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加味通窍活血汤下调PI3K/Akt通路抗基底动脉延长扩张症的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 87-94页

作者：刘飞祥张道培吴兆鑫张怀亮张运克苗晋鑫张振强孙瑞芹王理想河南中医药大学第一附属医院郑州450000 河南省眩晕病诊疗中心郑州450000 河南中医药大学眩晕病研究所郑州450000 河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学中医药研究院郑州450046

目的:建立基底动脉延长扩张症(BAD)小鼠模型,探讨加味通窍活血汤(JTQHX)对BAD模型小鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法:将60只C57/BL6雌性小鼠随机分为假手术组(注射10 U·mL^(-1)灭活弹性蛋白酶)、模型组、阿... 详细信息

目的:建立基底动脉延长扩张症(BAD)小鼠模型,探讨加味通窍活血汤(JTQHX)对BAD模型小鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法:将60只C57/BL6雌性小鼠随机分为假手术组(注射10 U·mL^(-1)灭活弹性蛋白酶)、模型组、阿托伐他汀钙片组、JTQHX低、高剂量组(注射10 U·mL^(-1)弹性蛋白酶)。造模14 d,假手术组和模型组给予等体积的纯水灌胃,阿托伐他汀钙片组给予2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1)阿托伐他汀钙片灌胃,JTQHX低、高剂量组分别给予含生药3.4、17 g·kg^(-1)·d^(-1)的JTQHX颗粒剂,连续药物干预2个月。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中小鼠白细胞介素-6(IL-6)和小鼠钙蛋白酶(Lp A)的变化;伟郝夫范吉森(EVG)染色观察血管的病理变化;原位末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡率;Image-Pro Plus软件观察并计算小鼠基底动脉血管的弯曲指数、延长长度、血管直径增加百分比及弯曲度情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠血管组织中PI3K、Akt蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组小鼠血清中IL-6水平显著降低(P<0.01);Lp A水平差异无统计学意义;VSMCs细胞凋亡显著升高(P<0.01);基底动脉血管的弯曲指数、延长长度、血管直径增加百分比及弯曲角度升高(P<0.01);血管中PI3K、Akt蛋白表达显著升高(P<0.01);基底动脉血管管壁中膜内弹力层破坏、肌层萎缩和结缔组织透明样改变严重程度升高。与模型组比较,JTQHX干预2个月后,血清中IL-6水平显著升高(P<0.01);基底动脉血管的延长度、弯曲角度、血管直径增加百分比和迂曲指数明显降低(P<0.05,P<0.01);VSMCs的凋亡显著降低(P<0.01);PI3K、Akt蛋白的表达显著降低(P<0.01);基底动脉血管管壁中膜的内弹力层的破坏、肌层的萎缩及结缔组织透明样变严重程度降低。结论:JTQHX抑制基底动脉血管延长、扩张、迂曲,改善病理变化的机制,可能与减少VSMCs凋亡,下调PI3K/Akt通路的表达有关。

关键词：基底动脉延长扩张症加味通窍活血汤磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

基于免疫反应-肠道微生物轴探究大肠癌湿热蕴结病机的生物学内涵

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 228-237页

作者：吴毅娟孙兴红郭海霞张相安河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

大肠癌(CRC)是以排便习惯改变,便血、及疼痛为主要临床表现的肠道恶性肿瘤。近年来随着生活方式及饮食结构的改变,发病率逐年上升。CRC的发病机制与异常免疫反应及慢性炎症、肠道微生物失调及致癌代谢产物产生等密切相关。肠道微生物群... 详细信息

