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寿胎丸对先兆流产肾虚证模型小鼠母胎界面糖酵解关键蛋白和凋亡相关因子表达的影响

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2169-2177页

作者：宋亚静李丹丹吕竞芳蒋敏杜惠兰河北中医药大学中西医结合研究所河北石家庄050091 河北省中西医结合生殖疾病协同创新中心河北石家庄050091 河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室河北石家庄050091

探究寿胎丸治疗先兆流产的作用机制。按照随机数字表法将ICR雌性小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、寿胎丸组和地屈孕酮组,每组15只。每日9:00正常组和模型组灌胃生理盐水,寿胎丸组灌胃寿胎丸混悬液,地屈孕酮组灌胃地屈孕酮溶解剂... 详细信息

探究寿胎丸治疗先兆流产的作用机制。按照随机数字表法将ICR雌性小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、寿胎丸组和地屈孕酮组,每组15只。每日9:00正常组和模型组灌胃生理盐水,寿胎丸组灌胃寿胎丸混悬液,地屈孕酮组灌胃地屈孕酮溶解剂,每日16:00正常组用等体积蒸馏水灌胃,模型组、寿胎丸组、地屈孕酮组灌胃氢化可的松溶液,连续4 d。将动情前期或动情期的ICR雌鼠与雄鼠按2∶1合笼。自妊娠第1天,按照之前给药方式继续给药,连续给药5 d。第6天灌胃米非司酮,复制肾虚流产模型。各组在妊娠第6天时随机选择10只ICR雌性小鼠,取连胎子宫,HE染色观察母胎界面滋养细胞病理形态学改变;Western blot及免疫荧光法检测糖酵解的关键酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、烯醇化酶1(enolase 1,ENO1)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)以及乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的蛋白表达,Western blot及实时荧光定量PCR法检测胚胎组织凋亡相关因子caspase-3、Bax、Bcl-2的表达,TUNEL法检测滋养细胞凋亡;剩余5只雌鼠孕14 d时采用台盼蓝染法计算胚胎丢失率。妊娠第14天时,正常组胚胎丢失率为5.00%,模型组与正常组相比胚胎丢失率升高,为27.78%(P<0.05);与模型组相比,地屈孕酮组及寿胎丸组胚胎丢失率降低,分别为10.26%、7.50%。妊娠第6天时,与正常组相比,模型组糖酵解的关键蛋白HK2、ENO1、PKM2、LDHA表达显著降低(P<0.05),凋亡相关因子Bcl-2表达显著降低(P<0.05),caspase-3、Bax表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,地屈孕酮组及寿胎丸组HK2、ENO1、PKM2、LDHA蛋白表达均显著升高(P<0.05),凋亡因子Bcl-2表达显著升高(P<0.05),caspase-3、Bax表达显著降低(P<0.05)。TUNEL染色显示,与正常组相比,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组相比,地屈孕酮组及寿胎丸组滋养细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。综上,寿胎丸能降低胚胎丢失率,发挥保胎作用,其机制可能是通过提高先兆流产模型小鼠母胎界面有氧糖酵解水平,抑制滋养细胞凋亡实现的。

关键词：寿胎丸先兆流产糖酵解凋亡

升陷汤调节Wnt3a/β-catenin信号途径介导的细胞衰老改善特发性肺纤维化大鼠肺功能

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 31-38页

作者：闫亚男梁玉磊王杰鹏方朝义河北中医药大学石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

目的:观察升陷汤对特发性肺纤维化(IPF)大鼠Wnt3a/β-连环蛋白(β-catenin)途径介导的细胞衰老的作用特点,揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法:32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博... 详细信息

