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基于16S rRNA测序技术探讨骨松益骨方对去卵巢大鼠肠道菌群的影响

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1752-1759页

作者：郑旭霞柴爽魏立伟张虹秦娜河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南郑州450016

目的基于肠道菌群探究骨松益骨方(GusongYigu decoction,GSYG)治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制。方法SPF级SD大鼠60只随机分成假手术组(Control)、模型组(Model)、骨松益骨方低剂量组(GSYG-L,1.25 g·kg^(-1))、骨松益骨方中剂量组(GSYG-M,2.5 g·kg^(-1)),骨松益骨方高剂量组(GSYG-H,5 g·kg^(-1))和阿仑膦酸钠组(Al,0.89 mg·kg^(-1)),每组10只。HE染色观察骨组织形态变化,micro CT观察大鼠的股骨组织结构变化;取Control组、Model组、GSYG-H组大鼠结肠粪便样本,提取DNA,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与Control组比较,Model组大鼠骨小梁稀疏;BV/TV、***、Tb.N及BMD均明显降低(P<0.01),SMI、***明显升高(P<0.01);与Model组比较,GSYG-L、GSYG-M、GSYG-H组和Al组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,且BV/TV、***、Tb.N及BMD明显增加(P<0.05),SMI、***明显降低(P<0.05)。肠道菌群测序结果显示,与Control组比较,Model组大鼠肠道菌群多样性降低,厚壁菌门丰度降低,而拟杆菌门丰度增加;与Model组比较,GSYG-H组厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度减少。结论GSYG能够改善PMOP患者的骨微结构,增加骨密度,其作用机制可能与增加肠道菌群的多样性、调节肠道菌群结构有关。

关键词：骨松益骨方绝经后骨质疏松症肠-骨轴肠道菌群 16S rRNA 骨密度

发育性颈椎管狭窄人群血清差异蛋白质组学分析

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中国组织工程研究 2024年第34期28卷 5432-5439页

作者：卜献忠钟远鸣卜保献李记天汪利合李慧英杨汉立许伟河南中医药大学第一附属医院河南省郑州市450000 广西中医药大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530023 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471002

背景:正常健康人与发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群之间的血清特异性生物学标志物尚未完全明确。目的:寻找并鉴定气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄的潜在生物学标志物。方法:分别采集发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群血清9例、健康正常人... 详细信息

背景:正常健康人与发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群之间的血清特异性生物学标志物尚未完全明确。目的:寻找并鉴定气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄的潜在生物学标志物。方法:分别采集发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群血清9例、健康正常人群血清8例,采用同位素相对标记与绝对定量技术串联质谱标签联合液相色谱-串联质谱筛选2组人群血清的差异蛋白及鉴定,使用Western Blot法对肌球蛋白轻链3(MYL3)差异蛋白进行验证。结果与结论:(1)串联质谱标签技术:共鉴定出61个差异蛋白(P 一致;(5)结论:通过绝对定量技术联合液相色谱-串联质谱技术发现健康正常人群与发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群之间的血清差异表达蛋白,并初步推测肌球蛋白轻链3可能是发育性颈椎管狭窄(气虚血瘀证)人群的特异性血清标志物。

