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两歧双歧杆菌B11调控肠道屏障的体外研究

中国乳品工业 2024年第5期52卷 11-15页

作者：贾晓蒙路江浩李思童李旭阳贾洪利梁丛丛霍文敏郭润晴杨玲河北一然生物科技股份有限公司研发中心石家庄050000

文章以肠道菌群体外批量发酵系统与HT-29细胞相结合,分析了两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)B11对肠道机械屏障的调控及对产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)的拮抗作用,通过对巨噬细胞RAW264.7影响,探讨B11对免疫... 详细信息

文章以肠道菌群体外批量发酵系统与HT-29细胞相结合,分析了两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)B11对肠道机械屏障的调控及对产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)的拮抗作用,通过对巨噬细胞RAW264.7影响,探讨B11对免疫屏障的调控。结果表明,两歧双歧杆菌B11可在体外发酵条件下拮抗ETEC对HT-29的损伤,提高HT-29黏蛋白MUC2和MUC5AC、紧密连接蛋白ZO-2、Claudin-1和Occudin的mRNA相对表达率至3.78、1.75、4.86、4.06和3.29。经过B11菌悬液处理RAW264.7细胞的相对增殖率提升(17.48±2.49)%,吞噬率提升(21.63±9.85)%,促进了细胞因子IL-12和TNF-α的分泌(P<0.05)。可知,两歧双歧杆菌B11能够增强肠道机械屏障和免疫屏障。

关键词：两歧双歧杆菌肠道屏障产肠毒素性大肠杆菌免疫益生菌

定点突变优化信号肽对嵌合抗原受体T细胞功能的影响

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生物工程学报 2024年第2期40卷 573-584页

作者：刘玉李帆戴蕙芸周润龙王梦怡甘世豪徐瑶武汉科技大学生命科学与健康学院生物医学研究院湖北武汉430081 武汉波睿达生物科技有限公司湖北武汉430075

信号肽(signal peptide, SP)参与调节嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构的分泌水平及跨膜易位过程,对嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)行使功能至关重要,本研究通过定点突变技术优化SP序列... 详细信息

信号肽(signal peptide, SP)参与调节嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构的分泌水平及跨膜易位过程,对嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)行使功能至关重要,本研究通过定点突变技术优化SP序列,并研究其对CD19-CAR-T杀伤功能的影响。首先,利用基因合成和分子克隆技术,构建含野生型SP(SP-wtY)、2种突变型SP(SP-muK或SP-muR)的靶向CD19的CAR载体;对构建成功的载体进行慢病毒包装,并使用慢病毒侵染T细胞,利用流式细胞术检测细胞的转染效率,钙黄绿素释放法检测对靶细胞的体外杀瘤能力,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)技术检测2种细胞因子[干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)和干扰素-α(interferon-α, TNF-α)]的分泌水平。结果显示,构建了野生型和信号肽突变的重组慢病毒质粒,慢病毒转导T细胞后,携带3种信号肽(SP-wtY、SP-muK或SP-muR)的CD19-CAR转染效率分别为33.9%、35.5%、36.8%。进一步杀伤实验显示,与SP-muK和SP-wtY细胞相比,SP-muR细胞的肿瘤杀伤效果显著提高,当效靶比为10:1时共培养24 h后,SP-muR组CAR-T细胞的细胞因子IFN-γ和TNF-α分泌水平显著高于SP-muK和SP-wtY组。本研究揭示信号肽N端正电荷数的增加可以提高CAR的表达效率和对CD19+靶细胞的杀伤作用,为CAR结构的优化改造和临床高效应用提供了科学依据。

关键词：定点突变信号肽嵌合抗原受体 CD19-CAR-T细胞体外杀瘤细胞因子

椰糠栽培条件下‘云烟87’种子产质量变化及生长模型构建

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分子植物育种 2024年

作者：潘磊毛春堂吴家昶陈云松潘义宏张立猛玉溪中烟种子有限责任公司云南五佳生物科技有限公司

为构建智能化烟草繁种技术体系，本研究以‘云烟87’为研究对象，在温室无土栽培条件下，对比分析椰糠作为栽培基质对‘云烟87’产质量的影响，探索研究其对应的繁种生长模型。通过对农艺性状和种子产质量的数据分析，椰糠处理不仅在农... 详细信息