目的:观察升陷汤对特发性肺纤维化(IPF)大鼠Wnt3a/β-连环蛋白(β-catenin)途径介导的细胞衰老的作用特点,揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法:32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博来霉素(0.005 g·kg^(-1))复制IPF大鼠模型。术后次日灌胃,升陷汤组灌胃升陷汤配方颗粒水溶液(0.78 g·kg^(-1)),吡非尼酮组灌胃吡非尼酮混悬液(0.05 g·kg^(-1)),其余各组灌胃去离子水(10 mL·kg^(-1)),连续28 d。测定大鼠肺功能后取肺组织:苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察大鼠肺组织病理形态学变化,并行Szapiel和Ashcroft评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测端粒长度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测上皮-间质转化(EMT)标记物[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]、端粒酶逆转录酶(TERT)、衰老相关蛋白(p53、p21)、衰老相关分泌表型[白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)]和Wnt信号途径关键蛋白[Wnt3a、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Myc]表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠最大呼吸流量(PEF)和每分钟通气量(MV)显著降低(P<0.01),呼吸频率(f)显著升高(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达显著升高(P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著降低(P<0.01)。与模型组比较,升陷汤组大鼠PEF和MV显著升高(P<0.01),f显著降低(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著升高(P<0.01)。结论:升陷汤对IPF大鼠肺功能具有显著地保护作用,其机制可能是作用于Wnt3a/β-catenin信号途径,调节TERT诱导的细胞衰老以抑制EMT实现。

关键词：升陷汤端粒细胞衰老特发性肺纤维化 Wnt3a信号通路上皮-间质转化肺功能

前交叉韧带重建术后三种不同药物镇痛早期疗效的对比

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北京大学学报（医学版） 2024年第2期56卷 293-298页

作者：王江静魏顺依敖英芳杨渝平河北省沧州中西医结合医院河北沧州061001 河北省中西医结合骨关节病研究重点实验室(筹) 河北沧州061001 北京大学第三医院运动医学科北京100191

目的:比较去痛片(复方氨基比林、非那西丁片,商品名去痛片)、盐酸曲马多缓释片(商品名:奇曼丁)及盐酸哌替啶(商品名:杜冷丁)在膝关节前交叉韧带自体肌腱单束重建术后早期的止疼效果及安全性。方法:回顾性分析2018年11月至2019年2月,北... 详细信息

目的:比较去痛片(复方氨基比林、非那西丁片,商品名去痛片)、盐酸曲马多缓释片(商品名:奇曼丁)及盐酸哌替啶(商品名:杜冷丁)在膝关节前交叉韧带自体肌腱单束重建术后早期的止疼效果及安全性。方法:回顾性分析2018年11月至2019年2月,北京大学第三医院连续收治的45例由同一组医师施行膝关节镜下前交叉韧带自体肌腱单束重建术患者,术后疼痛情况和使用药物镇痛情况的临床资料。采用随机区组设计,根据前交叉韧带断裂是否合并半月板损伤将患者分为两组,A组为单纯膝关节前交叉韧带重建的患者24例,B组为前交叉韧带断裂合并半月板损伤的患者21例。两组又根据患者实际使用的术后镇痛药物各分为3组,其中,A组口服去痛片4例、口服奇曼丁11例、肌肉注射(简称肌注)杜冷丁联合盐酸异丙嗪(商品名:非那根)9例;B组口服去痛片3例、口服奇曼丁10例、肌注杜冷丁联合非那根8例。术后早期,患者诉疼痛并主动要求镇痛时随机给予去痛片、奇曼丁或杜冷丁联合非那根这三种不同的止痛药物缓解疼痛,采用疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale, VAS)评估疼痛缓解情况,并观察不良反应发生情况。结果:患者在性别、年龄、体重指数、住院时间等基本情况上差异无统计学意义(P>0.05)。应用三种止痛药物缓解疼痛的两组患者,在用药前及用药1 h后通过VAS评分判断结果表明,患者疼痛情况明显缓解,用药前后疼痛差异有统计学意义(P0.05)。应用杜冷丁患者易出现恶心、呕吐等副反应,但应用杜冷丁的同时使用非那根可减少副反应。在不良反应方面,仅单纯前交叉韧带重建组中应用奇曼丁组的患者出现恶心1例,其余各组患者均未出现严重的并发症及过敏反应。结论:无论是单纯交叉韧带重建,还是合并半月板成型或缝合的交叉韧带重建,患者应用去痛片、奇曼丁、杜冷丁联合非那根这三种药物均能有效缓解疼痛,其中杜冷丁对疼痛的缓解幅度最大。应用杜冷丁的同时,合用非那根可有效减轻患者的呕吐、恶心等不良反应,增加用药安全性。