关键词：发育性颈椎管狭窄气虚血瘀证串联质谱标签血清蛋白标志物蛋白组学

外源性髓鞘抗原的清除在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 67-73页

作者：郑配国曹雪珍魏旭锋郑州大学第一附属医院检验科河南省检验医学重点实验室郑州450052

目的探讨外源性髓鞘抗原的清除对其诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的作用。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG_(35-55))或FITC标记的MOG_(35-55)免疫C57BL/6J小鼠诱导EAE,通过分析过继转移的CFSE标记的mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞在脾脏内的增殖情况评估免疫系统内外源性髓鞘抗原的含量;免疫组织化学法和流式细胞术分析接种部位外源性髓鞘抗原的释放;组织切片HE染色探讨外源性髓鞘抗原快速清除的原因;通过对比分析背部和足垫免疫诱导的EAE,以及可溶性MOG_(35-55)的治疗效果验证外源性髓鞘抗原的清除在EAE中的作用。结果免疫第2天小鼠脾脏内mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞增殖占比显著高于免疫第7天[(52.6±6.8)%vs(18.5±4.9)%,P<0.01];在发病小鼠(第13天)脾脏内mT/mG-2D2 CD4^(+)T细胞增殖与在初始小鼠脾脏内的增殖差异无统计学意义[(4.4±1.5)%vs(2.5±1.4)%,P=0.11];免疫组织化学法和流式细胞术结果显示,MOG_(35-55)在接种部位释放并被CD11b细胞吞噬,EAE发病时接种部位已无MOG_(35-55)释放;组织病理切片显示,EAE发病时乳化剂周围形成的肉芽肿阻止乳化剂释放抗原,使抗原与外周免疫系统完全隔离;经足垫免疫诱导的小鼠不易发病与MOG_(35-55)持续刺激免疫系统有关,与CD4^(+)调节性T细胞没有直接关系;持续腹腔注射可溶性MOG_(35-55)可预防和治疗EAE。结论EAE小鼠免疫系统内外源性髓鞘抗原已完全清除,EAE的发生依赖外源性髓鞘抗原的完全清除。

关键词：自身抗原实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4^(+)T细胞

FAR、CAR和PLR对高脂血症性急性胰腺炎的预测价值

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中华急诊医学杂志 2024年第10期33卷 1376-1382页

作者：王巧芳梅超鹏宋耀东刘艳娜李德剑崔梦巍何倩倩李慧慧王海峰朱长举郑州大学第一附属医院急诊科河南省急诊与创伤工程研究中心河南省急诊与创伤研究医学重点实验室郑州450052

目的探讨纤维蛋白原与白蛋白比值(fi brinogen to albumin ratio,FAR)、肌酐与白蛋白比值(creatinine to albumin ratio,CAR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)预测高脂血症性急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)预后不良的价值。方法回顾性收集本院2021年1月至2023年12月收治的HLAP患者的临床资料,根据预后情况分为两组:预后良好组和预后不良组。采用多因素Logistic回归分析得出不同预后组HLAP的独立危险因素;绘制受试者工作特征曲线(receive operator characteristic curve,ROC),并评价FAR、CAR和PLR单独及联合指标对HLAP预后的预测价值。结果共纳入118例HLAP患者,其中预后良好组69例,预后不良组49例。两组间的心率、淋巴细胞、甘油三酯、白蛋白、肌酐、尿素氮、血钙、血糖、C-反应蛋白、降钙素原、纤维蛋白原、FAR、CAR、PLR、急性胰腺炎严重程度床旁指标评分、急性生理学与慢性健康状况评分、住院时间差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,FAR(优势比(OR)=25.949,95%置信区间(95%CI):3.190~211.080,P=0.002)、CAR(OR=1.453,95%CI:1.095~1.928,P=0.010)、PLR(OR=1.005,95%CI:1.001~1.009,P=0.020)是HLAP患者预后不良的独立危险因素。ROC曲线分析显示:FAR、CAR、PLR单独指标预测HLAP患者预后不良的ROC曲线下面积AUC分别为0.823、0.781、0.652;FAR联合CAR、FAR联合PLR、CAR联合PLR的AUC分别为0.840、0.845、0.849;而FAR、CAR、PLR三者联合对HLAP患者预后不良的预测能力为(AUC=0.875,95%CI:0.814~0.937),其截断值为0.387,敏感度为83.7%,特异度为79.7%。结论FAR、CAR、PLR三者联合对HLAP患者预后不良的预测价值优于单独及两两联合的预测价值。

关键词：高脂血症急性胰腺炎纤维蛋白原与白蛋白比值肌酐与白蛋白比值血小板与淋巴细胞比值预测价值预后不良

颈椎中立位核磁共振检查对突出颈椎间盘体积及颈椎曲度的影响

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中国组织工程研究 2024年第30期28卷 4860-4865页

作者：靳宜楷马占华付苏严旭张春霖郑州大学第一附属医院骨科河南省郑州市450000

背景:颈椎中立位MRI被广泛应用于脊髓型颈椎病的诊断和治疗,但患者在重复进行颈椎MRI检查时,头颈部不可能保持完全相同的姿势,患者颈椎被床面限制于某一个特定位置,颈椎可能有矢状面内的微小伸屈运动,头部也可能发生一定的仰屈度变化。... 详细信息

