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鱼类逆境情况下MicroRNA表达研究进展

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水产科学 2020年第5期39卷 771-779页

作者：陈一竹杨长幸马文文王月冯梦霞董文广汪曦张曼董静高云霓顾钱洪周传江河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室河南新乡453007

鱼类因其生活环境的多变性,在其生活史中经常受到各种环境胁迫,因环境条件改变产生的不利变化都会使动物产生应激反应。疾病、有机体损伤、低氧、重金属和环境污染等均会打破鱼体原有的平衡,影响鱼类生长甚至生存。而脊椎动物进化出了... 详细信息

鱼类因其生活环境的多变性,在其生活史中经常受到各种环境胁迫,因环境条件改变产生的不利变化都会使动物产生应激反应。疾病、有机体损伤、低氧、重金属和环境污染等均会打破鱼体原有的平衡,影响鱼类生长甚至生存。而脊椎动物进化出了能够依靠转录因子和细胞因子进行自我保护的复杂免疫反应[1],这些免疫反应的激活信号通路主要通过核转录因子NF-κB激活[2],因此在逆境中转录水平表达量的变化就具有重要的参考意义。

关键词： MicroRNA(miRNA) 鱼类逆境负调控

日本沼虾核糖体蛋白S3a基因cDNA的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能初探

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淡水渔业 2023年第1期53卷 57-68页

作者：李屹铮张帅帅刘雪巍张冉林鑫辉张猛王磊于淼乔志刚江红霞河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室河南新乡453007

为了探究日本沼虾(Macrobrachium nipponense)核糖体蛋白S3a(MnRPS3a)在其卵巢发育中的功能,利用cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR技术获得了MnRPS3a基因的全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光(IF)技术分别进行了该基因... 详细信息

为了探究日本沼虾(Macrobrachium nipponense)核糖体蛋白S3a(MnRPS3a)在其卵巢发育中的功能,利用cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR技术获得了MnRPS3a基因的全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光(IF)技术分别进行了该基因的表达模式和蛋白定位分析。结果显示,MnRPS3a基因cDNA全长902 bp,共编码266个氨基酸;MnRPS3a与墨吉对虾(Fenneropenaeus merguiensis)RPS3a氨基酸序列相似性最高,进化上的亲缘关系也最近;在不同组织中,MnRPS3a基因在肌肉中的表达量最高;在不同发育阶段卵巢中,MnRPS3a基因在Ⅰ期卵巢中的表达量最高;注射5-羟色胺(5-HT)能诱导日本沼虾卵巢MnRPS3a和卵黄蛋白原(Vg)基因表达升高,而注射多巴胺(DA)则抑制这2个基因表达。MnRPS3a蛋白主要定位于日本沼虾Ⅰ期和Ⅱ期卵巢的滤泡细胞、Ⅲ期和Ⅳ期卵巢卵母细胞的细胞质中。结果表明MnRPS3a可能在日本沼虾卵巢发育调控中发挥重要的作用。

关键词：日本沼虾(Macrobrachium nipponense) 核糖体蛋白S3a 基因表达蛋白定位卵巢发育

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克氏原螯虾前列腺素E_(2)受体EP4基因的序列特征及表达分析

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水产科学 2023年第4期42卷 585-593页

作者：江红霞张冉李屹铮刘雪巍张帅帅于淼王磊张猛乔志刚李学军河南师范大学水产学院水产动物疾病控制河南省工程实验室河南省水产动物养殖工程技术研究中心河南新乡453007

前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP4在动物体的卵巢发育、排卵和生殖调控方面具有重要的作用。利用转录组测序的方法从克氏原螯虾卵巢中获得了PGE_(2)受体EP4(PcEP4)基因的具有完整开放阅读框的cDNA序列。为阐明该基因的序列特征及其在克氏... 详细信息

前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP4在动物体的卵巢发育、排卵和生殖调控方面具有重要的作用。利用转录组测序的方法从克氏原螯虾卵巢中获得了PGE_(2)受体EP4(PcEP4)基因的具有完整开放阅读框的cDNA序列。为阐明该基因的序列特征及其在克氏原螯虾卵巢中的作用,对该基因的序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法对该基因的表达模式进行检测。生物信息学分析结果显示:PcEP4基因开放阅读框长2505 bp,编码835个氨基酸;PcEP4是一个典型的具有7个跨膜α-螺旋结构的G蛋白偶联受体蛋白;克氏原螯虾EP4氨基酸序列与凡纳滨对虾的相似性最高,亲缘关系最近。基因表达结果显示:PcEP4基因表达量在克氏原螯虾成熟卵巢中的表达量最高;在Ⅰ~Ⅵ期的卵巢中,PcEP4基因在Ⅴ期卵巢中的表达量最高;PGE_(2)注射后36、48、60 h,克氏原螯虾卵巢中PcEP4基因表达量与对照组相比显著升高(P<0.05),注射72 h后克氏原螯虾的抱卵率与对照组相比也升高。试验结果表明,EP4作为PGE_(2)的受体与PGE_(2)一起在克氏原螯虾的卵巢中具有促进卵子成熟和排卵的重要作用。

