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狼毒化学成分基于Mpro靶点的虚拟筛选及抗SARS-CoV-2活性分析

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中华中医药学刊 2024年第6期42卷 14-19,I0004页

作者：肖斌张梅芳罗昆张维库韩亚如吴思韩晓燕杜冠华折占飞内蒙古医科大学鄂尔多斯临床医学院中心实验室内蒙古鄂尔多斯017000 中国海洋大学青岛海洋生物医药研究院山东青岛266100 中日友好医院临床医学研究所北京100050 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所药物靶点与新药筛选北京市重点实验室北京100050

目的对瑞香狼毒和狼毒大戟中的化学成分进行基于新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome-coronavirus-2,SARS-CoV-2)3CL水解酶(Mpro)的抑制剂虚拟筛选以及体外活性验证以为发现抗新型冠状病毒疾病(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)治疗药物提供参考。方法以瑞香狼毒和狼毒大戟中的天然产物为研究对象,以Mpro为靶点,以Mpro晶体结构(PDB ID:6LU7)中的配体小分子N3为阳性对照,采用AutoDock Vina进行分子对接,对结合亲和力和结合构象进行分析并进行基于SARS-CoV-2 Mpro蛋白的体外抑制活性测试。结果与N3(亲和力为-7.7 kcal/Mol)相比,双黄酮类化合物狼毒素和异狼毒素呈现了最高的Mpro靶点亲和力(-9.7 kcal/Mol),且优于利托那韦、更昔洛韦、利巴韦林、氯喹、达芦那韦、阿巴卡韦等已知抗病毒药物以及其他天然产物的亲和力。对接构象分析发现二者均能有效占据Mpro蛋白结合位点并形成若干重要的氢键结合,其中以异狼毒素为最优,这对于二者与Mpro靶点的结合以及Mpro靶点抑制构象的稳定起着重要作用。异狼毒素在50μM浓度下显示出优于狼毒素的较好的Mpro体外抑制活性。结论狼毒素和异狼毒素具有基于Mpro靶点抑制SARS-CoV-2病毒的潜在活性,可作为结构优化和抗SARS-CoV-2体内外活性研究的先导化合物。

关键词：新型冠状病毒瑞香狼毒狼毒大戟冠状病毒3CL水解酶虚拟筛选

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METTL3表达水平对口蹄疫病毒复制的影响

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中国兽医科学 2024年第8期54卷 1010-1018页

作者：张继燕李伟伟范许许曹雪静朱兆宇裴丹诗王一卓何路李熙忠任青峰张伟王川郑海学甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730000 河南农业大学动物医学院河南郑州450046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

利用CRISPR/Cas9系统构建了METTL3基因敲除细胞系(BHK-21),随后用口蹄疫病毒(FMDV)分别感染野生型和METTL3敲除BHK-21细胞,通过q PCR、Western-blot和TCID50方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况。结果表明,敲除METTL3显著抑制FMDV的... 详细信息

利用CRISPR/Cas9系统构建了METTL3基因敲除细胞系(BHK-21),随后用口蹄疫病毒(FMDV)分别感染野生型和METTL3敲除BHK-21细胞,通过q PCR、Western-blot和TCID50方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况。结果表明,敲除METTL3显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证METTL3的表型功能,利用慢病毒包装系统构建METTL3稳定表达细胞系。用FMDV分别感染野生型和METTL3过表达BHK-21细胞,通过q PCR和TCID50试验测定FMDV在这2株细胞中的复制情况。结果显示,过量表达METTL3促进FMDV的复制。此外,激光共聚焦显微镜试验显示,FMDV感染BHK-21细胞后,METTL3从细胞核迁移至细胞质,其细胞定位的改变表明METTL3可能参与调控FMDV基因组的转录过程。本研究中成功构建了METTL3基因敲除和过表达的BHK-21细胞系,首次发现该分子正向调控FMDV的复制。上述实验结果为进一步开展METTL3在宿主细胞中调控FMDV复制的机制研究奠定了可靠的数据基础。