为构建智能化烟草繁种技术体系，本研究以‘云烟87’为研究对象，在温室无土栽培条件下，对比分析椰糠作为栽培基质对‘云烟87’产质量的影响，探索研究其对应的繁种生长模型。通过对农艺性状和种子产质量的数据分析，椰糠处理不仅在农艺性状方面优于土壤处理，而且椰糠处理还大幅增加了烟株的单株果数和单株种子产量，两次试验较土壤分别提高了91.73%、48.42%和115.90%、94.23%，并且种子质量也优于土壤处理；利用Pearson方法分析了大气温度、大气湿度和移栽时间与椰糠栽培条件下‘云烟87’生长指标之间的相关性，基于梯度下降回归算法构建了株高增量、最大叶长增量、最大叶宽增量和有效叶片数增量的回归模型，株高增量模型的R2=0.89，最大叶长增量模型的R2=0.82，最大叶宽增量模型的R2=0.97，有效叶片数增量模型的R2=0.95，模型精度高，预测结果接近样本均值。模型不仅阐述了大气温度、大气湿度与椰糠栽培条件下‘云烟87’生长之间的关系，而且可以根据‘云烟87’生长状况，合理给出温度和湿度的调节方案，为烤烟温湿度控制提供理论依据。

关键词：椰糠云烟87 种子增长量梯度下降算法生长模型

基于全基因组预测和分析花生果腐病原菌分泌蛋白

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四川农业大学学报 2024年第1期42卷 11-18,38页

作者：王辉灵韩会玲王晓晗焦镇李步阳何弯弯孙伟明河北科技师范学院海洋资源与环境学院/农学与生物科技学院/河北省作物逆境生物学重点实验室(筹) 河北秦皇岛066000 河北长生果肥料研究院有限公司河北衡水053000

【目的】为分析花生果腐病病原菌-新孢镰刀菌的侵染机制并筛选可用基因。【方法】以全基因组测序结果为基础,根据分泌蛋白与效应因子的特点,采用SignalP、TMHMM、WoLF PSORT及NetGPI等软件一步步筛选,对新孢镰刀菌全基因组12756条蛋白... 详细信息

【目的】为分析花生果腐病病原菌-新孢镰刀菌的侵染机制并筛选可用基因。【方法】以全基因组测序结果为基础,根据分泌蛋白与效应因子的特点,采用SignalP、TMHMM、WoLF PSORT及NetGPI等软件一步步筛选,对新孢镰刀菌全基因组12756条蛋白序列进行了分泌蛋白预测和功能分析。【结果】新孢镰刀菌全基因组编码蛋白中有701条序列具有典型的分泌蛋白特征,占蛋白总数的5.49%,其长度主要分布在101~700个氨基酸范围内。信号肽的分析结果表明,信号肽-3和-1位置的氨基酸相对保守,其切割位点属于典型的A-X-A型。对分泌蛋白功能预测结果表明,656个分泌蛋白获得了功能注释,其功能主要涉及碳水化合物的运输、代谢过程,蛋白翻译后修饰和氨基酸代谢、运输过程。分泌蛋白中效应蛋白预测结果表明,新孢镰刀菌分泌蛋白中共有161个潜在的效应蛋白。【结论】对新孢镰刀菌分泌蛋白的有效预测和功能分析,为筛选新效应蛋白,明确其致病机理,筛选寄主抗性基因奠定了基础。同时为花生果腐病抗性品种选育和综合防治提供理论依据。

关键词：花生果腐病新孢镰刀菌生物信息学分泌蛋白

无土栽培基质中氮、钾施用量对微生物群落结构的影响分析

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分子植物育种 2024年

作者：潘磊毛春堂吴家昶陈云松潘义宏张立猛云南五佳生物科技有限公司玉溪中烟种子有限责任公司

为明确烟草无土栽培繁种基质中微生物群落的动态变化及不同时期适宜的氮钾施用量，本研究以‘云烟87’为材料，以椰糠为栽培基质，通过宏基因组学方法，研究‘云烟87’在不同氮钾梯度下椰糠中微生物群落在团棵期和种子采收期的动态变化... 详细信息

