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葫芦巴碱抑制食管癌细胞增殖、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡及铁死亡

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中药材 2024年 2039-2045页

作者：陈晓乐张勤生河南省中医院

目的:探讨葫芦巴碱对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及铁死亡的影响。方法:采用不同浓度葫芦巴碱及N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC,ROS抑制剂)或特丁基对苯二酚(TBHQ,Nrf2激活剂)或分别与葫芦巴碱联合作用于KYSE-150细胞,使用CCK-8试剂盒... 详细信息

目的:探讨葫芦巴碱对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及铁死亡的影响。方法:采用不同浓度葫芦巴碱及N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC,ROS抑制剂)或特丁基对苯二酚(TBHQ,Nrf2激活剂)或分别与葫芦巴碱联合作用于KYSE-150细胞,使用CCK-8试剂盒检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞集落形成能力;划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室实验检测细胞侵袭;流式细胞仪检测细胞内线粒体活性氧(mtROS)、脂质ROS及细胞凋亡;ELISA检测细胞内丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及铁含量;Western Blot检测细胞中MMP-2、MMP-9、Bax、Bcl-2、Nrf2、GPX4、SLCA711蛋白表达。结果:与空白对照组比较,葫芦巴碱可呈浓度依赖性降低KYSE-150细胞活力、集落形成能力、细胞迁移及侵袭能力、GSH水平及MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Nrf2、GPX4、SLCA711蛋白表达,提高细胞凋亡率、铁含量、Bax蛋白表达及mt ROS、脂质ROS、MDA水平,NAC和TBHQ可逆转葫芦巴碱的作用。结论:葫芦巴碱能抑制食管癌细胞KYSE-150增殖、迁移、侵袭并诱导其凋亡,其机制可能与下调Nrf2/SLCA711/GPX4信号通路而促进铁死亡有关。

关键词：食管癌葫芦巴碱铁死亡增殖迁移侵袭凋亡

身痛逐瘀汤调控SIRT1/Nrf2信号通路改善大鼠椎间盘退变的作用

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：黄家俊吴迪友陶广义赵宇黄俊卿杨彬河南省中医药大学骨伤学院河南省中医院

目的：探讨身痛逐瘀汤对大鼠椎间盘退变（intervertebral discs degeneration，IDD）的影响及其保护作用机制。方法：[体外研究] 40只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(3.38、6.75、13.5 g·kg-1)，连续给药7 d... 详细信息

