卵黄原蛋白基因,命名为EeVg(GenBank登录号:OM804251),开放阅读框(ORF)长度为5337bp,编码1778个氨基酸。(2)EeVg基因在雌成虫的脂肪体中相对表达量最高,为头部表达量的17.96倍。(3)100和150 Gy的X射线辐照雌蛹极显著地降低EeVg在烟草粉螟羽化后的表达量,分别为对照的0.34倍和0.09倍。(4)剂量为50、100和150 Gy的X射线辐照降低烟草粉螟雌蛹羽化率和成虫寿命(87.78%~75.56%和6.40~4.17d),显著降低雌蛾的产卵量和卵孵化率(55.27~20.37粒和76.67%~72.22%)。【结论】高剂量的X射线辐照胁迫可使EeVg基因表达量显著下调,显著降低烟草粉螟繁殖力,为深入研究X射线影响烟草粉螟繁殖力的分子机制奠定了基础。

关键词：烟草粉螟卵黄原蛋白基因 X射线辐照表达量繁殖力

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东亚小花蝽对烟粉虱若虫的捕食功能评价

烟草科技 2024年

作者：刘心怡杨浩岚张今李成军余祥文冯文龙余佳敏邓全李茂业刘苏安徽农业大学植物保护学院农产品质量与生物安全教育部重点实验室河南省农业科学院烟草研究所烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室中国烟草总公司四川省公司四川省烟草公司凉山州公司

为明确东亚小花蝽（Orius sauteri）对烟粉虱（Bemisia tabaci）若虫的捕食潜力，在室内条件下测定了东亚小花蝽5龄若虫和雌成虫对烟粉虱2～4龄若虫的喜好性和对烟粉虱4龄若虫的捕食能力以及东亚小花蝽密度对捕食烟粉虱的干扰反应。结... 详细信息

为明确东亚小花蝽（Orius sauteri）对烟粉虱（Bemisia tabaci）若虫的捕食潜力，在室内条件下测定了东亚小花蝽5龄若虫和雌成虫对烟粉虱2～4龄若虫的喜好性和对烟粉虱4龄若虫的捕食能力以及东亚小花蝽密度对捕食烟粉虱的干扰反应。结果表明，东亚小花蝽对烟粉虱2龄和3龄若虫均表现为负喜好性，对烟粉虱4龄若虫表现为正喜好性。东亚小花蝽5龄若虫和雌成虫对烟粉虱4龄若虫的日捕食量分别为14.00和16.00头，瞬时攻击率分别为0.878和0.888，单头烟粉虱处理时间分别为0.047和0.034 d，东亚小花蝽雌成虫的捕食能力强于5龄若虫。东亚小花蝽的日捕食量与烟粉虱密度呈正相关，与搜寻效应呈负相关；随着东亚小花蝽密度的增加捕食作用率降低。

关键词：东亚小花蝽烟粉虱喜好性捕食功能反应干扰反应