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基于抗凝血活性的丹红注射液生物效价测定方法的建立

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中草药 2022年第8期53卷 2348-2355页

作者：张宇航杨静吴宿慧李寒冰唐进法河南中医药大学河南省健康衰老产业工程研究中心河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南郑州450000

目的以凝血酶时间(thrombin time,TT)为指标,建立丹红注射液(Danhong Injection,DHI)抗凝血生物效价测定方法,以评价其质量。方法收集10批次合格DHI,同时采用光照、高温、暴露进行稳定性加速处理,共得样品40批。工作参照物的制备采用... 详细信息

目的以凝血酶时间(thrombin time,TT)为指标,建立丹红注射液(Danhong Injection,DHI)抗凝血生物效价测定方法,以评价其质量。方法收集10批次合格DHI,同时采用光照、高温、暴露进行稳定性加速处理,共得样品40批。工作参照物的制备采用丹酚酸B、羟基红花黄色素A与辅料1∶1∶8混合,并调制成40 mg/mL。按照“量反应平行线(3.3)法”设计抗凝血活性测定实验,所用的血浆为4只家兔等比混合的血浆,药物剂间距为1∶0.8,半自动凝血分析仪测定TT值,对线性关系、可靠性、精密度、重复性、稳定性进行考察,优化并确定检测条件,即反应体系为100μL血浆+工作参照物或样品溶液50μL+凝血酶试剂100μL,对样品开展生物效价检测。结果工作参照物和DHI在20~40 mg/mL时,与TT值线性关系良好,r值分别为0.982 7、0.969 6。生物效价结果表明工作参照物和合格的DHI均具有显著的抗凝血活性,且结果能通过可靠性检验,10批次DHI的效价值范围为3700~4300 U/mL;与加速处理的样品生物效价测定结果比较,暴露、光照处理DHI样品可被全部检出,高温处理DHI检出率80%。结论所建立的生物效价方法用于DHI的质量评价,具有精密度高、重复性好、结果可靠的特点。

关键词：生物效价丹红注射液量反应平行线凝血酶时间质量评价

补骨脂醇提物中8种成分在正常和脂多糖模型大鼠体内的组织分布比较研究

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中国中药杂志 2022年第24期47卷 6763-6779页

作者：唐进法牛璐王晓艳张辉张明亮吴娅丽陈小菲冯科冉贾金浩李伟霞河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南郑州450000 河南中医药大学河南郑州450046

该研究采用UPLC-TQ/MS技术,以微量脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的大鼠免疫特异质体质为模型,测定灌胃给予大鼠补骨脂醇提物3.6 g·kg^(-1)后正常生理状态与LPS模型状态下,8种主要成分(补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂苷、异补骨... 详细信息

该研究采用UPLC-TQ/MS技术,以微量脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的大鼠免疫特异质体质为模型,测定灌胃给予大鼠补骨脂醇提物3.6 g·kg^(-1)后正常生理状态与LPS模型状态下,8种主要成分(补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂二氢黄酮、补骨脂定、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮)在0.5、1、2、6、12 h大鼠肝、肾、脾、心、肺组织分布差异,探讨其在机体组织器官的分布规律及特性。结果表明不同成分在各组织中有不同的分布行为,在不同时间点各成分在体内分布较为广泛,具有不均衡的特征,肝、肾组织分布较多,其次是脾、心、肺。正常和LPS模型状态下,补骨脂醇提物中8种成分在不同时间点的肝、肾、脾、心、肺组织中的浓度存在较大差异,且各成分在肝、肾组织中含量较大,分布程度也存在较大差异。推断LPS模型组大鼠给药12 h后,组织中补骨脂素含量显著高于空白组大鼠,考虑造模后机体可能对补骨脂素的吸收、分布减慢;LPS模型组大鼠肝组织中的补骨脂苷和异补骨脂苷含量均高于空白组,考虑造模后二者在肝组织中的吸收、分布均有一定程度增加,推测补骨脂苷、异补骨脂苷可能是补骨脂致肝损伤的毒性物质。

关键词：补骨脂脂多糖模型组织分布液质联用

丁基苯酞在脑血管病的药理作用及临床联合应用的研究进展

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药学学报 2022年第10期57卷 3047-3056页

作者：泥文娟李伟霞王晓艳吴娅丽韩冰贾金浩李琨纪秋如唐进法河南中医药大学河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南郑州450000

