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来江藤苯丙素类成分及其抗氧化活性研究

中成药 2024年第8期46卷 2623-2630页

作者：李昌芬廖彬彬刘宗绪王洪云张新渐左爱学云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用重点实验室云南昆明650500 保山中医药高等专科学校中药学院云南保山678000

目的研究来江藤苯丙素类成分及其抗氧化活性。方法来江藤乙醇提取物采用Rp-C_(18)、MCI、半制备HPLC、硅胶及Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法测定其细胞毒性,DPPH、ABTS+自由基清除... 详细信息

目的研究来江藤苯丙素类成分及其抗氧化活性。方法来江藤乙醇提取物采用Rp-C_(18)、MCI、半制备HPLC、硅胶及Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法测定其细胞毒性,DPPH、ABTS+自由基清除法测定其抗氧化活性。结果从中分离得到15个苯丙素类化合物,分别鉴定为(+)松脂素(1)、(-)杜仲树脂酚(2)、(-)丁香脂素(3)、buddlenol D(4)、(7 R,7′R,7″S,8S,8′S,8″S)-4′,5″-dihydroxy-3,5,3′,4″-tetramethoxy-7,9′:7′,9-diepoxy-4,8″-oxy-8,8′-sesquineo-lignan-7″,9″-diol(5)、狗牙花脂素(6)、hedyotol A(7)、dracunculifoside R(8)、毛蕊花糖苷(9)、异毛蕊花糖苷(10)、连翘酯苷F(11)、异地黄苷(12)、curcasinlignan B(13)、erythro-2,3-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-ethoxypropan-l-ol(14)、枸橼苦素C(15)。化合物1~4、9~10对HepG2肝癌细胞无明显细胞毒性;化合物1、3、9、10、12对DPPH自由基具有较强的清除活性;化合物1~3、9~10、12、14对ABTS+自由基具有较强的清除活性。结论化合物1~8、12~15为首次从来江藤属植物中分离得到。来江藤苯丙素类化合物有较强的抗氧化活性。

关键词：来江藤苯丙素分离鉴定细胞毒性抗氧化活性

山茶油干预的阿尔茨海默病小鼠尿液代谢组学分析

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食品科学 2024年第8期45卷 114-121页

作者：王瑞锋周宁陈龙刘通郭彭莉张冰贤张振凯曾梦楠熊维政郑晓珂冯卫生河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南绿达山茶油股份有限公司河南信阳465550 河南省中药开发工程技术研究中心河南郑州450046

目的:基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flightmassspectrometry,UPLC-Q/TOF-MS)技术,利用代谢组学方法探讨山茶油干预的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠尿液的代谢组学变化。方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组、山茶油组,除对照组外其余各组小鼠均由β-淀粉样蛋白25-35肽诱导AD,并取尿液样本。尿液沉淀蛋白后进行UPLC-Q/TOF-MS分析,获得小鼠尿液代谢物数据,使用SIMCA-P14.1软件进行主成分分析(principalcomponent analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析,使用HMBD、MassBank、MetaboAnalyst、京都基因与基因组百科全书在线数据库对生物标志物进行鉴定、通路富集分析和代谢网络的构建。结果:在PCA得分图中,山茶油组样本点远离模型组样本点区域,更接近正常对照组样本点区域。鉴定得到48个生物标志物,主要涉及的通路有牛磺酸和次牛磺酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等。结论:山茶油通过调节能量代谢、氨基酸代谢等改善了AD小鼠体内代谢,为山茶油干预AD的进一步研究提供参考。

关键词：代谢组学山茶油小鼠尿液阿尔茨海默病

不同干燥方法对合欢花药材化学成分及其抗氧化活性影响

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天然产物研究与开发 2024年第1期36卷 125-136页

作者：左亚锋徐秀泉李巧月王孟虎孟祥松闫攀金传山吴德玲亳州学院中药学院亳州学院中药原料产品研发安徽普通高校重点实验室亳州236800 安徽中医药大学药学院合肥230012

建立测定合欢花药材中槲皮苷、异槲皮苷和槲皮素3种黄酮类成分含量测定的方法。通过化学成分含量及其抗氧化活性测定,探讨不同干燥方法对不同规格合欢花药材的影响,为合欢花药材的初加工工艺选择提供参考。通过晒干、阴干、蒸汽杀青后... 详细信息