关键词： METTL3 m6A修饰口蹄疫病毒

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通脉增智胶囊对小鼠学习记忆过程的影响

医学动物防制 1998年第2期14卷 15-17页

作者：宋国英方桂远王纯耀陈辉刘华河南医科大学生物教研室 450052 河南医科大学第一附属医院 450052 河南医科大学实验动物中心 450052

采用小鼠一次性学习行为——跳台反应法观察了通通脉增智胶囊对学习记忆获得、巩固和再现的影响。结果表明,通脉增智胶囊可明显改善小鼠对东莨菪碱所致学习记忆获得不良、亚硝酸钠所致记忆巩固不良和4％乙醇所致记忆再现不良。提示:通... 详细信息

采用小鼠一次性学习行为——跳台反应法观察了通通脉增智胶囊对学习记忆获得、巩固和再现的影响。结果表明,通脉增智胶囊可明显改善小鼠对东莨菪碱所致学习记忆获得不良、亚硝酸钠所致记忆巩固不良和4％乙醇所致记忆再现不良。提示:通脉增智胶囊可促进智能发育,改善记忆。

关键词：通脉增智胶囊学习记忆性条件反射

电针对疼痛患者血浆及小鼠脊髓甲硫氨酸脑啡肽、强啡肽及痛阈的影响

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河南医科大学学报 2001年第4期36卷 425-426页

作者：王一菱吴景兰金辉河南医科大学分子细胞生物学研究中心郑州450052

目的 :探讨 4～5Hz电针下 ,患者血浆及小鼠脊髓的甲硫氨酸脑啡肽 (MEK)及强啡肽 (Dyn)的变化与疼痛的关系。方法 :将针灸门诊患者电针前后的血浆和随机分为电针、对照两组的雄性BALB/C小鼠的脊髓匀浆 ,分别定量点于硝酸纤维素膜上 ,应... 详细信息

目的 :探讨 4～5Hz电针下 ,患者血浆及小鼠脊髓的甲硫氨酸脑啡肽 (MEK)及强啡肽 (Dyn)的变化与疼痛的关系。方法 :将针灸门诊患者电针前后的血浆和随机分为电针、对照两组的雄性BALB/C小鼠的脊髓匀浆 ,分别定量点于硝酸纤维素膜上 ,应用免疫反应性蛋白质斑点印迹技术 ,用Shimadu薄层层析扫描仪进行检测。患者在电针前后、小鼠在电针 /牵拉前后均用测痛仪检测痛阈。结果 :电针后患者血浆D(MEK)及D(Dyn)均升高 (P <0 .0 1) ,而小鼠脊髓两者均降低(P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,患者血浆及小鼠脊髓的D(MEK)比D(Dyn)变动显著。血浆或脊髓的D(MEK)与D(Dyn)变动呈正相关。血浆及脊髓D(MEK)分别与痛阈呈正相关 (r=0 846 ,P <0 0 1)或呈负相关 (r=- 0 6 2 5 ,P <0 0 5 )。但血浆及脊髓的D(Dyn)与痛阈不相关。结论

关键词：电针甲硫氨酸脑啡肽强啡肽镇痛疼痛痛阈小鼠脊髓

新型偶氮苯并冠醚衍生物在溶液和LB膜中的光致变色研究

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光谱学与光谱分析 2000年第3期20卷 415-417页

作者：徐霞刘萃红许世华郑惠良胡志军刘朝晖何晓红河南医科大学医学实验中心郑州450052 河南医科大学公共卫生学院郑州450052

本文合成了两种新型偶氮苯并冠醚衍生物 16 ABC- OH和 16 ABC- NH2 ,并对其在溶液中和L angmuir- Blodgett膜中的光致变色现象进行了研究。结果表明 :在溶液中 16 ABC- OH发生了反式 -顺式异构化反应 ,且异构化反应为一级反应 ,而 16 AB... 详细信息

本文合成了两种新型偶氮苯并冠醚衍生物 16 ABC- OH和 16 ABC- NH2 ,并对其在溶液中和L angmuir- Blodgett膜中的光致变色现象进行了研究。结果表明 :在溶液中 16 ABC- OH发生了反式 -顺式异构化反应 ,且异构化反应为一级反应 ,而 16 ABC- NH2 的顺反异构化反应较复杂 ,为非一级反应。在 L B膜中 ,16 ABC- OH无光组合记录且有一定程度的光致顺反异构反应 ,而 16 ABC- NH2 自组合形成 H-聚集体且光致变异构反应被禁阻。

