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计算机辅助复方苦参注射液中抑制p21活化激酶1的活性成分预测及分子机制研究

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生物医学工程学杂志 2024年第2期41卷 313-320页

作者：林琳常静杰田耀洲陈姣南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028 江苏省中医药研究院南京210028 广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动... 详细信息

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动力学模拟发现,14α-羟基苦参碱使PAK1的α1和α2螺旋向外延伸形成一个较深的别构调节口袋,同时诱导三磷酸腺苷(ATP)结合口袋处的β-折叠向内关闭,导致ATP结合口袋处于“半闭合”状态而失活。当去除14α-羟基苦参碱后,PAK1从失活构象向活性构象转变,因此推测,14α-羟基苦参碱可能是PAK1的可逆别构调节抑制剂。本研究采用现代技术方法对中药活性成分进行研究,为天然产物的开发利用及寻找新的胰腺癌治疗方案奠定基础。

关键词：复方苦参注射液 p21活化激酶1 14α-羟基苦参碱胰腺癌分子对接分子动力学模拟

心脏超声评价葶苈大枣泻肺汤抗阳虚血瘀型心力衰竭的研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：陈昊昱王振源王聪李焱山东中医药大学附属医院心血管病科

目的：分析心脏超声评价葶苈大枣泻肺汤抗阳虚血瘀型心力衰竭的研究。方法：纳入2022年8月—2023年9月山东中医药大学附属医院心血管病科收治的阳虚血瘀型心力衰竭患者94例为研究对象，随机数字表法将其分为2组，对照组47例采用常规治疗... 详细信息

目的：分析心脏超声评价葶苈大枣泻肺汤抗阳虚血瘀型心力衰竭的研究。方法：纳入2022年8月—2023年9月山东中医药大学附属医院心血管病科收治的阳虚血瘀型心力衰竭患者94例为研究对象，随机数字表法将其分为2组，对照组47例采用常规治疗，47例观察组在此基础上采用葶苈大枣泻肺汤治疗，对比两组疗效差异、并用心脏超声评价治疗前后心功能指标变化情况等。结果：观察组治疗总有效率为95.74%，远高于对照组的76.60%，组间比较差异显著（P＜0.05）；治疗后观察组心脏指数（CI）、每搏量（SV）、心脏每分钟搏出量（CO）、射血分数（EF）高于对照组，组间比较差异显著（P＜0.05）；治疗后观察组左心室舒张末期容积（Left Ventricular End Diastolic Volume ，LVEDV）、左心室收缩末期容积（LVESV）、左心室舒张末期内径（LVDd）、左心室收缩末期内径（LVDs）低于对照组，组间比较差异显著（P＜0.05）。结论：葶苈大枣泻肺汤治疗阳虚血瘀型心力衰竭患者效果明确，能有效可抑制心室重构，促进心功能恢复，促进患者病情改善；在治疗期间用心脏超声观察有利于准确评价患者心脏功能及心脏形态变化情况，为临床诊治提供必要参考依据，有较高应用价值。

关键词：葶苈大枣泻肺汤心脏超声心力衰竭阳虚血瘀型心功能

冠状动脉慢性完全闭塞病变侧支循环的建立与胰岛素抵抗的相关性

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 780-786页

作者：胡司淦程增为李敏高世毅高大胜康品方蚌埠医科大学第一附属医院心血管科安徽蚌埠233004

目的探讨糖尿病对冠状动脉慢性完全闭塞(CTO)冠心病患者侧支循环建立影响的调节机制。方法87例经冠脉造影确诊至少1支血管为CTO的冠心病患者,根据Cohen-Rentrop分级标准将侧支循环建立水平分为2组,0~1级为侧支循环水平低患者42例,2~3级... 详细信息