关键词：克氏原螯虾前列腺素E_(2)受体 EP4 基因表达卵巢

克氏原螯虾核糖体蛋白S24(RPS24)基因的克隆与表达分析

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淡水渔业 2021年第6期51卷 97-105页

作者：江红霞李屹铮张冉王磊张猛于淼乔志刚李学军河南师范大学水产学院水产动物疾病控制河南省工程实验室河南省水产动物养殖工程技术研究中心河南新乡453007

为了阐明克氏原螯虾(Proambaus clarkii)核糖体蛋白S24(ribosomal protein S24,RPS24)基因序列特征及其在卵巢发育中的作用,本研究利用RACE方法克隆获得了克氏原螯虾RPS24(PcRPS24)基因全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(QPCR)方法对... 详细信息

为了阐明克氏原螯虾(Proambaus clarkii)核糖体蛋白S24(ribosomal protein S24,RPS24)基因序列特征及其在卵巢发育中的作用,本研究利用RACE方法克隆获得了克氏原螯虾RPS24(PcRPS24)基因全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(QPCR)方法对该基因的表达模式进行了分析。结果显示:PcRPS24 cDNA序列全长438 bp,编码136个氨基酸,并具有11个磷酸化位点和1个RPS24e标志序列;克氏原螯虾与八棘多刺鱼的RPS24氨基酸序列相似性最高,与昆虫纲动物在进化上的亲缘关系最近;PcRPS24基因表达量在克氏原螯虾发育过程中逐渐升高,在卵巢发育至Ⅰ期的成虾中达到最大值;在成虾的不同组织中,PcRPS24基因在肝胰腺和卵巢中的表达量较高;在Ⅰ-Ⅵ期的卵巢中,PcRPS24基因在Ⅰ期卵巢中的表达量最高。结果表明PcRPS24可能在克氏原螯虾早期卵巢发育中起重要作用。

关键词：克氏原螯虾(Proambaus clarkii) 核糖体蛋白S24 基因克隆基因表达卵巢发育

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淡水鱼类对低氧的抗氧化防护响应

水产科学 2016年第5期35卷 591-596页

作者：赵燕静狄桂兰蒋昕彧李慧孔祥会河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室河南新乡453007

氧气对需氧生物的生存至关重要。同一分压下,水中氧含量仅为陆地空气氧含量的1/30,水生脊椎动物氧的可利用性比陆生动物更重要。此外,氧气在水中的扩散速度只有空气中的1/10 000[1]。所以,无论是生物或非生物过程中引起氧的可利用性或... 详细信息

氧气对需氧生物的生存至关重要。同一分压下,水中氧含量仅为陆地空气氧含量的1/30,水生脊椎动物氧的可利用性比陆生动物更重要。此外,氧气在水中的扩散速度只有空气中的1/10 000[1]。所以,无论是生物或非生物过程中引起氧的可利用性或氧消耗变化,均显著影响水环境中溶解氧的含量变化。因此,大多数海洋、河口和淡水较容易发生连续或慢性的低氧现象。

关键词：低氧淡水鱼类氧化应激抗氧化防护

乳酸乳球菌Z-2不同处理方式对鲤益生作用的离体研究

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饲料工业 2022年第2期43卷 46-51页

作者：蔡忠良张静静王淏冉任欣欣朱超杰刘莎莎崔文姗冯军厂河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室河南新乡453007

为探究乳酸乳球菌Z-2(Lactococcus lactis Z-2)不同处理方式对鲤的益生作用,试验共设置*** Z-2菌株6种不同处理[活菌及上清液的混合物(mixture of live cells and supernatant,LCS)、无细菌培养上清液(cell-free culture supernatant,CS)、活菌(live cells,LC)、菌热灭活(heat-killed cells,HK)、菌超声破碎(ultrasonic broken of cells,UB)和胞外多糖(exopolysaccharides of CS,EPS-2)]与鲤[体重(47.66±0.43)g]头肾单核细胞体外共培养,检测其对鲤头肾单核细胞的增殖能力和吞噬活性,及孵育液中一氧化氮(NO)和免疫相关细胞因子表达量的影响。结果表明:LCS、LC、UB和EPS-2处理组较之对照组,均能显著增强头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,HK处理组仅能显著增强头肾细胞的吞噬活性(P研究表明,*** Z-2的不同处理方式均对鲤表现出一定的免疫调节作用。

