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屎肠球菌FDT2的分离鉴定及抑菌特性研究

中国畜牧兽医 2024年第7期51卷 3020-3029页

作者：张晓勇蓝伟王雅劳健龙李志贾丹孔祥颖胡凯茵温咏森吕舒婷陈曼殷宏李有全兰州理工大学生命科学与工程学院兰州730050 广东海洋大学滨海农业学院湛江524088 青海大学青海省畜牧兽医科学院西宁810016 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 海北州农牧综合服务中心海北810299

【目的】从牦牛粪便中分离和鉴定屎肠球菌并进行体外抑菌特性研究,以期筛选出具有优良抑菌特性的益生菌。【方法】用MRS培养基从青海省健康牦牛粪便中分离肠球菌,结合形态学和分子生物学鉴定后进行抑菌性研究。通过发酵过滤分离菌株上清... 详细信息

【目的】从牦牛粪便中分离和鉴定屎肠球菌并进行体外抑菌特性研究,以期筛选出具有优良抑菌特性的益生菌。【方法】用MRS培养基从青海省健康牦牛粪便中分离肠球菌,结合形态学和分子生物学鉴定后进行抑菌性研究。通过发酵过滤分离菌株上清液,采用打孔法观察其对应的抑菌效果,通过改变pH及加入过氧化氢酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶等方法来分析其抑菌物质,并探究温度和pH对菌株发酵上清液的影响。【结果】结合形态学及系统进化树分析表明,分离的2株菌(FDT2和D2)均为屎肠球菌。抑菌试验结果表明,屎肠球菌FDT2对5株致病菌均有抑制作用,其中对产肠毒素性大肠杆菌K88和大肠杆菌ATCC 43888的抑菌性最强,而屎肠球菌D2对5株致病菌均无明显抑菌作用。通过排酸试验证明,屎肠球菌FDT2发酵上清液中起抑菌作用的不是酸性物质;通过加入过氧化氢酶试验证明了抑菌物质中有过氧化氢存在,且发挥部分的抑菌作用;加入胃蛋白酶和胰蛋白酶后其抑菌圈直径极显著低于对照组(P<0.01),表明抑菌物质中包含细菌素,且在抑菌过程中发挥重要作用。随着温度的逐渐升高,屎肠球菌FDT2的抑菌能力有所降低,在100℃下仍有抑菌性,表明其具有较强的热稳定性。随着pH的升高,屎肠球菌FDT2的抑菌活性逐渐下降,说明细菌素在酸性环境下活性较强。【结论】试验共分离到2株菌,其中屎肠球菌FDT2具有良好的抑菌特性,能分泌细菌素等抑菌物质,有必要对其深入研究。

关键词：屎肠球菌鉴定形态学抑菌性

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痤疮患者继发敏感性皮肤的调查与分析

中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：何倩涂颖何黎路永红许爱娥邱湘宁陈玉郭燕妮张晋松杨钰鑫杨瑾邓永琼张丽何淑娟王丽雷霞商干伟张建波许昌春肖文侬秀川梁作辉杨婷李彩霞房慧杨滢瑶张玲琳张薇毕晓东方杰李刚杨洪英凌昕高睿迪刁庆春吕新翔冯颖颖胡信林林向飞尤海燕梁羽萍杨凤元李雪莉刘俐陶诗沁孙振亮云南省中医医院皮肤科西南医科大学附属医院皮肤科中国医科大学附属第一医院皮肤科西安交通大学第二附属医院皮肤科河南省中医院皮肤科陆军特色医学中心皮肤科盐城市第三人民医院皮肤性病科大理市第二人民医院皮肤科中国医学科学院皮肤病医院柳州市工人医院皮肤科昆明医科大学第一附属医院云南省皮肤病医院文山州皮肤病防治所玉溪市人民医院皮肤科黄石市中心医院皮肤科昆明市延安医院皮肤科遂宁市中心医院皮肤科上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院皮肤科同济大学附属皮肤病医院昭通市中医医院皮肤科南阳市第一人民医院皮肤科毕节市第一人民医院皮肤科昆明医科大学生物医学工程研究院个旧市人民医院皮肤科前郭尔罗斯蒙古族自治县医院皮肤科苏州市第九人民医院皮肤科阜阳市人民医院皮肤科重庆市中医院皮肤科内蒙古医科大学附属医院皮肤科丽水市中医院皮肤科厦门大学附属医院皮肤科苏北人民医院皮肤科黑龙江省医院南岗皮肤病医院皮肤科成都市第二人民医院皮肤病医院玉林市皮肤病医院医疗美容科桂林医学院附属医院皮肤科河南省人民医院皮肤科大连市皮肤病医院中医美容科无锡市第二人民医院皮肤科上海市奉贤区中心医院杭州市第三人民医院皮肤科中南大学湘雅二医院皮肤科福建省福清市医院皮肤科福建医科大学附属第二医院皮肤科曲靖市第一人民医院皮肤科简阳市人民医院皮肤科