脑血管病具有发病率高、致残致死率高及复发率高等特点,严重危害人类健康,增加国民卫生经济负担。丁基苯酞是临床常用的治疗脑血管疾病的一类新药,也是当归、川芎等中药中的主要活性成分之一。本文对丁基苯酞的药理作用进行了系统概述,... 详细信息

脑血管病具有发病率高、致残致死率高及复发率高等特点,严重危害人类健康,增加国民卫生经济负担。丁基苯酞是临床常用的治疗脑血管疾病的一类新药,也是当归、川芎等中药中的主要活性成分之一。本文对丁基苯酞的药理作用进行了系统概述,其具有抗血小板聚集、抗血栓形成、抑制神经细胞凋亡、抗氧化、抗脑缺血、减轻脑损伤、抗血管性痴呆等药理作用,其临床常与依达拉奉、阿替普酶、法舒地尔、醒脑静注射液、复方丹参注射液等药物联合使用治疗脑卒中、血管性痴呆、脑血管痉挛等脑血管疾病,并发挥较好的协同治疗作用,可为丁基苯酞的临床合理应用提供支撑。

关键词：丁基苯酞脑血管病药理作用临床联合应用

基于vWF/GPIb-IX-V信号通路的丹红注射液对急性血瘀大鼠模型活血化瘀作用及机制研究

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中草药 2023年第4期54卷 1173-1183页

作者：刘旭吴宿慧陈小菲张宇航李寒冰唐进法河南中医药大学河南省中医药“治未病”健康重点实验室河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南郑州450000

目的观察丹红注射液对急性血瘀大鼠模型的影响,探讨丹红注射液调控血瘀证血小板功能的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、舒血宁注射液(1.8 mL/kg)组和丹红注射液高、中、低剂量(1.4、0.7、0.35 mL/kg)组,尾iv给予药... 详细信息

目的观察丹红注射液对急性血瘀大鼠模型的影响,探讨丹红注射液调控血瘀证血小板功能的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、舒血宁注射液(1.8 mL/kg)组和丹红注射液高、中、低剂量(1.4、0.7、0.35 mL/kg)组,尾iv给予药物干预11 d后,采用sc肾上腺素联合冰水浴制备急性血瘀证大鼠模型,再给予药物干预1 d后,检测血流变指标、凝血功能指标,血小板活化黏附、聚集、释放相关指标;观察耳廓微循环、心电图和心尖、腹主动脉组织病理变化;采用qRT-PCR和Western blotting检测心肌组织蛋白激酶B1(protein kinase B1,Akt1)、p38、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases1/2,ERK1/2)的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血液流变学、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、纤连蛋白(fibronectin,FN)、血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)、β-血栓环蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)、血小板第四因子(platelet factor 4,PF4)指标显著升高(P<0.05、0.01),6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)、耳廓微循环血流量显著降低(P<0.01),心肌组织p-Akt1、p-ERK1/2、p-p38蛋白表达以及Akt1、ERK1/2、p38基因表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,丹红注射液能够不同程度地降低血液流变学指标、vWF、FN、TXB2、β-TG、PF4(P<0.05、0.01),升高6-keto-PGF1α(P<0.05、0.01),显著提高凝血酶时间(thrombin time,TT)值(P<0.05、0.01),保护心脏,增加耳廓微循环血流量(P<0.05)。心尖、腹主动脉组织HE染色结果显示,模型组大鼠心肌、血管内膜出现轻微损伤,弹力纤维破坏,由于斑块脱落导致开始出现空泡;丹红注射液组大鼠心肌、血管内膜和内皮细胞以及弹力纤维显著改善。结论丹红注射液可以恢复血液流变学、凝血功能,改善血管内皮细胞、心肌细胞功能,通过调控vWF/GPIb-IX-V介导的信号通路及血小板功能,对大鼠急性血瘀有较好的保护和治疗作用。

关键词：丹红注射液急性血瘀心血管疾病血小板功能血管性血友病因子表面受体糖蛋白Ib-IX-V

凉血退紫合剂中8种成分在正常和过敏性紫癜大鼠的组织分布比较研究

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中国中药杂志 2023年第21期48卷 5915-5931页

作者：司利玲牛璐王晓艳张辉张明亮许爽任献青唐进法李伟霞河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000 河南中医药大学儿科医学院河南郑州450046 河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南郑州450000

该研究采用UPLC-TQ-MS技术,以灌胃热性药和注射卵白蛋白与弗氏完全佐剂乳化液的方法复制过敏性紫癜大鼠模型,测定灌胃凉血退紫合剂42 g·kg^(-1)后正常生理状态与过敏性紫癜模型状态下,8种主要成分(阿魏酸、咖啡酸、新绿原酸、隐绿原酸... 详细信息

