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蛋白质隐态构象

中国生物化学与分子生物学报 2021年第8期37卷 1010-1016页

作者：成细瑶李刚苏正定湖北工业大学生物工程系武汉430068

生物活性蛋白质的结构具有动态特性,存在构象系综,包含常规结构生物学可测定的稳态和常规结构生物学无法测定的隐态构象。隐态构象与稳态构象之间存在着多态平衡,在蛋白质生物学功能上具有重要作用。蛋白质隐态定义起源于蛋白质折叠机... 详细信息

生物活性蛋白质的结构具有动态特性,存在构象系综,包含常规结构生物学可测定的稳态和常规结构生物学无法测定的隐态构象。隐态构象与稳态构象之间存在着多态平衡,在蛋白质生物学功能上具有重要作用。蛋白质隐态定义起源于蛋白质折叠机制及蛋白质分子动态学研究。在蛋白质构象系综中,蛋白质隐态的含量较少、寿命短及较稳态构象能量高等性质使得隐态难以被捕捉与解析。随着核磁共振波普技术的迅速发展,在实验方法上探索蛋白质动态构象特性逐渐引人瞩目。研究蛋白质隐态构象及蛋白质不同构象之间的相互转变机制,有助于阐明蛋白质分子识别机制,为指导靶向药物设计提供新的理论依据。本文对蛋白质隐态定义进行了溯源,简述了蛋白质隐态的基本性质,探讨了蛋白质隐态对经典分子识别机制"锁匙假说"和"诱导契合假说"发展为"构象选择假说"的贡献。本文进一步简要分析与比较当前结构生物学方法对蛋白质隐态构象分析的优点和缺点,最后对蛋白质隐态研究进行了展望。

关键词：隐态亚稳态子构象构象系综

可降解亚硝酸盐植物乳杆菌在广式腊肠发酵中的应用

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中国调味品 2020年第3期45卷 1-4页

作者：陈桂柳卢超锐刘雪萍吴长力林梦哲陈颖琪张宏梅广东工业大学生物工程系

目的:以可降解亚硝酸盐的植物乳杆菌为发酵剂,分析探讨广式腊肠制作中使用该发酵剂的产品特征。方法:研究两株植物乳杆菌分别对2%氯化钠和300 mg/kg亚硝酸钠的耐受性,以及在MRS培养基中降解亚硝酸盐的能力。并以其中一株植物乳杆菌为发... 详细信息

目的:以可降解亚硝酸盐的植物乳杆菌为发酵剂,分析探讨广式腊肠制作中使用该发酵剂的产品特征。方法:研究两株植物乳杆菌分别对2%氯化钠和300 mg/kg亚硝酸钠的耐受性,以及在MRS培养基中降解亚硝酸盐的能力。并以其中一株植物乳杆菌为发酵剂加入广式腊肠中,测定不同发酵时间产品的pH值、水活度以及乳酸菌、霉菌和大肠菌的生长情况,与对照组进行比较,研究该发酵剂对发酵腊肠产品特征的影响。结论:将具有良好耐盐和耐亚硝酸盐能力,同时对亚硝酸盐具有较强降解能力的H1菌作为发酵剂加入腊肠后,降低了腊肠的pH值,同时对有害菌有明显的抑制效果,说明所选植物乳杆菌具有较好的环境适应性并显示出强大的酸化潜力,能通过抑制肠杆菌科的生长,提高微生物的安全性。因此,H1菌有望成为一种具有生物安全性的本土发酵剂。

关键词：植物乳杆菌广式腊肠发酵剂亚硝酸盐

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泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的克隆表达

中国调味品 2019年第9期44卷 9-12页

作者：吴长力陈颖琪陈桂柳林梦哲张宏梅广东工业大学生物工程系

目的:对植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因(nirS)进行克隆及表达,检测重组酶表达情况及其酶活力。方法:以分离自传统泡菜植物乳杆菌的基因组DNA为模版进行PCR扩增nirS;重组构建TA克隆质粒pMD19-T-nirS,并转化到大肠杆菌DH5a中保存;通过双酶... 详细信息

目的:对植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因(nirS)进行克隆及表达,检测重组酶表达情况及其酶活力。方法:以分离自传统泡菜植物乳杆菌的基因组DNA为模版进行PCR扩增nirS;重组构建TA克隆质粒pMD19-T-nirS,并转化到大肠杆菌DH5a中保存;通过双酶切消化将nirS基因连接到pET-32a(+)上,获得重组表达质粒pET-32a(+)-nirS,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达;重组酶经纯化后进行SDS-PAGE电泳检测其表达情况;重组酶经复性后检测其酶活力。结果:扩增得到nirS基因并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,所得重组酶以包涵体形式存在,酶活力为2131.5U/mg。结论:采用基因工程技术获得亚硝酸盐还原酶具有一定的应用前景。

