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以CRSIPR/Cas9技术删除CTLA-4后CTL抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第3期27卷 221-227页

作者：师龙耿耸松蔡子琪韩锦胜赵咫龙张伟宋鸿涛孟桐羽蔡建辉河北医科大学第二医院血管外科河北石家庄050000 浓孚雨(河北)生物医药股份有限公司河北石家庄050000 沧州中西医结合医院胃肠腹壁疝外科河北沧州061000 锦州医科大学附属第三医院肝胆外科辽宁锦州121000 邯郸市中心医院普外二科河北邯郸056001 石家庄市第二医院周围血管外科河北石家庄050000 石家庄市人民医院妇科河北石家庄050000 河北省人民医院普外科&肿瘤科河北石家庄050000

目的:探讨使用CRSIPR/Cas9技术删除CTL的免疫检查点CTLA-4后CTL的抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果及其作用机制。方法:针对CTLA-4设计特异性小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)并构建sgRNA/Cas9质粒,使用慢病毒载体转染质粒至CTL获得删除CTLA-4... 详细信息

目的:探讨使用CRSIPR/Cas9技术删除CTL的免疫检查点CTLA-4后CTL的抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果及其作用机制。方法:针对CTLA-4设计特异性小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)并构建sgRNA/Cas9质粒,使用慢病毒载体转染质粒至CTL获得删除CTLA-4的CTL(CTLA-4 KO CTL),并验证质粒的转染效率和CTLA-4的删除效率。BALB/c裸鼠随机分为2组进行实验,预防性注射CTLA-4 KO CTL(实验组)及CTL(对照组),3 d后接种结肠癌细胞株LS174-T,观察成瘤率及成瘤时间。建立结肠癌移植瘤裸鼠模型,成瘤后裸鼠随机分为2组,分别给予CTLA-4 KO CTL(实验组)及CTL(对照组)进行细胞治疗,观察移植瘤的体积、裸鼠的生存时间,并检测移植瘤裸鼠血清中TNF-α及IFN-γ分泌水平。结果:设计sgRNA并成功构建以慢病毒为载体的CRSIPR/Cas9系统,使用构建好的CRSIPR/Cas9系统转染CTL细胞,转染效率最高可达(28.80±0.62)%,转染后以流式细胞术检测CTLA-4的删除效率,CTLA-4 KO CTL组的CTLA-4表达较CTL组显著降低[(0.91±0.25)%vs(42.70±2.72)%,P<0.01]。预防实验中,实验组结肠癌移植瘤发生率明显低于对照组(33.33%vs 100.00%,P<0.01)。治疗实验中,实验组肿瘤体积较对照组显著减少[(503.0±23.9)vs(911.2±51.4)mm^3,P<0.05],实验组裸鼠相较于对照组生存时间明显延长(中位生存期:78 vs 42 d,P<0.05),实验组裸鼠血清TNF-α[(268.93±17.04)vs(148.26±20.07)pg/ml,P<0.05]及IFN-γ[(315.38±18.67)vs (202.92±29.32) pg/ml,P<0.05]的分泌水平较对照组明显增高。结论:以CRSIPR/Cas9技术成功删除CTL中免疫检查点CTLA-4后可以显著抑制裸鼠结肠癌移植瘤的成瘤率、增强CTL对荷结肠癌裸鼠的抗肿瘤作用,并明显增高荷瘤鼠血清中TNF-α和IFN-γ水平。

关键词： CRSIPR/Cas9 CTLA-4 CTL 结肠癌移植瘤免疫治疗

梗死前心绞痛对老年急性心肌梗死患者PCI术后心功能和预后的影响

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中国老年学杂志 2004年第8期24卷 703-704页

作者：王荣英胡少东谷新顺傅向华河北医科大学附属第二医院心血管干部病房河北石家庄050000

目的　探讨梗死前心绞痛对老年急性心肌梗死 (AMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗 (PCI)术后心功能和预后的近期影响。方法　 54例老年首次AMI患者 ,按梗死前有无心绞痛史分为无心绞痛组、有心绞痛组 ,所有患者均在发病 6h内行直接PCI术... 详细信息