目的明确痤疮患者继发敏感性皮肤（sensitiveskin，SS）的发生现状和影响因素，为防治痤疮患者继发SS提供指导。方法采用分层随机抽样的方式，对全国76家皮肤科参与“痤疮周”义诊的痤疮患者（n=5 787）继发SS的情况进行横断面调查，... 详细信息

目的明确痤疮患者继发敏感性皮肤（sensitiveskin，SS）的发生现状和影响因素，为防治痤疮患者继发SS提供指导。方法采用分层随机抽样的方式，对全国76家皮肤科参与“痤疮周”义诊的痤疮患者（n=5 787）继发SS的情况进行横断面调查，通过总结人口学信息、痤疮严重程度、皮肤类型、家族史、日常行为、医疗行为、环境因素、地区等资料，明确痤疮患者继发SS的影响因素。结果5 787例中，女性3 979例（68.8%），男性1 808例（31.2%），平均年龄25.63±6.656岁。痤疮继发SS共1 840例，检出率为38.1%。31.8%.logistic回归分析结果显示，女性、痤疮严重程度、皮肤类型、家族史、日常行为如：使用护肤品品牌＞4 个/d、洗澡/桑拿、使用空调、使用剥脱类洗护用品、运动、洗脸频率＞2 次/d；医疗行为如：半年内口服维A酸类药物，1个月内有外用过壬二酸、维A酸类药物、进行过激光治疗，1周内进行过化学剥脱治疗；环境因素如：季节交替、粉尘、刮风、夏季、春季、日晒时间＞4 h/d、秋季、地区；以上可能是痤疮患者继发SS的影响因素。结论我们的调查初步明确了痤疮患者继发SS的影响因素，提示临床医生在痤疮治疗中应兼顾SS的治疗，以提高临床上痤疮的治愈率，降低复发率。

关键词：痤疮敏感性皮肤影响因素

豫医无毛小鼠末梢血T淋巴细胞酯酶染色法的观察

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河南医学研究 1997年第4期6卷 312-314页

作者：王纯耀宋国英章金涛康巧珍祝庆蕃河南医科大学实验动物中心河南医科大学生物学教研室

目的：观察豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚群与正常昆明小明鼠有无差异。方法：用α醋酸萘酯酶法（ＡＮＡＥ）对豫医无毛小鼠进行了末梢血Ｔ淋巴细胞及其亚群的观察。结果：１月龄和２月龄豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞总数和Ｔ抑制细胞数无显... 详细信息

目的：观察豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚群与正常昆明小明鼠有无差异。方法：用α醋酸萘酯酶法（ＡＮＡＥ）对豫医无毛小鼠进行了末梢血Ｔ淋巴细胞及其亚群的观察。结果：１月龄和２月龄豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞总数和Ｔ抑制细胞数无显著差异，Ｔ辅助细胞数高于正常昆明小鼠，但６月龄无毛小鼠与正常昆明小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚群无明显差异。结论：豫医无毛小鼠６月龄后Ｔ淋巴细胞及其亚群趋于正常，与正常昆明小鼠无显著差异。

关键词：医用实验动物豫医无毛小鼠 T淋巴细胞酯酶

基于CRISPR/Cas系统的生物传感器在环境分析中的应用进展

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环境化学 2024年

作者：张毅波马明王明仕常天俊河南理工大学资源环境学院宁波海关技术中心

CRISPR/Cas可改造为靶核酸刺激-响应的传感系统，可视为集“分子识别与信号输出”一体的生物传感器，目前在核酸即时诊断中已得到广泛应用.鉴于该系统具有成熟、可靠和可扩展的优点，研究人员尝试将其用于环境分析领域的非核酸分析物检... 详细信息

CRISPR/Cas可改造为靶核酸刺激-响应的传感系统，可视为集“分子识别与信号输出”一体的生物传感器，目前在核酸即时诊断中已得到广泛应用.鉴于该系统具有成熟、可靠和可扩展的优点，研究人员尝试将其用于环境分析领域的非核酸分析物检测，已开发了一系列具有应用前景的便携式设备.然而，如何将非核酸靶标信息转换为核酸信息仍存在挑战，这限制了CRISPR/Cas系统在环境分析中的应用推广.为此，本文综述了CRISPR/Cas系统在重金属离子和阴离子、新污染物、农药与真菌毒素以及有害细菌等非核酸靶标检测中的应用进展，重点介绍了构筑非核酸靶标信息转换元件的策略，以期为推进该系统在环境分析中的应用提供支持.