关键词：前交叉韧带重建半月板损伤镇痛镇痛药阿片类

彩色多普勒超声显像评估收肌管阻滞导管位置的效果

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临床麻醉学杂志 2024年第4期40卷 379-383页

作者：吕瑞兆刘瑞王建华井郁陌河北省中西医结合神经康复重点实验室河北省中西医结合骨关节病研究重点实验室(筹)河北省沧州中西医结合医院麻醉与围术期医学科沧州市061001

目的观察利用彩色多普勒超声显像快速、准确定位收肌管导管位置在全膝关节置换术(TKA)术后恢复中的应用。方法选择初次进行全身麻醉下单侧TKA的患者60例,男26例,女34例,年龄50~80岁,BMI 18~30 kg/m^(2),ASAⅠ—Ⅲ级。采用随机数字表... 详细信息

目的观察利用彩色多普勒超声显像快速、准确定位收肌管导管位置在全膝关节置换术(TKA)术后恢复中的应用。方法选择初次进行全身麻醉下单侧TKA的患者60例,男26例,女34例,年龄50~80岁,BMI 18~30 kg/m^(2),ASAⅠ—Ⅲ级。采用随机数字表法将患者分为两组:彩色多普勒超声显像组(CFD组)和水分离技术组(CUG组),每组30例。术后CFD组采用彩色多普勒超声显像确认导管位置,CUG组采用传统局麻药扩散的“水分离”技术判断导管位置。记录收肌管置管时间、置管期间使用局麻药总量,术后4、8、24、48、72 h静息和活动时VAS疼痛评分,镇痛泵总按压次数、补救镇痛情况、术后首次下床活动时间、术后住院时间,穿刺部位水肿、血肿、院内跌倒等术后不良事件发生情况和患者术后满意度评分。结果与CUG组比较,CFD组置管时间明显缩短、置管期间使用局麻药总量明显减少(P<0.05),术后首次下床活动时间、术后住院时间明显缩短(P<0.05),术后穿刺部位水肿等不良事件发生率明显降低(P<0.05),患者术后满意度评分明显升高(P<0.05)。两组术后不同时点VAS疼痛评分、镇痛泵总按压次数和补救镇痛率、穿刺部位血肿和院内跌倒发生率差异均无统计学意义。结论在TKA中应用彩色多普勒超声显像准确判断收肌管导管位置,能够实现快速准确放置导管,利于患者早期下床活动,缩短患者术后住院时间,提高患者满意度,促进早期康复。

关键词：彩色多普勒超声显像全膝关节置换术收肌管阻滞导管位置置管时间

止血带在导航系统下行全膝关节置换的应用时机选择：一项单中心、回顾性分析

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中国组织工程研究 2024年

作者：潘浩杨梦刘国强河北省沧州中西医结合医院河北省中西医结合骨关节病研究重点实验室

背景：传统全膝关节置换过程中应用止血带的时机已有明确报道，随着关节相关技术不断精进，导航系统下全膝关节置换应用止血带的时机却鲜有报道。目的：评估采用全程与半程止血带对Brainlab导航系统下行全膝关节置换疗效的影响。方法：... 详细信息

