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藏红花素减轻皮质神经元缺氧复氧损伤与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关

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中国动脉硬化杂志 2023年第4期31卷 329-335,342页

作者：胡科李晓蕾麻瑞娟邯郸市中心医院神经内科河北省邯郸市056000

[目的]探讨藏红花素对皮质神经元缺氧复氧损伤的影响及其分子机制。[方法]分离并培养SD大鼠皮质神经元,设对照组、模型组、藏红花素(50 mg/L)组、藏红花素(50 mg/L)+脂多糖(TLR4激活剂,100μg/L)组。对照组常规培养,模型组建立缺氧4 h复... 详细信息

[目的]探讨藏红花素对皮质神经元缺氧复氧损伤的影响及其分子机制。[方法]分离并培养SD大鼠皮质神经元,设对照组、模型组、藏红花素(50 mg/L)组、藏红花素(50 mg/L)+脂多糖(TLR4激活剂,100μg/L)组。对照组常规培养,模型组建立缺氧4 h复氧24 h模型,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组分别给药干预24 h后造模。通过CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测神经元活力和凋亡率,ELISA法检测培养液中炎症因子水平,Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、p-IκBα、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、cleaved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。[结果]与对照组比较,模型组大鼠皮质神经元活力明显降低(P<0.05),凋亡率、培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平、神经元TLR4、HMGB1、cleved Caspase-3表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,藏红花素组皮质神经元活力升高94.97%(P<0.05),凋亡率降低65.80%(P<0.05),培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平分别降低61.86%、78.34%、63.42%(P<0.05),神经元TLR4、HMGB1、cleaved Caspase-3表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2比值分别降低73.43%、52.13%、81.52%、69.70%、60.55%、95.05%(P<0.05)。脂多糖明显逆转藏红花素对缺氧复氧损伤皮质神经元上述各指标的调控作用(P<0.05)。[结论]藏红花素可抑制缺氧复氧损伤皮质神经元凋亡和炎症反应,对缺氧复氧损伤皮质神经元起到保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

关键词：藏红花素神经元缺氧复氧 TLR4/NF-κB通路炎症反应细胞凋亡

腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合治疗子宫瘢痕妊娠20例

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中华医学杂志 2018年第47期98卷 3900-3902页

作者：张彤艳韩新彦李爱丽河北省邯郸市中心医院妇科 056001

目的探讨经腹腔镜手术治疗子宫瘢痕妊娠(CSP)的一种新的手术方法。方法回顾性分析河北省邯郸市中心医院2015年1月至2018年6月经腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合治疗Ⅲ型CSP患者20例。结果腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合配合人工流产手术的20例... 详细信息

目的探讨经腹腔镜手术治疗子宫瘢痕妊娠(CSP)的一种新的手术方法。方法回顾性分析河北省邯郸市中心医院2015年1月至2018年6月经腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合治疗Ⅲ型CSP患者20例。结果腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合配合人工流产手术的20例患者,均取得满意的治疗效果,手术时间短[(47±11)min],出血少[(40±17)ml],术后人绒毛膜促性腺激素下降良好,术后3个月复查彩超子宫下段肌层愈合好,厚度恢复正常,平均(3.9±0.3)mm。结论腹腔镜子宫下段肌层折叠缝合配合人工流产手术治疗子宫瘢痕妊娠,修复了薄弱的子宫肌层,手术易于掌握,患者创伤小,术后恢复快,避免了子宫肌层的再次损伤,容易在基层推广。

关键词：子宫瘢痕妊娠腹腔镜折叠缝合

兔脂肪间充质干细胞膜片促进关节软骨损伤修复

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中国矫形外科杂志 2022年第16期30卷 1497-1502页

作者：贾海栋李毅邯郸市中心医院河北邯郸056000

[目的]探讨兔脂肪间充质干细胞膜片对兔关节软骨损伤的修复作用。[方法]体外分离培养兔脂肪间充质干细胞,通过多系分化对细胞进行鉴定。通过化学方法构建兔脂肪间充质干细胞膜片(添加50μg/ml抗坏血酸),膜片构建成功后对其进行检测:分... 详细信息