关键词：亚硝酸盐还原酶基因表达包涵体植物乳杆菌

右旋龙脑和肉桂醛抑制游离态和生物被膜态食源致病菌的研究

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中国调味品 2020年第4期45卷 13-16页

作者：陈桂柳卢靖李嘉颖江嘉敏林梦哲陈颖琪张宏梅广东工业大学生物工程系广州510006

目的:以天然产物右旋龙脑和肉桂醛为研究对象,研究其抑制游离态和生物被膜态单核增生李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌的特征。方法:在采用微量肉汤稀释法研究右旋龙脑和肉桂醛单独对游离态单核增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌及其混合菌的最低... 详细信息

目的:以天然产物右旋龙脑和肉桂醛为研究对象,研究其抑制游离态和生物被膜态单核增生李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌的特征。方法:在采用微量肉汤稀释法研究右旋龙脑和肉桂醛单独对游离态单核增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌及其混合菌的最低抑菌浓度(MIPC)的前提下,分析两种天然产物共同作用下对游离态致病菌的最低抑菌浓度以及对生物被膜态致病菌的最低抑菌浓度(MIBC)。结果:右旋龙脑对游离态单核增生李斯特菌的MIPC为0.56 mg/mL,对游离态鼠伤寒沙门氏菌的MIPC为0.58 mg/mL,对混合菌的MIPC为0.60 mg/mL;添加肉桂醛时的3种培养状态下MIPC均为0.40μL/mL;在右旋龙脑和肉桂醛共同作用下(即0.50 mg/mL右旋龙脑和0.40μL/mL肉桂醛)对游离态菌体均可完全抑制,而2.50 mg/mL右旋龙脑和2.00μL/mL肉桂醛共同作用下可以完全抑制生物被膜态的菌体。结论:两种天然产物对生物被膜态菌体的最低抑菌浓度远远大于游离态菌体,右旋龙脑和肉桂醛在抑制游离态菌体和生物被膜态菌体生长方面具有协同作用。

关键词：右旋龙脑肉桂醛生物被膜态游离态食源性致病菌

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离子交换树脂分离发酵液中乳链菌肽工艺

离子交换与吸附 2008年第4期24卷 313-319页

作者：胡滨王晖赵艳丽殷昊吴兆亮河北工业大学生物工程系

用阳离子交换树脂D113吸附发酵液中乳链菌肽,单位体积D113的吸附量为120000IU/mL。加入90mL5%KCl溶液,8h时解吸率达到最大值,最终解吸率为48%。在25℃,40℃和50℃下D113的吸附等温线符合Langmuir吸附等温方程。通过对控制机理的判断,25... 详细信息

用阳离子交换树脂D113吸附发酵液中乳链菌肽,单位体积D113的吸附量为120000IU/mL。加入90mL5%KCl溶液,8h时解吸率达到最大值,最终解吸率为48%。在25℃,40℃和50℃下D113的吸附等温线符合Langmuir吸附等温方程。通过对控制机理的判断,25℃时F与t呈线性关系,为液膜扩散控制(FDC);40℃、50℃时[1-3(1-F)2/3+2(1-F)]~t曲线呈良好的线性关系,为颗粒扩散控制(PDC)。

关键词：乳链菌肽吸附解吸吸附等温线控制机理

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两级泡沫分离废水中大豆蛋白的工艺

农业工程学报 2010年第11期26卷 374-378页

作者：孙瑞娉殷昊卢珂吴兆亮河北工业大学生物工程系天津300130

为了有效处理高浓度大豆蛋白废水,在研究初始pH值、表观气速和温度特别是在较高温度(60℃)对泡沫分离大豆蛋白废水效果影响的基础上,建立了可同时提高富集比和回收率的两级泡沫分离工艺。在60℃时,对大豆蛋白质量浓度为4.0g/L的废水泡... 详细信息

为了有效处理高浓度大豆蛋白废水,在研究初始pH值、表观气速和温度特别是在较高温度(60℃)对泡沫分离大豆蛋白废水效果影响的基础上,建立了可同时提高富集比和回收率的两级泡沫分离工艺。在60℃时,对大豆蛋白质量浓度为4.0g/L的废水泡沫分离,富集比比常温时提高4倍多。两级泡沫分离工艺中,第一级分离在大豆蛋白质量浓度为4.0g/L,初始pH值为7.0,表观气速0.133cm/s,60℃下操作,富集比为7.71,残液作为第二级泡沫分离的进料;第二级分离先在20℃,表观气速0.133cm/s下进行,待塔顶无泡沫溢出时,再将表观气速升到0.398cm/s,富集比为2.63,消泡液加入到废液中作为第一级泡沫分离的进料;总回收率为82.75%。在不同温度和气速下进行的两级泡沫分离工艺可以有效的处理大豆蛋白废水,回收其中的蛋白质。