目的　探讨梗死前心绞痛对老年急性心肌梗死 (AMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗 (PCI)术后心功能和预后的近期影响。方法　 54例老年首次AMI患者 ,按梗死前有无心绞痛史分为无心绞痛组、有心绞痛组 ,所有患者均在发病 6h内行直接PCI术。术后 2w测定心功能 ;住院期间观察恶性心律失常、心力衰竭、心源性休克、梗死后心绞痛、再梗和死亡的发生率。结果　 (1 )有心绞痛组肌酸肌酶MB同工酶峰值低于无心绞痛组 (P <0 0 5)。 (2 )有心绞痛组左室射血分数和左室峰射血率均高于无心绞痛组 (P <0 0 5) ,左室峰射血时间低于无心绞痛组 (P <0 0 5)。(3)有心绞痛组梗死后心绞痛的发生率低于无心绞痛组 (P <0 0 5) ;有心绞痛组心律失常、心力衰竭、心源性休克的发生率、再梗率和住院病死率均有低于有心绞痛组的趋势 ,但均无显著性差异。

关键词：经皮冠状动脉介入治疗心绞痛心功能预后

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孤立性胃静脉曲张1例

中国介入影像与治疗学 2024年第5期21卷 314-315页

作者：孙延召杨永宾杨旭旭苏芮漆平桑伟张薇白云河北省人民医院老年消化科河北石家庄050000 河北省人民医院血管外科河北石家庄050000

患者女,76岁,呕血、黑便20余天,腹胀伴双下肢水肿10天,外院诊断为肝硬化、胃底静脉曲张;否认慢性病史、传染病史、家族史。查体:全腹膨隆,移动性浊音阳性;双下肢重度水肿;Child-Pugh肝功能B级。实验室检查:血红蛋白81.0 g/L,白蛋白28.4 ... 详细信息

患者女,76岁,呕血、黑便20余天,腹胀伴双下肢水肿10天,外院诊断为肝硬化、胃底静脉曲张;否认慢性病史、传染病史、家族史。查体:全腹膨隆,移动性浊音阳性;双下肢重度水肿;Child-Pugh肝功能B级。实验室检查:血红蛋白81.0 g/L,白蛋白28.4 g/L。腹部增强CT:肝脏缩小、肝裂增宽、边缘欠光整;胃底后方胃膈韧带内见侧支静脉扩张、扭曲,自胃底后方横行至小弯侧并斜行向下经直径约11 mm分流道汇入左肾静脉(图1A、1B);腹腔积液。诊断:肝硬化;胃底静脉曲张,胃-肾静脉分流;腹腔积液。

关键词：高血压,门静脉食管和胃静脉曲张侧支循环诊断显像

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急性心肌梗死患者心肌出血的研究进展

中华心血管病杂志 2016年第7期44卷 635-638页

作者：杨婧崔炜河北医科大学第二医院河北省心血管研究所心内科石家庄050000

急性心肌梗死的病死率及并发症的发病率较高，是全球范围内的重大公共卫生问题。持续冠状动脉阻塞超过40min，即可引起不可逆的心肌损伤。尽管及时的再灌注治疗有利于挽救缺血心肌，但是血运重建有可能通过触发心肌的缺血再灌注损伤，... 详细信息

急性心肌梗死的病死率及并发症的发病率较高，是全球范围内的重大公共卫生问题。持续冠状动脉阻塞超过40min，即可引起不可逆的心肌损伤。尽管及时的再灌注治疗有利于挽救缺血心肌，但是血运重建有可能通过触发心肌的缺血再灌注损伤，而导致微血管损伤及进一步的心肌坏死。微血管损伤主要包括微血管阻塞，以及微血管阻塞合并心肌出血。目前认为心肌出血是微血管阻塞的一种更严重的表现形式。心肌出血大多伴随着微血管阻塞的发生。

关键词：急性心肌梗死心肌出血心肌梗死患者微血管阻塞缺血再灌注损伤微血管损伤公共卫生问题冠状动脉阻塞

冠状动脉内应用山莨菪碱对急性心肌梗死介入治疗后无再流及心室功能和收缩同步性的影响

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中华心血管病杂志 2007年第10期35卷 908-913页

作者：范卫泽傅向华姜云发谷新顺吴伟力李世强刘君薛玲蔚永运郝国桢河北医科大学第二医院干部心血管病房石家庄050000

目的探讨冠状动脉内应用山莨菪碱对急性心肌梗死介入治疗(AMI-PCI)后无再流患者的逆转作用并评价其对患者局部、整体心室功能和收缩同步性的影响。方法自2003年1月至2006年2月首发急性前壁心肌梗死并于12 h 内行急诊 PCI 的患者136例,... 详细信息