背景:颈椎中立位MRI被广泛应用于脊髓型颈椎病的诊断和治疗,但患者在重复进行颈椎MRI检查时,头颈部不可能保持完全相同的姿势,患者颈椎被床面限制于某一个特定位置,颈椎可能有矢状面内的微小伸屈运动,头部也可能发生一定的仰屈度变化。颈椎中立位状态下颈椎和头部的这种变化是否会影响突出颈椎间盘的体积和颈椎曲度目前尚不清楚。目的:采用人工智能辅助测量,分析脊髓型颈椎病患者短期内2次颈椎中立位状态下MRI检查突出颈椎间盘体积、颈椎曲度测量的精准性与可靠性。方法:回顾性分析2012年6月至2023年6月接受保守治疗并在3个月内2次行颈椎MRI检查的脊髓型颈椎病患者。作者首次提出使用枕胸间距和枕胸角来评估颈椎中立位时头部仰屈度的变化,并参照首诊枕胸角的角度,将复诊患者分为枕胸角增大组和减小组。通过人工智能测量软件辅助或人工测量突出颈椎间盘的体积、C2-6 Cobb角及颈椎(C3-C7)曲率。正态分布数据用x-±s表示,非正态分布数据用中位数(四分位数间距)表示。采用Spearman秩相关系数分析Cobb角、颈椎(C3-C7)曲率变化与突出颈椎间盘体积变化的相关性。结果与结论:①共有104例脊髓型颈椎病患者,326个突出颈椎间盘,枕胸角增大组及枕胸角减小组分别有47例和57例患者;②头部仰屈指标:首诊和复诊时,枕胸间距、枕胸角均无显著差异;枕胸间距的变化量为0.035(3.23)mm,枕胸角变化量为-0.31(3.28)°,枕胸间距与枕胸角的变化量偏移范围较小,且无显著相关性;③颈椎曲度指标:首诊和复诊时,C2-6 Cobb角、C3-C7曲率无显著差异;枕胸角增大组和减小组C2-6 Cobb角、C3-C7曲率均无显著差异;④首诊和复诊时,突出颈椎间盘体积无显著差异;枕胸角增大组及减小组突出颈椎间盘体积均无显著差异;突出颈椎间盘体积的变化量与C2-6 Cobb角、C3-C7曲率的变化量无显著相关性;⑤结果说明,颈椎中立位状态下,颈椎被(床板)限制于某一个特定位置有可以忽略不计的矢状面内微小伸屈运动,头部虽存在一定范围的仰屈度变化,颈椎中立位状态下颈椎与头部这些变化不影响突出颈椎间盘体积、C2-6 Cobb角及颈椎(C3-C7)曲率等参数测量的精准度与可靠性。

关键词：脊髓型颈椎病突出颈椎间盘 MRI 颈椎中立位颈椎曲度人工智能

葡萄籽提取物抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及促进胫骨的生长

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3216-3222页

作者：宁桃丽谢艳王娜王庆丰吉建张冬纳河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 河南省洛阳市471000

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的... 详细信息

背景:已有文献报道,葡萄籽提取物在抑制雄激素依赖型肿瘤的生长(如乳腺癌等)方面具有一定的作用,因此理论上葡萄籽提取物可以抑制青少年后期由于雌激素产生的骨骺闭合现象。目的:观察葡萄籽提取物对大鼠生长板软骨细胞凋亡及骨骺闭合的影响。方法:①体外实验:取对数生长期的大鼠胫骨及股骨生长板软骨细胞,分组培养:正常对照组、模型对照组(加入17β雌二醇诱导细胞凋亡)、阳性对照组(加入来曲唑与17β雌二醇)、葡萄籽提取物组(加入17β雌二醇和10μg/mL葡萄籽提取物)、Caspase-9抑制剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9抑制剂)、Caspase-9激动剂组(加入17β雌二醇和Caspase-9激动剂),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。②体内实验:将30只3月龄SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组及药物低、中、高剂量组,每组5只,均皮下注射17β雌二醇(3次/周)建立骨骺闭合模型,阳性对照组灌胃给予来曲唑,药物低、中、高剂量组分别灌胃给予0.05,0.2,0.8 g/kg的葡萄籽提取物,1次/d,直至模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上停药,观察各组大鼠胫骨长度。将18只SD大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、药物中剂量组,每组6只,按照如上方法处理,连续给药1.5个月后,Western blot检测大鼠胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达。结果与结论:①体外实验:17β雌二醇可诱发生长板软骨细胞的凋亡,而来曲唑、葡萄籽提取物与Caspase-9抑制剂均可抑制生长板软骨细胞的凋亡;②体内实验:当模型对照组大鼠胫骨平台骨骺闭合2/3以上时,阳性对照组、药物中剂量组骨骺闭合数量少于模型对照组(P<0.05),且胫骨长度大于模型对照组(P<0.05),胫骨生长板软骨Caspase-9蛋白表达低于模型对照组(P<0.05);③结果表明:适宜浓度的葡萄籽提取物可有效抑制生长板软骨细胞的凋亡并延迟骨骺闭合,具有促进骨骼生长的潜能。