[目的]探讨兔脂肪间充质干细胞膜片对兔关节软骨损伤的修复作用。[方法]体外分离培养兔脂肪间充质干细胞,通过多系分化对细胞进行鉴定。通过化学方法构建兔脂肪间充质干细胞膜片(添加50μg/ml抗坏血酸),膜片构建成功后对其进行检测:分别在倒置相差显微镜下观察膜片的结构,大体观以及扫描电镜观察。制备兔膝关节骨软骨缺损模型(直径为3.5mm,深度为3 mm),然后将实验分为两组:对照组和细胞膜片组。术后3个月取标本进行检测,观察软骨的修复情况。[结果]原代兔脂肪间充质干细胞呈短梭形、三角形贴壁生长,经过传代培养后细胞逐渐呈涡旋状生长,第3代兔脂肪间充质干细胞具有多系分化能力;兔脂肪间充质干细胞膜片具有多层结构,细胞分泌大量的细胞外基质,将细胞镶嵌在其中。术后3个月取标本观察检测提示:细胞膜片组骨软骨缺损处可见大量新生的软骨组织再生,新生的软骨组织形态和颜色均接近于正常软骨;而对照组几乎没有新生软骨的形成。O’Driscoll评分结果也显示细胞膜片组的评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]兔脂肪间充质干细胞膜片能够促进兔关节软骨的再生,为临床软骨损伤的修复提供了新的思路。

关键词：脂肪间充质干细胞膜片关节软骨组织工程

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右美托咪定竖脊肌阻滞对椎间孔镜术镇痛影响

中国矫形外科杂志 2022年第13期30卷 1230-1233页

作者：迟晓慧陈永学程晶晶石文汇李斐邯郸市中心医院河北邯郸056000

[目的]探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)竖脊肌阻滞对椎间孔镜术镇痛的影响。[方法]2019年3月—2020年3月,本院89例拟行椎间孔镜术患者纳入本研究,采用随机数字表法将患者分为两组。其中,Dex组45例,给予Dex竖脊肌阻滞;非Dex组44例,... 详细信息

[目的]探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)竖脊肌阻滞对椎间孔镜术镇痛的影响。[方法]2019年3月—2020年3月,本院89例拟行椎间孔镜术患者纳入本研究,采用随机数字表法将患者分为两组。其中,Dex组45例,给予Dex竖脊肌阻滞;非Dex组44例,给予常规局部麻醉。比较两组术中生命体征变化和镇痛效果。[结果]术前两组间MAP和HR的差异均无统计学意义(P>0.05);而在手术开始时、切除关节突时、切除髓核时(T3)和手术结束时,Dex组的MAP及HR均显著低于非Dex组(P0.05)。相应时间点,Dex组的VAS评分均显著低于非Dex组(P<0.05)。Dex组术中舒芬太尼消耗量、术中舒适度NRS评分、恢复室停留时间、术后6 h和12h的PCIA按压次数均显著优于非Dex组(P<0.05)。[结论]Dex竖脊肌阻滞能够延长椎间孔镜术患者镇痛时间,提高患者围手术期的舒适度。

关键词：椎间孔镜右美托咪定竖脊肌阻滞舒适度镇痛

烷基化修复蛋白B同源物5调控果蝇Zeste基因增强子人类同源物2对K562/阿霉素细胞耐药的影响

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实用临床医药杂志 2022年第7期26卷 87-92,97页

作者：陈莉吉慧娟任利彬张洪峰索晓慧刘洪峰夏利敏河北省邯郸市中心医院血液内一科河北邯郸056001 河北省邯郸市中心医院普外科河北邯郸056001 河北省邯郸市中心医院科研科河北邯郸056001 河北省邯郸市中心医院乳腺外科河北邯郸056001

目的探讨烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)对K562/阿霉素(ADM)细胞耐药的影响及其作用机制。方法以人白血病细胞系K562和ADM抗性细胞K562/ADM细胞为研究对象,利用Lipofectamine;2000将K562/ADM细胞分为对照组、si-NC组、si-ALKBH5-1组、s... 详细信息