关键词：偶氮苯并冠醚 16ABC-OH 16ABC-NH2 光致变色研究

淋巴毒素的抗肿瘤作用及白细胞介素2对其功能的影响

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肿瘤防治研究 1990年第1期17卷 19-22,18页

作者：沈泽荔何俊森河南医科大学微生物学教研室

本文探讨了促有丝分裂原剌激淋巴细胞产生的含LT培养上清对肿瘤细胞的作用及IL2对其功能的影响、结果表明:含LT培养上清对多种人及小鼠的传代细胞,新分离的腹水瘤细胞及实体瘤细胞均有细胞毒性作用,放线菌素D能使这种作用增强,LT可增加... 详细信息

本文探讨了促有丝分裂原剌激淋巴细胞产生的含LT培养上清对肿瘤细胞的作用及IL2对其功能的影响、结果表明:含LT培养上清对多种人及小鼠的传代细胞,新分离的腹水瘤细胞及实体瘤细胞均有细胞毒性作用,放线菌素D能使这种作用增强,LT可增加人PBMC分泌LT;并能使其杀伤活性增加。

关键词：淋巴毒素 IL-2 PBMC 比色分析肝瘤

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真菌毒素对家兔免疫系统的影响及预防措施

中国养兔 2024年第2期 22-26,48页

作者：刘世洋张自强李双军刘玉梅河南科技大学动物科技学院洛阳471000 河南德邻生物制品有限公司兔业服务中心郑州450000

真菌毒素是由真菌产生的有毒化学物质,具有种类多、分布广、毒性强等特点,常存在于饲料原料中,对动物的健康产生负面影响。家兔对真菌毒素十分敏感,其饲粮主要由草粉和谷物构成,长期摄入被真菌毒素污染的饲粮后会引起机体多种组织器官... 详细信息

真菌毒素是由真菌产生的有毒化学物质,具有种类多、分布广、毒性强等特点,常存在于饲料原料中,对动物的健康产生负面影响。家兔对真菌毒素十分敏感,其饲粮主要由草粉和谷物构成,长期摄入被真菌毒素污染的饲粮后会引起机体多种组织器官损伤。免疫系统是保护动物机体免受病原微生物及其他有害物质侵害的重要基地,对真菌毒素的刺激具有强烈的抵抗作用,同时也极易受到真菌毒素的侵害。结合国内外研究进展,以几种常见的真菌毒素为例,综述真菌毒素对家兔的免疫功能、抗体水平、免疫细胞等造成的影响,并从加强饲料管理、脱霉剂预防、药物预防的角度提供具体的预防措施,为生产实践中降解饲料真菌毒素的危害提供参考依据。

关键词：真菌毒素家兔免疫

量子血疗对高血压病、冠心病疗效及血浆血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)的改变

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河南医科大学学报 1992年第1期27卷 3-6页

作者：易幼儒何欣张二淮周琦杜诗军王树立魏重琴河南医科大学医学实验中心河南医科大学生物化学教研室

报道25例高血压病与冠心病患者经量子血疗(Ultraviolet own blood irradiation,UBI)治疗,取得明显疗效,其中治愈3例,显效10例,有效12例,无效0;未发生副作用;疗程前后测血浆血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α)),... 详细信息

报道25例高血压病与冠心病患者经量子血疗(Ultraviolet own blood irradiation,UBI)治疗,取得明显疗效,其中治愈3例,显效10例,有效12例,无效0;未发生副作用;疗程前后测血浆血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α)),结果显示:血浆中TXB_2较治疗前下降(P<0.005),6-ke-to-PGF_(1α)较治疗前明显升高(P<0.001),其差异有显著统计学意义。TXB_2/6-keto-PGF_(1α)比值治疗后较治疗前明显降低,提示此种改变可能是UBI改善高血压病与冠心病的作用机理之一,为综合治疗高血压病、冠心病提供一条新途径。

关键词：最子血疗高血压病冠心病

脓毒性休克患儿临床特征与病原构成多中心研究

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中华儿科杂志 2024年第11期62卷 1083-1089页