大肠癌(CRC)是以排便习惯改变,便血、及疼痛为主要临床表现的肠道恶性肿瘤。近年来随着生活方式及饮食结构的改变,发病率逐年上升。CRC的发病机制与异常免疫反应及慢性炎症、肠道微生物失调及致癌代谢产物产生等密切相关。肠道微生物群和机体免疫之间是一种双向沟通,不仅在维持机体健康方面起着关键作用,而且还与疾病的发生发展有密切关系。越来越多的研究表明,异常的免疫反应通过产生炎症因子、引起机体慢性炎症,破坏肠黏膜屏障及增加黏膜通透性,造成肠道微生物生态失调,大量致病性微生物及其代谢产物加速疾病进程;另一方面,肠道微生物失调,通过抑制正常的免疫反应,导致体内多种代谢途径紊乱,影响肠道内外应激反应,诱导炎症发生,从而产生疾病。故免疫反应-肠道微生物轴之间复杂的串扰机制与大肠癌的发生关系密切。基于中医理论及临床研究发现,饮食因素是CRC发病的重要诱因,正气不足是其致病之本,湿热蕴结是关键病机。通过现代医学与生物学研究,认为异常的免疫反应是湿热内蕴的微观表现,而肠道微生物失调是毒注大肠生物学基础,并且在CRC的发病中,免疫反应-肠道微生物轴失衡与中医湿热蕴结相契合。从免疫反应-肠道微生物轴探讨CRC湿热蕴结的生物学内涵,力争用客观数据诠释CRC湿热蕴结的病机内涵,对于CRC湿热蕴结证的发病机制及诊疗策略提供新的思路及理论依据。

关键词：免疫反应-肠道微生物轴大肠癌免疫反应肠道微生物串扰机制湿热蕴结生物学内涵

基于消斑通脉方抗动脉粥样硬化作用机制的网络药理学分析和体外实验验证

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 925-938页

作者：曹珊张艺嘉白杨陈芳谢莎韩倩倩河南中医药大学中医学院方剂教研室河南郑州450046 河南中医药大学教务处河南郑州450046 河南中医药大学研究生院河南郑州450046 河南中医药大学医学院病理生理学教研室河南郑州450046 河南中医药大学基础实验中心河南郑州450046

目的:利用网络药理学分析方法初步预测消斑通脉方抗动脉粥样硬化(AS)的潜在作用通路和靶点,联合体外细胞实验对其可能机制进行验证。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、GeneCards、Swiss Target Prediction和Uniprot等... 详细信息

目的:利用网络药理学分析方法初步预测消斑通脉方抗动脉粥样硬化(AS)的潜在作用通路和靶点,联合体外细胞实验对其可能机制进行验证。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、GeneCards、Swiss Target Prediction和Uniprot等数据库,收集消斑通脉方中活性化合物及对应靶点信息,构建“成分-靶点-疾病”网络,通过蛋白-蛋白互作(PPI)网络预测可能的作用靶点和通路,对交集靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。体外培养人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMCs)并鉴定,采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导HA-VSMCs异常增殖并进行鉴定。MTT法检测不同浓度消斑通脉方作用后各组HA-VSMCs增殖活性,确定消斑通脉方安全性。HA-VSMCs分为空白组、模型组(诱导HA-VSMCs异常增殖)、瑞舒伐他汀组(诱导HA-VSMCs异常增殖后采用4μmol·L^(−1)瑞舒伐他汀干预)及低、中和高剂量消斑通脉方组(诱导HA-VSMCs异常增殖后分别采用0.025、0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方干预)。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组HA-VSMCs培养上清中人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组HA-VSMCs中核因子κB(NF-κB)p65 mRNA和成纤维细胞生长因子2(FGF2)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HA-VSMCs中NF-κB p65和FGF2蛋白表达水平。结果:消斑通脉方中含有103种活性成分,可通过作用于189个靶基因发挥抗AS作用,潜在作用靶点包括IL-6、IL-8、血管内皮生长因子A(VEGFA)、核因子κB1(NF-κB1)和RELA(NF-κB p65)等。GO功能分析和KEGG信号通路富集分析,消斑通脉方通过调节脂质、缺氧诱导因子1(HIF-1)、表皮生长因子(EGF)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和NF-κB等信号通路发挥抗AS作用。细胞形态表现和免疫荧光染色结果证明细胞为HA-VSMCs。油红O染色,可观察到大量红色脂滴,表明造模成功。MTT法检测,在一定剂量范围内消斑通脉方对HA-VSMCs增殖率无明显影响,安全性良好。ELISA法检测,与模型组比较,瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中MCP-1和IL-6水平降低(P<0.05或P<0.01),0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMC培养上清中IL-8降低(P<0.01);与瑞舒伐他汀组比较,不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中MCP-1降低(P<0.01),0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中IL-8降低(P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65 mRNA表达水平降低(P<0.01),瑞舒伐他汀组及0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMCs中FGF2 mRNA表达水平降低(P<0.01);与瑞舒伐他汀组比较,0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65和FGF2 mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65和FGF2蛋白表达水平降低(P<0.01);与瑞舒伐他汀组比较,0.050和0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.01),0.100 mg·L^(−1)消斑通脉方组HA-VSMCs中FGF2蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论:消斑通脉方具有抗炎、抑制HA-VSMCs增殖和抗AS作用,其作用机制可能与NF-κB/FGF2通路失活有关。