目的探讨烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)对K562/阿霉素(ADM)细胞耐药的影响及其作用机制。方法以人白血病细胞系K562和ADM抗性细胞K562/ADM细胞为研究对象,利用Lipofectamine;2000将K562/ADM细胞分为对照组、si-NC组、si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组、空载体组(转染pcDNA3.1)、ALKBH5-WT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-WT)、ALKBH5-MUT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-MUT)、si-ALKBH5-2+空载体组、si-ALKBH5-2+pcDNA3.1-EZH2组。采用比色法检测细胞中N6-甲基腺苷(m6A)含量;采用CCK-8法检测细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用荧光光度计法检测ADM外排;采用Western blot检测细胞中ALKBH5、果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药基因1(MDR1)的蛋白表达;采用RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证ALKBH5与EZH2 mRNA的相互作用;采用甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)检测EZH2 m6A水平。结果与K562细胞比较,K562/ADM细胞对ADM的耐药性及细胞中ALKBH5蛋白表达水平升高,m6A含量降低,差异有统计学意义(P<0.01);沉默ALKBH5可增加K562/ADM细胞中m6A含量,过表达野生型ALKBH5可减少m6A含量,而过表达突变型ALKBH5(H204A)对m6A含量无明显影响。与对照组、si-NC组比较,si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组细胞在450 nm处的光密度值(OD_(450nm)值)、P-gp、MDR1蛋白表达水平降低,细胞内荧光强度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在K562/ADM细胞中,ALKBH5蛋白能与EZH2 mRNA相互作用;沉默ALKBH5可上调K562/ADM细胞中EZH2 m6A水平,下调EZH2蛋白表达水平,过表达野生型ALKBH5则呈相反趋势;EZH2过表达逆转了沉默ALKBH5对K562/ADM细胞活力及耐药性的影响。结论沉默ALKBH5通过促进EZH2的甲基化来下调EZH2的表达,进而降低K562/ADM的耐药性。

关键词： N6-甲基腺苷烷基化修复蛋白B同源物5 果蝇Zeste基因增强子人类同源物2 阿霉素 P糖蛋白多药耐药基因1

SOCS1的表观遗传学修饰与急性髓系白血病的关系

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中国癌症杂志 2020年第8期30卷 577-585页

作者：张晓慧罗建民索晓慧孙国锋刘洪峰李静牛广旭河北省邯郸市中心医院血液内科河北邯郸056001 河北医科大学第二医院血液内科河北石家庄050000 河北省邯郸市中心医院肿瘤内科河北邯郸056001 河北省邯郸市中心医院病理科河北邯郸056001

背景与目的:细胞因子信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)是公认的抑癌基因,研究SOCS1基因的表观遗传学修饰与急性髓系白血病发生、发展的关系。方法:采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymeras... 详细信息

背景与目的:细胞因子信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)是公认的抑癌基因,研究SOCS1基因的表观遗传学修饰与急性髓系白血病发生、发展的关系。方法:采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MS-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)、体外细胞培养、药物干预、细胞增殖检测、基因敲除等技术,分析2016年2月—2018年12月邯郸市中心医院血液内科和河北省医科大学第二医院血液内科收治的110例急性髓系白血病患者及白血病细胞系U937和THP-1中SOCS1基因的表达、甲基化状态和疾病发生、发展的关系。同时分析SOCS1表观遗传学改变相关基因DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和DNMT3a及组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)基因的变化。结果:在急性髓系白血病初治组和复发难治组中SOCS1基因甲基化率显著高于缓解组和正常对照组(48%和80%vs 0%和0%),其mRNA表达、蛋白水平显著低于其他两组,而DNMT1、DNMT3a和HDAC1表达却与SOCS1基因表达呈负相关。SOCS1的甲基化与治疗后完全缓解(complete remission,CR)率呈负相关。药物干预白血病细胞系后,随DNMT1、DNMT3a和HDAC1表达下降和SOCS1基因表达恢复,肿瘤细胞的生长受到抑制。结论:SOCS1基因的甲基化、组蛋白去乙酰化导致基因表达沉默,最终促进急性髓系白血病细胞的生长增殖。

关键词：急性髓系白血病细胞因子信号转导抑制因子1 甲基化 DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3a 组蛋白去乙酰化酶1

放射性^(125)I粒子联合GDC-0941抑制卵巢透明细胞癌生长、提高机体免疫力的实验研究

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现代肿瘤医学 2023年第6期31卷 1015-1021页