作者：刘刚许峰任宏张晨美李莺成怡冰陈宇萍段红年刘春峰靳有鹏陈森王晓敏孙俊怡党红星徐香芝朱秋皎王向蝶刘鑫惠刘月胡杨王伟艾奇高恒妙樊超男钱素云国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院重症医学科北京重庆医科大学附属儿童医院重症医学科重庆上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心重症医学科上海浙江大学医学院附属儿童医院重症医学科杭州苏州大学附属儿童医院重症医学科苏州河南省儿童医院重症医学科郑州保定市儿童医院重症医学科保定中国医科大学附属盛京医院儿童重症医学科沈阳山东第一医科大学附属省立医院儿童重症医学科济南天津市儿童医院血液科天津天津市儿童医院重症医学科天津

目的了解我国儿童重症监护病房脓毒性休克患儿主要临床特征、病原构成和预后。方法多中心回顾性队列研究。回顾性收集我国10家医院2018年1月至2021年12月收治于儿童重症监护病房脓毒性休克患儿的病例资料, 分析其临床特征、病原构成和... 详细信息

目的了解我国儿童重症监护病房脓毒性休克患儿主要临床特征、病原构成和预后。方法多中心回顾性队列研究。回顾性收集我国10家医院2018年1月至2021年12月收治于儿童重症监护病房脓毒性休克患儿的病例资料, 分析其临床特征、病原构成和预后。根据是否存在恶性肿瘤基础病和预后将患儿分为恶性肿瘤组和非恶性肿瘤组, 存活组和死亡组, 采用两独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验和χ2检验比较组间临床特征和预后情况, 利用多因素Logistic回归分析死亡相关危险因素。结果共纳入脓毒性休克患儿1 247例, 其中男748例(59.9%), 年龄3.1(0.9, 8.8)岁, 住院病死率23.2%(289例)。总体病原阳性率为68.2%(851例)。共获得阳性病原体1 229个, 754个(61.4%)为细菌, 305个(24.8%)为病毒。全部细菌中, 革兰阴性菌484个(64.2%), 前2位为铜绿假单胞菌[108个(22.3%)]和肠杆菌[102个(21.1%)];革兰阳性菌270个(35.8%), 前2位为链球菌属[88个(32.6%)]和葡萄球菌[65个(24.1%)]。病毒中, 前3位为流感病毒[86个(28.2%)]、EB病毒[53个(17.4%)]、呼吸道合胞病毒[46个(15.1%)]。与非恶性肿瘤组相比, 肿瘤组患儿更年长, 第三代小儿死亡危险(PRISMⅢ)和儿童序贯器官衰竭评分(pSOFA)均更高[7.9(4.3, 11.8)比2.3(0.8, 7.5)岁、22(16, 26)比16(10, 24)分、10(5, 14)比8(4, 12)分、Z=11.32、0.87、4.00, 均P<0.05], 且病原阳性率和住院病死率均更高[77.7%(240/309)比65.1%(611/938), 29.7%(92/309)比21.0%(197/938), χ2=16.84、10.04, 均P<0.05]。病死组PRISM Ⅲ评分、pSOFA评分均更高[16(22, 29)比14(10, 20)分, 8(12, 15)比6(3, 9)分, Z=4.92、11.88, 均P<0.05], 且存在肿瘤性疾病、病原阳性率和有创机械通气比例均高于存活组[29.7%(87/289)比23.2%(222/958), 77.8%(225/289)比65.4%(626/958), 73.7%(213/289)比50.6%(485/958), χ2=5.72、16.03、49.98, 均P<0.05]。PRISM Ⅲ和pSOFA评分、存在恶性肿瘤疾病均与病死相关(OR=1.04、1.09、0.67, 95%CI 1.01～1.05、1.04～1.12、0.47～0.94, 均P<0.05)。结论脓毒性休克患儿以细菌感染为主, 但病毒阳性率也相对较高;存在恶性肿瘤基础病的患儿病情更重、对有创呼吸支持的依赖度更高;儿童重症监护病房脓毒性休克患儿总体住院病死率仍偏高, PRISM Ⅲ和pSOFA评分、存在恶性肿瘤性疾病与病死正相关。

关键词：休克, 脓毒性微生物学病毒重症监护病房儿童