为明确烟草无土栽培繁种基质中微生物群落的动态变化及不同时期适宜的氮钾施用量，本研究以‘云烟87’为材料，以椰糠为栽培基质，通过宏基因组学方法，研究‘云烟87’在不同氮钾梯度下椰糠中微生物群落在团棵期和种子采收期的动态变化。通过分析发现，在团棵期和采收期各检出14个菌门，24个菌属，优势菌门中变形菌门Proteobacteria相对丰度最高，其次是放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes；优势菌属为根瘤菌属Rhizobium、不粘杆菌属Asticcacaulis、德沃氏菌属Devosia、慢生根瘤菌属Bradyrhizobium和Pseudolabrys，根瘤菌属Rhizobium相对丰度在各处理中均最高；移栽期至团棵期1-F4处理(25%氮钾施用量)和盛花期至采收期3-F2处理(25%氮钾总量)的氮钾浓度提高了基质中微生物的碳水化合物代谢、氨基酸代谢、能量代谢基因丰度，有利于提升基质中微生物alpha多样性。

关键词：烟草繁种无土栽培宏基因组微生物群落多样性

树灵芝(Ganoderma sessile， SCAU-My1)菌丝体液态发酵条件优化以及菌丝体复合材料制备

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食品与发酵工业 2024年

作者：钟梓杰李雪玲胡文锋杨美艳深圳循环生物科技有限公司华南农业大学食品学院

该研究以树灵芝(Ganoderma sessile，SCAU-My1)为发酵菌株，采用菌丝体液态发酵制备种子，参考食用菌栽培技术进行菌丝体复合材料(mycelium-base composites，MBCs)制备。分别以麻秆和玉米秸秆为主要原料，接种上述菌丝体液态种后，固... 详细信息

该研究以树灵芝(Ganoderma sessile，SCAU-My1)为发酵菌株，采用菌丝体液态发酵制备种子，参考食用菌栽培技术进行菌丝体复合材料(mycelium-base composites，MBCs)制备。分别以麻秆和玉米秸秆为主要原料，接种上述菌丝体液态种后，固态发酵培养5 d，从而制备可生物降解的MBCs。首先，对树灵芝的菌丝体液态发酵种子培养基及培养条件进行了优化，研究碳源、氮源、发酵温度等因素对菌丝体生物量的影响。结果表明，最佳制种培养基配方为玉米淀粉25 g/L、黄豆粉14 g/L、KH2PO43 g/L、7H2O·MgSO43 g/L；最佳培养条件为发酵温度28 ℃，初始pH 5.5，接种量5%，装瓶量150 mL/500 mL，转速为180 r/min。在此条件下，种子液菌丝体生物量达18.73 g/L，较优化前的13.90 g/L，提高了34.7%。制备的MBCs在形变发生50%时，玉米秸秆-菌丝体复合材料(C-MBCs)压缩应力为聚乙烯(EPS)材料的5.4倍，为麻秆-菌丝体复合材料(H-MBCs)的0.6倍；在热重分析中，经过600 ℃热处理C-MBCs质量剩余约39%，H-MBCs质量剩余约33%，而EPS材料仅剩1.08%，说明玉米秸秆或麻秆制成的MBCs承重能力、热稳定性均优于EPS材料。此结果为菌丝体复合材料替代发泡塑料作为缓冲包装材料提供有意义的参考。

关键词：树灵芝菌丝体培养基优化发酵条件优化菌丝体复合材料可生物降解

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松花粉醋发酵过程中风味品质差异性分析

食品科学 2024年

作者：白绍赐杨明源张群芳邹晨阳于艳奇吕春茂周慧改朝阳松海生物科技有限公司沈阳农业大学食品学院

为明确松花粉醋发酵过程中色泽、口感、香气和品质的变化，以活性成分、抗氧化能力、色差、电子舌、游离氨基酸、有机酸、挥发性化合物和感官评分为评价指标，进一步采用主成分分析、偏最小二乘判别分析和气味活性值进行差异性分析。结... 详细信息