目的：探讨身痛逐瘀汤对大鼠椎间盘退变（intervertebral discs degeneration，IDD）的影响及其保护作用机制。方法：[体外研究] 40只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(3.38、6.75、13.5 g·kg-1)，连续给药7 d后收集血清。另取10只雄性大鼠，分离髓核细胞。① 以白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）处理来构建IDD细胞模型，分别加入身痛逐瘀汤含药血清和铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1，Fer-1），探究身痛逐瘀汤含药血清对髓核细胞增殖以及铁死亡的影响。② 为研究沉默信息调节因子-1（silent information regulator type-1，SIRT1）/核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）在身痛逐瘀汤含药血清调控髓核细胞铁死亡中的作用，在IL-1β和身痛逐瘀汤高剂量含药血清处理的同时，分别加入SIRT1抑制剂Ex 527和Nrf2抑制剂ML385干预。CCK-8法检测细胞活力，EdU染色检测细胞增殖，比色法检测Fe2+、谷胱甘肽（glutathione，GSH）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平，Western blot检测谷胱甘肽过氧化酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）、长链脂酰辅酶A合成酶4（long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4）、II型胶原（Collagen II）、蛋白聚糖（Aggrecan）、SIRT1、Nrf2蛋白表达，免疫荧光检测SIRT1蛋白表达，[体内研究] 以雄性大鼠为研究对象，采用纤维环穿刺法构建IDD大鼠模型，大鼠随机分为假手术组、模型组、身痛逐瘀汤组(13.5 g生药·kg-1)以及阳性空白组(尼美舒利分散片，0.18 mg·kg-1)，给药体积为1 mL·kg-1。假手术组和模型组则灌胃等体积的生理盐水。每日给药1次，连续28 d。末次给药结束后采用HE染色法结合Masuda评分法，观察大鼠椎间盘组织病理变化并进行病理学评分。Western blot检测髓核组织中SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen II蛋白表达。结果：与空白组比较，IL-1β组髓核细胞中Fe2+和MDA含量及ACSL4蛋白水平显著升高（P<0.05），而细胞存活率、GSH浓度和GPX4、Collagen II、Aggrecan蛋白表达均显著降低（P<0.05）。身痛逐瘀汤含药血清和Fer-1干预逆转了IL-1β对髓核细胞活力和铁死亡的影响，髓核细胞中的Collagen II和Aggrecan蛋白水平也显著升高（P<0.05）。此外，IL-1β组髓核细胞中Sirt1和Nrf2蛋白表达降低，与空白组比较有统计学意义（P<0.05）。与IL-1β组比较，身痛逐瘀汤高剂量含药血清+ IL-1β组髓核细胞中SIRT1和Nrf2蛋白表达均显著增加（P<0.05）。与身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组相比，ML385组细胞中Nrf2和GPX4蛋白水平及GSH浓度显著降低，Fe2+含量和MDA水平均显著增加（P<0.05）。此外，Ex 527组细胞中的SIRT1、Nrf2和GPX4蛋白水平均降低，较身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组有统计学意义（P<0.05）。体内研究结果表明，与假手术组比较，模型组大鼠的椎间盘组织严重退变，病理学评分和ACSL4蛋白水平增加（P<0.05），而SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen II蛋白水平则显著降低（P<0.05）。与模型组比较，身痛逐瘀汤组大鼠椎间盘退变得到明显改善，病理学评分和ACSL4蛋白水平降低（P<0.05），SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen II蛋白水平升高（P<0.05）。结论：身痛逐瘀汤可能激活SIRT1/Nrf2信号通路，抑制IDD大鼠髓核细胞铁死亡，从而延缓IDD进程。

关键词：身痛逐瘀汤大鼠椎间盘退变髓核细胞铁死亡 SIRT1/Nrf2/GPX4信号通路

山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响

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中国老年学杂志 2024年第18期 4475-4480页

作者：苗喜云王慧莲孟庆良左瑞庭马俊福范围展俊平河南省中医院风湿病科

目的探讨山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症应答的影响及潜在分子机制。方法采用肿瘤坏死因子(TNF)-α(10 ng/ml)刺激成纤维细胞样滑膜细胞系MH7A细胞24 h,建立体外炎症模型。将细胞分为对照组(无处理)、T... 详细信息

目的探讨山姜素对人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症应答的影响及潜在分子机制。方法采用肿瘤坏死因子(TNF)-α(10 ng/ml)刺激成纤维细胞样滑膜细胞系MH7A细胞24 h,建立体外炎症模型。将细胞分为对照组(无处理)、TNF-α组(加入10 ng/ml的TNF-α)和TNF-α+山姜素低、中、高剂量组(加入10 ng/ml的TNF-α培养12 h,再加入5、10或20μmol/L的山姜素培养24 h)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和RT-q聚合酶链反应(PCR)分别检测细胞培养液上清液和细胞中白介素(IL)-6和IL-1β水平，噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖能力，TUNEL染色法和流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、p-p65、磷酸化核因子(NF)-κB抑制蛋白(p-IκBα)、p65、IκBα和Toll样受体(TLR)4蛋白表达。结果与对照组比较，TNF-α组MH7A培养液上清液中IL-6和IL-1β含量及细胞中IL-6和IL-1β mRNA水平、细胞增殖率、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα和TLR4蛋白表达明显升高(P<0.05);采用山姜素干预后，IL-6和IL-1β mRNA及含量、Bcl-2、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα及TLR4蛋白表达、细胞增殖率明显降低，细胞凋亡率、Bax蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论山姜素可降低TNF-α诱导的MH7A细胞增殖能力，并促进其凋亡，同时抑制炎症应答反应，其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路活化有关。