目的探讨冠状动脉内应用山莨菪碱对急性心肌梗死介入治疗(AMI-PCI)后无再流患者的逆转作用并评价其对患者局部、整体心室功能和收缩同步性的影响。方法自2003年1月至2006年2月首发急性前壁心肌梗死并于12 h 内行急诊 PCI 的患者136例,根据心肌灌注分级方法(myocardial blush grade,MBG)确认无再流患者(MBG 0～1级)47例(男36例,女11例),平均年龄(63.23±11.24)岁,随机分为两组:A 组(山莨菪碱组,24例)和 B 组(对照组23例),A 组于 PCI 后即刻由指引导管冠状动脉内注射山莨菪碱1000μg/次,余治疗同 B 组。于 PCI 后即行左心室造影,测定心室容积、压力参数和室壁运动积分(wall motion score,WMS);AMI 后1周时行平衡法核素心室造影,测定左室整体和局部收缩功能、舒张功能和收缩同步性参数;AMI 后6个月随访时重复行心室造影和核素心室造影检查测定上述参数,同时随访并记录术后6个月内主要不良心脏事件(MACE)的发生率。结果 (1)A 组患者在冠状动脉内应用山莨菪碱1000μg/次,平均(2.53±0.34)次后 MBG由(0.74±0.32)级增加到用药后的(2.33±0.28)级。(2)AMI-PCI 后6个月随访时,A 组左室收缩末容积指数、左心室舒张末期容积指数、WMS 和左室舒张末期压均较 B 组明显降低[(40.53±8.12)ml/m^2比(50.32±8.26)ml/m^2,(80.13±9.74)ml/m^2比(87.17±10.25)ml/m^2,(8.24±1.31)比(10.23±1.82),(13.36±4.21)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)比(16.38±3.21)mm Hg,P 均0.05;(7.92±4.12)°比(11.76±4.11)°,P<0.05]。(5)在6个月随访期内,A 组 MACE 发生率明显低于 B 组。结论冠状动脉内注射山莨菪碱可明显逆转 AMI-PCI 后无再流现象,改善无再流患者的心室功能和收缩同步性,降低 MACE 发生率。

关键词：心肌梗塞山莨菪碱血管成形术经腔经皮冠状动脉无再流心肌灌注分级

活血化瘀养心通络方辅助治疗冠心病PCI术后心绞痛患者疗效及对炎症因子水平的影响

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中国医院药学杂志 2020年第22期40卷 2341-2344页

作者：耿彬王思洲苗华为封亚丽王艳炜赵天资河北省中医院心血管科河北石家庄050000

目的:研究活血化瘀养心通络方辅助治疗冠心病PCI术后心绞痛患者实验室指标血清人软骨糖蛋白(YKL-40)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等炎症因子水平及临床疗效的影响。方法:选取2018年3月到2019年6月某院心内科收治的冠心病PCI术后再发心绞痛... 详细信息

目的:研究活血化瘀养心通络方辅助治疗冠心病PCI术后心绞痛患者实验室指标血清人软骨糖蛋白(YKL-40)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等炎症因子水平及临床疗效的影响。方法:选取2018年3月到2019年6月某院心内科收治的冠心病PCI术后再发心绞痛患者。随机分为治疗组与对照组各50例。2组均给予常规西医药物治疗,治疗组在西医药物治疗基础上增加活血化瘀养心通络方治疗。观察治疗后硝酸甘油停减率、治疗前后YKL-40、hs-CRP水平、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、临床疗效及中医证候积分。结果:治疗后治疗组硝酸甘油停减率明显高于对照组(P<0.05)。2组治疗后YKL-40、hsCRP、TNF-α、IL-6水平均明显分别低于本组治疗前(P<0.05);治疗后治疗组YKL-40、hsCRP、TNF-α、IL-6水平均明显低于对照组(P<0.05)。治疗后治疗组显效率76.00%(38/50)明显高于对照组42.00%(21/50)(P<0.05)。2组治疗后中医证候积分均明显分别低于本组治疗前(P<0.05);治疗后治疗组中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)。结论:在常规西医药物基础上增加活血化瘀养心通络方治疗可更显著改善冠心病PCI术后再发心绞痛患者心绞痛症状,促进相关实验室指标恢复正常。

关键词：活血化瘀养心通络方冠心病心绞痛 PCI手术血清YKL-40

肠缺血再灌注损伤程度与PARP-1活性变化相关性的实验研究

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苏州大学学报（医学版） 2010年第1期30卷 79-82页

作者：邢莉潘旭东郑军赵莉刘光茂李虎臣河北医科大学第二医院普通外科河北石家庄050000 首都医科大学附属北京安贞医院心血管外科北京100029

目的研究大鼠肠缺血再灌注后肠损伤程度与聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)激活程度的相关关系,探索肠缺血再灌注后PARP-1过度激活的水平。方法通过阻断腹腔干和肠系膜上动脉后恢复血运,制作鼠肠缺血再灌注模型,按不同缺血时间分组,再... 详细信息