关键词：蛋白温度废水大豆蛋白两级泡沫分离

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泡沫分离过程中泡沫层总高度对持液率的影响

高校化学工程学报 2009年第3期23卷 543-546页

作者：钱少瑜李雪良吴兆亮刘萌河北工业大学生物工程系天津300130

以乳链菌肽发酵液为模拟体系,研究了泡沫分离过程中泡沫层总高度对泡沫塔出口持液率εout以及泡沫层轴向持液率分布特性的影响。实验发现:在泡沫层形成过程中,εout从一个较低值逐渐升高到一个较高的稳定值;泡沫在塔内泡沫相中的停留时... 详细信息

以乳链菌肽发酵液为模拟体系,研究了泡沫分离过程中泡沫层总高度对泡沫塔出口持液率εout以及泡沫层轴向持液率分布特性的影响。实验发现:在泡沫层形成过程中,εout从一个较低值逐渐升高到一个较高的稳定值;泡沫在塔内泡沫相中的停留时间不是εout的决定性因素,气速对εout的影响很大。同时还发现:随着泡沫层总高度的增加,εout缓慢下降而泡沫层与液层界面处的持液率急剧上升,可以推测出整个轴向持液率特性分布会上移。实验数据表明仅仅用静态泡沫的排液时间代替上升动态泡沫的停留时间的方法来预测εout的一般方法可能得出错误的结果。

关键词：泡沫分离鼓泡塔持液率泡沫排液

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泡沫分离法处理酸碱混合染料工艺

石油学报（石油加工） 2009年第5期25卷 752-756页

作者：丁红梅吴兆亮郑辉杰张晓龙河北工业大学生物工程系天津300130

为开发一种设备和工艺简单、成本低且不产生二次污染的染料废水处理方法,以甲基橙(MO)和结晶紫(CV)的混合溶液模拟染料废水,以表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和十二烷基苯磺酸钠(SDBS)为捕收剂,对泡沫分离法处理混合染料工艺进... 详细信息

为开发一种设备和工艺简单、成本低且不产生二次污染的染料废水处理方法,以甲基橙(MO)和结晶紫(CV)的混合溶液模拟染料废水,以表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和十二烷基苯磺酸钠(SDBS)为捕收剂,对泡沫分离法处理混合染料工艺进行了研究。采用分步分离法,探讨了pH值、气体体积流量(G)、表面活性剂质量浓度、装液量(V)对染料废水脱色的影响,确定的最佳操作条件为:pH值8.0,气体体积流量200 mL/min,装液量500 mL,CTAB质量浓度50 mg/L,SDBS质量浓度为600 mg/L。所对应的MO的脱色率(R)为97.4%,富集比(β)为39.4;CV的脱色率为99.2%,富集比为54.9。

关键词：泡沫分离印染废水甲基橙(MO) 结晶紫(CV) 脱色过程

抗菌肽CGA-N12诱导的活性氧打开热带念珠菌线粒体通透性转换孔

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第9期36卷 1090-1098页

作者：赵佳瑞李丹丹陶梦珂石微妮李瑞芳河南工业大学生物工程学院生物技术系郑州450001

嗜铬粒蛋白A-N12(chromogranin A-N12,CGA-N12)是衍生自人嗜铬粒蛋白A的N-端抗念珠菌肽,由第65至76位氨基酸组成。前期研究表明,CGA-N12能够降低热带念珠菌线粒体膜电位,诱导线粒体依赖性细胞凋亡。有文献报道,线粒体通透性转换孔(mitoc... 详细信息

嗜铬粒蛋白A-N12(chromogranin A-N12,CGA-N12)是衍生自人嗜铬粒蛋白A的N-端抗念珠菌肽,由第65至76位氨基酸组成。前期研究表明,CGA-N12能够降低热带念珠菌线粒体膜电位,诱导线粒体依赖性细胞凋亡。有文献报道,线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)蛋白质复合物上的二硫键和自由巯基的氧化还原状态对mPTP开关具有调节作用。本文研究了CGA-N12对热带念珠菌细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)聚集、DTT还原作用下CGA-N12对线粒体膜去极化、线粒体肿胀、Ca^2+泄露等的影响,以期阐明CGA-N12诱导mPTP打开的分子机制。结果发现,CGA-N12使细胞内活性氧聚集,线粒体膜电位降低,线粒体肿胀,但DTT可通过还原作用抑制CGA-N12诱导线粒体产生的上述现象。结果表明,CGA-N12通过诱导ROS维持mPTP蛋白质复合物上的二硫键和巯基的氧化状态打开mPTP,提高线粒体膜通透性,使线粒体膜电位耗散。该研究结果为阐明CGA-N12对热带念珠菌的凋亡机制提供了理论依据。

关键词：抗菌肽嗜铬粒蛋白A-N12 线粒体膜电位活性氧线粒体膜通透性转换孔