关键词：山姜素类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 MH7A细胞 Toll样受体(TLR)4/NF-κB通路

循经刮痧联合五行音乐疗法对肝阳上亢型持续性姿势-感知性头晕的疗效观察

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护理研究 2024年第10期38卷 1854-1858页

作者：何莹莹王红霞李佳唐洁河南省中医院河南450000

目的:探讨循经刮痧联合五行音乐疗法对肝阳上亢型持续性姿势-感知性头晕(PPPD)的疗效。方法:选择2022年9月—12月于我院就诊的66例肝阳上亢型PPPD病人作为研究对象,采用随机数字表法将病人分为观察组与对照组,各33例。对照组给予常规治... 详细信息

目的:探讨循经刮痧联合五行音乐疗法对肝阳上亢型持续性姿势-感知性头晕(PPPD)的疗效。方法:选择2022年9月—12月于我院就诊的66例肝阳上亢型PPPD病人作为研究对象,采用随机数字表法将病人分为观察组与对照组,各33例。对照组给予常规治疗及护理健康教育,观察组在对照组基础上采用循经刮痧联合五行音乐疗法。比较两组病人临床疗效、头晕程度、焦虑和抑郁情绪、中医证候评分。结果:观察组病人临床疗效优于对照组;观察组病人治疗后眩晕障碍量表、汉密尔顿焦虑量表、汉密尔顿抑郁量表及中医证候评分均低于治疗前及同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:循经刮痧联合五行音乐对肝阳上亢型PPPD病人临床疗效显著,可有效降低病人头晕程度、焦虑和抑郁情绪,减轻病人临床症状。

关键词：循经刮痧五行音乐疗法肝阳上亢持续性姿势-感知性头晕焦虑抑郁护理

通管消癥汤内服外用在输卵管阻塞性不孕症中的应用效果及对炎症因子水平的影响

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中华中医药学刊 2024年

作者：陈影杜文霞曹颖河南省中医院妇产科

目的：研究通管消癥汤内服外用在输卵管阻塞性不孕症中的应用效果及对炎症因子水平的影响。方法：选取2020年1月～2021年12月于某医院进行输卵管介入再通术后的输卵管阻塞性不孕症患者120例，按照随机数字表法均分为两组、每组60例患者... 详细信息

目的：研究通管消癥汤内服外用在输卵管阻塞性不孕症中的应用效果及对炎症因子水平的影响。方法：选取2020年1月～2021年12月于某医院进行输卵管介入再通术后的输卵管阻塞性不孕症患者120例，按照随机数字表法均分为两组、每组60例患者，对照组患者进行常规西药及灌肠、外敷疗法治疗，观察组患者在对照组基础上联合通管消癥汤内服治疗。治疗3个月后比较两组患者的临床疗效，中医症状积分，炎症因子白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平，治疗结束后跟踪随访12个月观察输卵管通畅率及宫内妊娠率。结果：观察组总有效率95.00%，显著高于对照组总有效率83.33%，组间差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后两组带下异常、腰骶酸痛、脉弦细涩、舌黯苔白症状积分均显著降低，且观察组显著低于对照组（P＜0.05）。治疗后两组IL-6、IL-8和TNF-α水平均显著降低，且观察组显著低于对照组（P＜0.05）。治疗结束后12个月观察组输卵管通畅率及宫内妊娠率分别为91.67%、33.33%，对照组分别为81.67%、23.33%，组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：通管消癥汤内服外用在输卵管阻塞性不孕症中的应用效果满意，能够降低患者血清炎症因子水平，是有效的治疗方案，值得应用。