背景：传统全膝关节置换过程中应用止血带的时机已有明确报道，随着关节相关技术不断精进，导航系统下全膝关节置换应用止血带的时机却鲜有报道。目的：评估采用全程与半程止血带对Brainlab导航系统下行全膝关节置换疗效的影响。方法：回顾性分析2022年1-12月在河北省沧州中西医结合医院行导航系统下全膝关节置换患者的资料，选择符合条件的145例患者进行分析，按松开止血带时机分为全程组(n=71)和半程组(n=74)。收集患者一般资料、围术期情况、术后膝关节周围肿胀情况、下肢深静脉血栓发生情况、目测类比评分、美国特种外科医院膝关节评分和关节遗忘评分，评估膝关节功能并进行比较。结果与结论：(1)与半程组相比，全程组患者的手术时间更短、下肢深静脉血栓发生率更高、术后膝关节肿胀情况更重(P 0.05)；(4)提示采用导航系统行全膝关节置换的患者中，半程使用止血带隐匿性失血量少、术后患肢肿胀程度及下肢深静脉血栓发生率低，膝关节功能恢复更快。

关键词：导航系统全膝关节置换止血带膝关节功能关节遗忘评分

基于脊柱-骨盆解剖学和腰椎滑脱力学评估两种椎间融合术对老年退行性腰椎滑脱的疗效

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中国临床研究 2024年第1期37卷 79-84页

作者：刘洋王志伟赵冲王艳河北省沧州中西医结合医院脊柱脊髓外科河北省中西医结合骨关节病研究重点实验室河北沧州061000

目的基于脊柱-骨盆解剖学和腰椎滑脱力学评估斜外侧椎间融合术(OLIF)与小切口经椎间孔椎间融合术(MIS-TLIF)对老年退行性腰椎滑脱(DLS)的治疗效果。方法回顾性选取2020年4月至2022年3月于沧州中西医结合医院行手术治疗的老年DLS患者12... 详细信息

目的基于脊柱-骨盆解剖学和腰椎滑脱力学评估斜外侧椎间融合术(OLIF)与小切口经椎间孔椎间融合术(MIS-TLIF)对老年退行性腰椎滑脱(DLS)的治疗效果。方法回顾性选取2020年4月至2022年3月于沧州中西医结合医院行手术治疗的老年DLS患者122例为研究对象,接受OLIF术治疗的59例为OLIF组,接受MIS-TLIF手术治疗的63例为MIS-TLIF组。收集两组患者临床资料,包括手术情况、术前、术后即刻和术后12个月的滑脱参数[椎间隙高度(DH)、局部后凸角(SK)、腰椎滑脱率(SP)、滑脱角(SA)]、腰椎骨盆解剖学参数[L1椎体中心至骶骨垂线间距离(LASD)、腰椎前凸角(LL)、骶骨倾斜角(SS)、骨盆倾斜角(PT)、骨盆入射角(PI)]。采用疼痛视觉模拟量表(VAS)评分和Oswestry功能障碍指数(ODI)评估患者疼痛感受和腰部功能。结果相较于MIS-TLIF组,OLIF组手术时间、住院时间和切口长度更短,术中出血量和术后引流量更少(P0.05);而VAS评分和ODI明显降低(P0.05)。结论 OLIF术和MIS-TLIF术对于老年DLS患者的脊柱-骨盆解剖学和腰椎滑脱力学参数、疼痛程度和腰部功能均有较好的改善效果,且效果大致相似,但OLIF手术时间、住院时间和切口长度更短,术中出血量和术后引流量更少,具有明显优势。

关键词：斜外侧椎间融合术小切口经椎间孔椎间融合术退行性腰椎滑脱滑脱力学脊柱-骨盆解剖学

基于网络药理学和实验验证黄芪甲苷和三七总皂苷配伍调控血管生成抗脑缺血作用机制

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1017-1027页

作者：李艳玲陆展辉张燕燕吴莎莎谢天浩丁煌张伟刘晓丹邓常清湖南中医药大学中西医结合学院中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制。运用网络药理学预测ASTⅣ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制。... 详细信息