作者：游志鑫刘爱民王海东周莎莎赵改花霍红旗邯郸市中心医院核医学科河北邯郸056001 邯郸市中心医院精准医学科河北邯郸056001 邯郸市中心医院肿瘤内二科河北邯郸056001 邯郸市中心医院病案管理科河北邯郸056001

目的:探究放射性^(125)I粒子联合Pictilisib(GDC-0941)对卵巢透明细胞癌的杀伤及抗肿瘤免疫效应的影响。方法:将人卵巢透明细胞癌细胞株ES-2分为对照组、^(125)I粒子组(细胞接受^(125)I粒子照射处理)、GDC-0941组(1μmol/L GDC-0941培... 详细信息

目的:探究放射性^(125)I粒子联合Pictilisib(GDC-0941)对卵巢透明细胞癌的杀伤及抗肿瘤免疫效应的影响。方法:将人卵巢透明细胞癌细胞株ES-2分为对照组、^(125)I粒子组(细胞接受^(125)I粒子照射处理)、GDC-0941组(1μmol/L GDC-0941培养细胞24 h)及^(125)I+GDC-0941组(细胞接受^(125)I粒子照射处理,并以1μmol/L GDC-0941培养24 h),按照分组进行处理后,MTT法测定细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态;皮下接种ES-2建立卵巢透明细胞癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为对照组、^(125)I粒子组(将^(125)I粒子植入肿瘤组织中心)、GDC-0941组(灌胃125 mg/kg的GDC-0941)及^(125)I+GDC-0941组(将^(125)I粒子植入肿瘤组织中心并灌胃125 mg/kg的GDC-0941),给药开始后,每隔2 d测量并计算肿瘤体积,21 d后处死裸鼠并取其肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内凋亡蛋白Cleaved-caspase-3与增殖标记物Ki-67的表达,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群。结果:相较于^(125)I粒子照射和GDC-0941单独处理,^(125)I与GDC-0941联合作用下,细胞存活率下降(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),且细胞核浓缩明显,浓染颗粒较多,碎裂现象严重。与^(125)I粒子植入和GDC-0941灌胃的两组裸鼠比较,^(125)I粒子植入联合GDC-0941灌胃的裸鼠,肿瘤生长较为缓慢,肿瘤块变小、质量也减小(P<0.05),肿瘤组织内细胞排列稀疏,Cleaved-caspase-3阳性表达率升高(P<0.05),Ki-67阳性表达率降低(P<0.05),此外,外周血中CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例增加。结论:放射性^(125)I粒子联合GDC-0941作用能够显著提高对卵巢透明细胞癌的杀伤作用,且抑制肿瘤生长并改善移植瘤裸鼠的抗肿瘤免疫功能,两者联合作用效果要优于单独作用。

关键词：卵巢透明细胞癌 ^(125)I粒子 GDC-0941 抗肿瘤效应

超声造影联合BRAF基因突变对C-TIRADS 4类甲状腺良恶性结节的鉴别诊断价值

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临床超声医学杂志 2022年第11期24卷 841-846页

作者：邵建波侯晓英申向辉李佳刘欣申志华毛亚娟刘艳超河北省邯郸市中心医院超声医学科 056000 河北省人民医院超声科河北省邯郸市中心医院体检中心 056000

目的探讨超声造影(CEUS)联合BRAF基因突变对中国甲状腺影像报告与数据系统(C-TIRADS)4类甲状腺良恶性结节的鉴别诊断价值。方法选取我院行CEUS检查并经手术病理证实的甲状腺结节患者126例(共126个结节),术后均行BRAF基因突变检测;其中... 详细信息