目的探讨糖尿病对冠状动脉慢性完全闭塞(CTO)冠心病患者侧支循环建立影响的调节机制。方法87例经冠脉造影确诊至少1支血管为CTO的冠心病患者,根据Cohen-Rentrop分级标准将侧支循环建立水平分为2组,0~1级为侧支循环水平低患者42例,2~3级为侧支循环水平高患者45例,根据是否合并糖尿病分别比较胰岛素抵抗(IR)水平。应用数学模型稳态模式评估法计算IR指数(HOMA-IR)。22例患者介入术中获得侧支循环及外周血标本,采用非靶向代谢组学比较侧支循环与外周血代谢物差异。结果两组在NT-proBNP(P<0.05)和LVEF(P<0.01)方面比较差异有统计学意义。在非糖尿病CTO患者中,侧支循环水平0~1级组胰岛素抵抗水平高于2~3级组(P<0.01)。CTO伴糖尿病与CTO非糖尿病患者相比,侧支循环及外周血中存在明显差异性代谢物,在侧支循环中,上调代谢物63种,下调48种;外周血中,上调代谢物23种,下调14种。侧支循环中差异性代谢物显著相关的富集通路为芳香化合物降解,脂肪酸生物合成,类固醇降解通路;在外周血中差异代谢物富集通路为戊糖磷酸代谢,细菌趋化性,己内酰胺降解,甘油磷脂代谢,赖氨酸降解通路。结论CTO非糖尿病患者中侧支循环建立水平较低者存在明显的胰岛素抵抗。芳香化合物的降解,脂肪酸生物合成,类固醇降解通路与侧支循环形成密切相关。

关键词：冠心病胰岛素抵抗侧支循环慢性完全闭塞病变代谢组学

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基于NF-κB/NLRP3信号通路探讨益气通脉方干预ApoE-∕-小鼠肝脏炎症及脂质沉积的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 64-72页

作者：陈雨晗任权娜汪坤宿婷婷杨艳华马鸣张雨赵旭河南中医药大学药学院河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院

目的：探究益气通脉方（YQTM）通过调控核转录因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路对载脂蛋白E-∕-敲除(Apo E-∕-)小鼠肝脏炎症的影响。方法：将40只Apo E-∕-小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组（阳性药组）、YQTM低... 详细信息

目的：探究益气通脉方（YQTM）通过调控核转录因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路对载脂蛋白E-∕-敲除(Apo E-∕-)小鼠肝脏炎症的影响。方法：将40只Apo E-∕-小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组（阳性药组）、YQTM低、中、高剂量组(0.39、0.78、1.56 g·kg-1)。各给药组在高脂饲料喂养基础上分别给予相应剂量药物灌胃，连续12周。8只C57BL/6J小鼠为空白组，普通饲料喂养。12周后，采用油红O（oil red O）染色、马松（Masson）染色法观察小鼠主动脉病变情况并判断是否造模成功；oil red O染色观察小鼠肝脏中脂肪沉积；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏组织病变情况；Masson染色观察小鼠肝脏胶原蛋白纤维分布；酶标仪检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）的表达水平；肝脏中TC、TG水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠肝脏白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）的表达水平；免疫组化法（IHC）观察小鼠肝脏NF-κB、NLRP3的表达区域；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肝脏中NF-κB、NF-κB抑制蛋白（IκB）、IκB激酶β（IKKβ）、磷酸化（p）-NF-κB、pIκB、p-IKKβ、NLRP3和胱天蛋白酶-1（Caspase-1）蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组小鼠主动脉脂质沉积严重，肝脏细胞内脂肪滴积大量聚集且细胞质内充满脂肪空泡（P<0.01），小鼠血清中TG、TC、LDL-C、AST和ALT水平均显著升高（P<0.01），肝脏中TG、TC水平升高（P<0.01）；肝组织IL-1β和IL-18含量，肝脏NF-κB、IκB、IKKβ、p-NF-κB、p-IκB、p-IKKβ、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，YQTM各剂量组小鼠主动脉斑块减轻，肝脏内脂肪聚集减少，炎症细胞浸润得到缓解（P<0.05,P<0.01）。小鼠血清中TG、TC、LDL-C、AST和ALT水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）；肝脏中TG、TC水平有所减少；肝组织L-1β、IL-18水平，肝脏NF-κB、IκB、IKKβ、p-NF-κB、p-IκB、p-IKKβ、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论：YQTM对Apo E-∕-小鼠肝脏炎症的干预机制可能是与下调NF-κB/NLRP3信号通路有关。

关键词：益气通脉方动脉粥样硬化肝脏炎症核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路

圣草素促进成骨细胞自噬减轻糖皮质激素诱导的细胞凋亡

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中国组织工程研究 2024年第28期28卷 4498-4504页

作者：马运锋韩小飞河南中医药大学第二附属医院(河南省中医院)骨病一科河南省郑州市450002 河南中医药大学第二附属医院(河南省中医院)风湿病科河南省郑州市450002