建立测定合欢花药材中槲皮苷、异槲皮苷和槲皮素3种黄酮类成分含量测定的方法。通过化学成分含量及其抗氧化活性测定,探讨不同干燥方法对不同规格合欢花药材的影响,为合欢花药材的初加工工艺选择提供参考。通过晒干、阴干、蒸汽杀青后烘干、微波杀青后烘干、烘干(30、50、70、90℃)、冷冻干燥的方式对两种规格合欢花药材进行干燥处理,采用紫外分光光度法、高效液相色谱法、比色法和ABTS法、DPPH法等检测样品中总黄酮、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素含量及抗氧化活性。利用主成分分析、聚类分析和相关性分析对干燥后不同规格样品进行综合评价。研究结果表明,不同干燥处理合欢花药材样品化学成分和抗氧化活性结果存在显著差异。相关性分析表明,槲皮苷含量和总黄酮含量呈显著正相关(P<0.05),槲皮苷含量可作为总黄酮含量大小的评价指标,与O_(2)^(-)自由基清除能力呈正相关但不显著。槲皮苷含量和总黄酮含量与其他四种抗氧化指标呈显著正相关(P<0.05)或极显著正相关(P<0.01),槲皮素含量与ABTS自由基清除能力呈显著正相关(P<0.05),推测槲皮苷和槲皮素是2种合欢花类药材主要抗氧化活性物质。不同干燥方法对2种规格合欢花药材影响显著,盛开的合欢花适合宜采用70℃烘干处理,花蕾期的合欢米宜采用冷冻干燥处理,合欢花和合欢米均不宜采用阴干处理。本研究为2种合欢花类药材初加工方法的选择提供实验依据。

关键词：合欢花干燥方法化学成分抗氧化活性

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怀菊花中1个新的没药烷型倍半萜

中草药 2024年第9期55卷 2863-2867页

作者：蔡雅君薛金凤赵慧君支燕乐卢纪衡陈辉王彦志冯卫生薛贵民河南中医药大学药学院河南郑州450046 豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南省中药开发工程技术中心河南郑州450046 郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450046

目的研究怀菊花Chrysanthemum morifolium的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20以及半制备HPLC等方法进行分离纯化,根据波谱数据并结合文献对化合物结构进行鉴定。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.... 详细信息

目的研究怀菊花Chrysanthemum morifolium的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20以及半制备HPLC等方法进行分离纯化,根据波谱数据并结合文献对化合物结构进行鉴定。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,以抑制炎性细胞因子一氧化氮(NO)的分泌为评价指标对分离得到的化合物进行体外抗炎活性评价。结果从怀菊花二氯甲烷提取物中分离得到7个化合物,分别为(6S,7R,10R)-没药烷-7-羟基-10,11-环氧-4-酮(1)、黑麦草内酯(2)、(4R)-1-甲基-4-(1-羟基异丙基)环己烯-6-酮(3)、2-甲氧基对苯二酚(4)、4-(3-羟丙基)苯酚(5)、5-(3-羟丙基)-2-甲氧基苯酚(6)、4-甲基苯酚(7)。结论化合物1为新的没药烷型倍半萜,命名为怀菊花没药烷A。除化合物2外,其余化合物均为首次从该属植物中分离得到。化合物1和3有显著NO抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值分别为9.2、38.9μmol/L。

关键词：怀菊花怀菊花没药烷A 倍半萜抗炎 (4R)-1-甲基-4-(1-羟基异丙基)环己烯-6-酮 2-甲氧基对苯二酚

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窝儿七的化学成分研究

中草药 2024年第2期55卷 366-373页

作者：白红云赵晨孙彦君弓建红陈辉李孟冯卫生河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南郑州450046 河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中药开发工程技术中心河南郑州450046

目的研究窝儿七(中华山荷叶Diphylleia sinensis干燥根茎)中的化学成分。方法运用硅胶、AB-8大孔吸附树脂、ODS、MCI和Sephadex LH-20等柱色谱和半制备高效液相色谱对其化学成分进行分离纯化,通过IR、UV、MS、NMR等波谱分析技术,结合... 详细信息