关键词：输卵管阻塞性不孕症灌肠外敷通管消癥汤炎症因子

糖尿病周围神经病变经当归四逆汤治疗后的神经传导速度与疗效观察

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辽宁中医杂志 2024年

作者：陈焱季聚良牛越河南省中医院内分泌科

目的探讨糖尿病周围神经病变（DPN）经当归四逆汤治疗后的神经传导速度与疗效。方法采用随机数字表法将104例于2021年12月～2022年12月在河南省中医院接受治疗的DPN患者分为A组和B组，各52例。B组患者采用常规治疗，A组在B组基础上给... 详细信息

目的探讨糖尿病周围神经病变（DPN）经当归四逆汤治疗后的神经传导速度与疗效。方法采用随机数字表法将104例于2021年12月～2022年12月在河南省中医院接受治疗的DPN患者分为A组和B组，各52例。B组患者采用常规治疗，A组在B组基础上给予当归四逆汤治疗。以4周为1个周期，两组均维持治疗1个周期。比较两组治疗4周后的临床疗效，治疗前、治疗4周后的中医证候评分、血清学指标、血糖指标、神经传导情况及治疗期间的不良反应发生情况。结果与B组比较，A组治疗4周后的临床总有效率较高，（98.08%vs84.62%）；相较于治疗前，两组治疗4周后的肌肉萎缩、感觉减退、肢体麻木、四肢疼痛、四肢发凉各项评分、血清餐后2h血糖（2hPBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-23（IL-23）水平、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）值均降低，且相较于B组，A组更低，两组治疗4周后的正中神经感觉神经传导速度（SNCV）、腓总神经SNCV、正中神经腓总神经运动神经传导速度（MNCV）、腓总神经MNCV、血清总抗氧化能力（T-AOC）水平均升高，且与B组比较，A组较高（P<0.05）。两组均未发生明显不良反应。结论当归四逆汤治疗DPN可有效改善患者临床症状，减轻机体炎症以及氧化应激反应，稳定患者血糖水平，增强神经传导速度，疗效显著，且安全性较高。

关键词：糖尿病周围神经病变当归四逆汤神经传导速度疗效

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运用三期进阶法治疗输卵管性不孕症经验

中医杂志 2024年第17期65卷 1829-1834页

作者：吴长华郑瑞君李亚鸽张培培王林河南中医药大学 450000 河南省中医院河南省许昌市中医院

认为输卵管性不孕症病位在胞脉,以瘀阻胞脉为核心病机,并根据疾病发生发展过程中的病机变化特点,提出“三期进阶法”治疗方案。一期祛邪期以外感热毒合内生湿、郁、瘀邪壅滞胞脉为病机特点,治以清热利湿、行气活血,自拟盆炎消方;二期消... 详细信息

认为输卵管性不孕症病位在胞脉,以瘀阻胞脉为核心病机,并根据疾病发生发展过程中的病机变化特点,提出“三期进阶法”治疗方案。一期祛邪期以外感热毒合内生湿、郁、瘀邪壅滞胞脉为病机特点,治以清热利湿、行气活血,自拟盆炎消方;二期消癥期以气血阻滞、胞脉闭塞为病机特点,治以破血行气、逐瘀通络,自拟通管方;三期扶正助孕期以胞脉瘀阻日久、肾精亏损为病机特点,治以温肾化瘀、益气养血,自拟毓麟助孕方。同时注重中西医协同诊疗,辨证与辨病相结合。

关键词：输卵管性不孕症祛邪消癥扶正助孕

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乌头汤对膝骨关节炎大鼠模型的治疗作用

山东大学学报（医学版） 2024年第5期62卷 64-71页

作者：王莉莎王上增史栋梁张仲博任博文王云飞郭中华周晓宁河南省中医院骨病一科河南郑州450053 河南省中医院关节科河南郑州450053 河南省洛阳正骨医院颈肩腰腿痛四科河南洛阳450016

目的探讨乌头汤基于核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型的治疗作用。方法通过向膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液建立... 详细信息