为明确松花粉醋发酵过程中色泽、口感、香气和品质的变化，以活性成分、抗氧化能力、色差、电子舌、游离氨基酸、有机酸、挥发性化合物和感官评分为评价指标，进一步采用主成分分析、偏最小二乘判别分析和气味活性值进行差异性分析。结果表明：在发酵过程中松花粉汁的总酚、总黄酮、维生素C、游离氨基酸和有机酸的含量均显著增加；电子舌的结果表明发酵后的样品苦味降低、鲜味增加；采用气相色谱-质谱联用技术在发酵过程中共检测到110种挥发性化合物，其中醛类、酸类和酯类是松花粉醋的主要香气物质。乙醇、2-乙基己醇、苯乙醇、异丁酸、乙酸乙酯、壬醛、茴香烯以及乙酸被认定为发酵过程中的关键差异物质，赋予松花粉醋宜人的香气；此外感官评价表明，松花粉醋的色泽，味道、香气和整体接受度均高于松花粉汁。该结果为生产高质量的松花粉醋奠定了理论基础，并推动了松花粉的深加工利用。

关键词：松花粉发酵醋顶空固相微萃取-气相色谱-质谱挥发性物质生物活性物质

豌豆蛋白酶解-美拉德反应产物的制备及其提升低钠植物肉风味及储藏稳定性的研究

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现代食品科技 2024年第1期40卷 183-193页

作者：谢宇希宋雪盈赵谋明吴军罗东辉罗燕华梁春虹张佳男苏国万华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广东天企生物科技有限公司广东佛山528000 广州市肽汇生物科技有限公司广东广州511458

该文探究了豌豆蛋白酶解-美拉德反应产物(Maillard Reaction Products Derived From Pea Protein Enzymatic Hydrolysate,PPIHM)对低钠植物肉品质的影响。以豌豆蛋白为原料,通过蛋白酶水解结合谷氨酰胺转氨酶(Glutamine Transaminase,TG酶)交联,添加质量分数为3.0%谷胱甘肽和1.0%还原糖(木糖:核糖=1:3)进行美拉德反应制备PPIHM,并证明PPIHM的良好烤肉香气,鲜味及抗氧化能力。进一步添加不同质量分数(1%,3%,5%)的PPIHM于低钠植物肉中,系统研究发现添加PPIHM在保持植物肉自身刚性和稳定性的前提下,能显著提升植物肉的肉香感知强度,延缓植物肉中油脂和蛋白的氧化。其中,感官品评人员对3%PPIHM植物肉组的喜好度和接受度最高,5%PPIHM植物肉组抗氧化和贮藏稳定性效果最好,在第12天时,POV值仅为0.0097 g/100 g。研究结果表明添加PPIHM是改善低钠植物肉风味,提高其储藏性能的一种有效途径。该研究为深入探究PPIHM作为天然反应型风味补偿剂在低钠植物肉中的应用提供了理论基础和方法指导。

关键词：豌豆蛋白美拉德反应植物肉风味特性储藏稳定性

植物精油微粉中肉桂醛含量超高效液相色谱测定

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动物医学进展 2024年第7期45卷 38-42页

作者：黎乃添陆泳良雍燕袁富威赵敏端广东温氏大华农生物科技有限公司广东云浮527400

建立了检测植物精油微粉中肉桂醛含量的超高效液相色谱法。采用CORTECS C18色谱柱,以乙腈-水(42∶58)为流动相,流速0.3 mL/min,波长280 nm,柱温为30℃,进样量0.6μL。结果表明,肉桂醛色谱峰峰形良好,在1.0~200.0μg/mL范围内线性关系良... 详细信息

建立了检测植物精油微粉中肉桂醛含量的超高效液相色谱法。采用CORTECS C18色谱柱,以乙腈-水(42∶58)为流动相,流速0.3 mL/min,波长280 nm,柱温为30℃,进样量0.6μL。结果表明,肉桂醛色谱峰峰形良好,在1.0~200.0μg/mL范围内线性关系良好(R 2为0.9999)。检测限为0.5μg/mL。精密度和稳定性考察结果相对标准偏差均小于2.0%。加样回收率在96.76%~102.66%之间,符合方法学要求。采用上述方法进行了6批植物精油包被产品的检测,肉桂醛含量均符合要求。此方法具有检测限低,精密度和准确度高,分析快速等特点。

关键词：植物精油包被制剂肉桂醛超高液相色谱法