关键词：消斑通脉方动脉粥样硬化血管平滑肌细胞网络药理学细胞增殖

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中药调控肠道菌群防治缺血性脑卒中的现代生物学机制及特点分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期 243-250页

作者：屈秉聪周天豹佘琳静苗明三白明河南中医药大学

卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，具有高发病率、高致残率、高死亡率、高复发率、高经济负担的特点。缺血性脑卒中是最为常见的卒中类型，主要由颅内动脉闭塞引起，临床患者表现为偏瘫、失语、感觉障碍等神经功能缺损症状，同时常... 详细信息

卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，具有高发病率、高致残率、高死亡率、高复发率、高经济负担的特点。缺血性脑卒中是最为常见的卒中类型，主要由颅内动脉闭塞引起，临床患者表现为偏瘫、失语、感觉障碍等神经功能缺损症状，同时常伴有便秘、消化道出血等胃肠道症状。肠道菌群在缺血性脑卒中的发病中扮演着重要角色，其潜在的生物学作用受到人们的广泛关注，肠道菌群不仅可以影响肠道屏障功能，还可以调节胃肠道免疫影响宿主机体的稳态。近年来，中药在防治脑缺血中表现出效果显著且不良反应较小的特点，中药通过调节肠道菌群结构及相关代谢，维持肠道菌群功能等方面改善脑缺血损伤作用的研究逐渐成为热点。通过调研近年来相关研究文献，以中药与肠道菌群相互作用为基础，探讨中药通过调节肠道菌群结构，影响肠道菌群代谢，调节机体免疫等多个角度发挥抗脑缺血损伤作用的机制，并进行归纳总结，为深入阐述肠道菌群在脑缺血中的作用及中药防治缺血性脑卒中的机制研究提供依据。

关键词：肠道菌群缺血性脑卒中中医药肠-脑轴

扶正化积癃闭汤治疗良性前列腺增生正虚瘀结证的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 77-82页

作者：李凝华王祖龙张宸铭李霄陈如兵张琦华众广西中医药大学南宁530001 河南中医药大学第一附属医院郑州450099 河南中医药大学郑州450046

目的:评价扶正化积癃闭汤治疗良性前列腺增生(BPH)正虚瘀结证的临床疗效及安全性。方法:94例BPH患者随机分为对照组和观察组,各47例。对照组患者口服甲磺酸多沙唑嗪缓释片口服治疗,观察组患者在对照组治疗基础上联合口服扶正化积癃闭汤... 详细信息