目的探讨乌头汤基于核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型的治疗作用。方法通过向膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液建立KOA大鼠模型;将造模后的大鼠随机分为KOA组、乌头汤组(4.2 g/kg乌头汤)、抑制剂组(30 mg/kg ML385)、乌头汤+抑制剂组(4.2 g/kg乌头汤+30 mg/kg ML385),每组10只,另取10只大鼠腔内注射生理盐水作为对照组。采用苏木精-伊红染色法观察软骨组织病理学变化并进行损伤评分;采用ELISA法检测血清中炎症因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)]及氧化应激[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]指标;采用qRT-PCR法及Western blotting法检测Nrf2、HO-1表达。结果与对照组相比,KOA组软骨表面粗糙不平,细胞排列紊乱,层状结构消失,IL-1β、TNF-α、MDA含量增加,SOD、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与KOA组相比,乌头汤组病理损伤得到缓解,IL-1β、TNF-α、MDA含量降低,SOD、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05),但抑制剂组病理损伤进一步加剧,IL-1β、TNF-α、MDA含量增加,SOD、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与乌头汤组相比,乌头汤+抑制剂组病理损伤较为严重,IL-1β、TNF-α、MDA含量增加,SOD、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与抑制剂组相比,乌头汤+抑制剂组病理损伤稍有改善,IL-1β、TNF-α、MDA含量降低,SOD、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乌头汤可通过激活Nrf2/HO-1通路对KOA大鼠起治疗作用。

关键词：乌头汤核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1通路膝骨关节炎治疗机制

基于SIRT1/NF-κB通路探究秦艽醇提物对脂多糖诱导大鼠背根神经节神经元炎性损伤的保护作用及机制

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 179-183页

作者：周松林黄俊卿李科季鸿飞都帅刚杨彬河南省中医院疼痛科河南郑州450002

目的探讨秦艽醇提物对脂多糖诱导大鼠背根神经节神经元(DRGn)炎性损伤的保护作用及其机制。方法大鼠分为假手术组、模型组(建模)、阳性组(建模+16 mg/kg普瑞巴林)和给药组(建模+50 mg/kg秦艽醇提物),测定大鼠建模前及给药前后的机械性... 详细信息

目的探讨秦艽醇提物对脂多糖诱导大鼠背根神经节神经元(DRGn)炎性损伤的保护作用及其机制。方法大鼠分为假手术组、模型组(建模)、阳性组(建模+16 mg/kg普瑞巴林)和给药组(建模+50 mg/kg秦艽醇提物),测定大鼠建模前及给药前后的机械性触痛阈值(PWPT)。制备正常大鼠血清和秦艽醇提物低、高剂量大鼠含药血清,分离培养DRGn细胞并分为对照组(10%正常大鼠血清)、脂多糖组(100 ng/ml脂多糖+10%正常大鼠血清)、秦艽醇提物低浓度组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物低剂量大鼠含药血清)、秦艽醇提物高浓度组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物高剂量大鼠含药血清)及沉默信息调节因子(SIRT)1抑制组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物高剂量大鼠含药血清+98 nmol/L烟酰胺)。CCK-8测定DRGn细胞活力,流式细胞仪检测DRGn细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定DRGn细胞培养液中白细胞介素(IL)-6、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测DRGn细胞中SIRT1、乙酰化(Ac)-核因子(NF)-κB p65、NF-κB p65蛋白表达。结果给药前模型组、给药组PWPT较建模前均显著降低(P0.05);与对照组相比,脂多糖组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与脂多糖组相比,秦艽醇提物低、高浓度组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;与秦艽醇提物低、高浓度组相比,SIRT1抑制组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论秦艽醇提物可激活SIRT1,促进NF-κB p65去乙酰化,减轻脂多糖诱导大鼠DRGn细胞炎性损伤。

关键词：秦艽醇提物沉默信息调节因子1/核因子κB通路脂多糖背根神经节神经元炎性损伤