目的研究窝儿七(中华山荷叶Diphylleia sinensis干燥根茎)中的化学成分。方法运用硅胶、AB-8大孔吸附树脂、ODS、MCI和Sephadex LH-20等柱色谱和半制备高效液相色谱对其化学成分进行分离纯化,通过IR、UV、MS、NMR等波谱分析技术,结合理化性质分析,鉴定化合物结构。采用DPPH自由基清除实验,测试化合物1、4、10、11、20的抗氧化活性。结果从窝儿七95%乙醇和50%乙醇提取物中分离得到21个化合物,分别鉴定为[4,5-二羟基-2-(1-羟基乙基)苯基][(4-羟基)苯基]甲酮(1)、(+)-7′-甲氧基落叶松树脂醇(2)、7′R-羟基落叶松树脂醇(3)、3-甲氧基槲皮素(4)、二氢槲皮素(5)、二氢山柰酚(6)、山柰酚(7)、槲皮素(8)、podoverine B(9)、大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(10)、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷(11)、尿嘧啶(12)、胸腺嘧啶核苷(13)、uridine-5′α-hydroxypropanoate(14)、对甲氧基苯甲醛(15)、对羟基苯甲酸(16)、香草醛(17)、3,4-二羟基苯甲酸(18)、羟基酪醇(19)、3′,5′-二羟基苯基-4-羟基苯甲酸酯(20)、5-羟甲基糠醛(21)。结论化合物1为新化合物,命名为山荷叶甲酮。化合物20为新的天然产物,并首次对其氢谱和碳谱数据进行归属。化合物2、3、5、6、9~11、13、14、17和19~21为首次从山荷叶属植物中分离得到。首次从该属植物中发现了生物碱类和蒽醌类化合物的存在。DPPH自由基清除实验结果显示,化合物1对DPPH自由基具有较强的清除能力,半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值为8.52μmol/L,且强于阳性药水溶性维生素E(trolox,14.95μmol/L)。

关键词：中华山荷叶 DPPH自由基清除抗氧化山荷叶甲酮 3′,5′-二羟基苯基-4-羟基苯甲酸酯 (+)-7′-甲氧基落叶松树脂醇二氢槲皮素大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷

基于UPLC-ABTS-Q-TOF-MS的艾草不同部位抗氧化活性成分比较研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2468-2477页

作者：王苗苗王宇卿李淑娇庄果杨媛媛河南大学药学院河南开封475004 南阳医学高等专科学校河南省中药效应物质与质量控制研究中医药重点实验室南阳道地药材(艾草)研究院河南南阳473061

为了对中药艾Artemisia argyi不同部位(根、茎、叶、籽)中化学成分进行表征与鉴定,筛选具有抗氧化活性的化合物,该研究采用超高效液相色谱-2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-ABTS-Q-TOF-MS)... 详细信息

为了对中药艾Artemisia argyi不同部位(根、茎、叶、籽)中化学成分进行表征与鉴定,筛选具有抗氧化活性的化合物,该研究采用超高效液相色谱-2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-ABTS-Q-TOF-MS)在线联用技术,以Poroshell 120 SB-Aq(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为色谱柱,乙腈(A)-0.2%的甲酸水(B)为流动相,进行梯度洗脱,在正、负离子模式下分别扫描,运用MassLynx软件,结合对照品及相关文献,对艾草不同部位进行化学成分鉴定并比较不同部位化学成分的差异,采用抗氧化活性成分在线检测体系,对抗氧化活性成分进行检测,并以清除效率为指标对艾草不同部位活性成分的抗氧化活性进行比较评价。结果从艾草不同部位提取物中共鉴定出87个化合物,根、茎、叶、籽分别鉴定出38、72、85、33个成分;共筛选出具有22个抗氧化活性的化合物,根、茎、叶、籽分别鉴定出14、17、20、11个具有抗氧化活性的化合物。研究表明艾草不同部位化学成分和抗氧化成分均存在一定差异,为艾草的资源利用和进一步研究开发提供数据支持。

关键词：艾草在线筛选抗氧化活性 UPLC-ABTS-Q-TOF-MS 2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐

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新型基因编辑技术加速盐藻表达系统的成熟和应用

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中国生物工程杂志 2024年第4期44卷 102-111页

作者：黄晓雯皇甫雨静姬聪浩代月优李姝璇冯书营河南中医药大学医学院郑州450046 河南省中医药特医食品工程研究中心郑州450046 河南省药食同源中药工程研究中心郑州450046

盐藻因具备低成本、易培养、便于转基因操作、可调控的转录和翻译等优点,已成为基因工程领域备受关注的新型表达系统。但盐藻表达系统存在低表达和不稳定遗传等技术瓶颈,严重限制了其应用。CRISPR/Cas系统凭借高稳定性、高靶点特异性、... 详细信息

盐藻因具备低成本、易培养、便于转基因操作、可调控的转录和翻译等优点,已成为基因工程领域备受关注的新型表达系统。但盐藻表达系统存在低表达和不稳定遗传等技术瓶颈,严重限制了其应用。CRISPR/Cas系统凭借高稳定性、高靶点特异性、可编程性等优点,可作为助推盐藻表达系统改进和应用的重要工具,从而大幅提高盐藻表达系统重组蛋白、脂质积累和胡萝卜素等高附加值产物的产量。由于盐藻兼具原核细胞和真核细胞的双重特点,基因编辑存在较大的难度和限制性,因而必须不断提高基因编辑技术在盐藻中的精确性和编辑效率,以确保目标基因得到准确修饰。探讨盐藻表达系统的基因工程研究现状,包括盐藻转化方法、外源基因的表达和基因编辑的研究现状等,分析CRISPR/Cas编辑技术在盐藻中面临的主要挑战,提出未来的发展方向和增效策略,以期加速盐藻表达系统的成熟和应用。