目的探讨超声造影(CEUS)联合BRAF基因突变对中国甲状腺影像报告与数据系统(C-TIRADS)4类甲状腺良恶性结节的鉴别诊断价值。方法选取我院行CEUS检查并经手术病理证实的甲状腺结节患者126例(共126个结节),术后均行BRAF基因突变检测;其中C-TIRADS 4A类52个,C-TIRADS 4B类36个,C-TIRADS 4C类38个。比较各分类甲状腺结节CEUS特征和BRAF基因突变情况的差异;分析C-TIRADS 4类甲状腺恶性结节CEUS特征与BRAF基因突变的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估CEUS特征、BRAF基因突变单独及联合诊断C-TIRADS 4类甲状腺恶性结节的效能。结果 C-TIRADS 4B、4C类甲状腺结节低增强(66.67%、73.68%)、不均匀增强(94.44%、89.47%)、向心性增强(97.22%、89.47%)占比均高于C-TIRADS 4A类,差异均有统计学意义(均P<0.05)。126个甲状腺结节中58个发生BRAF基因突变,发生率为46.03%。C-TIRADS 4B、4C类甲状腺结节BRAF基因突变阳性占比高于C-TIRADS 4A类,差异有统计学意义(P<0.05)。C-TIRADS 4类甲状腺恶性结节的CEUS特征(低增强、不均匀增强、向心性增强)与BRAF基因突变阳性呈显著正相关(r=0.793、0.872、0.895,均P<0.05)。ROC曲线分析显示,CEUS特征联合BRAF基因突变诊断C-TIRADS 4类甲状腺恶性结节的曲线下面积(0.973)、敏感性(100%)、特异性(94.60%)均较其单独诊断效能高。结论 CEUS联合BRAF基因突变有助于提高对C-TIRADS 4类甲状腺良恶性结节的鉴别诊断价值。

关键词：超声检查造影剂中国甲状腺影像报告与数据系统 BRAF基因,突变相关性

α-突触核蛋白对帕金森小鼠β-arrestin 2表达水平的影响及意义

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中华老年医学杂志 2022年第5期41卷 586-590页

作者：郭鹏王相斌尤素伟崔学静薛陆明河北省邯郸市中心医院神经内一科邯郸056001

目的探讨α-突触核蛋白(α-syn)对帕金森(PD)小鼠β-arrestin 2表达水平的影响及意义。方法选取运动能力相近的C57BL/6J小鼠28只,随机分为模型组和对照组,每组各14只。采用脑纹状体注射α-syn预成型纤维法建立PD模型,造模4周后观察行为... 详细信息

目的探讨α-突触核蛋白(α-syn)对帕金森(PD)小鼠β-arrestin 2表达水平的影响及意义。方法选取运动能力相近的C57BL/6J小鼠28只,随机分为模型组和对照组,每组各14只。采用脑纹状体注射α-syn预成型纤维法建立PD模型,造模4周后观察行为学改变。蛋白免疫印迹法测定中脑星形胶质细胞α-syn、多巴胺受体(DR)、酪氨酸羟化酶(TH)、炎性因子、β-arrestin 2以及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达水平。荧光共振能量转移(FRET)检测α-syn与β-arrestin 2的相互作用,双荧光素酶报告实验检测α-syn对β-arrestin 2转录激活活性的调节作用。结果造模4周后,与对照组比较,模型组小鼠平均运动速度显著减小(t=9.415,P<0.001),运动轨迹集中在旷场四周且明显稀疏,通过爬杆所需时间显著延长(t=16.412,P<0.001);与对照组比较,模型组中脑星形胶质细胞α-syn相对表达量显著升高(1.14±0.18比0.53±0.16),D1DR(0.67±0.13比1.15±0.11)和TH(0.46±0.05比0.81±0.06)相对表达量显著降低(t=9.810、10.917、17.356,均P<0.001),肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6以及NF-κB信号通路相关蛋白相对表达量均显著上调(t=3.583、4.284、5.396、11.747、16.375、18.294,均P<0.001),中脑星形胶质细胞β-arrestin 2蛋白的相对表达量均显著降低(0.42±0.11比1.33±0.14)(t=19.795,P<0.001);FRET结果显示,α-syn与β-arrestin 2可能存在直接的相互作用;双荧光素酶报告实验结果显示,α-syn基因敲除后,β-arrestin 2转录活性显著上调。结论α-syn可能通过激活NF-κB信号通路、诱导星形胶质细胞炎性反应,并通过减少多巴胺的生物合成及其生理功能参与PD的发病过程,且该作用依赖于负性调控β-arrestin 2。

关键词：帕金森病突触蛋白类受体,多巴胺