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制。运用网络药理学预测ASTⅣ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制。体内实验:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、ASTⅣ(10 mg·kg^(-1))+PNS(25 mg·kg^(-1))组,大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立脑缺血模型。ASTⅣ及PNS灌胃给药,每天2次。采用Longa法测定神经功能缺损症状;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理损伤;免疫组化测定血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达;免疫荧光测定血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、VEGFA、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达。体外实验:原代培养并鉴定脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),取第3代rBMECs,设置对照组、模型组、ASTⅣ+PNS(50μmol·L^(-1)+30μmol·L^(-1))组、LY294002(PI3K/AKT信号通路抑制剂)组、740Y-P组(PI3K/AKT信号通路激动剂)、ASTⅣ+PNS+LY294002组及ASTⅣ+PNS+740Y-P组,氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)建立缺血再灌注损伤模型。CCK-8检测rBEMCs存活情况,划痕实验检测rBEMCs迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测rBEMCs成管数;内皮细胞渗漏实验检测内皮细胞渗透率;蛋白质印迹检测rBEMCs中VEGFR2、VEGFA、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达。网络药理学结果显示,ASTⅣ及PNS可调节脑梗死血管生成的21个靶点,包括VEGFA、AKT1等,大部分涉及PI3K/AKT信号通路。体内实验发现,与模型组比较,ASTⅣ+PNS配伍能降低脑缺血后神经功能缺损评分(P实验发现,与模型组比较,ASTⅣ+PNS、740Y-P、ASTⅣ+PNS+LY294002及ASTⅣ+PNS+740Y-P均能增加OGD/R后rBEMCs存活率,增强rBEMCs迁移率,增加rBEMCs成管数,增强PI3K/AKT通路相关蛋白表达,降低内皮细胞渗透率(P研究表明,ASTⅣ和PNS在脑缺血后能促进血管生成,机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：黄芪甲苷三七总皂苷血管内皮细胞生长因子(VEGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路

补肾温阳化瘀方调节SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬治疗子宫内膜异位症的机制研究

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2542-2548页

作者：孟鑫付欣平安铭立刘慧敏马艺鸣陈景伟河北中医药大学中西医结合研究所河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室石家庄050200 河北省中西医结合生殖疾病协同创新中心石家庄050200

目的:探讨SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬在子宫内膜异位症(EMs)发展中的机制以及补肾温阳化瘀方治疗EMs的疗效与可能的作用机制。方法:将12Z细胞分为CON组、DMSO组(+同体积DMSO)及EX527组(+SIRT1抑制剂),采用划痕实验检测各组细胞的迁移能... 详细信息

目的:探讨SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬在子宫内膜异位症(EMs)发展中的机制以及补肾温阳化瘀方治疗EMs的疗效与可能的作用机制。方法:将12Z细胞分为CON组、DMSO组(+同体积DMSO)及EX527组(+SIRT1抑制剂),采用划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用免疫荧光及Western Blot分别检测SIRT1、FoxO1及自噬相关因子蛋白定位及含量表达。将100只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、中药+EX527组及EX527组。EMs造模成功后,中药组及中药+EX527组给予补肾温阳化瘀方灌胃,假手术组、模型组及EX527组同体积纯净水灌胃;中药+EX527组、EX527组给予腹腔注射EX527溶剂,其余各组给予腹腔注射同体积0.9%氯化钠溶液,连续3周。免疫组化与Western Blot分别检测SIRT1、FoxO1及自噬相关因子蛋白定位及含量表达。结果:细胞实验中,与CON组或DMSO组比较,EX527组的迁移能力和侵袭能力明显增强,SIRT1水平显著下降(P实验中,与假手术组比较,模型组与EX527组的SIRT1水平显著下降(P<0.05),FoxO1及自噬相关因子水平显著上升(P<0.01),中药组及中药+EX527组的SIRT1水平显著升高(P<0.01),FoxO1及自噬相关因子水平则显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:SIRT1通过介导FoxO1负向调控细胞自噬水平,补肾温阳化瘀方可能通过上调SIRT1,抑制FoxO1介导的自噬,从而起到治疗EMs的作用。