目的:评价扶正化积癃闭汤治疗良性前列腺增生(BPH)正虚瘀结证的临床疗效及安全性。方法:94例BPH患者随机分为对照组和观察组,各47例。对照组患者口服甲磺酸多沙唑嗪缓释片口服治疗,观察组患者在对照组治疗基础上联合口服扶正化积癃闭汤。两组均连续治疗8周,在治疗前后对国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QOL)、最大尿流率(Qmax)、膀胱残余尿量(RUV)、中医证候积分、中医单项症状评分及心电图、肝肾功能等指标变化进行评估,以评价两组临床疗效及安全性。结果:治疗8周后,对照组总有效率63.64%(28/44),观察组总有效率84.44%(38/45);两组临床疗效比较,观察组优于对照组(Z=-2.17,P=0.030);总有效率比较,观察组优于对照组(χ^(2)=5.026,P中医证候积分均明显下降,Qmax明显升高(P中医证候积分均明显降低(P中医单项症状评分均明显降低(P<0.05),对照组仅有夜尿频数、排尿困难、尿线变细、尿后余沥症状评分降低(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组的主证夜尿频数,次证神疲乏力、畏寒肢冷、小腹不适、大便不成形症状评分降低(P<0.05)。研究中未观察到使用扶正化积癃闭汤相关不良反应。结论:扶正化积癃闭汤治疗良性前列腺增生正虚瘀结证有较好的疗效,能够改善患者临床症状,提高生活质量,且临床应用安全可靠。

关键词：良性前列腺增生癃闭正虚瘀结证扶正化积癃闭汤甲磺酸多沙唑嗪缓释片

中药黄酮类化合物改善脑缺血再灌注损伤的作用及其机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 269-279页

作者：岳璐周天豹闫向丽苗明三李艳白明河南中医药大学药学院郑州450046 河南中医药大学中医药科学院郑州450046 河南中医药大学中医学院郑州450046 河南中医药大学豫药全产业链研发河南省协同创新中心郑州450046

脑缺血再灌注损伤(CIRI)的发生率、致残率和病死率极高,严重影响人类生命健康。近年来,现代医学在CIRI诊治方面有一定进展,却依然存在术后康复困难、药物不良反应等问题,CIRI亟需新的治疗药物。中药黄酮类化合物作为一类重要的中药有效... 详细信息

脑缺血再灌注损伤(CIRI)的发生率、致残率和病死率极高,严重影响人类生命健康。近年来,现代医学在CIRI诊治方面有一定进展,却依然存在术后康复困难、药物不良反应等问题,CIRI亟需新的治疗药物。中药黄酮类化合物作为一类重要的中药有效成分,其可发挥抗氧化、抑制细胞凋亡、抗炎等药理作用改善脑组织损伤,对提高CIRI患者的生活质量和延缓社会人口老龄化具有重要意义。大量研究发现,中药黄酮类化合物可通过调控细胞表面受体Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)、Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(RhoA/ROCK)、核因子E2相关因子2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/血红素加氧酶-1(Nrf2/Keap1/HO-1)、Notch等信号通路,调节脑缺血及再灌注后相关蛋白的转录表达,缓解脑组织损伤的加剧进而改善CIRI。该文分析了近年来国内外的相关文献,对中药黄酮类化合物改善CIRI的作用机制及相关通路进行综述,并在代谢水平上探究CIRI新的治疗方向,旨在为进一步开发和应用中药黄酮类化合物提供依据。

关键词：中药黄酮类脑缺血再灌注损伤抗炎抗氧化抑制细胞凋亡

基于《伤寒论》探讨半夏泻心汤类方治疗溃疡性结肠炎的机制及研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 279-288页

作者：张亚粉左振魁刘天瑞河南中医药大学郑州450046 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院郑州450002

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的... 详细信息

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的治疗方法。中医药防治此类病证由来已久,仲景曾在《伤寒论》原文中多次论及下利、泄利与久痢、肠风、脏毒等与UC相类似的症状,论述了相应病机与治法,并提出有效的治疗方剂,为后世运用经方辨治UC奠定了基础。近年来,研究发现中医药对防治UC具有独特的优势,不仅能够有效缓解UC患者的症状,还能在很大程度上改善患者的生活质量。研究还发现,无论是从网络药理学、临床观察亦是动物实验,半夏泻心汤类方作为一种中药复方,在治疗UC方面取得了显著的疗效。经过大量的实验探索,研究发现半夏泻心汤类方在治疗UC的原理上与细胞炎症因子、肠道微生物、免疫反应、相关的信号传导途径和细胞焦亡等因素有紧密的关联。本文将会对半夏泻心汤类方在治疗UC中的作用原理做一个全面的概括,包括其理论根源、药物组成和作用机制等各个方面的研究,旨在给临床实践提供更加稳固的理论支持。