目的研究大鼠肠缺血再灌注后肠损伤程度与聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)激活程度的相关关系,探索肠缺血再灌注后PARP-1过度激活的水平。方法通过阻断腹腔干和肠系膜上动脉后恢复血运,制作鼠肠缺血再灌注模型,按不同缺血时间分组,再灌注2h后,处死动物取材,分别作HE染色、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)的免疫组化染色,用TUNEL方法检测组织细胞凋亡情况,用Westernblot检测凋亡早期信号PARP-1片段p85和凋亡诱导因子(AIF)的表达情况。结果随着缺血时间的延长,肠损伤程度和PAR表达阳性率呈显著增高(P二者呈正相关(r=0.924,P<0.01)。PAR表达阳性率在20%左右时,凋亡早期信号PARP-1p85片段、AIF表达和TUNEL阳性率较假手术组显著升高(P<0.05);PAR表达阳性率在40%左右时,细胞坏死和组织损伤显著增加(P<0.05)。结论在大鼠肠缺血再灌注损伤中,肠损伤程度与PARP-1激活程度呈正相关,PARP-1激活率在20%左右时,组织损伤以细胞凋亡为主;PARP-1激活率在40%左右时,组织损伤以细胞坏死为主。

关键词：聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 缺血再灌注肠损伤

沉默miR-146a对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制

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中国老年学杂志 2023年第4期43卷 892-896页

作者：池魁袁涛孙欢欢李烨张金文河北医科大学第二医院血管外科河北石家庄050000 河北医科大学第二医院麻醉科河北石家庄050000

目的探究沉默微小RNA-146a(miR-146a)对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制。方法 48只SPF级SD大鼠平均分为4组,其中空白组不做任何处理,模型组、过表达组、沉默组构建颈动脉狭窄模型,做miR-146a慢病毒滴定,采用实时荧... 详细信息

目的探究沉默微小RNA-146a(miR-146a)对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制。方法 48只SPF级SD大鼠平均分为4组,其中空白组不做任何处理,模型组、过表达组、沉默组构建颈动脉狭窄模型,做miR-146a慢病毒滴定,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-146a基因表达量,采用流式细胞仪检测N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)、同型半胱氨酸(Hcy),四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测血管平滑肌细胞增殖水平,采用细胞划痕实验检测血管平滑肌细胞迁移能力,采用Western印迹法检测L型钙通道蛋白(CaV1.2)、CaV1.3及Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子(NF)-κB信号通路蛋白表达量。结果与过表达组相比,沉默组miR-146a基因表达量、增殖数、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达量明显降低(P血管平滑肌细胞活性。

关键词：微小RNA-146a 颈动脉狭窄血管平滑肌细胞活性

血管内皮生长因子-C蛋白和mRNA在胆管癌中的表达及其意义

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中华实验外科杂志 2010年第11期27卷 1657-1659页

作者：刘三光穆宏凌边伟张树彬高翔刘润田刘建华河北医科大学第二医院肝胆外科石家庄050000 河北医科大学第二医院血管外科石家庄050000 河北省卫生厅考试培训中心

目的检测胆管癌和癌旁0.5 cm胆管组织及手术切缘的正常胆管组织血管内皮生长因子（VEGF）-C蛋白及mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用.方法应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法（SP）检测42例胆管癌组织及20例正常组... 详细信息

目的检测胆管癌和癌旁0.5 cm胆管组织及手术切缘的正常胆管组织血管内皮生长因子（VEGF）-C蛋白及mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用.方法应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法（SP）检测42例胆管癌组织及20例正常组织中VEGF-C蛋白的表达,同时应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测42例术中所取的新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中VEGF-C的mRNA表达,并与临床资料进行相关分析.结果正常胆管组织、癌旁组织、胆管癌组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别0.6105±0.0577、0.6270 ±0.0664、0.6930±0.1078,VEGF-C mRNA在3组之间表达呈上升趋势（P＜0.05）.VEGF-C蛋白表达趋势同其相对应的基因表达趋势一致,即VEGF-C mRNA在胆管癌组织中高表达（P＜0.05）.胆管癌组织、正常胆管组织中VEGF-C表达的阳性率分别为83.33%和30.00%.结论 VEGF-C基因转录和蛋白可能参与了胆管癌的发生发展过程.

关键词：胆管癌 VEGF