关键词：子宫内膜异位症补肾温阳化瘀方 SIRT1-FoxO1 细胞自噬

加味桂枝茯苓丸通过PTEN/PI3K/Akt通路调控线粒体凋亡途径预防小鼠结直肠腺瘤的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：贾苏杰刘龙辉张艺凡郎晓猛刘建平康欣孙超迪刘静远河北省中医院河北省中西医结合胃肠病研究重点实验室河北中医药大学

目的：探讨加味桂枝茯苓丸通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Phosphatase and tension homolog， PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol， PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B， Akt)通路调控线粒体凋亡途径预防小鼠结直肠腺瘤(Colo... 详细信息

目的：探讨加味桂枝茯苓丸通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Phosphatase and tension homolog， PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol， PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B， Akt)通路调控线粒体凋亡途径预防小鼠结直肠腺瘤(Colorectal adenoma， CRA)的作用及机制。方法：将60只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、加味桂枝茯苓丸低、中、高剂量组(13、26、52g·kg-1·d-1)，阳性药阿司匹林组(0.015g·kg-1·d-1)，通过氧化偶氮甲烷(Azoxymethane， AOM)/葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium， DSS)化学诱导CRA小鼠模型，造模同时灌胃给予加味桂枝茯苓丸或阿司匹林。给药期间，每周检测各组小鼠体重；9周后，观察腺瘤形成数目；酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α， TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6， IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β， IL-1β)水平；苏木精-伊红染色法(HE)观察腺瘤组织病理变化；免疫组织化学法(IHC)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1， CCND1)和细胞增殖核抗原(Nuclear proliferating antigen Ki67， Ki67)的表达；原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测腺瘤组织细胞凋亡情况；实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察PTEN、PI3K、Akt、磷酸化-PI3K(p-PI3K)、磷酸化-Akt(p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma， Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X， Bax)、细胞色素C(Cytochrome C， Cyt C)、半胱胺酸天冬氨酸酶-9(Cysteinyl aspartate-specific protein-9， Caspase-9)、半胱胺酸天冬氨酸酶-3(Cysteinyl aspartate-specific protein-3， Caspase-3)mRNA和蛋白表达水平。结果：(1)与正常组比较，模型组小鼠体重在第1周至第2周无明显变化，第3周至第9周明显降低(P＜0.05)；结直肠长度明显缩短，结直肠重量明显增加，黏膜表面可见大小不等的瘤样突起(P＜0.01)；血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P＜0.01)；小鼠肠上皮腺体结构紊乱，细胞核明显拉长且可见病理性核分裂，固有层可见大量淋巴细胞小灶性浸润；CyclinD1、Ki67阳性表达率显著升高(P＜0.01)；腺瘤细胞凋亡率明显降低(P＜0.01)；腺瘤组织PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA和蛋白表达增强(P＜0.01)，p-PI3K、p-Akt蛋白表达增强(P＜0.01)，PTEN、Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低(P＜0.05， P＜0.01)。(2)与模型组相比，各给药组小鼠体重上升(P＜0.01)；肠道重量减轻，结直肠长度增加，腺瘤数量减少(P＜0.05， P＜0.01)；血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显降低(P＜0.01)；肠上皮腺体结构紊乱及黏膜固有层中性粒细胞浸润程度有所改善；CyclinD1、Ki67阳性表达率明显下降(P＜0.01)；腺瘤组织细胞凋亡率明显增加(P＜0.05， P＜0.01)；腺瘤组织PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA和蛋白表达下降(P＜0.05， P＜0.01)，p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P＜0.05， P＜0.01)，PTEN、Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达升高(P＜0.05， P＜0.01)，以加味桂枝茯苓丸高剂量组干预效果最为显著。结论：加味桂枝茯苓丸可能通过调控PTEN/PI3K/Akt信号通路，进而诱导线粒体凋亡途径发挥预防小鼠CRA的作用。

关键词：加味桂枝茯苓丸结直肠腺瘤磷酸酯酶与张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/Akt) 线粒体途径细胞凋亡