关键词：伤寒论半夏泻心汤溃疡性结肠炎研究进展机制

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中药调控食管癌相关信号通路研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 226-238页

作者：李闪闪魏丹丹裴俊文王红玲蒋士卿河南中医药大学郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450000 河南省肿瘤医院郑州450000 河南中医药大学第三附属医院郑州450000

食管癌是常见的消化道恶性肿瘤。目前,食管癌的发病机制尚未完全阐明。虽然手术、放疗、化疗、靶向治疗及免疫治疗等在食管癌的治疗中取得较好的临床疗效,仍存在并发症多、不良反应大等问题。中药作为中医药的重要组成部分,近年来众多... 详细信息

食管癌是常见的消化道恶性肿瘤。目前,食管癌的发病机制尚未完全阐明。虽然手术、放疗、化疗、靶向治疗及免疫治疗等在食管癌的治疗中取得较好的临床疗效,仍存在并发症多、不良反应大等问题。中药作为中医药的重要组成部分,近年来众多基础实验及临床研究证实了其治疗食管癌具有较好的效果。同时,中药多成分、多靶点的特点及食管癌发病机制尚未完全明确的现状,决定了中药防治食管癌存在相关作用机制不明等问题,需要从现代医学着手,从分子生物学、网络药理学等层面揭示中药防治疾病的作用机制。中医学认为食管癌的发生多归结于肝气郁结、痰瘀气滞、津亏热结、正气衰败、癌毒胶结等。查阅文献发现,中药复方主要为补益剂如六君子汤、润燥剂如启膈散及清热剂如复方苦参注射液等;中药单体以攻毒杀虫类、清热类、活血化瘀药及理气药等为主;与中医学所认为的食管癌发生的病因病机相挈合。研究发现,中药还可以通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)、分泌型糖蛋白/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核转录因子-κB(NF-κB)、酪氨酸激酶2/转录激活因子3(JAK2/STAT3)等相关信号通路发挥促进细胞凋亡,促进细胞自噬,阻滞细胞周期,逆转细胞耐药等作用治疗食管癌,但缺乏系统认识。该文通过系统总结中药调控食管癌的相关信号通路,利于明确中药治疗在食管癌分子机制发生发展及侵袭转移等过程中的相关作用机制,以期为食管癌的治疗提供新靶点,新视角,新思路,促进中医药现代化发展。

关键词：食管癌中药信号通路研究进展

基于UPLC四神丸方中19种有效成分定量测定以及提取工艺优化研究

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中草药 2024年第11期55卷 3679-3688页

作者：杨秋琛张琼琼王桂群代丽萍李玲玲崔瑛刘雅琳河南中医药大学豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南郑州450046 河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046

目的建立四神丸方(汤剂)19种成分同时定量分析的UPLC法,并对其提取工艺进行优化。方法采用Accucore RP-MS C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长245 nm,建立19种成分的含量测定方法。以... 详细信息

目的建立四神丸方(汤剂)19种成分同时定量分析的UPLC法,并对其提取工艺进行优化。方法采用Accucore RP-MS C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长245 nm,建立19种成分的含量测定方法。以层次分析法获得的综合评分为评价指标,进行Box-Behnken设计-响应面试验,并对得到的最优提取工艺进行验证。结果建立了四神丸方(汤剂)中19种成分的UPLC含量测定方法,方法学考察结果均符合要求。四神丸方(汤剂)最佳提取工艺为加水14倍量,浸泡30 min,提取3次,每次48 min。结论建立的含量测定方法准确可靠,为该制剂质量控制和药效物质基础研究提供参考。优化的提取工艺合理可行,为四神丸方(汤剂)工业生产提供依据。

关键词：四神丸方(汤剂) 超高效液相色谱法含量测定提取工艺层次分析法 Box-Behnken响应面法