关键词： CRISPR/Cas 新污染物核酸适体 RNA-cleaving DNAzyme 生物传感器

肺炎链球菌自溶酶(LytA)蛋白T细胞表位的预测、筛选及确定

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免疫学杂志 2014年第1期30卷 21-28页

作者：麦璟莹梁雪清高志岩马长玲袁竹青梁广明梁雪清广州医科大学病原生物学与免疫学教研室 510182 广州医科大学形态学实验中心广州医科大学生物技术专业

目的确定肺炎链球菌自溶酶(LytA)蛋白CD4 T细胞及CD8 T细胞的表位。方法通过生物信息学方法预测肺炎链球菌LytA蛋白分子小鼠的MHC-Ⅰ结合肽(CD8 T细胞表位)和MHC-Ⅱ结合肽(CD4 T细胞表位)序列并人工合成相应肽段;经诱导表达、纯化、透... 详细信息

目的确定肺炎链球菌自溶酶(LytA)蛋白CD4 T细胞及CD8 T细胞的表位。方法通过生物信息学方法预测肺炎链球菌LytA蛋白分子小鼠的MHC-Ⅰ结合肽(CD8 T细胞表位)和MHC-Ⅱ结合肽(CD4 T细胞表位)序列并人工合成相应肽段;经诱导表达、纯化、透析、去内毒素、定量等步骤得到纯化的rLytA蛋白用以免疫小鼠;分离每只免疫组小鼠和对照组小鼠的脾及淋巴结细胞并分别与每条人工合成的候选表位肽段体外共培养,取培养上清进行双夹心ELISA检测每组细胞IFN-γ的产生情况;用初步筛选到的表位多肽刺激小鼠的脾及淋巴结细胞并进行细胞内染色及细胞流式技术检测,筛选出LytA蛋白分子T细胞表位。结果利用多种方法分析了LytA蛋白分子的MHC-Ⅰ结合肽及MHC-Ⅱ结合肽,经整理得到候选MHC-Ⅰ结合肽26条,候选MHC-Ⅱ结合肽7条,并进行了人工合成。利用分子生物学技术获得了rLytA蛋白并成功免疫了小鼠;双夹心ELISA结果初步提示:肽段LⅠ4、LⅠ5、LⅠ6、LⅠ7、LⅠ11、LⅠ12、LⅠ13、LⅠ14、LⅠ25以及肽段LⅡ3、LⅡ4、LⅡ5刺激免疫小鼠细胞产生的IFN-γ量比相应的对照小鼠显著升高;细胞流式技术进一步确定:经肽段LⅠ4、LⅠ6、LⅠ7、LⅠ11、LⅠ12、LⅠ13、LⅠ14及LⅠ25刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD8双阳性的细胞百分比较对照小鼠细胞的百分比显著升高;经肽段LⅡ4和LⅡ5刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD4双阳性的细胞百分比较对照小鼠细胞的百分比显著升高。结论确定了肺炎链球菌LytA蛋白分子2个CD4 T细胞及8个CD8 T细胞的表位。

关键词：肺炎链球菌自溶酶 T细胞表位

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泌尿生殖道解脲支原体感染的初步研究

河南医科大学学报 1995年第1期30卷 31-33页

作者：王纯耀宋国英邢金山康巧珍杜春燕章金涛金戈河南医科大学实验动物中心河南医科大学生物学教研室

对９７例慢性前列腺炎、９４例不明原因不孕、不育及１５例阴道炎患者泌尿生殖道分泌物进行解脲支原体的分离培养。阳性率分别为５３．６％、４５．７％、４６．６％。另对解脲支原体引起的不孕、不育及感染进行了讨论。

关键词：解脲支原体前列腺炎不育症感染泌尿生殖系

8-Br-cAMP对人食管癌Eca-109细胞生长相关基因表达的影响

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解剖学报 1999年第3期30卷 227-229,I009页