关键词：鲤乳酸菌头肾细胞不同处理方式免疫应答

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凡纳滨对虾环境胁迫响应信号通路研究进展

广东畜牧兽医科技 2024年第1期49卷 16-25页

作者：刘丽诗陈义烘华南师范大学现代水产养殖科学与工程研究院华南师范大学生命科学学院

水生动物生活于不断变化的水体环境之中，并时刻受其影响。凡纳滨对虾为具有开放式血淋巴管系统的变温动物，这些生理特征，决定了相较于鱼类等水生脊椎动物，水体环境变化对其生理状态更容易产生负面影响，造成环境胁迫。一般而言，凡... 详细信息

水生动物生活于不断变化的水体环境之中，并时刻受其影响。凡纳滨对虾为具有开放式血淋巴管系统的变温动物，这些生理特征，决定了相较于鱼类等水生脊椎动物，水体环境变化对其生理状态更容易产生负面影响，造成环境胁迫。一般而言，凡纳滨对虾可以通过主动逃避、物理屏障、神经内分泌调节及胁迫信号通路调控等多种措施，从不同的层次对环境胁迫做出反应。近年来，随着分子生物学，尤其是各种组学技术的发展，关于凡纳滨对虾环境胁迫响应信号通路的研究取得了较大的进展。凡纳滨对虾内质网应激响应、氧化应激响应等过程的分子机制均已得到了初步的揭示。该文将重点介绍近年来关于凡纳滨对虾中若干重要环境胁迫响应信号通路的研究所取得的进展，并就该方面存在的不足与未来方向进行初步的谈论。

关键词：凡纳滨对虾环境胁迫胁迫响应内质网应激非折叠蛋白反应

饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响

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动物营养学报 2022年第3期34卷 1831-1844页

作者：李衡曹慧杨国坤常绪路张艳敏张建新胡文攀朱振祥李克克孟晓林河南师范大学水产学院新乡453007 河南省水产动物养殖工程技术研究中心新乡453007 河南金百合生物科技股份有限公司安阳456150

为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0(对照)、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[(75.25±1.45)g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形... 详细信息

为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0(对照)、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[(75.25±1.45)g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形态、肠道防御屏障相关基因表达以及肠道内容物短链脂肪酸(SCFAs)含量和肠道菌群的变化。结果显示:1)与对照组相比,添加怀山药对鲤生长性能无显著影响(P>0.05),但可以增加肠微绒毛密度和完整性,增加杯状细胞数量、肠道黏膜褶皱数量和肠绒毛高度,从而改善鲤肠道组织结构,提高吸收表面积。2)与对照组相比,怀山药组肠道组织过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增强(P>0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)基因相对表达量显著升高(P开发的免疫刺激剂应用于水产养殖。

关键词：鲤怀山药肠道菌群肠屏障免疫

睡美人转座子在草鱼CIK细胞中介导的高效基因整合

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水生生物学报 2018年第2期42卷 264-270页

作者：陈凯薛亭王艺舟潘启华于淼陈天圣华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室武汉430070 河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心新乡453007

为研究睡美人(Sleeping Beauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系统,以及转座子和转座酶元件在同一个质粒的一元顺式(cis)转... 详细信息

为研究睡美人(Sleeping Beauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系统,以及转座子和转座酶元件在同一个质粒的一元顺式(cis)转座子系统;通过转染CIK细胞,用荧光显微镜、流式细胞仪和荧光定量PCR分析了转染2d后及嘌呤霉素筛选4周后的细胞,测定Ds Red转染效率和整合效率,并结合高效热不对称交互式PCR扩增获得SB转座子整合位点的序列。结果表明,SB二元转座子系统的整合效率远高于一元系统;SB转座子与转座酶比例为1鲶2时,外源基因Ds Red的整合效率最高;SB转座子偏向于插入草鱼基因组TA序列处。研究表明优化SB转座子和转座酶的比例能提高外源基因在草鱼细胞中的整合效率并快速获得突变细胞,同时为在鱼类细胞中采用SB转座子建立突变体文库提供理论基础。

关键词：睡美人转座子转座酶草鱼肾脏细胞整合位点