该研究采用UPLC-TQ-MS技术,以灌胃热性药和注射卵白蛋白与弗氏完全佐剂乳化液的方法复制过敏性紫癜大鼠模型,测定灌胃凉血退紫合剂42 g·kg^(-1)后正常生理状态与过敏性紫癜模型状态下,8种主要成分(阿魏酸、咖啡酸、新绿原酸、隐绿原酸、苯甲酰氧化芍药苷、络石苷、马钱苷、芍药苷)在0.5、1、2、6、12 h大鼠肝、肺、心、脾、肾组织分布差异,探讨其在机体组织器官的分布规律及特性。结果表明,凉血退紫合剂中8种成分在正常和过敏性紫癜模型大鼠各组织中分布行为不同,牡丹皮及白芍中的主要成分芍药苷在各组织中含量均较高;8种成分在肝、肺、肾组织分布较多,脾、心组织次之。

关键词：凉血退紫合剂过敏性紫癜组织分布液质联用

基于网络药理学和代谢组学探讨凉血退紫合剂治疗过敏性紫癜的潜在成分和作用机制

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中国中药杂志 2023年第12期48卷 3327-3344页

作者：李伟霞许爽陈毓龙王晓艳张辉张明亮泥文娟任献青唐进法河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000 河南中医药大学儿科医学院河南郑州450046 河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心河南郑州450000 河南中医药大学药学院河南郑州450046

采用UPLC-Q-TOF-MS技术结合UNIFI分析软件快速定性分析凉血退紫合剂中的成分,借助成分靶点预测数据库(SwissTargetPrediction)、在线人类孟德尔遗传病数据库(OMIM)和基因数据库(GeneCards)等数据库筛选活性成分及过敏性紫癜(Henoch-Sch?... 详细信息

采用UPLC-Q-TOF-MS技术结合UNIFI分析软件快速定性分析凉血退紫合剂中的成分,借助成分靶点预测数据库(SwissTargetPrediction)、在线人类孟德尔遗传病数据库(OMIM)和基因数据库(GeneCards)等数据库筛选活性成分及过敏性紫癜(Henoch-Sch?nlein purpura, HSP)的相关靶点,构建“成分-靶点-疾病”网络、蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络,运用Omishare平台对靶点进行基因本体(Gene Ontology, GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析,采用分子对接法验证该合剂中潜在活性成分与核心靶点的相互作用。同时,将大鼠随机分为正常组、模型组、凉血退紫合剂低剂量组、凉血退紫合剂中剂量组、凉血退紫合剂高剂量组,利用非靶向代谢组学筛选血清差异代谢物,分析可能的代谢通路,并构建“成分-靶点-差异代谢物”网络图。从凉血退紫合剂中鉴定或推断出45个成分,预测得到其潜在治疗过敏性紫癜靶点145个;KEGG富集相关的主要信号通路包括表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的抗性、PI3K-AKT及T细胞受体等;分子对接结果表明凉血退紫合剂中的活性成分与关键靶标蛋白具有较强的结合能力。从血清中共筛选出13个差异代谢物,与活性成分有27个共有靶标,代谢通路分析表明过敏性紫癜进展与甘油磷脂代谢、鞘脂代谢等代谢异常相关。表明了凉血退紫合剂中的成分主要通过炎症和免疫等多方面发挥治疗过敏性紫癜的作用,为临床合理用药提供了科学依据。

关键词：凉血退紫合剂过敏性紫癜 UPLC-Q-TOF-MS 网络药理学分子对接代谢组学

基于生物信息学和体外实验验证的肾康注射液治疗肾纤维化作用机制研究

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中国药理学通报 2024年第10期40卷 1953-1962页

作者：孟高全张明亮陈小菲王晓艳李伟霞张岱蒋露李明格张小帅孟伟亭韩冰唐进法河南中医药大学第一附属医院药学部河南郑州450003 河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心、河南省中药临床药学中医药重点实验室、河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心河南郑州450003 河南中医药大学第一附属医院检验科河南郑州450003

目的利用生物信息学及体外实验探讨肾康注射液(Shenkang injection, SKI)治疗肾纤维化(renal fibrosis, RF)的作用机制与物质基础。方法利用GEO数据库筛选RF差异表达基因,借助CMAP数据库,基于基因表达谱相似性原理,重定位出具有调控R... 详细信息