作者：陈奎生郑乃刚吴景兰丁一王一菱河南医科大学分子细胞生物学研究中心河南临床检验中心河南医科大学病理解剖教研室暨河南省肿瘤病理重点实验室

目的探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人Ｅｃａ－１０９细胞与生长相关基因表达的影响。方法体外培育的人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞受８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后，用原位杂交、免疫组织化学及ＲＮＡ、蛋白质斑点印迹技术研究了与细胞生长相关的... 详细信息

目的探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人Ｅｃａ－１０９细胞与生长相关基因表达的影响。方法体外培育的人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞受８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后，用原位杂交、免疫组织化学及ＲＮＡ、蛋白质斑点印迹技术研究了与细胞生长相关的几种基因的表达变化。结果８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可减弱ＥＧＦＲ、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、突变型ｐ５３等基因的表达，增强野生型ｐ５３基因表达和ｐ２１ＷＡＦ１蛋白的表达。结论８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可通过影响有关信号传递和细胞周期进程基因表达而抑制细胞生长。

关键词： 8-Br-cAMP 基因表达 Eca-109细胞系食管肿瘤

产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位可有效诱导和增强对肠道病毒71型的黏膜免疫应答

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第12期30卷 1233-1237页

作者：谢婷婷胡琼文马永平重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学肿瘤研究中心重庆400016

目的研究产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的免疫原性。评价肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1联合LTB的鼻腔免疫效果。方法构建重组质粒pET32a-LTB,表达的6×His-LTB融合蛋白用Ni2+-NTA树脂纯化后免疫新西兰大白兔制备抗血清,EL... 详细信息

目的研究产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的免疫原性。评价肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1联合LTB的鼻腔免疫效果。方法构建重组质粒pET32a-LTB,表达的6×His-LTB融合蛋白用Ni2+-NTA树脂纯化后免疫新西兰大白兔制备抗血清,ELISA检测抗血清效价。用纯化的EV71 VP1、LTB联合EV71 VP1、生理盐水分别经鼻腔免疫BALB/c小鼠,收集血清、肺和小肠黏膜冲洗液,采用间接ELISA检测IgG和分泌性IgA(sIgA)。结果已成功构建重组质粒pET32a-LTB。表达的6×His-LTB融合蛋白主要以包涵体形式表达,相对分子质量(Mr)约为30 000,免疫兔所制备的抗血清效价为1∶125 000。EV71 VP1联合LTB组的小鼠特异性IgG和sIgA水平较EV71 VP1单独免疫组和对照组有明显增高。结论在*** BL21(DE3)中成功表达了6×His-LTB融合蛋白,纯化的融合蛋白具有良好的免疫活性和佐剂活性。通过滴鼻免疫,LTB可有效增强特异性血清抗体反应,诱导黏膜免疫应答。

关键词：不耐热肠毒素B亚单位肠道病毒71型免疫原性黏膜免疫

2023年沧州市食品中化学污染物及有害因子状况调查

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职业与健康 2024年

作者：李俊江邵寒冰杨莹徐娜张瑞河北医科大学第一临床医学院沧州市疾病预防控制中心理化检验科沧州市疾病预防控制中心综合办公室沧州市疾病预防控制中心微生物检验科

目的全面了解沧州市市售食品中化学污染物及其有害因素的污染状况,确定污染物的分布特征,为食品安全防控工作提供数据支撑。方法根据《2023年国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》,2023年在沧州市16个县区内的农贸市场、超市... 详细信息

目的全面了解沧州市市售食品中化学污染物及其有害因素的污染状况,确定污染物的分布特征,为食品安全防控工作提供数据支撑。方法根据《2023年国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》,2023年在沧州市16个县区内的农贸市场、超市等不同采购环节进行样品采集,开展化学污染物及有害因子检测,并对数据进行分析。结果 245份抽检样品中阳性样品共检出109份,总检出率为44.1%;超标样品检出2份,超标率为0.8%。监测指标5 618项次,共检出1 491项次,检出率为26.5%;超标2项次,超标率为0.04%。水产品阳性检出率最高,为78.6%(22/28);农药类检出率最高,为83.5%(71/85);农贸市场中样品阳性检出率最高,为52.7%(39/72);超标样品分别为花生[黄曲霉毒素B1(aflatoxin detoxification,AFB1)]、姜(毒死蜱)。不同采购环节样品检出率、监测项目检出率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);样品中不同类型污染物及其有害因素阳性检出率、监测测项目检出率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 2023年沧州市市售食品有不同程度的污染,但整体在可控范围,应继续加强监管。

关键词：化学污染物检出率超标污染