关键词：葡萄籽提取物生长板软骨细胞细胞凋亡骨骺闭合 Casepase-9

血清IL-8、VEGF水平与下肢动脉硬化闭塞症患者支架植入术后1年内支架内再狭窄的关系

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中国普通外科杂志 2024年第6期33卷 943-951页

作者：胡威龙王高尚张小兵张同庆河南省南阳市第一人民医院血管外科河南南阳473000

背景与目的:支架植入术是治疗下肢动脉硬化闭塞症(ASO)的主要治疗方式之一,可有效恢复血管畅通,改善患者临床症状,但部分患者术后1年内易出现支架内再狭窄。支架内再狭窄可导致患者较差的预后,因此明确影响ASO术后支架再狭窄的病理机制... 详细信息

背景与目的:支架植入术是治疗下肢动脉硬化闭塞症(ASO)的主要治疗方式之一,可有效恢复血管畅通,改善患者临床症状,但部分患者术后1年内易出现支架内再狭窄。支架内再狭窄可导致患者较差的预后,因此明确影响ASO术后支架再狭窄的病理机制具有重要意义。血清白细胞介素8(IL-8)与血管内皮生长因子(VEGF)分别是反映机体炎症和血管内皮功能的指标,与ASO的发生关系密切,但是否与ASO患者支架植入术后支架再狭窄相关尚不明确。鉴于此,本研究对IL-8、VEGF水平与ASO患者支架植入术后1年内支架内再狭窄的关系进行探讨,并建立预测支架植入术后1年内支架内再狭窄的列线图模型。方法:选取2020年1月—2022年10月河南省南阳市第一人民医院血管外科接受支架植入手术治疗的100例ASO患者为研究对象,术后随访1年,根据随访结果将受试者分为再狭窄组和未再狭窄组。收集受试者人口学特征、术后血清IL-8与VEGF水平及其他相关指标等。采用单因素和Logistic回归分析影响支架植入术后1年内支架内再狭窄的危险因素。基于危险因素构建预测支架植入术后1年支架内再狭窄的风险列线图预测模型,并对构建的预测模型进行验证。结果:随访期间失访4例,失访率为4.00%(4/100)。96例患者中29例患者发生支架内再狭窄,支架内再狭窄率为30.21%(29/96)。Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁(OR=4.191)、Fontaine分期(Ⅳ期)(OR=2.863)、完全闭塞(OR=2.445)、下肢血管病变长度≥7.15 cm(OR=3.343)、术后IL-8≥1.02 ng/mL(OR=6.482)、术后VEGF≥158.37 pg/mL(OR=10.402)是影响支架植入术后1年支架内再狭窄的独立危险因素(均P<0.05)。对基于以上因素构建的列线图预测模型的验证结果显示,校正曲线贴近于理想曲线;C指数为0.857(95%CI=0.785~0.952);受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,列线图风险模型预测支架植入术后1年支架内再狭窄的ROC曲线下面积为0.852(95%CI=0.631~0.979),敏感度、特异度分别为92.50%、78.40%。结论:ASO患者支架植入术后血清IL-8、VEGF水平与支架内再狭窄的发生率关系密切,术后血清IL-8、VEGF水平越高,患者术后支架内再狭窄的发生风险越高,以此为基础构建的列线图模型预测模型有助于临床医生对ASO患者提供更好的治疗和随访方案。