目的利用生物信息学及体外实验探讨肾康注射液(Shenkang injection, SKI)治疗肾纤维化(renal fibrosis, RF)的作用机制与物质基础。方法利用GEO数据库筛选RF差异表达基因,借助CMAP数据库,基于基因表达谱相似性原理,重定位出具有调控RF作用的药物,然后通过分子指纹相似性分析筛选出SKI潜在治疗RF的成分;同时基于网络药理学预测SKI调控RF的核心靶点及通路;最后,通过分子对接和细胞实验进行验证。结果基于GEO数据库筛选到2个RF相关的数据集,CMAP重定位到3个共同的RF治疗药物(saracatinib、dasatinib、PP-2),分子指纹相似性分析发现,RF治疗药物与salvianolic acid B、hydroxysafflor yellow A等5个SKI成分的结构相似性较高。分子对接结果发现,salvianolic acid B、hydroxysafflor yellow A等成分与SKI调控的潜在治疗RF的核心靶标MMP1、MMP13等均有良好的结合能力。网络药理学分析提示,SKI核心靶点主要富集在Relaxin和AGE-RAGE等信号通路。细胞实验表明,SKI可显著降低RF模型细胞AGE-RAGE信号通路中AGER、NFKB1、COL1A1、SERPINE1、VEGFC和Relaxin信号通路中MMP1、MMP13的mRNA表达水平,显著升高RXFP1的mRNA表达水平。结论 SKI可通过调控Relaxin和AGE-RAGE信号通路来发挥治疗RF的作用,其物质基础可能为salvianolic acid B、hydroxysafflor yellow A等成分。

关键词：肾康注射液肾纤维化生物信息学药物重定位实验验证作用机制

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1例丙戊酸镁中毒患者的血药浓度监测及临床处置

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中国医院药学杂志 2023年第3期43卷 341-343页

作者：吴娅丽李伟霞王晓艳张辉唐进法河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用/评价与转化工程研究中心河南郑州450000 河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床药学中医药重点实验室河南郑州450000

回顾性分析1例丙戊酸镁中毒患者的临床处置过程,通过临床药师监测丙戊酸血药浓度指导医生诊断病情,从中西医结合角度辨证施治,初期采用“清”法促药物排出并通过活性炭吸附残余药物,醒脑静联合针刺醒神开窍,后期以益气养阴为主。活性炭... 详细信息

回顾性分析1例丙戊酸镁中毒患者的临床处置过程,通过临床药师监测丙戊酸血药浓度指导医生诊断病情,从中西医结合角度辨证施治,初期采用“清”法促药物排出并通过活性炭吸附残余药物,醒脑静联合针刺醒神开窍,后期以益气养阴为主。活性炭吸附3 h后丙戊酸血药浓度下降,连续2 d中西医结合治疗后,血药浓度降至正常低值,效果显著,病情改善明显予以出院,病程7 d。提示临床药师参与监测丙戊酸血药浓度可指导医生诊断病情,有助于药物过量中毒患者的抢救,且中西医联合辨证施治有助于丙戊酸中毒患者症状好转。

关键词：丙戊酸镁中毒血药浓度监测中西医结合

基于群体感应和免疫逃逸的铜绿假单胞菌耐药机制及中药干预策略研究进展

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中草药 2024年第14期55卷 4991-5001页

作者：吴娅丽李伟霞王晓艳陈小菲张明亮张辉杨柳青唐进法河南中医药大学第一附属医院药学部河南郑州450003 河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心河南郑州450003 河南中医药大学药学院河南郑州450046

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是公认的引起医院内感染的主要病原菌之一,以抗生素耐药著称,其耐药机制主要与群体感应和免疫逃逸相关。中医药能从多方面治疗耐药PA所致感染。通过基于群体感应和免疫逃逸关联耐药机制,对PA的... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是公认的引起医院内感染的主要病原菌之一,以抗生素耐药著称,其耐药机制主要与群体感应和免疫逃逸相关。中医药能从多方面治疗耐药PA所致感染。通过基于群体感应和免疫逃逸关联耐药机制,对PA的流行病学及危险因素、耐药机制、中医药干预策略等方面进行系统综述,为临床中药及中西药合用治疗耐药PA感染提供依据,并为中药-机体、中药-病原菌及中药-抗生素间相互作用的进一步研究提供方向。

关键词：铜绿假单胞菌耐药机制中药群体感应免疫逃逸