关键词：盐藻新型表达系统基因编辑 CRISPR/Cas9系统

怀菊花茎叶中聚炔类化合物对ox-LDL诱导的HUVECs细胞损伤的保护作用

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天然产物研究与开发 2024年

作者：王小兰石静亚李孟王滢清郑晓珂冯卫生河南中医药大学中医药科学院河南省中药开发工程技术研究中心河南中医药大学药学院

本文旨在研究怀菊花茎叶中分离得到的聚炔类化合物对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）损伤的保护作用及初步探讨作用机制。采... 详细信息

本文旨在研究怀菊花茎叶中分离得到的聚炔类化合物对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）损伤的保护作用及初步探讨作用机制。采用ox-LDL（200 μg/mL）处理HUVECs细胞建立内皮细胞损伤模型，同时给予聚炔类化合物1～10（100 μg/mL）干预；通过CCK-8法检测细胞生存率，筛选出有细胞保护作用的目标化合物；采用目标化合物5和9（12.5、25、50、100 μg/mL）干预细胞24 h，CCK-8检测细胞生存率，采用流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧（reactive oxygen species，ROS）生成率，酶联免疫（ELISA）检测细胞上清液中白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）及肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量；细胞免疫印迹法（In-Cell Western）检测细胞中核转录因子-κB（nuclear transcription factor-κB，NF-κB）2p100/p52 与NF-κBp65蛋白的相对表达水平。结果显示：与正常对照组（Con）相比，模型组（ox-LDL）中的细胞生存率明显下降，细胞凋亡率、ROS生成，炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α明显升高（P< 0.01）；与ox-LDL组相比，聚炔类化合物5和9可以明显提高HUVECs细胞的生存率、降低细胞凋亡率、ROS生成率，炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α（P< 0.05 或P< 0.01）的分泌，下调NF-κB2 p100/p52、NF-κB p65蛋白的表达（P< 0.05 or P< 0.01）。综上所述，怀菊花茎叶中聚炔苷类成分可以改善ox-LDL诱导的HUVECs细胞损伤与功能障碍，其作用机制可能与NF-κB信号通路相关。

关键词：怀菊花茎叶聚炔类化合物 HUVECs 凋亡与炎症 NF-κB

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艾GRF基因家族的鉴定与表达分析

福建农业学报 2024年第5期39卷 540-549页

作者：郭晨宁李晶晶杨晶凡刘俊杨灏马蕊陈随清练从龙河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中药资源与中药化学重点实验室河南郑州450046 豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南郑州450046

【目的】生长调节因子(growth-regulating factors,GRF)是植物的一种特有蛋白,探明艾(Artemisia argyi)GRF基因家族的生物学特性,为艾的生长发育和逆境胁迫调节提供依据。【方法】对艾GRF基因家族进行理化性质、进化、基因结构以及表达... 详细信息

【目的】生长调节因子(growth-regulating factors,GRF)是植物的一种特有蛋白,探明艾(Artemisia argyi)GRF基因家族的生物学特性,为艾的生长发育和逆境胁迫调节提供依据。【方法】对艾GRF基因家族进行理化性质、进化、基因结构以及表达等生物信息学进行分析,进而通过转录组数据和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析基因家族各成员在不同组织、逆境胁迫以及响应不同激素的表达模式。【结果】从艾基因组中共鉴定出17个GRF家族成员,理化鉴别显示其编码蛋白均为亲水蛋白;系统发育进化树分为4个亚家族;motif分析表明进化树中同一分支的基因具有相似或相同的保守基序;AaGRF基因家族成员随机分布在11条不同的染色体上;AaGRF基因家族启动子含有多种逆境和激素响应元件;Aa GRF基因家族在响应盐碱胁迫时表现出不同的表达趋势;该家族成员在艾的根、茎、叶中的表达模式具有组织特异性;经脱落酸、吲哚乙酸、水杨酸和茉莉酸甲酯处理后,AaGRF05、AaGRF06、AaGRF11和AaGRF14在处理后的12 h基因表达量最高,表明大部分基因在前期参与不同激素的调控。【结论】艾GRF基因家族参与艾生长发育、激素与逆境胁迫调节,为探究GRF家族功能提供的理论依据。

关键词：艾 GRF基因家族表达分析激素响应