关键词：闭塞性动脉硬化下肢移植物闭塞,血管白细胞介素8 血管内皮生长因子类

麝香黄芪复方滴丸含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖分化

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 2960-2966页

作者：陈娜王燕琳孙慧芳樊飞燕李东红张运克河南中医药大学第一附属医院河南省郑州市450046 河南中医药大学河南省郑州市450046 郑州大学第一附属医院河南省郑州市450046

背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛用于治疗神经系统疾病,但由于血脑屏障的限制以及干细胞在受损部位存活率、分化率低,导致治疗效果有限。目的:探讨麝香黄芪复方滴丸含药血清对BMSCs增殖、迁... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛用于治疗神经系统疾病,但由于血脑屏障的限制以及干细胞在受损部位存活率、分化率低,导致治疗效果有限。目的:探讨麝香黄芪复方滴丸含药血清对BMSCs增殖、迁移和向星形胶质细胞分化的影响。方法:SD雄性大鼠连续灌胃麝香黄芪复方滴丸5 d后进行腹主动脉取血,分离血清备用。采用CCK-8法检测体积分数5%,10%,20%含药血清对BMSCs增殖的影响;划痕实验观察体积分数10%含药血清对BMSCs横向迁移的影响;Transwell小室培养BMSCs,用结晶紫染色和DAPI核染色观察体积分数10%含药血清对BMSCs纵向迁移的影响;用含体积分数10%含药血清的诱导液或与星形胶质细胞共培养观察BMSCs向星形胶质细胞分化情况。结果与结论:①体积分数10%和20%含药血清在第2,3天促进细胞增殖更明显,且两种体积分数无统计学差异;②在划痕30,48 h时,10%含药血清组BMSCs迁移量显著高于对照组;③10%含药血清组BMSCs穿过Transwell小室滤过膜的数量高于对照组;④体积分数10%含药血清可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化,但分化作用较弱,星形胶质细胞能进一步促进含药血清诱导BMSCs向星形胶质细胞方向分化;⑤结果表明,体积分数10%含药血清能促进BMSCs体外增殖、迁移;与星形胶质细胞共培养可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化。

关键词：缺血性脑卒中麝香黄芪复方滴丸含药血清骨髓间充质干细胞星形胶质细胞增殖迁移分化

彩色多普勒超声联合超声弹性成像检查在甲状腺结节定性诊断中的价值

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深圳中西医结合杂志 2024年第8期34卷 75-78页

作者：高翠萍亓晓威兰考第一医院河南兰考475300

目的:探讨彩色多普勒超声联合超声弹性成像在甲状腺结节定性诊断中的应用价值。方法:选取2021年5月至2023年6月兰考第一医院收治的145例甲状腺结节患者,根据手术或病理活检结果,将其分为良性结节组(85例)和恶性结节组(60例),所有患者均... 详细信息

目的:探讨彩色多普勒超声联合超声弹性成像在甲状腺结节定性诊断中的应用价值。方法:选取2021年5月至2023年6月兰考第一医院收治的145例甲状腺结节患者,根据手术或病理活检结果,将其分为良性结节组(85例)和恶性结节组(60例),所有患者均在手术或病理活检前行彩色多普勒超声及超声弹性成像检查,比较不同性质甲状腺结节的彩色多普勒超声声像图特征,以及两组患者甲状腺彩色多普勒超声血流参数、超声弹性成像信号等级,之后比较不同检查方式的结果,并计算不同检查方式的诊断效能。结果:恶性结节组患者病灶形状不规则、边缘模糊、回声不均匀、内部钙化、无晕环且纵横比≥1的检出率均多于良性结节组;恶性结节组患者收缩期峰值流速(PSV)、血流阻力指数(RI)值均高于良性结节组,舒张末期血流速度(EDV)低于良性结节组;良性结节组患者超声弹性成像分级为0、Ⅰ级占比高于恶性结节组,Ⅱ~Ⅳ级占比低于恶性结节组;超声弹性成像、彩色多普勒超声联合诊断的灵敏度、准确度、阴性预测值均高于单独诊断,且漏诊率低于单独诊断,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:彩色多普勒超声、超声弹性成像联合检查可显著提高对甲状腺结节定性诊断的准确率,降低漏诊率,有助于临床准确鉴别结节类型。

关键词：甲状腺结节彩色多普勒超声超声弹性成像定性诊断