背景:糖皮质激素诱导的骨质疏松症是系统性糖皮质激素治疗的常见并发症,主要表现为对成骨细胞的抑制作用。圣草素可抑制破骨细胞分化和卵巢切除术引起的骨质疏松,然而,圣草素是否调节糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡尚不清楚。目的:探究... 详细信息

背景:糖皮质激素诱导的骨质疏松症是系统性糖皮质激素治疗的常见并发症,主要表现为对成骨细胞的抑制作用。圣草素可抑制破骨细胞分化和卵巢切除术引起的骨质疏松,然而,圣草素是否调节糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡尚不清楚。目的:探究圣草素是否在地塞米松诱导的成骨细胞凋亡中发挥作用,及其潜在的作用机制。方法:采用不同浓度(0,0.5,1,2.5,5,10μmol/L)的圣草素或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(5μmol/L)处理地塞米松预处理的成骨细胞MC3T3‐E1,然后用血红素加氧酶1的过表达载体(pcDNA-HMOX1)和空载体(pcDNA vector)转染MC3T3‐E1细胞。分别采用CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡;采用ELISA检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性;采用Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Atg5和Atg12表达,凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,以及AMP蛋白激活激酶(AMPK)和p-AMPK蛋白表达。结果与结论:①低浓度的圣草素对MC3T3-E1细胞无毒性,且促进细胞增殖,并以剂量依赖性的方式促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Atg5和Atg12表达,降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性,抑制Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达,减少地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞凋亡;②此外圣草素可显著促进成骨细胞中血红素加氧酶1的表达;过表达血红素加氧酶1促进AMPK磷酸化,激活自噬,抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡;③而3-甲基腺嘌呤处理抵消了血红素加氧酶1过表达对MC3T3-E1细胞的影响;④提示低浓度圣草素对成骨细胞无毒性,可以通过上调血红素加氧酶1的表达激活AMPK信号通路,从而促进自噬,抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡;圣草素具有治疗糖皮质激素诱导骨质疏松症的巨大潜力。

关键词：圣草素地塞米松血红素加氧酶1 MC3T3‐E1细胞 AMPK通路

扩张型心肌病相关信号通路及其中医药调控研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 256-264页

作者：邱月清王振涛河南中医药大学郑州450053 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院郑州450053

扩张型心肌病(DCM)主要病理改变为左心室扩大为主的全心扩大,临床表现为心功能下降、心律失常、血栓栓塞等,甚者可能发生猝死,是难治性心血管疾病之一。临床仍以保守药物治疗为主,但因其无法规避的血压过低等不良反应常难以达到满意预后... 详细信息

扩张型心肌病(DCM)主要病理改变为左心室扩大为主的全心扩大,临床表现为心功能下降、心律失常、血栓栓塞等,甚者可能发生猝死,是难治性心血管疾病之一。临床仍以保守药物治疗为主,但因其无法规避的血压过低等不良反应常难以达到满意预后,而中西医结合治疗可有效改善副作用、提高疗效。研究发现,核转录因子-κB(NF-κB)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β(TGF-β)/Smads、Toll样受体(TLR)4/c-Jun氨基末端激酶(JNK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(Akt)等信号通路在DCM的发生发展中起到了关键的调控作用,且中医方药可通过调控上述信号通路起到改善心肌纤维化、逆转心室重构、减轻氧化应激、抗炎等多种作用改善DCM,并且因其多靶点、多机制的作用特点具有安全性高、耐受性良好的优势,已经成为当前临床治疗的重要内容。

关键词：扩张型心肌病中医药信号通路研究进展

基于《伤寒论》探讨半夏泻心汤类方治疗溃疡性结肠炎的机制及研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 279-288页

作者：张亚粉左振魁刘天瑞河南中医药大学郑州450046 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院郑州450002

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的... 详细信息

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的治疗方法。中医药防治此类病证由来已久,仲景曾在《伤寒论》原文中多次论及下利、泄利与久痢、肠风、脏毒等与UC相类似的症状,论述了相应病机与治法,并提出有效的治疗方剂,为后世运用经方辨治UC奠定了基础。近年来,研究发现中医药对防治UC具有独特的优势,不仅能够有效缓解UC患者的症状,还能在很大程度上改善患者的生活质量。研究还发现,无论是从网络药理学、临床观察亦是动物实验,半夏泻心汤类方作为一种中药复方,在治疗UC方面取得了显著的疗效。经过大量的实验探索,研究发现半夏泻心汤类方在治疗UC的原理上与细胞炎症因子、肠道微生物、免疫反应、相关的信号传导途径和细胞焦亡等因素有紧密的关联。本文将会对半夏泻心汤类方在治疗UC中的作用原理做一个全面的概括,包括其理论根源、药物组成和作用机制等各个方面的研究,旨在给临床实践提供更加稳固的理论支持。

关键词：伤寒论半夏泻心汤溃疡性结肠炎研究进展机制

巨噬细胞线粒体功能障碍在动脉粥样硬化中的作用研究进展

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中国免疫学杂志 2024年

作者：靳博远王婷婷华成俊陈玉善尚莎莎王建茹河南中医药大学第一附属医院心脏中心国家区域(中医)心血管诊疗中心

动脉粥样硬化（AS）是一种多因素疾病，在其发生发展过程中巨噬细胞的线粒体功能障碍起到了关键性作用。巨噬细胞线粒体功能障碍影响巨噬细胞的极化方向，并导致严重的炎症反应，是AS的潜在治疗靶点。本文主要就AS发生发展过程中巨噬细... 详细信息

动脉粥样硬化（AS）是一种多因素疾病，在其发生发展过程中巨噬细胞的线粒体功能障碍起到了关键性作用。巨噬细胞线粒体功能障碍影响巨噬细胞的极化方向，并导致严重的炎症反应，是AS的潜在治疗靶点。本文主要就AS发生发展过程中巨噬细胞线粒体功能障碍所发挥作用以及改善巨噬细胞线粒体功能的治疗方式的最新研究进展进行综述。

关键词：动脉粥样硬化巨噬细胞线粒体功能障碍线粒体自噬

免疫细胞在心肌炎中的因果作用：两样本与多变量孟德尔随机化研究

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现代预防医学 2024年第10期51卷 1748-1753页

作者：薛思杨姜红菊山东中医药大学第二附属医院心血管病科

目的采用孟德尔随机化分析方法，探究参与心肌炎(MC)的相关免疫细胞。方法对全基因关联研究数据库(GWAS)进行数据挖掘，暴露因素为731种免疫细胞特征，结局因素为心肌炎。采用逆方差加权法(IVW)、MR-Egger法、Simple Mode法、加权中... 详细信息

目的采用孟德尔随机化分析方法，探究参与心肌炎(MC)的相关免疫细胞。方法对全基因关联研究数据库(GWAS)进行数据挖掘，暴露因素为731种免疫细胞特征，结局因素为心肌炎。采用逆方差加权法(IVW)、MR-Egger法、Simple Mode法、加权中位数法和Weighted Mode法等回归模型进行孟德尔随机化分析。同时进行异质性检验、水平多效性分析、敏感性分析。通过逆方差加权法(IVW)对筛选出的相关免疫细胞特征进行多变量孟德尔随机化分析，以矫正7种阳性免疫细胞特征对结局的影响。结果 (1)两样本孟德尔随机化IVW法结果显示：CD39+resting Treg%resting Treg(OR=1.237,95%CI:1.039～1.474)、CD4+CD8dim%leukocyte(OR=0.737,95%CI:0.543～0.100)、CD28-CD8dim AC(OR=0.868,95%CI:0.753～0.100)、CD28-CD8br AC(OR=1.398,95%CI:1.097～1.780)、CD20 on CD20-CD38-(OR=1.295,95%CI:1.012～1.659)、CCR2 on monocyte(OR=1.010,95%CI:1.000～1.208)、CD11b on basophil(OR=0.852,95%CI:0.727～0.998)7种免疫细胞特征与MC存在因果关系。(2)多变量孟德尔随机化结果显示，CD39+resting Treg%resting Treg(OR=1.228,95%CI:1.059～1.423)、CD28-CD8dim AC(OR=0.629,95%CI:0.428～0.924)、CCR2 on monocyte(OR=0.661,95%CI:0.488～0.895)与MC存在相关性。(3)反向孟德尔随机化结果未发现7种阳性免疫细胞特征与MC存在因果关系。结论本研究通过遗传学手段证实了免疫细胞与MC之间的密切联系，为今后的研究提供参考。

关键词：孟德尔随机化全基因组关联研究心肌炎免疫细胞